α-sünukleiini fibrillid ja paelad on teadusuuringutes killustatud, et tekitada väiksemaid fibrillide katkendeid või isegi üksikuid valgumolekule, mida saab erinevate eksperimentaalsete tehnikate abil hõlpsamini analüüsida. VialTweeter Sonicator on üks kõige sagedamini kasutatavaid ultrasonikaatoreid tõhusaks ja usaldusväärseks alfa-sünukleiini killustumiseks.

α-sünukleiin teadusuuringutes

Alfa-sünukleiini fibrillid on valgu agregaadid, mis on tugevalt seotud neurodegeneratiivsete häiretega nagu Parkinsoni tõbi ja teatud dementsuse vormid, sealhulgas dementsus Lewy kehadega. Alfa-sünukleiini fibrillidele keskendunud uuringute eesmärk on mõista nende rolli haiguse progresseerumisel ja töötada välja võimalikud terapeutilised sekkumised. Lagundades alfa-sünukleiini fibrillid väiksemateks fragmentideks, saavad teadlased uurida nende spetsiifilisi struktuurilisi omadusi. Näiteks alfa-sünukleiini fibrillide fragmenteerimine võimaldab teadlastel uurida nende koostoimeid teiste molekulidega, nagu valgud, lipiidid või väikesed molekulid. Väiksemate fragmentide tootmisega saab nende interakteeruvate partnerite sidumissaite ja afiinsust tõhusamalt sondeerida. Väiksematel α-Syn fribrillidel ja paeltel võib samuti olla muutunud toksilisus ja biokeemiline toime. Seetõttu on ülioluline usaldusväärne ja tõhus killunemistehnika, mis annab kiirel ja lihtsal proovide töötlemisel reprodutseeritavaid tulemusi.
Ultraheli alfa-syn killustumine: VialTweeter sonikaator on loodud ultraheli proovi ettevalmistamise süsteem, mis sonikeerib kuni 10 viaali samaaegselt täpselt samadel tingimustel. Programmeeritavad seaded võimaldavad samade katsete lihtsat ja kiiret uuesti käivitamist, mis annab väga usaldusväärseid ja reprodutseeritavaid tulemusi alfa-sünukleiini fibrillide killustumisel.

α-sünukleiini proovi ettevalmistamine sonikaatoriga

Üks lähenemine alfa-sünukleiini fibrillide uurimisele hõlmab nende ekstraheerimist ja killustumist, kasutades selliseid meetodeid nagu ultrahelitöötlus. Sonikatsioon on protsess, mis kasutab kõrge intensiivsusega, madala sagedusega ultraheli laineid, et häirida ja lagundada valgu agregaate, mis viib väiksemate fibrillide või üksikute valgumolekulide vabanemiseni. Sonikaatori VialTweeter on sel eesmärgil α-sünukleiiniga seotud uuringutes tavaliselt kasutatav seade.

Paljud uuringud kirjeldavad alfa-sünukleiini fibrillide ultrahelitöötluse täpseid proovide ettevalmistamise protokolle, mis kasutavad Hielscher VialTweeterit tõhusaks ja usaldusväärseks α-sünukleiini fibrillide killustumiseks. Fibrillide ultraheli killustamisega saavad teadlased analüüsida saadud tooteid ja uurida nende struktuuri, toksilisust ja koostoimeid teiste molekulidega. See uuring annab olulist teavet neurodegeneratsiooni aluseks olevate mehhanismide kohta ja võib tuvastada uusi terapeutilisi sihtmärke. Väljakujunenud α-sünukleiini ultrahelitöötlusprotokollid, mis kasutavad VialTweeteri sonikaatorit, võimaldavad usaldusväärseid ja reprodutseeritavaid tulemusi.

Ülemised pildid: fragmenteerimata alfa-sünukleiini fibrillid
Madalamad pildid: Ultraheli fragmenteeritud alfa-sünukleiini fibrillid koos VialTweeter sonikaatoriga
(uuring ja pildid: ©Dieriks et al., 2022)

α-sünukleiini fibrillide ultraheli killustumine – Protokollid

Kuna paljud teadlased kasutavad VialTweeteri sonikaatorit eelistatud killustumise tehnikana, et toota ühtlasi α-sünukleiini fibrillifragmende, on loodud protokollid kergesti kättesaadavad. Allpool leiate mõned eeskujulikud killustatuse protokollid.
 

 
ClearTau seemnete ettevalmistamine: ClearTau fibrillid lahjendati dH2O-s 10 μM-ni ja töödeldi ultraheliga 70 % amplituudiga 50 sekundit 1 s ON 1 s OFF tsükli tuubis, kasutades sonikaatorit UP200St koos VialTweeteriga. Seemneid iseloomustas elektronmikroskoopia.
ThS fluorestsentsi mõõtmine: ClearTau fibrillid lahjendati dH2O-s 2,5 μM-ni ja töödeldi ultraheliga 70 % amplituudiga 50 sekundit 1 s ON 1 s OFF tsükliga torus, kasutades UP200St koos VialTweeteriga. Kontrollina kasutati 2,5 μM täispikka Tau 4R2N monomeeri. 100 μl reaktsioonile lisati 100 μl ThS-i (10 μM), mis andis valgu lõppkontsentratsiooniks 1,25 μM. Ühe ajapunkti ThS fluorestsentsi mõõtmiseks kasutati 96 hästi läbipaistvat põhjaplaati, mis olid seadistatud FLUOstar Omega mikroplaadilugejasse, ergastusega 445 nm juures ja emissioon 485 nm juures.
(vrd Limorenko et al., 2023)
 
Ühtlane α-sünukleiini pikkus ultrahelitöötluse abil: α-sün-fibrillide ja paelte pikkuse heterogeensust vähendati ultrahelitöötlusega 20 minutit jääl 2-ml Eppendorfi torudes VialTweeteris, mis oli seatud 75% amplituudile, 0,5 s impulssidele.
(vrd Bousset et al., 2013)
 
Viidi läbi inimese rekombinantse monomeerse WT või S129A a-Syn ja nende tekitatud fibrillaarsete polümorfide ning a-Syn 1–110 kvaliteedikontroll. Seejärel killustati fibrillaarsed polümorfid ultrahelitöötlusega 20 minutit 2-ml Eppendorfi torudes VialTweeteri ultrasonikaatoris, et genereerida fibrillaarseid osakesi, mille keskmine suurus on 42–52 nm ja mis sobivad endotsütoosiks.
(vrd Shrivastava et al., 2020)
 

Viie fibrillaarse α-Syn polümorfi iseloomustus. (A) Näidatakse negatiivselt värvitud α-Syn fibrillaarsete polümorfide fibrillide, lintide, fibrillide-91, fibrillide-65 ja fibrillide-110 ülekandeelektronmikrograafe enne (ülemine rada) ja pärast killustumist VialTweeteriga (alumine rada). (B) Näidatud on killustatud fibrillaarsete polümorfide pikkusejaotus. Näidatud on fibrillaarsete koostude arv (n), millest histogrammid on tuletatud.
(uuring ja pildid: Shrivastava et al., 2020)

 
α-Syn fibrillid killustati ultrahelitöötlusega 20 minutit 2 ml Eppendorfi torudes VialTweeteris, et tekitada fibrillaarseid osakesi, mille keskmine suurus oli 42–52 nm, nagu hinnati TEM-analüüsiga.
(vrd Negrini et al., 2022)
 
Resuspendeeritud fibrillid91 (fosfaatpuhvri lisandiga keedusoolalahuses) killustati enne rakukultuuride lisamist ultrahelitöötlusega 2 ml Eppendorfi torudes, kasutades viaali Tweeter sonikaatorit, alikvootne, välklambiga külmutatud vedelas lämmastikus ja säilitati kuni kasutamiseni -80 ° C juures.
(vrd Vajhøj et al., 2021)
 

VialTweeter ja Lab Sonicators α-SYN killustumiseks

Hielscher Ultrasonics on kogu maailmas tunnustatud kui tipptasemel ultrasonikaatorite juhtiv tootja. Usaldatud ja asutatud suuremates uurimislaborites kogu maailmas, meie ultrasonikaatorid pakuvad teie kriitiliste katsete jaoks enneolematut kvaliteeti ja jõudlust.
Hielscher VialTweeteri ja mis tahes muu Hielscheri sonikaatoriga kogete võrratut kasutajamugavust, kuna need on läbimõeldult konstrueeritud reprodutseeritavate tulemuste, kasutusmugavuse ja sujuva töö jaoks. Automaatsete andmete salvestamise funktsioonidega saate keskenduda oma uurimistööle, samal ajal kui meie ultrasonikaatorid salvestavad hoolikalt olulisi andmeid reprodutseeritavuse ja täpsuse tagamiseks.
Saavutage enesekindlalt järjepidevaid ja reprodutseeritavaid tulemusi!
Meie ultrasonikaatorid on konstrueeritud ja toodetud Saksamaal. Saksa täpsus ja kõrgeim tehniline kvaliteet, et tagada usaldusväärne ja täpne proovide ettevalmistamine, näiteks alfa-sünukleiini fibrillide killustumine iga kord. Enam pole vaja muretseda ebajärjekindlate tulemuste pärast - meie ultrahelitehnoloogia tagab, et teie uurimistöö jääb teaduse arengu esirinnas.
Aga see pole veel kõik! Meie pühendumus tipptasemele ulatub meie toodetest kaugemale. Oleme uhked oma erakordse klienditeeninduse üle, pakkudes asjatundlikku tuge kõigi teie küsimuste või murede lahendamiseks. Meie pühendunud meeskond on siin, et aidata teid teie uurimisteekonna igal sammul, tagades, et saate meie ultrasonikaatoritest maksimumi.
Valige innovatsioon, töökindlus ja erakordne kasutajakogemus - valige meie laborisonikaatorid, näiteks VialTweeter alfa-sünukleiini fibrillide killustumiseks. Saage kasu juba kehtestatud protokollidest ja liituge juhtivate teadlaste ridadega, kes usaldavad meie tehnoloogiat oma kriitiliste uuringute jaoks. Tõstke oma uurimistööd ja uurige meie tipptasemel ultrasonikaatoritega dementsuse ja neurodegeneratiivsete haiguste uurimise uusi piire.

Disain, tootmine ja nõustamine – Kvaliteet Valmistatud Saksamaal

Hielscheri ultrasonikaatorid on tuntud oma kõrgeimate kvaliteedi- ja disainistandardite poolest. Vastupidavus ja lihtne kasutamine võimaldavad meie ultrasonikaatorite sujuvat integreerimist tööstusrajatistesse. Karmid tingimused ja nõudlikud keskkonnad on Hielscheri ultrasonikaatorite poolt kergesti käsitsetavad.

Hielscher Ultrasonics on ISO sertifitseeritud ettevõte ja paneb erilist rõhku suure jõudlusega ultrasonikaatoritele, millel on tipptasemel tehnoloogia ja kasutajasõbralikkus. Loomulikult on Hielscheri sonikaatorid CE-nõuetele vastavad ja vastavad UL, CSA ja RoHs nõuetele.
 
Allolev tabel annab teile ülevaate meie laborisuuruse ultrasonikaatorite ligikaudsest töötlemisvõimsusest: