لیپوزوم ها به روش تبخیر فاز معکوس با استفاده از فراصوت
لیپوزوم ها نانوحامل های همه کاره ای هستند که به دلیل زیست سازگاری و توانایی کپسوله کردن داروهای آبدوست و آبگریز در دارورسانی استفاده می شوند. روش تبخیر فاز معکوس (همچنین به عنوان روش امولسیون یا روش تبخیر حلال شناخته می شود) یک تکنیک برجسته برای آماده سازی لیپوزوم است که راندمان کپسوله سازی بالایی را ارائه می دهد. این مقاله بر روی آماده سازی لیپوزوم ها از طریق روش تبخیر فاز معکوس که توسط فراصوت پروب نوع افزایش یافته است، تمرکز دارد و مراحل رویه ای، مزایا و کاربردهای بالقوه در سیستم های تحویل دارو را برجسته می کند.
لیپوزوم ها ساختارهای وزیکولار متشکل از یک یا چند لایه دو لایه لیپیدی هستند که قادر به کپسوله کردن ترکیبات آبدوست و آبگریز هستند. ساختار منحصر به فرد آنها آنها را برای تحویل هدفمند دارو ایده آل می کند. روش تبخیر فاز معکوس (معروف به امولسیون یا روش تبخیر حلال) یک روش تثبیت شده برای تهیه لیپوزوم است. در پاراگراف های بعدی، ما شما را به مزایای روش تبخیر فاز معکوس با استفاده از فراصوت پروب نوع معرفی، که شناخته شده است برای بهبود امولسیون سازی، بهره وری کپسوله سازی و کاهش اندازه لیپوزومی.
پروب نوع فراصوت UP400St برای تهیه لیپوزوم
روش شناسی تهیه لیپوزوم به روش تبخیر فاز معکوس
تشکیل لیپوزوم از طریق روش تبخیر معکوس با استفاده از فراصوت شامل حل چربی در مخلوط حلال آلی کلروفرم و متانول (2: 1 V? V) ، که به نفع تشکیل میسل معکوس. سپس یک بافر آبی به این مخلوط اضافه می شود. راه حل ترکیبی فراصوت است, مثلا, با استفاده از یک پروب نوع فراصوت مانند UP400ST, برای ایجاد یک میکرو امولسیون آب در روغن. سپس حلال آلی با استفاده از یک اواپراتور دوار تبخیر می شود و در نتیجه یک ژل چسبناک ایجاد می شود که در نهایت فرو می ریزد و لیپوزوم تشکیل می دهد. هسته آبی بزرگ حباب های میکروامولسیون باعث به دام افتادن مولکول های آب دوست می شود و منجر به ژل های لیپوزومی می شود که رهایش کنترل شده و مشخصات نفوذی خوبی دارند. سرانجام, لیپوزوم ها به اندازه یکنواخت با استفاده از فراصوت کوچک.
تشکیل لیپوزوم به روش تبخیر معکوس با استفاده از فراصوت
پروتکل? دستورالعمل های گام به گام:
- چربی ها را وزن و حل کنید:
وزن دقیق در مجموع 40 میلی گرم L-α-فسفاتیدیل کولین و کلسترول در نسبت جرم یا 4:1 یا 7:3.
لیپیدهای توزین شده را در 10 میلی لیتر مخلوط کلروفرم/متانول (4:1 حجم/حجم) در یک فلاسک کف گرد حل کنید. - فرم فیلم لیپید:
فلاسک پایین گرد را به یک اواپراتور دوار وصل کنید.
فلاسک را در دمای 8 گرم در دمای 40 درجه سانتیگراد در شرایط خلاء بچرخانید تا زمانی که یک لایه لیپیدی نازک روی دیواره های فلاسک ایجاد شود. - دود حلال را حذف کنید:
دودهای باقیمانده مخلوط حلال را با شستشوی فلاسک با گاز نیتروژن تخلیه کنید. - فیلم لیپید را دوباره حل کنید:
فیلم لیپیدی را در 10 میلی لیتر دی اتیل اتر دوباره حل کنید تا وزیکول های فاز معکوس تشکیل شود. - فاز آبی را آماده کنید:
5 میلی لیتر بافر PBS (0.1 مولار، pH 7.4) حاوی ماده فعال برای کپسوله سازی و 20 میلی گرم توئین 80 را با فاز آلی (دی اتیل اتر با لیپیدهای محلول) مخلوط کنید. - امولسیون را فراصوت کنید:
امولسیون بدون امولسیون را در حمام یخ قرار دهید.
امولسیون را با استفاده از یک سونیکاتور از نوع پروب UP200Ht در 26 کیلوهرتز و حالت پالس 50٪ (0.5 چرخه = 30 ثانیه روشن? 30 ثانیه خاموش) و دامنه 50٪ برای 1 دقیقه فراصوت کنید. - تبخیر کنید تا ژل تشکیل شود:
امولسیون فراصوت را به اواپراتور دوار برگردانید.
تحت فشار اتمسفر در دمای 40 درجه سانتیگراد تبخیر کنید تا ژل به دست آید. - فرم لیپوزوم:
ژل را بیشتر تبخیر کنید و آن را به یک مایع نیمه شفاف تقسیم کنید که نشان دهنده تشکیل لیپوزوم است. - سوسپانسیون نهایی لیپوزوم:
5 میلی لیتر بافر PBS دیگر (0.1 M، pH 7.4) را به سوسپانسیون لیپوزوم اضافه کنید.
مخلوط را به آرامی گرداب دهید.
دودهای باقیمانده دی اتیل اتر را با استفاده از گاز نیتروژن تخلیه کنید. - ذخیره سازی:
سوسپانسیون نهایی لیپوزوم را در دمای 4 درجه سانتیگراد تا زمان نیاز در یخچال نگهداری کنید.
این دستورالعمل ها روند گام به گام برای تهیه لیپوزوم ها با استفاده از روش تبخیر فاز معکوس با همگن سازی اولتراسونیک را تشریح می کند و از بارگذاری آبی داخلی بالا و کپسوله سازی کارآمد ماده فعال اطمینان حاصل می کند.
روش تبخیر فاز معکوس، به ویژه با استفاده از فراصوت نوع پروب، یک تکنیک به طور گسترده ای برای آماده سازی لیپوزوم ها است، به ویژه هنگامی که هدف بارگذاری آبی داخلی بالا است. این روش به دلیل توانایی آن در ترکیب مقدار بیشتری از فاز آبی در لیپوزوم ها، نسبت به روش سنتی هیدراتاسیون لایه نازک سودمند است.
سونیکاتور صنعتی UIP2000hdT برای تولید لیپوزوم در مقیاس بزرگ
مزایای فراصوت از نوع پروب برای تشکیل لیپوزوم
- همگنی پیشرفته: فراصوت پروب نوع فراهم می کند ورودی انرژی سازگار, و در نتیجه توزیع اندازه یکنواخت تر از لیپوزوم.
- کپسوله سازی بهبود یافته: نیروهای مکانیکی در طول فراصوت افزایش کپسوله سازی مواد مخدر، به ویژه برای ترکیبات آبدوست.
- مقیاس پذیری: این روش ها به راحتی مقیاس پذیر هستند و آنها را برای تولید لیپوزوم در مقیاس بزرگ مناسب می کند.
کاربردهای لیپوزوم در دارورسانی
لیپوزوم های تهیه شده از طریق روش های امولسیون سازی و تبخیر حلال با فراصوت پروب نوع مناسب برای کاربردهای مختلف تحویل دارو, شامل:
- تحویل هدفمند دارو: عملکرد لیپوزوم ها با لیگاندهای خاص امکان تحویل هدفمند به بافت ها یا سلول های خاص را فراهم می کند.
- انتشار کنترل شده: ساختار دو لایه لیپیدی اجازه انتشار دارو کنترل شده, افزایش اثر درمانی.
- تنوع: این روش ها طیف گسترده ای از عوامل درمانی را در خود جای می دهند، از مولکول های کوچک گرفته تا مولکول های زیستی بزرگتر مانند پروتئین ها و اسیدهای نوکلئیک.
روش تبخیر فاز معکوس به ویژه به دلیل بارگذاری آبی داخلی بالاتر آن در مقایسه با روش هیدراتاسیون لایه نازک مورد توجه قرار گرفته است. این ویژگی برای کاربردهایی که نیاز به کپسوله سازی قابل توجهی از داروهای آب دوست یا سایر عوامل درمانی دارند مفید است.
روش تبخیر فاز معکوس با استفاده از فراصوت پروب نوع یک روش قوی و کارآمد برای آماده سازی لیپوزوم است. توانایی آن برای دستیابی به بارگذاری آبی داخلی بالاتر، آن را به روشی ترجیحی در کاربردهای دارویی تبدیل می کند که در آن به حداکثر رساندن کپسوله سازی مواد آب دوست بسیار مهم است. کنترل دقیق تبخیر حلال و استفاده از فراصوت کلید موفقیت این روش است که منجر به تولید لیپوزوم های با کیفیت بالا مناسب برای اهداف مختلف درمانی می شود.
سونیکاتور مناسب برای تولید لیپوزوم خود را پیدا کنید
Hielscher مافوق صوت ارائه می دهد طیف گسترده ای از محصولات فراصوت پروب نوع برای تولید لیپوزوم کارآمد و در نتیجه به دام افتادن بالا کارآمد و ظرفیت بارگذاری بالا از مولکول های فعال زیستی.
شما می توانید از فراصوت Hielscher برای مسیرهای مختلف آماده سازی لیپوزوم مانند تکنیک تبخیر فاز معکوس در اینجا توضیح داده شده، روش امولسیون سازی و روش فیلم نازک استفاده کنید.
اطلاعات بیشتر در مورد آماده سازی لیپوزوم اولتراسونیک از طریق روش فیلم نازک!
اطلاعات بیشتر در مورد لیپوزوم های التراسونیک آماده کپسوله کردن
- راندمان بالا
- تکنولوژی روز
- قابلیت اطمینان & نیرومندی
- کنترل فرآیند قابل تنظیم و دقیق
- دسته & درون خطی
- برای هر حجمی
- نرم افزار هوشمند
- ویژگی های هوشمند (به عنوان مثال، قابل برنامه ریزی، پروتکل داده ها، کنترل از راه دور)
- آسان و ایمن برای کار
- تعمیر و نگهداری کم
- CIP (تمیز کردن در محل)
طراحی، ساخت و مشاوره – کیفیت ساخت آلمان
مافوق صوت Hielscher به خوبی برای بالاترین کیفیت و استانداردهای طراحی خود را شناخته شده. استحکام و بهره برداری آسان اجازه می دهد تا ادغام صاف از ultrasonicators ما به امکانات صنعتی. شرایط خشن و محیط های خواستار به راحتی توسط مافوق صوت Hielscher رسیده.
Hielscher اولتراسونیک یک شرکت دارای گواهینامه ISO است و تاکید ویژه ای بر مافوق صوت با کارایی بالا با ویژگی های دولت از هنر فن آوری و کاربر پسند قرار داده است. البته، مافوق صوت Hielscher مطابق با CE و دیدار با الزامات UL، CSA و RoHs.
جدول زیر به شما نشانه ای از ظرفیت پردازش تقریبی مافوق صوت ما می دهد:
| حجم دسته ای | نرخ جریان | دستگاه های توصیه شده |
|---|---|---|
| 0.5 تا 1.5 میلی لیتر | ن.ا. | VialTweeter(ویال گروهی) |
| 1 تا 500 میلی لیتر | 10 تا 200 میلی لیتر در دقیقه | UP100H |
| 10 تا 2000 میلی لیتر | 20 تا 400 میلی لیتر در دقیقه | تا 200 هرتز، UP400St |
| 0.1 تا 20 لیتر | 0.2 تا 4 لیتر در دقیقه | UIP2000hdT |
| 10 تا 100 لیتر | 2 تا 10 لیتر در دقیقه | UIP4000hdT |
| 15 تا 150 لیتر | 3 تا 15 لیتر در دقیقه | UIP6000hdT |
| 15 تا 150 لیتر | 3 تا 15 لیتر در دقیقه | UIP6000hdT |
| ن.ا. | 10 تا 100 لیتر در دقیقه | UIP16000 |
| ن.ا. | بزرگتر | خوشه ای از UIP16000 |
تماس با ما!? از ما بپرسید!
Hielscher مافوق صوت تولید کننده هموژنایزرهای مافوق صوت با کارایی بالا برای مخلوط کردن برنامه های کاربردی، پراکندگی، امولسیون و استخراج در آزمایشگاه، خلبان و مقیاس صنعتی.
ادبیات? منابع
- Marco Paini, Sean Ryan Daly, Bahar Aliakbarian, Ali Fathi, Elmira Arab Tehrany, Patrizia Perego, Fariba Dehghani, Peter Valtchev (2015): An efficient liposome based method for antioxidants encapsulation. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 136, 2015. 1067-1072.
- Yao, X., Bunt, C., Cornish, J., Quek, S.-Y. and Wen, J. (2014): Preparation, Optimization and Characterization of Bovine Lactoferrin-loaded Liposomes and Solid Lipid Particles Modified by Hydrophilic Polymers Using Factorial Design. Chemical Biology and Drug Design 83, 2014. 560-575.
- Seyedeh Parinaz Akhlaghi, Iris Renata Ribeiro, Ben J. Boyd, Watson Loh (2016): Impact of preparation method and variables on the internal structure, morphology, and presence of liposomes in phytantriol-Pluronic® F127 cubosomes. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 145, 2016. 845-853.
حقایقی که ارزش دانستن دارند
لیپوزوم چیست؟
لیپوزوم ها وزیکول های کروی با یک لایه دو لایه لیپیدی هستند که برای کپسوله کردن ترکیبات استفاده می شوند. آنها در محلول حاوی ترکیبی که قرار است به دام بیفتد تهیه می شوند. برای ترکیبات آبدوست مانند پروتئین ها ، از محلول آبی استفاده می شود ، در حالی که مولکول های آبگریز با استفاده از محلول های موجود در حلال های آلی مخلوط با لیپیدها محصور می شوند. این تطبیق پذیری لیپوزوم ها را برای تحویل دارو و سایر کاربردهای زیست پزشکی ارزشمند می کند.
روش تبخیر فاز معکوس برای تهیه لیپوزوم چیست؟
روش تبخیر فاز معکوس برای تهیه لیپوزوم شامل حل کردن لیپیدها در مخلوط کلروفرم/متانول و تشکیل یک لایه لیپیدی نازک از طریق تبخیر چرخشی است. سپس این فیلم در دی اتیل اتر دوباره حل می شود تا وزیکول های فاز معکوس ایجاد شود. یک فاز آبی حاوی ماده فعال و توئین 80 با فاز آلی مخلوط می شود و یک امولسیون آب در روغن تشکیل می دهد. امولسیون با استفاده از یک سونیکاتور نوع پروب فراصوت می شود و به دنبال تبخیر چرخشی بیشتر برای تولید یک ژل انجام می شود که در نهایت پس از تبخیر اضافی لیپوزوم ها را تشکیل می دهد. سوسپانسیون نهایی با افزودن بافر PBS و حذف حلال های باقیمانده با گاز نیتروژن تکمیل می شود و در نتیجه لیپوزوم هایی در دمای 4 درجه سانتیگراد ذخیره می شوند.
اثر فراصوت بر لیپوزوم چیست؟
فراصوت با استفاده از امواج اولتراسونیک برای مختل کردن و مخلوط کردن فازهای لیپیدی و آبی لیپوزوم ها را تحت تاثیر قرار می دهد و باعث تشکیل پراکندگی همگن می شود. این فرآیند به کنترل اندازه و یکنواختی لیپوزوم ها کمک می کند و با اجازه دادن به انفجارهای متناوب انرژی از گرم شدن بیش از حد جلوگیری می کند. حفره کنترل شده ناشی از فراصوت تضمین کپسوله سازی کارآمد از مواد تشکیل دهنده فعال در لیپوزوم.
انتقال فاز در لیپوزوم ها چیست؟
انتقال فاز در لیپوزوم ها به تغییر ناشی از دما در وضعیت فیزیکی لیپید اشاره دارد. دمای انتقال فاز دمای خاصی است که در آن لیپیدها از فاز ژل مرتب شده، جایی که زنجیره های هیدروکربنی به طور کامل گسترش یافته و بسته بندی شده اند، به فاز کریستالی مایع بی نظم، جایی که زنجیره های هیدروکربنی به طور تصادفی جهت گیری و سیال می شوند، تغییر می کنند. این انتقال بر ثبات لیپوزوم، نفوذپذیری و تعامل با مواد کپسوله شده تأثیر می گذارد.
روش اکستروژن برای تهیه لیپوزوم چیست؟
گاهی اوقات، روش هیدراتاسیون لایه نازک را روش اکستروژن نیز می نامند، زیرا مرحله هیدراتاسیون لایه نازک با مرحله اکستروژن دنبال می شود. در طول اکستروژن، لیپوزوم ها از طریق غشاهای پلی کربنات اکسترود می شوند تا لیپوزوم های کوچک همگن به دست آید. از طرف دیگر برای اکستروژن، لیپوزوم ها اغلب با فراصوت کوچک می شوند.
روش فراصوت لیپوزوم ها چیست؟
فراصوت در روش های مختلف تشکیل لیپوزوم اعمال می شود. فراصوت برای امولسیون کردن لیپیدها و حلال ها، برای آبرسانی مجدد فیلم لیپید و کوچک سازی لیپوزوم استفاده می شود. برای روش evaoration فاز معکوس, لیپیدها التراسونیک با یک فاز آبی امولسیون می شوند. برای روش فیلم نازک، یک فیلم لیپیدی خشک شده با استفاده از یک فراصوت برای ایجاد یک سوسپانسیون وزیکول چند لایه آبرسانی می شود. تکنیک های آماده سازی لیپوزوم متعدد استفاده از فراصوت برای پس از آن کوچک سازی لیپوزوم های تشکیل. در اینجا، فراصوت نتایج در لیپوزوم های یکنواخت کوچک و پایدار مناسب برای کاربردهای مختلف.
Hielscher مافوق صوت تولید کننده هموژنایزرهای مافوق صوت با کارایی بالا از ازمایشگاه ها تا اندازه صنعتی.