Extracción de puntos nubosos asistida por ultrasonidos

Cloud point extraction (CPE) es un procedimiento preanalítico para separar y preconcentrar analitos. En combinación con la ultrasonicación, la extracción en el punto de turbidez puede intensificarse haciendo que el proceso sea más eficiente, rápido y respetuoso con el medio ambiente. La extracción en el punto de turbidez asistida por ultrasonidos reduce el consumo de disolventes y el tiempo de extracción y también proporciona factores de enriquecimiento elevados para los analitos de forma significativa.

¿Cómo funciona la extracción de puntos nubosos?

Cloud point extraction (CPE) es una técnica de separación utilizada para la extracción y preconcentración de analitos a partir de una matriz de muestra. Este método implica la formación de una nube de micelas o agregados de cristal líquido en la matriz de la muestra a una temperatura específica conocida como punto de turbidez. Los analitos se solubilizan en la fase micelar, que puede separarse de la matriz de la muestra por centrifugación o filtración.
La técnica CPE puede aplicarse a una gran variedad de matrices de muestras, como agua, fluidos biológicos y muestras medioambientales. Se utiliza habitualmente para la extracción de compuestos orgánicos, como fenoles, hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP) y pesticidas, a partir de matrices complejas.
¿Qué significa extracción de puntos nubosos?
Cloud point extraction utiliza la transformación física de los líquidos a cierta temperatura, cuando el líquido se enturbia. El punto de enturbiamiento de los líquidos es la temperatura por debajo de la cual una solución transparente sufre una separación de fase líquido-líquido para formar una emulsión o una transición de fase líquido-sólido para formar un sol estable o una suspensión que sedimenta un precipitado.
Principio de funcionamiento de la extracción de puntos nubosos: Cloud point extraction (CPE) utiliza el comportamiento de fase específico de los tensioactivos no iónicos en soluciones acuosas, que muestra la separación de fases tras alcanzar una temperatura determinada – el llamado punto de nube – y/o la adición de un agente quelante. El principal motor de separación durante la extracción en el punto de turbidez está causado por la interacción hidrófoba entre el analito y el tensioactivo, que permite capturar los analitos en forma de diversos complejos metálicos en la fase rica en tensioactivos no iónicos.
La CPE presenta varias ventajas sobre los métodos de extracción tradicionales, como la extracción en fase sólida y la extracción líquido-líquido. Es una técnica sencilla y rentable que sólo requiere una pequeña cantidad de disolventes orgánicos. También puede utilizarse para la extracción selectiva de analitos específicos y puede combinarse fácilmente con otras técnicas analíticas, como la cromatografía y la espectroscopia, para el análisis cuantitativo de analitos.
Sin embargo, la CPE también tiene algunas limitaciones, como la necesidad de un control cuidadoso de la temperatura y la posibilidad de interferencia de otros componentes de la matriz. A pesar de estas limitaciones, la CPE es una tecnología prometedora, que puede ser incluso más eficaz si se combina con la sonicación.

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CupHorn ultrasónico para la preparación simultánea de varias muestras en las mismas condiciones para la extracción de analitos en el punto de turbidez.

El cuerno de copa ultrasónico facilita la extracción del punto de turbidez, ya que permite la preparación simultánea de muestras de varios viales en las mismas condiciones

¿Cómo hace la sonicación más eficiente la extracción de puntos nubosos?

El ultrasonicador UP100H es un homogeneizador de laboratorio que se utiliza a menudo para la preparación de muestras de placas de cultivo celular.La ultrasonicación puede utilizarse para ayudar y mejorar cloud point extraction (CPE) de varias maneras. La ultrasonicación implica el uso de ondas sonoras de alta frecuencia para crear burbujas de cavitación en un medio líquido. Cuando estas burbujas se colapsan, generan altas temperaturas y presiones localizadas que pueden alterar la matriz de la muestra y mejorar la solubilización de los analitos en la fase micelar durante la CPE.
 
He aquí algunas formas en que la ultrasonicación puede ayudar y mejorar la ECP:

  1. Mejorar la formación de micelas: La ultrasonicación puede potenciar la formación de micelas al aumentar el contacto entre las moléculas de tensioactivo y la matriz de la muestra. Esto puede conducir a una solubilización más rápida y eficaz de los analitos en la fase micelar, lo que se traduce en mayores rendimientos de extracción.
  2. Reduzca el tiempo de extracción: La ultrasonicación puede reducir el tiempo de extracción necesario para la CPE al acelerar la transferencia de masa de los analitos de la matriz de la muestra a la fase micelar. Esto se debe a los efectos mecánicos de la ultrasonicación sobre la matriz de la muestra, que pueden alterar las fuerzas intermoleculares que retienen los analitos en la matriz.
  3. Mejorar la eficacia de la extracción: La ultrasonicación puede mejorar la eficacia de extracción de la CPE al aumentar el contacto entre las moléculas de tensioactivo y los analitos. Esto puede conducir a una solubilización más completa de los analitos en la fase micelar, lo que resulta en una mayor eficiencia de extracción.
  4. Aumentar la sensibilidad: La ultrasonicación puede aumentar la sensibilidad de la CPE al mejorar la preconcentración de los analitos en la fase micelar. Esto puede permitir la detección de analitos a concentraciones más bajas de lo que sería posible sin preconcentración.

En general, la ultrasonicación puede ser una herramienta útil para mejorar el rendimiento de la CPE al potenciar la formación de micelas, reducir el tiempo de extracción, mejorar la eficacia de la extracción y aumentar la sensibilidad.

Este clip de vídeo muestra el homogeneizador ultrasónico UP100H de Hielscher, un ultrasonicador muy utilizado para la preparación de muestras en laboratorios.

Homogeneizador ultrasónico UP100H

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Este tutorial explica qué tipo de sonicador es el mejor para sus tareas de preparación de muestras como lisis, disrupción celular, aislamiento de proteínas, fragmentación de ADN y ARN en laboratorios, análisis e investigación. Elija el tipo de sonicador ideal para su aplicación, volumen de muestra, número de muestras y rendimiento. Hielscher Ultrasonics tiene el homogeneizador ultrasónico ideal para usted.

Cómo encontrar el sonicador perfecto para la disrupción celular y la extracción de proteínas en ciencia y análisis

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Encuentre el ultrasonicador adecuado para su extracción de puntos nubosos

Hielscher Ultrasonics ofrece varias soluciones de ultrasonidos sofisticadas para una preparación de muestras eficaz, rápida y fácil de usar para la extracción del punto de turbidez y el preanálisis. Tanto si desea sonicar muestras individuales, muestras múltiples o placas de microtitulación/multipocillos para la extracción del punto de turbidez, disponemos del ultrasonido ideal para su procedimiento de extracción.
La tabla siguiente le ofrece una visión general de nuestros ultrasonidos para la preparación y extracción de muestras. Haga clic en el tipo de aparato para obtener más información sobre cada homogeneizador ultrasónico. Nuestro personal técnico, bien formado y con una larga experiencia, estará encantado de ayudarle a elegir el ultrasonicador más adecuado para la preparación de sus muestras.
 

Volumen del loteTasa de flujoDispositivos recomendados
hasta 10 viales o tubosn.a.VialTweeter
placas multipocillo / microtitern.a.UIP400MTP
varios tubos / recipientesn.a.CupHorn
1 a 500 mL10 a 200 mL/min.UP100H
De 10 a 1000 ml20 a 200mL/minUP200Ht, UP200St
10 a 2000 mL20 a 400 mL/min.UP400St

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El vídeo muestra el sistema de preparación de muestras por ultrasonidos UIP400MTP, que permite la preparación fiable de muestras de cualquier placa multipocillo estándar mediante ultrasonidos de alta intensidad. Las aplicaciones típicas del UIP400MTP incluyen la lisis celular, el cizallamiento de ADN, ARN y cromatina, así como la extracción de proteínas.

Ultrasonicador UIP400MTP para sonicación de placas de pocillos múltiples

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VialTweeter en el procesador ultrasónico UP200ST

El VialTweeter es una unidad ultrasónica de preparación de múltiples muestras para la sonicación simultánea de 10 tubos de ensayo.


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