การสกัดเบต้ากลูแคนจากเห็ดโดยใช้ ultrasonication

การสกัดเบต้ากลูแคนจากเห็ดเพื่อการทดสอบในห้องปฏิบัติการหรือการผลิตเกี่ยวข้องกับการรวมกันของการสับบดหรือบดเห็ดการสกัดด้วยอัลตราโซนิกและการตกตะกอนของเบต้ากลูแคน นี่คือโครงร่างที่เรียบง่ายของกระบวนการสกัดเบต้ากลูแคน พร้อมกับตัวอย่างปริมาตรและน้ําหนักสําหรับการทดลองในห้องปฏิบัติการ โปรดทราบว่าเงื่อนไขและการวัดเฉพาะอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับชนิดของเห็ดและความบริสุทธิ์ของเบต้ากลูแคนที่ต้องการ

วัสดุและอุปกรณ์

  • เห็ด (เช่น เห็ดสับหรือหั่นบาง ๆ 100 กรัม)
  • น้ํากลั่นเย็น (เช่น 500 มล.)
  • เครื่องปั่นหรือเครื่องบด
  • บีกเกอร์แก้วหรือขวดแก้ว
  • กระดาษกรองหรือการตั้งค่าการกรองสูญญากาศ
  • เครื่องหมุนเหวี่ยง (อุปกรณ์เสริม)
  • แอลกอฮอล์ (เช่น เอทานอล) สําหรับการตกตะกอน
  • ตู้เย็น
  • เตาอบแห้ง
การสกัดเบต้ากลูแคนจากเห็ดไลออนส์มาเน่

โปรโตคอลการสกัดเบต้ากลูแคน

  1. บดหรือบดเห็ด (เช่น Chaga หรือ Lion’ เห็ดแผงคอ) เป็นอนุภาคหยาบประมาณ 1 ถึง 3 มิลลิเมตร ตัวอย่างเช่นใช้อนุภาคเห็ดแห้ง 100 กรัม
  2. จากนั้นเพิ่มอนุภาคเห็ดลงในบีกเกอร์แก้วหรือขวด
  3. จากนั้นเติมน้ํากลั่น 500 มล. ลงในบีกเกอร์ที่มีอนุภาคเห็ดที่จะสกัด อัตราส่วนน้ําต่อเห็ดอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับชนิดของเห็ดและขนาดอนุภาคที่เฉพาะเจาะจง
  4. หลังจากที่คุณกวนสารละลายแล้ว ให้ผสมสารผสมโดยใช้โฮโมจีไนเซอร์ในห้องปฏิบัติการอัลตราโซนิก (เช่น UP400St ที่มีโซโนโทรด 22 มม. ที่แอมพลิจูด 100% หรือ UP200Ht พร้อมโซโนโทรด 14 มม. ที่แอมพลิจูด 100%) และรักษาอุณหภูมิให้ต่ํากว่า 90°C อุณหภูมิที่ต่ํากว่าช่วยรักษาสารประกอบที่ไวต่อความร้อนเช่นเบต้ากลูแคนในระหว่างการสกัด Sonicate ประมาณ 5 ถึง 10 นาทีเมื่อใช้ UP400St และ 10 ถึงนาทีเมื่อใช้ UP200Ht ตามลําดับ โปรดทราบว่าอุณหภูมิและเวลาในการสกัดอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับพลังงานอัลตราโซนิกที่ใช้ แน่นอนว่าปริมาณที่มากขึ้นจะต้องใช้เวลาในการแยกเสียงนานขึ้น
  5. กรองส่วนผสม sonicated ผ่านกระดาษกรองหรือใช้การตั้งค่าการกรองสูญญากาศเพื่อแยกของเหลว (ที่มีเบต้ากลูแคนที่สกัดแล้ว) ออกจากเศษเห็ดที่เป็นของแข็ง
  6. จากนั้นตกตะกอนเบต้ากลูแคนจากของเหลวโดยเติมแอลกอฮอล์ (เช่นเอทานอล) โดยทั่วไปคุณสามารถใช้แอลกอฮอล์ 2-3 ปริมาตรสําหรับการตกตะกอน
  7. หลังจากนั้นเก็บส่วนผสมไว้ในตู้เย็นเป็นเวลาหลายชั่วโมงเพื่อให้เบต้ากลูแคนตกตะกอน
  8. หลังจากการตกตะกอนคุณสามารถ decant ของเหลวอย่างระมัดระวังและรวบรวมตะกอนเบต้ากลูแคน
  9. สุดท้ายให้แห้งเบต้ากลูแคนในเตาอบที่อุณหภูมิต่ํา (เช่น 40-50 °C) จนกว่าแอลกอฮอล์ทั้งหมดจะถูกลบออกและคุณได้รับผงแห้ง
This video demonstrates the highly efficient extraction of lion's mane mushrooms using the Hielscher UP200Ht ultrasonic homogenizer.

Lion's Mane Mushroom Extraction using an Ultrasonic Homogenizer UP200Ht

ภาพขนาดย่อของวิดีโอ

เห็ดแสดงการเปลี่ยนแปลงในลักษณะของพวกเขา ดังนั้นกระบวนการสกัดเบต้ากลูแคนอาจแตกต่างกันไปตามปัจจัยต่างๆเช่นเห็ดชนิดเฉพาะสถานะของเห็ด (แห้งหรือสด) ขนาดอนุภาคและอุณหภูมิการสกัด เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพขั้นตอนการสกัดของคุณให้พิจารณาทดลองกับพารามิเตอร์ต่างๆรวมถึงการเปลี่ยนแปลงอัตราส่วนของแข็งต่อของเหลวการปรับอุณหภูมิการสํารวจตัวทําละลายต่างๆและการทดสอบระยะเวลา sonication ที่หลากหลายและการตั้งค่าแอมพลิจูด

ขอข้อมูล





การสกัดด้วยเอนไซม์ช่วยด้วยอัลตราโซนิกของเบต้ากลูแคน

การสกัดเอนไซม์ด้วยอัลตราโซนิกเป็นวิธีการที่ใช้ในการสกัดเบต้ากลูแคนจากเห็ดโดยใช้เอนไซม์และคลื่นอัลตราโซนิกร่วมกัน กระบวนการนี้ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพของการสกัดโดยการทําลายผนังเซลล์ของเห็ดและอํานวยความสะดวกในการปล่อยเบต้ากลูแคน

การขยายขนาดของการสกัดเบต้ากลูแคนจากเห็ด

เมื่อคุณสร้างโปรโตคอลการสกัดเบต้ากลูแคนที่ตรงตามความต้องการของคุณแล้วการขยายกระบวนการสกัดอาจเป็นความพยายามที่ตรงไปตรงมา

การขยายขนาดการสกัดแบทช์

หากคุณวางแผนที่จะขยายขนาดโดยใช้วิธีการสกัดแบบแบทช์เราขอแนะนําให้เพิ่มปริมาณแบทช์ในขณะที่รักษาอัตราส่วนของแข็งต่อของเหลวและพารามิเตอร์อื่น ๆ ทั้งหมดให้คงที่ หากคุณยังคงใช้ homogenizer อัลตราโซนิกเดียวกันให้แน่ใจว่าได้เพิ่มเวลา sonication ตามสัดส่วน สําหรับแบทช์ที่เกิน 1 ลิตรคุณอาจต้องการพิจารณาใช้เครื่องกวนช้าเพื่อรักษาสารแขวนลอยของอนุภาคและปรับปรุงความสม่ําเสมอของการสกัด ภาพด้านล่างแสดงการตั้งค่าการสกัดแบบแบทช์ขนาด 8 ลิตรโดยใช้เครื่องทําโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิก UP400St ร่วมกับเครื่องกวนในห้องปฏิบัติการ

การตั้งค่าการสกัดเห็ดด้วย homogenizer อัลตราโซนิก UP400sT (400W, 24kHz)

การตั้งค่าการสกัดเห็ดแบบแบทช์ 8L ด้วย UP400St Sonicator

การกรองสูญญากาศของสารสกัดเบต้ากลูแคนหลังจาก Sonication โดยใช้ UP200Ht Sonicator

การกรองสูญญากาศของสารสกัดเบต้ากลูแคนหลังจาก Sonication

การสกัดเห็ดแบบอินไลน์

สําหรับผู้ที่สนใจในการสกัดเบต้ากลูแคนจํานวนมากจากเห็ดอย่างต่อเนื่อง Hielscher Ultrasonics นําเสนอเครื่องปฏิกรณ์เซลล์ไหลที่ออกแบบมาสําหรับการสกัดวัสดุทางพฤกษศาสตร์ หากสิ่งนี้มีผลกับคุณเราขอแนะนําให้คุณติดต่อเราโดยตรงเพื่อขอข้อมูลเพิ่มเติม ทีมเทคนิคของเรายินดีที่จะช่วยเหลือในการพิจารณาการตั้งค่าที่เหมาะสมที่สุดสําหรับความต้องการเฉพาะของคุณ อย่างไรก็ตามการทําการทดลองระดับห้องปฏิบัติการที่กล่าวถึงก่อนหน้านี้กับสายพันธุ์เห็ดเฉพาะของคุณอาจมีค่ามากในการทําความเข้าใจข้อกําหนดของกระบวนการที่แม่นยํา ภาพด้านล่างแสดงเครื่องปฏิกรณ์เซลล์ไหลขนาดใหญ่ที่มีโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิก UIP4000hdT สําหรับการสกัดเบต้ากลูแคนที่สารละลายเห็ดและตัวทําละลายประมาณ 50 ถึง 200 ลิตรต่อชั่วโมง

เครื่องปฏิกรณ์เซลล์ไหลที่มี homogenizer อัลตราโซนิก UIP4000hdT สําหรับการสกัดเบต้ากลูแคนที่ 50 ถึง 200 ลิตรของสารละลายตัวทําละลายเห็ดต่อชั่วโมง

UIP4000hdT อัลตราโซนิก Homogenizer สําหรับ 50 ถึง 200L ของสารละลายเห็ด - ตัวทําละลายต่อชั่วโมง

ความเข้มข้นของเบต้ากลูแคนเชิงประจักษ์ของสายพันธุ์เห็ด

ด้านล่างนี้คุณจะพบรายการความเข้มข้นของเบต้ากลูแคนเชิงประจักษ์ที่สกัดจากเห็ดสายพันธุ์ต่างๆ

สายพันธุ์เห็ด เบต้ากลูแคน (% น้ําหนัก)
ปลวก fuliginosus R. Heim 1%
Boletus ยักษ์ใหญ่ R. Heim 3%
Russula densifolia Secr. อดีต Gillet 25%
Russula cyanoxantha (Schaeff.) Fr. 29%
Russula alboareolata Hongo 42%
Russula emetica (Schaeff.) Pers. 10%
Russula delica Fr. 38%
Pycnoporus cinnabarinus (Jacq.) พี. 35%
Amanita hemibapha (เบิร์ค. & บรูม) แซค. 5%
มุม Amanita princeps & บาส 9%
Amanita caesarea (Scop.) Pers. 4%
Heimiella retispora (แพท. & C.F. Baker) Boedijn 19%
Cortinarius claricolor var. turmalis (Fr.) ควอดร์ 13%
Termitomyces tylerianus Otieno 12%
Termitomyces microcarpus (เบิร์ค. & บรูม) R. Heim 8%
Termitomyces eurhizus (Berk.) R. Heim 7%
Polyporellus varius (Pers.) P. Karst. 2%
Pycnoporus coccineus (Fr.) Bondartsev & นักร้อง 45%
Lentinus squarrosulus Mont. 2%
Daedaleopsis confragosa (โบลตัน) J. Schröt 3%
Pycnoporus sanguineus (L.) Fr. 35%
Amanita hemibapha (เบิร์ค. & บรูม) แซค. 5%
Amanita virgineoides บาส 1%
Agaricus silvaticus Schaeff 3%
คลอโรฟิลลัมโมลิบดีส (G. Mey.) แมสซี 3%
เห็ดหลินจือ (Curtis) P. Karst. 33%
rugosum Amauroderma (บลูม) & T. Nees) ทอร์เรนด์ 4%
Suillus bovinus var. bovinus (Pers.) คุนตเซ 1%
Clitocybe suaveolens (Schumach.) P. Kumm. S 9%
Cleroderma verrucosum (กระทิง) Pers. 9%
Heimiella retispora (แพท. & ซี.เอฟ.เบเกอร์) 19%
Lentinula edodes (Berk.) เพ็กเลอร์ 34%
Pycnoporus cinnabarinus (Jacq.) พี. 35%

ความเข้มข้นของเบต้ากลูแคนของเห็ดป่า ที่มา: Boonyanuphap, Jaruntorn & หรรษาสวัสดิ์, ชนิดา. (2558). (2553). การกระจายเชิงพื้นที่ของเบต้ากลูแคนที่มีชุมชนเห็ดป่าในป่าแห้งกึ่งเขตร้อน, ประเทศไทย. ความหลากหลายของเชื้อรา 46. 29-42. 10.1007/ส 13225-010-0067-8.

สอบถามข้อมูลเพิ่มเติม

โปรดใช้แบบฟอร์มด้านล่างหากคุณต้องการขอข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันของอัลตราโซนิก เรายินดีที่จะเสนอระบบอัลตราโซนิกให้ตรงกับความต้องการของคุณ












การหาปริมาณความเข้มข้นของสารสกัดเบต้ากลูแคนของเห็ด

ความเข้มข้นของเบต้ากลูแคนหลังจากการสกัดสามารถหาปริมาณได้โดยใช้วิธีการต่าง ๆ ขึ้นอยู่กับประเภทของเบต้ากลูแคนและข้อกําหนดเฉพาะของการวิเคราะห์ วิธีการทั่วไปในการหาปริมาณความเข้มข้นของเบต้ากลูแคนมีการระบุไว้ด้านล่าง แน่นอนว่าการเลือกวิธีการขึ้นอยู่กับปัจจัยต่างๆเช่นความแม่นยําที่ต้องการและอุปกรณ์ที่มีอยู่

  1. วิธีกราวิเมตริก

    • หลักการ: วิธีนี้ขึ้นอยู่กับการตกตะกอนของเบต้ากลูแคนด้วยเอทานอลตามด้วยการอบแห้งและชั่งน้ําหนักตะกอน
    • ขั้นตอน: ตัวอย่างละลายในน้ําบําบัดด้วยเอทานอลเพื่อตกตะกอนเบต้ากลูแคนจากนั้นจึงเก็บตะกอนแห้งและชั่งน้ําหนัก
    • ข้อดี: ง่ายและใช้กันอย่างแพร่หลาย
    • ข้อ จํากัด : แม่นยําน้อยกว่าเมื่อเทียบกับวิธีการอื่น ๆ
  2. วิธีการวัดสี

    • หลักการ: วิธีการเหล่านี้เกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาสีกับรีเอเจนต์เฉพาะที่สร้างการเปลี่ยนสีตามสัดส่วนของความเข้มข้นของเบต้ากลูแคน
    • ตัวอย่าง:

      • วิธีกรดฟีนอลซัลฟิวริก: วิธีนี้เกี่ยวข้องกับการรักษาตัวอย่างด้วยกรดซัลฟิวริกเข้มข้นและฟีนอลซึ่งจะเปลี่ยนสารละลายเป็นสีส้ม ความเข้มของสีเป็นสัดส่วนกับความเข้มข้นของเบต้ากลูแคน
      • วิธี Anthrone: รีเอเจนต์ Anthrone ทําปฏิกิริยากับเบต้ากลูแคนเพื่อสร้างสีฟ้าเขียวและวัดความเข้มของสี
    • ข้อดี: มีความละเอียดอ่อนและเหมาะสําหรับการวิเคราะห์ปริมาณงานสูง
    • ข้อ จํากัด : การรบกวนจากสารประกอบอื่น ๆ และความต้องการรีเอเจนต์เฉพาะ
  3. เอนไซม์ทดสอบ

    • หลักการ: การทดสอบเอนไซม์ใช้เอนไซม์เช่น β-glucanase เพื่อสลายเบต้ากลูแคนเป็นน้ําตาลที่ง่ายกว่าและน้ําตาลที่ปล่อยออกมาจะถูกวัดปริมาณ
    • ข้อดี: มีความเฉพาะเจาะจงและแม่นยําสูง
    • ข้อ จํากัด : ต้องใช้อุปกรณ์พิเศษและรีเอเจนต์
  4. โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC)

    • หลักการ: HPLC แยกและหาปริมาณสารประกอบตามปฏิสัมพันธ์กับคอลัมน์โครมาโตกราฟี
    • ขั้นตอน: เบต้ากลูแคนจะถูกไฮโดรไลซ์เป็นโมโนแซคคาไรด์และน้ําตาลที่ได้จะถูกแยกและวัดปริมาณโดย HPLC
    • ข้อดี: มีความแม่นยําสูงและเหมาะสําหรับตัวอย่างที่ซับซ้อน
    • ข้อ จํากัด : ต้องใช้อุปกรณ์พิเศษและความเชี่ยวชาญ
  5. immunoassays เฉพาะ

    • หลักการ: Immunoassays ใช้แอนติบอดีที่จําเพาะต่อเบต้ากลูแคนเพื่อวัดความเข้มข้น
    • ตัวอย่าง:

      • ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay): ในวิธีนี้แอนติบอดีที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์จะสร้างการเปลี่ยนสีเมื่อจับกับเบต้ากลูแคน
      • การทดสอบการไหลด้านข้าง: นี่คือการทดสอบอย่างรวดเร็วที่ให้ผลลัพธ์ที่มองเห็นได้บนแถบทดสอบ
    • ข้อดี: ความจําเพาะและความไวสูง
    • ข้อ จํากัด : ต้องใช้แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงและอาจมีค่าใช้จ่ายสูงกว่า

เรายินดีที่จะหารือเกี่ยวกับกระบวนการของคุณ

มาติดต่อกันเถอะ