جابجایی بیوفیلم با استفاده از UIP400MTP Sonicator با توان عملیاتی بالا
فراصوت با توان بالا طراحی شده برای صفحات چند چاه و صفحات 96 چاه ابزار ضروری در تحقیقات بیوفیلم هستند، به ویژه برای جابجایی و حذف بیوفیلم از چاه ها، لوله ها، پین ها، و ظروف پتری. این فراصوت تسهیل پردازش نمونه های متعدد به طور همزمان, بهبود بهره وری و سازگاری. Hielscher با توان بالا سونیکاتور UIP400MTP ایده آل برای فراصوت چند به خوبی صفحات ، صفحات 96 به خوبی ، چند لوله و یا ظروف پتری است. لرزش و کاویتاسیون اولتراسونیک یکنواخت به طور قابل اعتمادی بیوفیلم ها را از پایین صفحه حذف می کند. این باعث می شود که فراصوت صفحه چند چاه UIP400MTP ابزار آماده سازی نمونه ایده آل برای حذف بیوفیلم، سنجش بیوفیلم و تحقیق در مورد باکتری ها و میکروب ها باشد.
UIP400MTP سونیکاتور چند چاه برای تخلیه و حذف بیوفیلم در آماده سازی نمونه با توان بالا:
- بیوفیلم های باکتریایی
- بیوفیلم های یوکاریوتی
- بیوفیلم های قارچی
- بیوفیلم های باستانی
- بیوفیلم های چند میکروبی / بیوفیلم های گونه های مختلط
- بیوفیلم دندان (پلاک)
- بیوفیلم های دریایی
- بیوفیلم های محیطی
- بیوفیلم های دستگاه پزشکی
- سوسپانسیون های سلولی کشت شده
UIP400MTP سونیکاتور با توان بالا برای حذف بیوفیلم از صفحات چند چاهی، صفحات 96 چاهی، لوله ها و ظروف پتری.
جابجایی و حذف بیوفیلم با استفاده از فراصوت
Hielscher با توان بالا سونیک UIP400MTP برای فراصوت قابل اعتماد و یکنواخت از صفحات چند چاه و 96 به خوبی طراحی شده است. ضروری در تحقیقات بیوفیلم, UIP400MTP چند چاه صفحه فراصوت ارائه می دهد یک فن آوری قابل اعتماد برای جابجا کردن و از بین بردن بیوفیلم از صفحات چند چاه, لوله ها و ظروف پتری. اجازه می دهد برای آماده سازی نمونه با توان بالا, UIP400MTP افزایش بهره وری و قوام سنجش بیوفیلم و دیگر مطالعات مرتبط, که باعث می شود این ماسونیک ضروری در هر دو تحقیقات میکروبیولوژی دانشگاهی و صنعتی.
حذف بیوفیلم با استفاده از فراصوتی: برای جابجایی بیوفیلم، بیوفیلم ها در چاه های صفحه چند چاهی تحت شرایط کنترل شده مجاز به تشکیل هستند. سپس صفحه در سونیکاتور قرار داده می شود، جایی که پارامترهایی مانند زمان، دامنه و فرکانس با توجه به نیازهای خاص نوع بیوفیلم و اهداف تجربی تنظیم می شوند. امواج اولتراسونیک کاویتاسیون را در هر چاه ایجاد می کنند و به طور موثر ماتریس بیوفیلم را مختل می کنند و سلول ها را جابجا می کنند.
آماده سازی نمونه اولتراسونیک برای بیوفیلم: در سنجش بیوفیلم، فراصوت های با توان بالا کاربردهای متعددی دارند. پس از فراصوت ، سلول های بیوفیلم جابجا شده را می توان با استفاده از سنجش های مختلف مانند رنگ آمیزی بنفش کریستالی ، شمارش سلول های زنده یا اندازه گیری زیست توده جمع آوری و کمی کرد. علاوه بر این، بیوفیلم ها را می توان با عوامل ضد میکروبی و به دنبال آن فراصوت درمان کرد تا اثربخشی این عوامل در مختل کردن بیوفیلم ها ارزیابی شود. سلول های بیوفیلم جابجا شده همچنین برای مطالعات ژنومی و پروتئومیک مفید هستند، زیرا می توان از آنها برای استخراج DNA، RNA و پروتئین برای تجزیه و تحلیل مولکولی بیشتر استفاده کرد.
فراصوت با توان عملیاتی بالا مزایای بی شماری را ارائه می دهد. آنها امکان پردازش همزمان چندین نمونه را فراهم می کنند، در زمان و نیروی کار صرفه جویی می کنند و از تصفیه یکنواخت همه چاه ها اطمینان حاصل می کنند، تنوع را کاهش می دهند و تکرارپذیری نتایج را بهبود می بخشند. این دستگاه ها همچنین برای مطالعات در مقیاس بزرگ مناسب هستند و امکان غربالگری با توان عملیاتی بالا تشکیل، اختلال و درمان بیوفیلم را فراهم می کنند.
(الف) صفحه حاوی TSB با 2 درصد گلوکز که برای تشکیل بیوفیلم، بازیابی سلول و تعیین MIC و MBCB استفاده می شود. (B) درب با سنجاق برای تشکیل بیوفیلم های استافیلوکوک.
سلول های بیوفیلم تشکیل شده بر روی پین ها با استفاده از UIP250MTP صوتی Hielscher به مدت 5 دقیقه در صفحات 96 چاه حاوی محیط کشت تازه برای بازیابی سلول ها جابجا شدند.
(تصویر و مطالعه: ©دی اولیویرا و همکاران، 2016)
سونیکاتور صفحه 96 به خوبی UIP400MTP برای فراصوت میکروتیتر و صفحات چند چاه
اهمیت حذف بیوفیلم اولتراسونیک در تحقیقات بیوفیلم
حذف بیوفیلم اولتراسونیک در تحقیقات بیوفیلم با توجه به اثربخشی، قوام، کارایی و تطبیق پذیری آن بسیار مهم است. این اختلال کامل و یکنواخت بیوفیلم ها را تضمین می کند و تجزیه و تحلیل دقیق و قابل تکرار را در سنجش های مختلف بیوفیلم تسهیل می کند. این سنجش ها، از جمله رنگ آمیزی بنفش کریستالی، شمارش سلول های زنده، بیولومینسانس ATP، کاهش XTT، تجزیه و تحلیل میکروسکوپی، و استخراج اسید نوکلئیک/پروتئین، بینش جامعی در مورد تشکیل بیوفیلم، زنده ماندن، ساختار و پاسخ به درمان ها ارائه می دهد.
فراصوت بیوفیلم را به آرامی از بسترهای جامد مانند کف صفحه، پین ها، گیره ها یا پوشش ها خارج می کند.
- اختلال موثر بیوفیلم ها:
کاویتاسیون: امواج اولتراسونیک حباب های کاویتاسیون ایجاد می کنند که پس از فروپاشی نیروهای برشی قوی ایجاد می کنند و به طور موثر ساختار پیچیده بیوفیلم ها را مختل می کنند.
جابجایی کامل: اطمینان حاصل می کند که سلول های بیوفیلم به طور کامل از سطوح خارج می شوند، که برای کمی سازی و تجزیه و تحلیل دقیق بسیار مهم است. - سازگاری و تکرارپذیری:
درمان یکنواخت: فراصوت با توان بالا توزیع انرژی اولتراسونیک یکنواخت را در تمام نمونه ها فراهم می کند، تنوع را کاهش می دهد و تکرارپذیری را بهبود می بخشد.
استانداردسازی: استانداردسازی پروتکل های اختلال بیوفیلم را امکان پذیر می کند که منجر به نتایج قابل اطمینان تر و قابل مقایسه تر می شود. - بهره وری:
قابلیت توان عملیاتی بالا: امکان پردازش همزمان چندین نمونه، صرفه جویی در زمان و افزایش توان عملیاتی در مطالعات بیوفیلم را فراهم می کند.
اتوماسیون: می تواند به راحتی در گردش کار خودکار ادغام شود و کارایی را بیشتر افزایش دهد و کار دستی را کاهش دهد. - حفظ زنده ماندن و یکپارچگی:
شرایط کنترل شده: پارامترهایی مانند زمان و شدت را می توان به خوبی تنظیم کرد تا بیوفیلم ها را بدون به خطر انداختن زنده ماندن یا یکپارچگی سلول مختل کند، که برای سنجش های بعدی مهم است. - تنوع:
کاربرد گسترده: مناسب برای انواع بیوفیلم ها (باکتریایی، قارچی، گونه های مخلوط) و سازگار با سطوح و مواد مختلف مورد استفاده در تحقیقات بیوفیلم.
UIP400MTP فراصوت صفحه چند چاه مزایای متعددی را ارائه می دهد که آنها را به ابزاری ضروری در آماده سازی نمونه با توان بالا تبدیل می کند.
Hielscher اولتراسونیک ارائه می دهد مدل های مختلف فراصوت از جمله پروب نوع فراصوت, غیر تماس با فراصوت و فراصوت با توان بالا. همین حالا با ما تماس بگیرید! کارشناسان فنی ما خوشحال خواهند شد که نیازهای پردازش شما را با شما در میان بگذارند و مناسب ترین سونیکاتور را برای برنامه بیوفیلم خود به شما توصیه کنند.
ماسونیک صفحه میکروتیتر UIP400MTP برای خارج کردن بیوفیلم ها برای تحقیقات استفاده می شود
ادبیات / منابع
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
سوالات متداول در مورد تحقیقات بیوفیلم
رایج ترین داربست برای بیوفیلم چیست؟
رایج ترین داربست بیوفیلم در تحقیقات آزمایشگاهی، صفحه میکروتیتر است. صفحات میکروتیتر، به ویژه فرمت 96 چاهی، به دلیل تطبیق پذیری، سهولت استفاده و سازگاری با تکنیک های مختلف تحلیلی به طور گسترده ای مورد استفاده قرار می گیرند.
بهترین صفحه 96 چاهی برای بیوفیلم چیست؟
بهترین صفحه 96 چاهی برای مطالعات بیوفیلم به عوامل متعددی از جمله نوع بیوفیلم مورد مطالعه، تنظیمات آزمایشی و الزامات خاص تحقیق بستگی دارد. با این حال، برخی از صفحات 96 چاهی که معمولا برای مطالعات بیوفیلم توصیه می شوند عبارتند از:
- Corning® Costar® 3596 96-well Clear Flat Bottom Plate: این صفحه به دلیل وضوح نوری بالا اغلب مورد استفاده قرار می گیرد که برای تصویربرداری و سنجش های اسپکتروفتومتری مفید است.
- صفحات Nunc™ MicroWell™ 96-Well: این صفحات به دلیل ابعاد چاه یکنواخت و وضوح نوری بالا شناخته شده اند. آنها در درمان های سطحی مختلف برای حمایت از انواع مختلف کشت سلولی موجود هستند.
- Greiner Bio-One CELLSTAR® 96-Well Microplate: این صفحه به دلیل کیفیت ثابت و در دسترس بودن آن در پوشش های سطحی مختلف، مانند سطوح تحت درمان با کشت بافت یا سطوح کم اتصال، اغلب برای مطالعات بیوفیلم استفاده می شود.
- صفحات 96 چاهی پایین سیاه / شفاف: برای مطالعاتی که نیاز به اندازه گیری فلورسانس یا لومینسانس دارند، صفحات سیاه با کف شفاف (به عنوان مثال، Corning® 3603) ایده آل هستند زیرا صحبت متقابل بین چاه ها را به حداقل می رسانند و تشخیص سیگنال را بهبود می بخشند.
- صفحات پوشش داده شده آبگریز یا آبگریز: بسته به ماهیت بیوفیلم و میکروارگانیسم، صفحات با پوشش های خاص که چسبندگی را تقویت یا مهار می کنند، می توانند مفید باشند. به عنوان مثال، صفحات آبگریز ممکن است برای بیوفیلم های تشکیل شده توسط باکتری های خاص مناسب باشند.
- صفحات مخصوص بیوفیلم: برخی از تولیدکنندگان صفحاتی را ارائه می دهند که به طور خاص برای تحقیقات بیوفیلم طراحی شده اند. این صفحات اغلب دارای خواص سطحی پیشرفته ای هستند که باعث تشکیل بیوفیلم می شوند و برای سنجش بیوفیلم بهینه شده اند.
هنگام انتخاب یک صفحه 96 چاهی برای مطالعات بیوفیلم، معیارهای زیر را در نظر بگیرید:
- مواد و درمان سطح: مواد صفحه ای و درمان سطحی را انتخاب کنید که از چسبندگی و رشد میکروارگانیسم های تشکیل دهنده بیوفیلم که در حال مطالعه هستید پشتیبانی می کند.
وضوح نوری: برای سنجش های مربوط به اندازه گیری های نوری، اطمینان حاصل کنید که صفحه دارای وضوح نوری بالایی است. - طراحی خوب: شکل و عمق چاه ها را در نظر بگیرید که می تواند بر رشد بیوفیلم و اثربخشی درمان ها یا اندازه گیری های بعدی تأثیر بگذارد.
- سازگاری با تجهیزات: اطمینان حاصل کنید که صفحه با ماسونیکاتور ، دستگاه جوجه کشی و سایر تجهیزات مورد استفاده در مطالعه شما سازگار است. Hielscher چند به خوبی صفحه سونیکاتور سازگار با تمام microtiter استاندارد و چند به خوبی صفحات است.
در نهایت، بهترین انتخاب به نیازهای خاص تحقیقات بیوفیلم شما و ویژگی های میکروارگانیسم های درگیر بستگی دارد.
سنجش های بیوفیلم معمولی که در تحقیقات استفاده می شود چیست؟
در تحقیقات و تشخیص، انواع مختلفی از سنجش ها برای بررسی و طبقه بندی بیوفیلم ها استفاده می شود. فراصوت یک مرحله معمول آماده سازی نمونه برای حذف بیوفیلم از بستر جامد آن است که بیوفیلم را برای سنجش و تجزیه و تحلیل در دسترس قرار می دهد.
- رنگ آمیزی کریستال بنفش:
هدف: زیست توده بیوفیلم کل را کمی می کند.
روش بررسی: بیوفیلم ها با رنگ کریستالی بنفش رنگ آمیزی شده و سپس رنگ حل شده و به روش اسپکتروفتومتری اندازه گیری می شود.
کاربرد: برای ارزیابی تشکیل بیوفیلم و اثرات عوامل ضد میکروبی استفاده می شود. - شمارش سلولی زنده (سنجش CFU):
هدف: تعیین تعداد سلول های بیوفیلم زنده است.
روش بررسی: سلول های بیوفیلم جابجا شده به صورت سریال رقیق شده و برای شمارش واحدهای کلنی ساز (CFUs) بر روی آگار آبکاری می شوند.
کاربرد: زنده ماندن سلول های بیوفیلم و اثربخشی ضد میکروبی را ارزیابی می کند. - بیولومینسانس ATP:
هدف: اندازه گیری فعالیت متابولیکی سلول های بیوفیلم است.
روش بررسی: سطوح ATP با استفاده از روش بیولومینسانس اندازه گیری می شود.
کاربرد: زنده ماندن بیوفیلم و وضعیت متابولیکی را نشان می دهد. - سنجش کاهش XTT:
هدف: ارزیابی فعالیت متابولیک سلولی.
روش بررسی: معرف XTT توسط سلول های فعال متابولیکی کاهش می یابد و یک محصول فرمازان رنگی تشکیل می شود که به صورت اسپکتروفتومتری کمی می شود.
کاربرد: برای ارزیابی زنده ماندن سلول های بیوفیلم و اثر درمان ها استفاده می شود. - تجزیه و تحلیل میکروسکوپی:
هدف: ساختار و ترکیب بیوفیلم را تجسم می کند.
روش بررسی: تکنیک ها شامل میکروسکوپ نوری، میکروسکوپ روبشی لیزری کانفوکال (CLSM) و میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM) است.
کاربرد: بینش دقیقی در مورد معماری بیوفیلم، توزیع و اثرات درمان ها ارائه می دهد. - استخراج DNA، RNA و پروتئین:
هدف: تجزیه و تحلیل پروفایل های ژنتیکی و پروتئومی سلول های بیوفیلم است.
روش بررسی: سلول های بیوفیلم برای استخراج اسیدهای نوکلئیک و پروتئین ها برای تجزیه و تحلیل پایین دست (مانند PCR، qPCR، توالی یابی و پروتئومیکس) لیز می شوند.
کاربرد: بیان ژن، تنوع ژنتیکی و بیان پروتئین در بیوفیلم ها را مطالعه می کند. - سنجش مهار و ریشه کنی بیوفیلم:
هدف: ترکیبات را به دلیل توانایی آنها در جلوگیری از تشکیل بیوفیلم یا ریشه کن کردن بیوفیلم های مستقر غربال می کند.
روش بررسی: بیوفیلم ها با عوامل بالقوه آنتی بیوفیلم تیمار می شوند و اختلال با استفاده از روش های مذکور ارزیابی می شود.
کاربرد: کشف دارو و توسعه درمان های ضد بیوفیلم.
Hielscher مافوق صوت تولید کننده هموژنایزرهای مافوق صوت با کارایی بالا از ازمایشگاه ها تا اندازه صنعتی.
