Extracción en el punto de nube asistida por ultrasonidos
Cloud point extraction (CPE) es un procedimiento preanalítico para separar y preconcentrar analitos. En combinación con la ultrasonicación, la extracción en el punto de nube puede intensificarse para que el proceso sea más eficiente, más rápido y más respetuoso con el medio ambiente. La extracción en el punto de nube asistida por ultrasonidos reduce el consumo de disolventes y el tiempo de extracción, y también proporciona factores de enriquecimiento elevados para los analitos.
¿Cómo funciona la extracción en el punto de nube?
Cloud point extraction (CPE) es una técnica de separación utilizada para extraer y preconcentrar analitos de una matriz de muestra. Este método implica la formación de una nube de micelas o agregados de cristales líquidos en la matriz de la muestra a una temperatura específica conocida como punto de nube. Los analitos se solubilizan en la fase micelar, que puede separarse de la matriz de la muestra mediante centrifugación o filtración.
La técnica CPE puede aplicarse a diversas matrices de muestra, como agua, fluidos biológicos y muestras ambientales. Se utiliza habitualmente para extraer compuestos orgánicos, como fenoles, hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAHs) y plaguicidas, de matrices complejas.
¿Qué significa extracción en el punto de nube?
Cloud point extraction utiliza la transformación física de los líquidos a una determinada temperatura, a la que el líquido se vuelve turbio. El punto de nube de los líquidos es la temperatura por debajo de la cual una solución transparente experimenta una separación de fases líquido-líquido que forma una emulsión o una transición de fase líquido-sólido que forma un sol estable o una suspensión en la que se deposita un precipitado.
Principio de funcionamiento de la extracción en el punto de nube: Cloud point extraction (CPE) utiliza el comportamiento de fases específico de los tensioactivos no iónicos en soluciones acuosas, que presentan una separación de fases tras alcanzar una determinada temperatura –el denominado punto de nube– y/o añadir un agente quelante. El principal mecanismo que impulsa la separación durante la extracción en el punto de nube es la interacción hidrofóbica entre el analito y el tensioactivo, que permite captar los analitos en forma de diversos complejos metálicos en la fase rica en tensioactivo no iónico.
La CPE presenta varias ventajas frente a los métodos de extracción tradicionales, como la extracción en fase sólida y la extracción líquido-líquido. Es una técnica sencilla y rentable que solo requiere una pequeña cantidad de disolventes orgánicos. También puede utilizarse para la extracción selectiva de analitos específicos y combinarse fácilmente con otras técnicas analíticas, como la cromatografía y la espectroscopia, para el análisis cuantitativo de los analitos.
Sin embargo, la CPE también presenta algunas limitaciones, como la necesidad de controlar cuidadosamente la temperatura y la posibilidad de interferencias de otros componentes de la matriz. A pesar de estas limitaciones, la CPE es una tecnología prometedora cuya eficiencia puede mejorarse aún más al combinarla con la sonicación.
El CupHorn ultrasónico facilita la extracción en el punto de nube, ya que permite preparar simultáneamente muestras en varios viales en las mismas condiciones
¿Cómo mejora la sonicación la eficiencia de la extracción en el punto de nube?
La ultrasonicación puede utilizarse para facilitar y mejorar cloud point extraction (CPE) de varias maneras. La ultrasonicación consiste en utilizar ondas sonoras de alta frecuencia para crear burbujas de cavitación en un medio líquido. Cuando estas burbujas colapsan, generan temperaturas y presiones elevadas de forma localizada que pueden desestructurar la matriz de la muestra y mejorar la solubilización de los analitos en la fase micelar durante la CPE.
Estas son algunas de las formas en que la ultrasonicación puede facilitar y mejorar la CPE:
- Mejorar la formación de micelas: La ultrasonicación puede mejorar la formación de micelas al aumentar el contacto entre las moléculas de tensioactivo y la matriz de la muestra. Esto puede favorecer una solubilización más rápida y eficiente de los analitos en la fase micelar, lo que se traduce en mayores rendimientos de extracción.
- Reducir el tiempo de extracción: La ultrasonicación puede reducir el tiempo de extracción necesario para la CPE al acelerar la transferencia de masa de los analitos desde la matriz de la muestra hasta la fase micelar. Esto se debe a los efectos mecánicos de la ultrasonicación sobre la matriz de la muestra, que pueden alterar las fuerzas intermoleculares que mantienen los analitos en la matriz.
- Mejorar la eficiencia de extracción: La ultrasonicación puede mejorar la eficiencia de extracción de la CPE al aumentar el contacto entre las moléculas de tensioactivo y los analitos. Esto puede favorecer una solubilización más completa de los analitos en la fase micelar, lo que se traduce en una mayor eficiencia de extracción.
- Aumentar la sensibilidad: La ultrasonicación puede aumentar la sensibilidad de la CPE al mejorar la preconcentración de los analitos en la fase micelar. Esto puede permitir detectar analitos a concentraciones inferiores a las que sería posible detectar sin preconcentración.
En general, la ultrasonicación puede ser una herramienta útil para mejorar el rendimiento de la CPE al favorecer la formación de micelas, reducir el tiempo de extracción, mejorar la eficiencia de extracción y aumentar la sensibilidad.
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Hielscher Ultrasonics ofrece diversas soluciones ultrasónicas avanzadas para una preparación de muestras eficiente, rápida y fácil de realizar para la extracción en el punto de nube y la fase preanalítica. Tanto si desea sonicar muestras individuales como múltiples muestras o placas de microtitulación / multipocillo para la extracción en el punto de nube, disponemos del ultrasonicador ideal para su procedimiento de extracción.
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| Volumen por lote | Caudal | Equipos recomendados |
|---|---|---|
| hasta 10 viales o tubos | n.a. | VialTweeter |
| placas multipocillo / de microtitulación | n.a. | UIP400MTP |
| múltiples tubos / recipientes | n.a. | CupHorn |
| 1 a 500 mL | 10 a 200 mL/min | UP100H |
| 10 a 1000 mL | 20 a 200 mL/min | UP200Ht, UP200St |
| 10 a 2000 mL | 20 a 400 mL/min | UP400St |
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El VialTweeter es una unidad ultrasónica de preparación de múltiples muestras para la sonicación simultánea de 10 tubos de ensayo.
Bibliografía / Referencias
- Yoong Kit Leong, John Chi-Wei Lan, Hwei-San Loh, Tau Chuan Ling, Chien Wei Ooi, Pau Loke Show (2017): Cloud-point extraction of green-polymers from Cupriavidus necator lysate using thermoseparating-based aqueous two-phase extraction. Journal of Bioscience and Bioengineering, Volume 123, Issue 3, 2017. 370-375.
- Trindade, A. S., Dantas, A. F., Lima, D. C., Ferreira, S. L., & Teixeira, L. S. (2015): Multivariate optimization of ultrasound-assisted extraction for determination of Cu, Fe, Ni and Zn in vegetable oils by high-resolution continuum source atomic absorption spectrometry. Food chemistry, 185, 2015. 145–150.
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