Ультразвукове відшарування клітин
Ультразвукове відшарування клітин – це високоефективна та надійна методика підготовки зразків, яка використовується в різних галузях клітинної біології та біотехнології. Використовуючи ультразвукові хвилі, багатолунковий пластинчастий ультразвуковий UIP400MTP відокремлює прилиплі клітини від поверхні культури та готує клітинні суспензії для подальшого застосування. Ультразвукова діагностика має ряд переваг перед традиційними ферментативними, хімічними та механічними методами відшарування, що робить її цінним інструментом для дослідників.
Принцип ультразвукового відшарування клітин
Ультразвукове відшарування клітин ґрунтується на використанні потужного ультразвуку для порушення взаємодії між клітинами та субстратом, до якого вони прикріплені. Ультразвукові хвилі генерують мікропухирці, акустичну кавітацію та вібрації в живильному середовищі, виробляючи механічні сили, які м'яко, але ефективно зміщують клітини. Цей процес зазвичай виконується за допомогою безконтактного UIP400MTP ультразвукового апарату для багатолункових пластин.

Безконтактний УЗД UIP400MTP для відшарування клітин
Відокремлення клітин має вирішальне значення при культивуванні адгезивних клітин. Хоча трипсинізація є найбільш часто використовуваним методом, вона може знизити життєздатність клітин, пошкоджуючи клітинну мембрану та позаклітинний матрикс. Щоб підвищити ефективність культивування клітин, важливо мінімізувати цю шкоду. Ультразвукове відшарування клітин є високоефективною та надійною методикою без ферментів. Це робить UIP400MTP мікропланшетний ультразвуковий апарат чудовою альтернативою при відшаруванні клітин на основі ферментів. Ультразвукове дослідження застосовує акустичну кавітацію та перемішування в середовищі без сироватки, яке м'яко зміщує клітини, не завдаючи їм шкоди.
Порівняння ультразвукового відшарування клітин з традиційними методами
Переваги | Ультразвукове відшарування | ферментативна відшарування | Хімічний загін |
---|---|---|---|
Життєздатність клітин | Високий | Середнє | Змінної |
Швидкість | Швидкий (хвилини) | Помірний (від хвилин до годин) | Змінна (від хвилин до годин) |
Збереження поверхневих маркерів | Відмінна | Можна переробити | Можна переробити |
Масштабованість | Високий | Середнє | Змінної |
Без залишків | Так | Ні (залишок ферменту) | Змінна (хімічний залишок) |
Вартість обладнання | Одноразові інвестиції, відсутність запатентованих одноразових матеріалів, відсутність повторних витрат | Повторні витрати | Повторні витрати |
Простота оптимізації | Легкий | Легкий | Змінної |
Нижче ви знайдете зразкову інструкцію з відшарування клітин за допомогою багатолункового пластинчастого сонікатора UIP400MTP.
Обладнання та матеріали для ультразвукового відшарування клітин
- Безконтактний сонник для багатолункових пластин UIP400MTP: Цей високопродуктивний ультразвукорежисер є ключовим інструментом. Пластинчастий ультразвуковий UIP400MTP підходить для будь-яких стандартних багатолункових і мікротитрових пластин, а також для чашок Петрі. Ультразвукові хвилі дають необхідну механічну енергію для відшарування клітини.
- Пластини для культивування клітин або чашка Петрі: Стандартні судини використовуються для вирощування прилиплих культур клітин.
- Живильне середовище: Рідке середовище, в якій вирощуються і підтримуються клітини.
- Стерильний PBS (фосфатно-буферизований фізіологічний розчин): Використовується для миття клітин перед відшаруванням.
- Колекційні туби: Для збору відокремленої клітинної суспензії.
Протокол ультразвукового відшарування за допомогою пластинчастого сонікатора UIP400MTP
- Підготовка
– Переконайтеся, що все обладнання чисте та стерильне, щоб запобігти забрудненню.
– Попередньо підігрійте живильне середовище та PBS до відповідної температури (зазвичай 37 °C). - Миття клітин
– Аспіруйте живильне середовище з колби або планшета для культивування клітин.
– Обережно промийте клітини стерильним PBS, щоб видалити залишки середовища та відокремлені клітини. - ультразвукова хвороба,
– Додайте в колбу або пластину невеликий об'єм PBS або свіжого живильного середовища, щоб покрити моношар клітини.
– Помістіть чашку Петрі або тарілку в UIP400MTP ультразвуковий апарат.
– Робіть ультразвук протягом певної тривалості, як правило, від кількох секунд до кількох хвилин, залежно від типу клітин і сили прикріплення. - Збір клітинної суспензії
– Після ультразвуку поспостерігайте за клітинами під мікроскопом, щоб переконатися в їх відшаруванні.
– Обережно введіть піпеткою клітинну суспензію, щоб зібрати відокремлені клітини.
– Перенесіть суспензію в трубку для збору. - Обробка після відшарування
– При необхідності центрифугуйте клітинну суспензію, щоб сконцентрувати клітини.
– Повторно суспендуйте клітини в свіжому живильному середовищі або буфері для подальшого застосування.
Нотатки: Параметри (такі як час та інтенсивність ультразвуку) повинні бути оптимізовані для різних типів клітин, щоб уникнути пошкодження клітин. Деякі типи делікатних клітин можуть бути більш чутливими до ультразвукового лікування, що вимагає ретельної оптимізації.
Практичне застосування ультразвукового відшарування клітин
Ультразвукове відшарування клітин використовується в різних дослідницьких і клінічних умовах:
- Проточна цитометрія: Підготовка одноклітинних суспензій для аналізу.
- Підрахунок клітин та аналіз життєздатності: Відокремлені клітини для точного підрахунку та оцінки життєздатності.
- Субкультурування: Перенесення клітин з одного судини для культивування в інший.
- Експерименти з молекулярної біології: Ізолюючі клітини для екстракції ДНК, РНК і білків.
Чому я повинен замінити зіскрібок клітин відшаруванням клітин на UIP400MTP мікропланшетний сонциатор?
Заміна зіскрібка клітин на відшарування клітин за допомогою UIP400MTP мікропланшетного ультразвукового апарату дає дослідникам кілька переваг. На відміну від ручного вишкрібання, точно контрольоване ультразвукове дослідження за допомогою UIP400MTP забезпечує послідовне та м'яке відшарування клітин, мінімізуючи механічні пошкодження та зберігаючи життєздатність клітин. Ця UIP400MTP забезпечує точний контроль параметрів ультразвукового аналізу, забезпечуючи рівномірне очищення на всіх свердловинах і усуваючи варіативність між зразками. Цей метод швидший, ефективніший і масштабований, що робить його ідеальним для додатків з високою пропускною здатністю, зберігаючи при цьому відтворюваність і цілісність чутливих клітинних культур. Порівняльне дослідження шукайте тут!

96-лунковий пластинчастий сонікатор UIP400MTP для ультразвукового дослідження мікротитру та багатолункових пластин

96-лунковий пластинчастий сонікатор UIP400MTP: рідина, що передає ультразвук, оточує всі лунки та забезпечує рівномірне ультразвукове дослідження кожного зразка
Поширені типи клітин для ультразвукового відшарування клітин
- Фібробласти:
Зазвичай використовується в тканинній інженерії та дослідженнях загоєння ран.
Прилиплі клітини, які потребують від'єднання для пасажу та експериментів. - Епітеліальні клітини:
Використовується у вивченні тканинних бар'єрів, дослідженні раку та тестуванні ліків.
Вимагають відстороненості для аналізу і субкультивування. - Ендотеліальні клітини:
Має важливе значення для судинних досліджень і вивчення ангіогенезу.
Адгезивні клітини, які потребують відшарування для аналізів in vitro. - Стовбурові клітини:
У тому числі мезенхімальні стовбурові клітини та індуковані плюрипотентні стовбурові клітини.
Потрібні щадні методи відшарування для збереження життєздатності та плюрипотентності. - Лінії ракових клітин:
Широко використовується в дослідженнях раку і розробці ліків.
Прилиплі клітини, які вимагають регулярного відшарування для проведення експериментальних маніпуляцій. - Гепатоцити:
Використовується у дослідженнях функції печінки та дослідженні метаболізму лікарських засобів.
Вимагають від'єднання для моделей in vitro та аналізів. - Кератиноцити:
Переважає тип клітин в епідермісі і зазвичай використовується в дослідженнях шкіри, дослідженнях загоєння ран і косметичних тестуваннях.
Як і інші адгезивні клітини, кератиноцити ростуть прикріпленими до поверхні культуральних колб або пластинок і повинні бути від'єднані для різних експериментальних процедур, включаючи пасування, аналіз і субкультивування. - Макрофаги:
Часто вимагають відокремлення при культивуванні in vitro.
Макрофаги - це адгезивні клітини, які зазвичай прикріплюються до поверхні культуральних колб або пластинок. Щоб зібрати їх для подальших застосувань, таких як аналіз, субкультивування або експерименти, їх потрібно відокремити від поверхні культури.
Література? Список літератури
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Факти, які варто знати
Що таке відшарування клітин?
Відшарування клітин – це процес відділення адгезивних клітин від поверхні їх судини для культивування, що дозволяє збирати їх і готувати до подальших експериментальних процедур або аналізу. Цього можна досягти за допомогою ферментативних, хімічних, механічних або ультразвукових методів.
Що таке дисоціація клітин?
Дисоціація клітин - це процес розщеплення клітинних агрегатів або тканин на окремі життєздатні клітини. Це досягається шляхом порушення позаклітинного матриксу і спайок клітина за допомогою ферментативних, механічних (наприклад, ультразвукового дослідження) або хімічних методів. Дисоціація клітин має важливе значення для різних застосувань, включаючи первинну культуру клітин, аналіз однієї клітини та приготування клітинних суспензій для експериментів і терапевтичних цілей.
У чому різниця між прилиплою культурою клітин і біоплівкою?
Прилипання до культури клітин означає ріст клітин, як правило, еукаріотичних, які прикріплюються до субстрату в контрольованому лабораторному середовищі, покладаючись на поживні речовини, що надходять через живильне середовище. На противагу цьому, біоплівка – це складне природне мікробне співтовариство, яке прилипає до поверхні та укладене в позаклітинний матрикс, з клітинами, які демонструють колективну поведінку, хімічні градієнти та підвищену стійкість до зовнішніх стресів. У той час як прилиплі клітинні культури є штучними і використовуються в дослідницьких цілях, біоплівки є динамічними екосистемами, знайденими в природних або інженерних середовищах.
Ультразвукова діагностика за допомогою UIP400MTP – це високоефективна методика без ферментів для від'єднання прилиплих клітин і видалення біоплівок. Дізнайтеся більше про переваги видалення біоплівки з мікропластин та чашок Петрі за допомогою багатолункового пластинчастого сонника UIP400MTP!
Які переваги ультразвукового відшарування клітин?
- Дбайливо впливає на клітини: Ультразвукова відшарування менш жорстка в порівнянні з ферментативними методами (наприклад, трипсинізацією) і механічним вишкрібанням, зберігаючи життєздатність клітин і поверхневі маркери.
- Швидкий та ефективний: Процес швидкий, часто займає всього кілька хвилин, і може ефективно відокремити клітини навіть від великих поверхонь культури.
- Масштабованість: Підходить як для невеликих лабораторних застосувань, так і для більших біотехнологічних процесів.
- Відсутність залишку ферментів: Усуває потребу в ферментах, знижуючи ризик зміни білків клітинної поверхні або введення забруднювачів.