Trombositlərlə zəngin serumun ultrasəslə hazırlanması
- Trombositlərlə zəngin plazma (PRP) tibbi və estetik müalicələrdə istifadə olunan, trombositlərlə zənginləşdirilmiş qan plazmasıdır.
- Ultrasəs lizisi və kondisionerləşdirmə trombositlərlə zəngin plazmanın hazırlanması üçün çox təsirli üsuldur.
- Hielscher Ultrasonics qanın emalı tələblərinə uyğun müxtəlif ultrasəs sistemləri təklif edir (məsələn, təmiz otağın daxilində və xaricində hazırlama üçün).
Trombositlərlə zəngin serum
Ultrasəslə emal böyümə faktorlarını sərbəstləşdirmək üçün autoloji qan serumundakı trombositləri lizisə uğratmağın etibarlı və asan üsuludur. Trombositlərdən alınan fraksiyalar – autoloji kondisionerləşdirilmiş serum (ACS) kimi də tanınır – toxumaların bərpası və ya estetik müalicələr üçün istifadə olunur. Optimal nəticələr əldə etmək üçün PRP inyeksiyadan əvvəl zənginləşdirilir.
Hüceyrə böyümə faktorları ilə zənginləşdirilmiş plazma hazırlamaq üçün ultrasəslə emal hüceyrə membranlarını lizisə uğratmağın və trombositlərdən hüceyrə böyümə faktorlarının demək olar ki, hamısını sərbəstləşdirməyin çox təsirli və səmərəli üsuludur. Ultrasəs lizisi və kondisionerləşdirmə vasitəsilə hətta laxtalanması əngəllənmiş qandan da istifadə etmək mümkündür.
PRP-nin ultrasəslə kondisionerləşdirilməsi konsentratlaşdırılmış böyümə faktorları əldə etməyin rahat və iqtisadi cəhətdən sərfəli yoludur.
Trombositlərlə zəngin plazmanın (PRP) ultrasəs lizisi
Ultrasəs lizisinin təsirləri
Qan serumunun ultrasəslə emalı trombositlərin daxilindəki böyümə faktorlarını (AB böyümə faktoru (PDGF-AB), AA böyümə faktoru (PDGF-AA), BB böyümə faktoru (PDGF-BB), damar endotelinin böyümə faktoru (VEGF), transformasiyaedici böyümə faktoru β (TGF-β), epidermal böyümə faktoru (EGF), insulinəbənzər böyümə faktoru (IGF), epitel hüceyrələrinin böyümə faktoru ECGF və fibroblast böyümə faktoru (FGF)) sərbəstləşdirmək üçün trombositlərin homogen lizisinə səbəb olur. Trombositlər və onların alfa-qranulları ultrasəslə parçalanır; bunun üçün akustik kavitasiya fenomenindən istifadə edilir. Trombositlərin lizisi üçün ultrasəs kavitasiyasından istifadə təkrar dondurma və ərimə üsulunun böyümə faktorlarının aktivliyinə mümkün mənfi təsirini azaldır.
PRP-nin ultrasəslə hazırlanması protokolu
Təzə götürülmüş təxminən 16mL autoloji qan nümunəsi qan və antikoaqulyantların yaxşı qarışması üçün sınaq borusunda ehtiyatla 8–10 dəfə çevrilir. Daha sonra nümunə otaq temperaturunda 1800 g-də 20 min sentrifuqalanır. Sentrifuqalamadan sonra trombositlər və mononuklear hüceyrələr plazma qatının dibində trombositlərlə zəngin plazma (PRP) adlanan ağımtıl qat əmələ gətirir. Üst qat trombositlərlə kasad plazma (PPP) kimi tanınır. Mononuklear hüceyrələr çıxarıla və ya nümunədə saxlanıla bilər. Kontaminasiya riski yaradan əlavə mərhələlərdən qaçmaq üçün mononuklear hüceyrələr çox vaxt PRP nümunəsində saxlanılır.
Qeyd: Autoloji PRP-nin ultrasəslə emalı steril şəraitdə aparılmalıdır.
PRP və PPP ayrılır və toplanır. PPP-yə 1,5mL 10% kalsium xlorid məhlulu, PRP-yə isə 0,5mL 5% etanol əlavə edilir. Hər iki suspenziya ehtiyatla qarışdırılır və otaq temperaturunda 5 min saxlanılır. Sonda PRP suspenziyasına 1mL PPP əlavə edilir və fibrin laxtası əmələ gələnədək saxlanılır.
Ultrasəslə emal: Əmələ gəlmiş trombosit geli sərbəstləşdirilən böyümə faktorları üçün rezervuar rolunu oynadığından, mövcud böyümə faktorlarını sərbəstləşdirmək üçün fibrin geli parçalanmalıdır. Ultrasəs lizisi və böyümə faktorlarının sərbəstləşdirilməsi üçün parametrlər aşağıdakılardır: Sınaq borusundakı nümunəni ultrasəslə emal etmək üçün UP200Ht və ya UP200St (200W, 26kHz) cihazından S26d2 sonotrodu ilə istifadə edin. Qan nümunəsinin həddindən artıq qızmasının qarşısını almaq üçün ultrasəslə emal impuls dövrləri ilə aparıla bilər (məsələn, 10 sec. işləmə, 30 sec. fasilə). Soyutmaq üçün nümunə buz üzərinə yerləşdirilməlidir ki, temperatur optimal olaraq 2 – 5°C arasında saxlanılsın. Ultrasəslə emaldan sonra nümunə otaq temperaturunda 16.000 g-də 5 min. sentrifuqalanır. Supernatant toplanır və -70°C-də saxlanıla bilər.
Ultrasəslə emal üsulunda PRP fraksiyasındakı trombosit konsentrasiyası ədəbiyyatda göstərilən tam qandakı orta trombosit sayı ilə müqayisədə 1,7 – 4,5 dəfə artırılmışdır.
PRP piy toxumasından alınan kök hüceyrələrlə müalicə ilə birləşdirilmişdir (piy toxumasından ultrasəslə sərbəstləşdirilmiş autoloji kök hüceyrələr PRP ilə qarışdırılmış və bərpa məqsədilə yenidən xəstənin toxumasına inyeksiya edilmişdir).
Ultrasəs avadanlığı
Hielscher Ultrasonics müasir və etibarlı ultrasəs texnologiyası üzrə mütəxəssisdir. Ultrasəs cihazlarımız bütün dünyada lizis, ekstraksiya və nümunələrin hazırlanması üçün istifadə olunur – birbaşa və dolayı yolla. Avtoklavda sterilizasiya edilə bilən həmçinin birdəfəlik aksesuarlar kontaminasiyasız autoloji qan nümunəsi emalını təmin edir. Sistemlərimizin əksəriyyəti aşağıdakıların ultrasəs lizisi üçün istifadə oluna bilər: kök hüceyrələr və PRP. Bu, ultrasəs cihazlarımızı iqtisadi baxımdan daha da səmərəli edir.
Aşağıdakı cədvəldə trombositlərlə zəngin plazmanın hazırlanması üçün uyğun ultrasəs cihazlarımız və hər biri üçün tövsiyə olunan nümunə həcmi göstərilmişdir. Daha böyük ultrasəs cihazları və fərdi tələblərə uyğunlaşdırılmış sistemlər də mövcuddur.
| Cihaz | Güc [W] | Tezlik [kHz] | Tip | Həcm [mL] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | müstəqil | 0,5 | – | 1,5 |
| UP50H | 50 | 30 | əldə tutulan və ya stativə quraşdırılan | 0,01 | – | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | əldə tutulan və ya stativə quraşdırılan | 0,01 | – | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | əldə tutulan və ya stativə quraşdırılan | 0,1 | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | stativə quraşdırılan | 0,1 | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | stativə quraşdırılan | 5,0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | müstəqil | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | kontaminasiyasız axın hüceyrəsi | |||
Bu gün bizimlə əlaqə saxlayın! Optimal ultrasəs cihazını tapmağınıza məmnuniyyətlə kömək edərik!
Bizimlə əlaqə saxlayın! / Bizdən soruşun!
UP200St-TD ultrasəs çeviricisinə qoşulmuş GDmini2 (200 vatt)
Ədəbiyyat/İstinadlar
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; Pula, G. (2016): Trombosit lizat geli və endotel progenitorları in vitro mikrovaskulyar şəbəkənin formalaşmasını stimullaşdırır: toxuma mühəndisliyi üçün əhəmiyyəti. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, M.S.A.; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Kəskin əzələ zədələnməsi üçün trombositlərlə zəngin plazma (PRP): sistematik icmal. PLOS ONE Cild 9, Say 2, 2014.
Bilməyə dəyər faktlar
Trombositlərlə zəngin plazma
Trombositlərlə zəngin plazmada hüceyrələrin böyüməsi və yenilənməsinin mühüm stimulyatorları olan AB böyümə faktoru (PDGF-AB), trombosit mənşəli AA böyümə faktoru (PDGF-AA), trombosit mənşəli BB böyümə faktoru (PDGF-BB), damar endotelinin böyümə faktoru (VEGF), transformasiyaedici böyümə faktoru β (TGF-β), epidermal böyümə faktoru (EGF), insulinəbənzər böyümə faktoru (IGF), epitel hüceyrələrinin böyümə faktoru ECGF və fibroblast böyümə faktoru (FGF) mövcuddur.
Autoloji kondisionerləşdirilmiş serum (ACS)
Autoloji kondisionerləşdirilmiş plazma (ACP) müxtəlif ortopedik xəstəliklərdə və cərrahi prosedurlarda regenerasiyanı dəstəkləmək üçün istifadə olunan, autoloji qandan alınmış trombositlərlə zəngin plazmadır. Kondisionerləşdirilmiş serum plazmanı digər qan komponentlərindən (məsələn, eritrositlərdən) ayırmaq və konsentratlaşdırmaq yolu ilə hazırlanır. ACP trombositlərlə zəngin plazmadır (PRP). PRP tam qanla müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə yüksək trombosit konsentrasiyasına malik plazma növü üçün ümumi termindir. O, tam qandan alınır. ACP-nin əsas komponentlərinə trombositlər (qan lövhəcikləri) və sağalma proseslərində əsas rol oynayan bir neçə böyümə faktoru daxildir. Digər trombositlərlə zəngin plazma preparatlarından fərqli olaraq, ACP yüksək konsentrasiyalarda mövcud olduqda sağalma prosesinə zərər verə bilən neytrofil qranulositlər kimi ağ qan hüceyrələrinin aşağı konsentrasiyası ilə fərqlənir.
Trombositlərlə zəngin plazma inyeksiyaları
Trombositlərlə zəngin plazma həm regenerativ tibbdə, həm də kosmetik prosedurlarda inyeksiya şəklində istifadə olunur. PRP-nin tətbiqi əzələlərin sağalmasının və bərpasının əhəmiyyətli dərəcədə sürətlənməsini vəd edir. Bundan əlavə, o, iltihabın, artritin, ağrının, yaraların, gec sağalan açıq yaraların və ağır dəri yanıqlarının müalicəsində uğurla istifadə olunur. PRP yüksək miqdarda böyümə faktorları ehtiva edir; bu faktorlar sağalma prosesində iştirak edən hüceyrələri stimullaşdırır və qoruyur, nəticədə zədələnmiş toxuma bərpa olunur.
Kosmetik müalicələrdə PRP-nin saç böyüməsini və dərinin yenilənməsini stimullaşdırmaq üçün təsirli olduğu göstərilmişdir (bu, vampir müalicəsi kimi də tanınır).
Trombosit mənşəli böyümə faktorları (PDGF)
Trombosit mənşəli böyümə faktoru (PDGF) termini PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C və PDGF-D faktorlarını ifadə edir. Bu, dörd liqanddan (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C və PDGF-D) və iki reseptordan, PDGFR-alpha və PDGFR-beta-dan ibarət siqnal şəbəkəsidir.
Böyümə faktorları, yəni zülallar, hüceyrələrin böyüməsini və bölünməsini tənzimləyir. Laxta əmələ gəlməsi zamanı trombositlərdən sərbəstləşən və məməlilərin serumunda rast gəlinən əsas mitogen kimi o, qan damarlarının əmələ gəlməsində (angiogenez), yəni artıq mövcud olan qan damarı toxumasından qan damarlarının inkişaf etməsində mühüm rol oynayır.