Ультразвукове відокремлення клітин

Ультразвукове відокремлення клітин – це високоефективний і надійний метод підготовки зразків, який застосовують у різних галузях клітинної біології та біотехнології. За допомогою ультразвукових хвиль ультразвуковий прилад UIP400MTP для багатолункових планшетів відокремлює адгезивні клітини від поверхонь для культивування та готує клітинні суспензії для подальшого застосування. Ультразвукова обробка має низку переваг порівняно з традиційними ферментативними, хімічними та механічними методами відокремлення, що робить її цінним інструментом для дослідників.

Принцип ультразвукового відокремлення клітин

Ультразвукове відокремлення клітин ґрунтується на використанні потужного ультразвуку для порушення взаємодій між клітинами та субстратом, до якого вони прикріплені. Ультразвукові хвилі утворюють мікробульбашки, спричиняють акустичну кавітацію та вібрації в культуральному середовищі, створюючи механічні сили, які м’яко, але ефективно відокремлюють клітини. Цей процес зазвичай здійснюють за допомогою безконтактного ультразвукового приладу UIP400MTP для багатолункових планшетів.

Нижче наведено приклад інструкції з відокремлення клітин за допомогою ультразвукового приладу UIP400MTP для багатолункових планшетів.
 

Обладнання та матеріали для ультразвукового відокремлення клітин

• Безконтактний ультразвуковий прилад UIP400MTP для багатолункових планшетів: Цей високопродуктивний ультразвуковий прилад є основним інструментом. Ультразвуковий прилад UIP400MTP для планшетів підходить для будь-яких стандартних багатолункових і мікротитраційних планшетів, а також для чашок Петрі. Ультразвукові хвилі забезпечують механічну енергію, необхідну для відокремлення клітин.
• Планшети для культивування клітин або чашка Петрі: Стандартні посудини, які використовують для вирощування адгезивних клітинних культур.
• Культуральне середовище: Рідке середовище, у якому вирощують і підтримують клітини.
• Стерильний PBS (фосфатно-сольовий буфер): Використовують для промивання клітин перед відокремленням.
• Пробірки для збирання: Для збирання суспензії відокремлених клітин.

Протокол ультразвукового відокремлення за допомогою ультразвукового приладу UIP400MTP для планшетів

1. Підготовка
   – Переконайтеся, що все обладнання чисте та стерильне, щоб запобігти контамінації.
   – Попередньо нагрійте культуральне середовище та PBS до відповідної температури (зазвичай 37°C).
2. Промивання клітин
   – Аспіруйте культуральне середовище з флакона або планшета для культивування клітин.
   – Обережно промийте клітини стерильним PBS, щоб видалити всі залишки середовища та відокремлені клітини.
3. Ультразвукова обробка
   – Додайте до флакона або планшета невеликий об’єм PBS або свіжого культурального середовища, щоб покрити клітинний моношар.
   – Помістіть чашку Петрі або планшет в ультразвуковий прилад UIP400MTP.
   – Проводьте ультразвукову обробку протягом визначеного часу, зазвичай від кількох секунд до кількох хвилин, залежно від типу клітин і міцності їх прикріплення.
4. Збирання клітинної суспензії
   – Після ультразвукової обробки огляньте клітини під мікроскопом, щоб переконатися в їх відкріпленні.
   – Обережно піпетуйте клітинну суспензію, щоб зібрати відкріплені клітини.
   – Перенесіть суспензію в пробірку для збору.
5. Обробка після відкріплення
   – За потреби центрифугуйте клітинну суспензію для концентрування клітин.
   – Ресуспендуйте клітини у свіжому культуральному середовищі або буфері для подальшого застосування.

Примітки: Параметри (наприклад, тривалість та інтенсивність ультразвукової обробки) необхідно оптимізувати для різних типів клітин, щоб уникнути їх пошкодження. Деякі вразливі типи клітин можуть бути чутливішими до ультразвукової обробки, що потребує ретельної оптимізації.

Практичне застосування ультразвукового відкріплення клітин

Ультразвукове відкріплення клітин застосовують у різних дослідницьких і клінічних умовах:

1. Проточна цитометрія: Підготовка суспензій поодиноких клітин для аналізу.
2. Підрахунок клітин і визначення їх життєздатності: Відкріплення клітин для точного підрахунку та оцінювання життєздатності.
3. Субкультивування: Перенесення клітин з однієї культуральної посудини в іншу.
4. Молекулярно-біологічні експерименти: Виділення клітин для екстракції ДНК, РНК і білків.

Дізнайтеся тут, як ультразвуковий апарат UIP400MTP для 96-лункових планшетів застосовують для відокремлення біоплівок у дослідженнях біоплівок, зокрема за протоколом ASTM E2799!

Чому варто замінити зішкрібання клітин їх відкріпленням за допомогою ультразвукового апарата UIP400MTP для мікропланшетів?

Заміна зішкрібання клітин їх відкріпленням за допомогою ультразвукового апарата UIP400MTP для мікропланшетів надає дослідникам низку переваг. На відміну від ручного зішкрібання, точно контрольована ультразвукова обробка за допомогою UIP400MTP забезпечує стабільне та дбайливе відкріплення клітин, мінімізуючи механічні пошкодження та зберігаючи життєздатність клітин. UIP400MTP забезпечує точний контроль параметрів ультразвукової обробки, що дає змогу рівномірно обробляти всі лунки та усувати варіабельність між зразками. Цей метод швидший, ефективніший і придатний до масштабування, що робить його ідеальним для високопродуктивної обробки зі збереженням відтворюваності та цілісності чутливих клітинних культур. Ознайомтеся з порівняльним дослідженням тут!