Sonikasyon kullanarak Ters Faz Buharlaştırma Yöntemi ile Lipozomlar
Lipozomlar, biyouyumlulukları ve hem hidrofilik hem de hidrofobik ilaçları kapsülleme yetenekleri nedeniyle ilaç dağıtımında kullanılan çok yönlü nanotaşıyıcılardır. Ters fazlı buharlaştırma yöntemi (emülsifikasyon yöntemi veya çözücü buharlaştırma yöntemi olarak da bilinir), yüksek kapsülleme verimliliği sunan lipozom hazırlığı için öne çıkan bir tekniktir. Bu makale, prob tipi sonikasyon ile geliştirilmiş ters faz buharlaştırma yöntemi yoluyla lipozomların hazırlanmasına odaklanmakta ve ilaç dağıtım sistemlerindeki prosedürel adımları, faydaları ve potansiyel uygulamaları vurgulamaktadır.
Lipozomlar, hidrofilik ve hidrofobik bileşikleri kapsülleyebilen bir veya daha fazla lipid çift katmanından oluşan veziküler yapılardır. Eşsiz yapıları, onları hedefe yönelik ilaç dağıtımı için ideal kılar. Ters fazlı buharlaştırma yöntemi (diğer adıyla emülsifikasyon veya bir çözücü buharlaştırma yöntemi), lipozom hazırlığı için iyi bilinen bir tekniktir. Aşağıdaki paragraflarda, emülsifikasyonu, kapsülleme verimliliğini ve lipozomal boyut azaltmayı iyileştirdiği bilinen prob tipi sonikasyon kullanarak ters fazlı buharlaştırma yönteminin faydalarını tanıtıyoruz.

Prob tipi sonikatör UP400St lipozom hazırlığı için
Ters Faz Buharlaştırma Yöntemi ile Lipozom Hazırlama Metodolojisi
Sonikasyon kullanılarak ters buharlaştırma yöntemi ile lipozom oluşumu, lipitlerin kloroform ve metanolün (2: 1 v / v) organik bir çözücü karışımında çözülmesini içerir, bu da ters misellerin oluşumunu destekler. Daha sonra bu karışıma sulu bir tampon eklenir. Kombine çözelti, örneğin, yağda su mikroemülsiyonu oluşturmak için UP400ST gibi bir prob tipi sonikatör kullanılarak sonikleştirilir. Organik çözücü daha sonra döner bir buharlaştırıcı kullanılarak buharlaştırılır ve sonunda lipozomlar oluşturmak üzere çöken viskoz bir jel ile sonuçlanır. Mikroemülsiyon kabarcıklarının büyük sulu çekirdeği, hidrofilik moleküllerin sıkışmasını teşvik eder, bu da kontrollü salınım ve iyi bir geçirgenlik profili sergileyen lipozomal jellere yol açar. Son olarak, lipozomlar sonikatör kullanılarak tek tip bir boyuta küçültülür.
Protokol / Adım Adım Talimatlar:
- Lipitleri tartın ve çözün:
Toplam 40 mg L-α-fosfatidilkolin ve kolesterolü 4: 1 veya 7: 3'lük bir kütle oranında doğru bir şekilde tartın.
Tartılan lipitleri 10 mL'lik bir kloroform/metanol karışımı (4:1 v/v) içinde yuvarlak tabanlı bir şişede çözün. - Form Lipid Filmi:
Yuvarlak tabanlı şişeyi döner bir buharlaştırıcıya takın.
Şişeyi, şişe duvarlarında ince bir lipit film oluşana kadar vakum koşulları altında 40°C'de 8 x g'da döndürün. - Solvent dumanlarını çıkarın:
Şişeyi nitrojen gazı ile yıkayarak çözücü karışımının kalan dumanını boşaltın. - Lipid Filmi Yeniden Çözün:
Ters fazlı veziküller oluşturmak için lipid filmi 10 mL dietil eter içinde yeniden çözün. - Sulu faz hazırlayın:
Kapsülleme için aktif bileşen içeren 5 mL PBS tamponu (0.1 M, pH 7.4) ve organik faz (çözünmüş lipitli dietil eter) ile 20 mg Tween 80'i karıştırın. - Emülsiyonu Sonicate:
Emülsiyonu olmayan bir buz banyosuna yerleştirin.
Emülsiyonu, 26 kHz ve% 50 darbe modunda (0.5 döngü = 30 saniye AÇIK / 30 saniye KAPALI) ve 1 dakika boyunca% 50 genlikte prob tipi bir sonikatör UP200Ht kullanarak sonikleştirin. - Jel oluşturmak için buharlaşır:
Sonikasyonlu emülsiyonu döner buharlaştırıcıya geri koyun.
Bir jel elde edilene kadar 40°C'de atmosferik basınç altında buharlaştırın. - Form Lipozomları:
Jeli daha da buharlaştırın, yarı saydam bir sıvıya bölün, bu da lipozomların oluşumunu gösterir. - Son Lipozom Süspansiyonu:
Lipozom süspansiyonuna 5 mL daha PBS tamponu (0.1 M, pH 7.4) ekleyin.
Karışımı nazikçe girdaplayın.
Kalan dietil eter dumanını nitrojen gazı kullanarak boşaltın. - Depolama:
Son lipozom süspansiyonunu 4°C'de gerektiği kadar buzdolabında saklayın.
Bu talimatlar, ultrasonik homojenizasyon ile ters fazlı buharlaştırma yöntemini kullanarak lipozomların hazırlanması için adım adım süreci özetlemektedir, bu da yüksek dahili sulu yükleme ve aktif bileşenin verimli bir şekilde kapsüllenmesini sağlar.
Ters fazlı buharlaştırma yöntemi, özellikle prob tipi sonikasyon kullanılarak, özellikle yüksek iç sulu yüklemeyi hedeflerken, lipozomların hazırlanması için yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. Bu yöntem, lipozomlar içinde daha fazla miktarda sulu faz içerme kabiliyeti nedeniyle geleneksel ince film hidrasyon yöntemine göre avantajlıdır.

Endüstriyel sonikatör UIP2000hdT büyük ölçekli lipozom üretimi için
Lipozom oluşumu için prob tipi sonikasyonun avantajları
- Geliştirilmiş Homojenlik: Prob tipi sonikasyon, tutarlı enerji girişi sağlar, bu da lipozomların daha düzgün bir boyut dağılımı ile sonuçlanır.
- Geliştirilmiş Kapsülleme: Sonikasyon sırasındaki mekanik kuvvetler, özellikle hidrofilik bileşikler için ilaç kapsüllemesini arttırır.
- Ölçeklenebilirlik: Yöntemler kolayca ölçeklenebilir, bu da onları büyük ölçekli lipozom üretimi için uygun hale getirir.
Lipozomların İlaç Dağıtımındaki Uygulamaları
Prob tipi sonikasyon ile emülsifikasyon ve çözücü-buharlaştırma yöntemleri ile hazırlanan lipozomlar, aşağıdakiler de dahil olmak üzere çeşitli ilaç dağıtım uygulamaları için uygundur:
- Hedefe Yönelik İlaç Dağıtımı: Lipozomların spesifik ligandlarla işlevselleştirilmesi, belirli dokulara veya hücrelere hedefli dağıtıma izin verir.
- Kontrollü Yayın: Lipid çift katmanlı yapı, terapötik etkinliği artıran kontrollü ilaç salınımına izin verir.
- Çok yönlü -lük: Bu yöntemler, küçük moleküllerden proteinler ve nükleik asitler gibi daha büyük biyomoleküllere kadar çok çeşitli terapötik ajanları barındırır.
Ters fazlı buharlaştırma yöntemi, ince film hidrasyon yöntemine kıyasla daha yüksek iç sulu yüklemesi ile özellikle dikkat çekmektedir. Bu özellik, hidrofilik ilaçların veya diğer terapötik ajanların önemli ölçüde kapsüllenmesini gerektiren uygulamalar için faydalıdır.
Prob tipi sonikasyon kullanan ters fazlı buharlaştırma yöntemi, lipozom hazırlığı için sağlam ve verimli bir tekniktir. Daha yüksek dahili sulu yükleme elde etme yeteneği, onu hidrofilik maddelerin kapsüllenmesini en üst düzeye çıkarmanın çok önemli olduğu farmasötik uygulamalarda tercih edilen bir yöntem haline getirir. Çözücü buharlaşmasının dikkatli bir şekilde kontrol edilmesi ve sonikasyon kullanımı, bu yöntemin başarısının anahtarıdır ve çeşitli terapötik amaçlar için uygun yüksek kaliteli lipozomların üretilmesine yol açar.
Lipozom Üretiminiz İçin Doğru Sonikatörü Bulun
Hielscher Ultrasonics, verimli lipozom üretimi için geniş bir ürün yelpazesi sunar, bu da biyoaktif moleküllerin yüksek tuzak, verimli ve yüksek yükleme kapasitesi ile sonuçlanır.
Hielscher sonicators, burada açıklanan ters faz buharlaştırma tekniği, emülsifikasyon yöntemi ve ince film yöntemi gibi çeşitli lipozom hazırlama yolları için kullanabilirsiniz.
İnce film yöntemi ile ultrasonik lipozom hazırlama hakkında daha fazla bilgi edinin!
Ultrasonik olarak hazırlanmış lipozomları kapsülleme hakkında daha fazla bilgi edinin
- yüksek verim
- En son teknoloji
- güvenilirlik & sağlamlık
- Ayarlanabilir, hassas proses kontrolü
- toplu iş & Satır içi
- herhangi bir hacim için
- Akıllı Yazılım
- Akıllı özellikler (örn. programlanabilir, veri protokolü, uzaktan kumanda)
- Kullanımı kolay ve güvenli
- Az bakım gerektirir
- CIP (yerinde temizlik)
Tasarım, İmalat ve Danışmanlık – Almanya'da Üretilen Kalite
Hielscher ultrasonicators en yüksek kalite ve tasarım standartları için iyi bilinir. Sağlamlık ve kolay kullanım, ultrasonicators'ımızın endüstriyel tesislere sorunsuz bir şekilde entegre edilmesini sağlar. Zorlu koşullar ve zorlu ortamlar Hielscher ultrasonicators tarafından kolayca ele alınır.
Hielscher Ultrasonics, ISO sertifikalı bir şirkettir ve en son teknoloji ve kullanıcı dostu özelliklere sahip yüksek performanslı ultrasonicators'a özel önem vermektedir. Tabii ki, Hielscher ultrasonicators CE uyumludur ve UL, CSA ve RoHs gereksinimlerini karşılar.
Aşağıdaki tablo size ultrasonicators'ımızın yaklaşık işleme kapasitesinin bir göstergesini verir:
Numune Hacmi | Akış Oranı | Önerilen Cihaz |
---|---|---|
0,5 - 1,5 mL | n.a. | VialTweeter |
1 - 500mL | 10 - 200mL/min | UP100H |
10 - 2000mL | 20 - 400mL/min | UP200Ht, UP400St |
0,1 - 20L | 0,2 - 4L/min | UIP2000hdT |
10 - 100L | 2 - 10L/min | UIP4000hdT |
15 ila 150L | 3 ila 15L/dk | UIP6000hdT |
15 ila 150L | 3 ila 15L/dk | UIP6000hdT |
n.a. | 10 - 100L/min | UIP16000 |
n.a. | daha büyük | grubu UIP16000 |
Bizimle İletişime Geçin! / Bize Sor!
Literatür / Referanslar
- Marco Paini, Sean Ryan Daly, Bahar Aliakbarian, Ali Fathi, Elmira Arab Tehrany, Patrizia Perego, Fariba Dehghani, Peter Valtchev (2015): An efficient liposome based method for antioxidants encapsulation. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 136, 2015. 1067-1072.
- Yao, X., Bunt, C., Cornish, J., Quek, S.-Y. and Wen, J. (2014): Preparation, Optimization and Characterization of Bovine Lactoferrin-loaded Liposomes and Solid Lipid Particles Modified by Hydrophilic Polymers Using Factorial Design. Chemical Biology and Drug Design 83, 2014. 560-575.
- Seyedeh Parinaz Akhlaghi, Iris Renata Ribeiro, Ben J. Boyd, Watson Loh (2016): Impact of preparation method and variables on the internal structure, morphology, and presence of liposomes in phytantriol-Pluronic® F127 cubosomes. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 145, 2016. 845-853.
Bilmeye Değer Gerçekler
Lipozomlar nedir?
Lipozomlar, bileşikleri kapsüllemek için kullanılan bir lipid çift tabakasına sahip küresel veziküllerdir. Yakalanacak bileşiği içeren bir çözelti içinde hazırlanırlar. Proteinler gibi hidrofilik bileşikler için sulu bir çözelti kullanılırken, hidrofobik moleküller lipitlerle karıştırılmış organik çözücüler içindeki çözeltiler kullanılarak kapsüllenir. Bu çok yönlülük, lipozomları ilaç dağıtımı ve diğer biyomedikal uygulamalar için değerli kılar.
Lipozom Hazırlığı için Ters Faz Buharlaştırma Yöntemi Nedir?
Lipozom hazırlama için ters fazlı buharlaştırma yöntemi, lipitlerin bir kloroform/metanol karışımı içinde çözülmesini ve döner buharlaştırma yoluyla ince bir lipit filmi oluşturulmasını içerir. Bu film daha sonra ters fazlı veziküller oluşturmak için dietil eter içinde yeniden çözülür. Aktif bileşeni ve Tween 80'i içeren sulu bir faz, organik faz ile karıştırılarak bir yağ içinde su emülsiyonu oluşturulur. Emülsiyon, prob tipi bir sonikatör kullanılarak sonikleştirilir, ardından ek buharlaşma üzerine lipozomlar oluşturan bir jel üretmek için daha fazla döner buharlaşma yapılır. Son süspansiyon, PBS tamponu eklenerek ve artık çözücülerin nitrojen gazı ile uzaklaştırılmasıyla tamamlanır, bu da 4 ° C'de depolanan lipozomlarla sonuçlanır.
Sonikasyonun Lipozomlar Üzerindeki Etkisi Nedir?
Sonikasyon, homojen bir dispersiyon oluşumunu teşvik ederek lipit ve sulu fazları bozmak ve karıştırmak için ultrasonik dalgalar kullanarak lipozomları etkiler. Bu işlem, lipozomların boyutunu ve homojenliğini kontrol etmeye yardımcı olur ve aralıklı enerji patlamalarına izin vererek aşırı ısınmayı önler. Sonikasyonun neden olduğu kontrollü kavitasyon, lipozomlar içindeki aktif bileşenlerin verimli bir şekilde kapsüllenmesini sağlar.
Lipozomlarda Faz Geçişi Nedir?
Lipozomlardaki faz geçişi, lipidin fiziksel durumundaki sıcaklığa bağlı değişikliği ifade eder. Faz geçiş sıcaklığı, lipitlerin, hidrokarbon zincirlerinin tamamen uzatıldığı ve sıkı bir şekilde paketlendiği sıralı jel fazından, hidrokarbon zincirlerinin rastgele yönlendirildiği ve akışkan hale geldiği düzensiz sıvı kristal faza geçtiği spesifik sıcaklıktır. Bu geçiş, lipozom stabilitesini, geçirgenliğini ve kapsüllenmiş maddelerle etkileşimi etkiler.
Lipozom Hazırlamanın Ekstrüzyon Yöntemi Nedir?
Bazen, ince film hidrasyon yöntemi, ince film hidrasyon adımını bir ekstrüzyon adımı takip ettiğinden, ekstrüzyon yöntemi olarak da adlandırılır. Ekstrüzyon sırasında, homojen küçük lipozomlar elde etmek için lipozomlar polikarbonat membranlardan ekstrüde edilir. Ekstrüzyona alternatif olarak, lipozomlar genellikle sonikasyon ile küçültülür.
Lipozomların Sonikasyon Yöntemi Nedir?
Sonikasyon, çeşitli lipozom oluşum yöntemlerinde uygulanır. Sonikasyon, lipitlerin ve çözücülerin emülsifikasyonu, lipit film rehidrasyonu ve lipozom küçültme için uygulanır. Ters faz evaorasyon yöntemi için, lipitler sulu bir faz ile ultrasonik olarak emülsifiye edilir. İnce film yöntemi için, kurutulmuş bir lipit filmi, çok katmanlı bir vezikül süspansiyonu oluşturmak için bir sonikatör kullanılarak yeniden sulandırılır. Çoklu lipozom hazırlama teknikleri, oluşan lipozomların daha sonra küçültülmesi için sonikasyon kullanır. Burada, sonikasyon, çeşitli uygulamalar için uygun olan düzgün küçük ve kararlı lipozomlarla sonuçlanır.

Hielscher Ultrasonics, yüksek performanslı ultrasonik homojenizatörler üretmektedir. laboratuvar Hedef endüstriyel boyut.