EPA3550 คู่มือการสกัดอัลตราโซนิก
การสกัดอัลตราโซนิก เป็นวิธีการสกัดที่เป็นมิตรต่อสิ่งแวดล้อม ซึ่งสามารถนําไปใช้กับตัวอย่างในห้องปฏิบัติการขนาดเล็ก เช่นเดียวกับการสกัดสารประกอบที่มีคุณค่าในระดับการผลิตเชิงพาณิชย์ สํานักงานคุ้มครองสิ่งแวดล้อมแห่งสหรัฐอเมริกา (EPA) แนะนําวิธีการทดสอบทางเคมีวิเคราะห์และลักษณะเฉพาะที่หลากหลายการสุ่มตัวอย่างและการตรวจสอบสิ่งแวดล้อมและการประกันคุณภาพเพื่อสนับสนุนพระราชบัญญัติการอนุรักษ์และฟื้นฟูทรัพยากร (RCRA) สําหรับการสกัดด้วยอัลตราโซนิกช่วย EPA ได้ออกคําแนะนําต่อไปนี้:
วิธี 3550C – การสกัดอัลตราโซนิก
1. ขอบเขตและการใช้งาน
นอกจากนี้ วิธีการ SW-846 ยกเว้นการใช้วิธีการที่จําเป็นสําหรับการวิเคราะห์พารามิเตอร์ที่กําหนดวิธีการ มีจุดประสงค์เพื่อเป็นวิธีการนําทางซึ่งมีข้อมูลทั่วไปเกี่ยวกับวิธีการดําเนินการตามขั้นตอนหรือเทคนิคการวิเคราะห์ ซึ่งห้องปฏิบัติการสามารถใช้เป็นจุดเริ่มต้นพื้นฐานสําหรับการสร้างขั้นตอนการปฏิบัติงานมาตรฐาน (SOP) โดยละเอียดของตนเอง ข้อมูลประสิทธิภาพที่รวมอยู่ในวิธีนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อเป็นแนวทางเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์และต้องไม่ใช้เป็นเกณฑ์การยอมรับ QC แบบสัมบูรณ์เพื่อวัตถุประสงค์ในการรับรองห้องปฏิบัติการ
1.1 วิธีนี้อธิบายขั้นตอนการสกัดสารประกอบอินทรีย์ที่ไม่ระเหยและกึ่งระเหยจากของแข็ง เช่น ดิน กากตะกอน และของเสีย กระบวนการอัลตราโซนิกช่วยให้มั่นใจได้ถึงการสัมผัสอย่างใกล้ชิดของเมทริกซ์ตัวอย่างกับตัวทําละลายสกัด
1.2 วิธีนี้แบ่งออกเป็นสองขั้นตอนตามความเข้มข้นที่คาดไว้ของสารประกอบอินทรีย์ ขั้นตอนความเข้มข้นต่ํา (Sec. 11.3) มีไว้สําหรับส่วนประกอบอินทรีย์แต่ละชนิดที่คาดว่าจะน้อยกว่าหรือเท่ากับ 20 มก./กก. และใช้ขนาดตัวอย่างที่ใหญ่ขึ้นและการสกัดแบบอนุกรมสามครั้ง (ความเข้มข้นที่ต่ํากว่าจะสกัดได้ยากกว่า) ขั้นตอนความเข้มข้นปานกลาง/สูง (ข้อ 11.4) มีไว้สําหรับส่วนประกอบอินทรีย์แต่ละชนิดที่คาดว่าจะมากกว่า 20 มก./กก. และใช้ตัวอย่างที่เล็กกว่าและการสกัดเพียงครั้งเดียว
1.3 ขอแนะนําอย่างยิ่งให้สารสกัดอยู่ภายใต้การทําความสะอาดบางรูปแบบ (เช่น ใช้วิธีการจากซีรีส์ 3600) ก่อนการวิเคราะห์
1.4 เป็นสิ่งสําคัญที่จะต้องปฏิบัติตามวิธีการ (รวมถึงคําแนะนําของผู้ผลิต) อย่างชัดเจนเพื่อให้ได้ประสิทธิภาพการสกัดสูงสุด ดู Sec. 11.0 สําหรับการอภิปรายเกี่ยวกับประเด็นสําคัญของขั้นตอนการสกัด ศึกษาคําแนะนําของผู้ผลิตเกี่ยวกับการตั้งค่าการทํางานเฉพาะ
1.5 วิธีนี้อธิบายระบบตัวทําละลายการสกัดอย่างน้อยสามระบบที่อาจใช้กับสารวิเคราะห์กลุ่มต่างๆ (ดู Sec. 7.4) อาจใช้ระบบตัวทําละลายอื่น ๆ โดยมีเงื่อนไขว่าสามารถแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพที่เพียงพอสําหรับสารวิเคราะห์ที่น่าสนใจ การเลือกตัวทําละลายสกัดจะขึ้นอยู่กับสารวิเคราะห์ที่สนใจ และไม่มีตัวทําละลายตัวเดียวที่ใช้ได้กับกลุ่มสารวิเคราะห์ทั้งหมด อันเป็นผลมาจากความกังวลเกี่ยวกับประสิทธิภาพของการสกัดด้วยอัลตราโซนิกโดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ความเข้มข้นใกล้หรือต่ํากว่าประมาณ 10 ไมโครกรัม / กก. จึงมีความจําเป็นที่นักวิเคราะห์จะต้องแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพของระบบตัวทําละลายเฉพาะและเงื่อนไขการทํางานสําหรับสารวิเคราะห์ที่น่าสนใจและความเข้มข้นที่น่าสนใจ การสาธิตนี้ใช้กับระบบตัวทําละลายใด ๆ ที่ใช้ รวมถึงระบบที่ระบุไว้ในวิธีนี้โดยเฉพาะ อย่างน้อยที่สุด การสาธิตดังกล่าวจะครอบคลุมการสาธิตความเชี่ยวชาญเบื้องต้นที่อธิบายไว้ในวิธี 3500 โดยใช้เมทริกซ์อ้างอิงที่สะอาด วิธีการ 8000 อธิบายขั้นตอนที่อาจใช้เพื่อพัฒนาเกณฑ์ประสิทธิภาพสําหรับการสาธิตดังกล่าว ตลอดจนการแหลมเมทริกซ์และผลตัวอย่างการควบคุมในห้องปฏิบัติการ
1.6 EPA ตั้งข้อสังเกตว่ามีข้อมูลที่เผยแพร่อย่างจํากัดเกี่ยวกับประสิทธิภาพของการสกัดอัลตราโซนิกเกี่ยวกับสารกําจัดศัตรูพืชออร์กาโนฟอสฟอรัสที่ความเข้มข้นส่วนต่อพันล้าน (ppb) ต่ําและต่ํากว่า ด้วยเหตุนี้ การใช้วิธีนี้สําหรับสารประกอบเหล่านี้โดยเฉพาะควรได้รับการสนับสนุนจากข้อมูลประสิทธิภาพ เช่น ที่กล่าวถึงข้างต้นและในวิธีที่ 3500
1.7 ก่อนใช้วิธีนี้ นักวิเคราะห์ควรปรึกษาวิธีการพื้นฐานสําหรับขั้นตอนแต่ละประเภทที่อาจใช้ในการวิเคราะห์โดยรวม (เช่น วิธีการ 3500, 3600, 5000 และ 8000) สําหรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับขั้นตอนการควบคุมคุณภาพ การพัฒนาเกณฑ์การยอมรับ QC การคํานวณ และคําแนะนําทั่วไป นักวิเคราะห์ควรศึกษาข้อความปฏิเสธความรับผิดชอบที่ด้านหน้าของคู่มือและข้อมูลในบทที่สองสําหรับคําแนะนําเกี่ยวกับความยืดหยุ่นที่ตั้งใจไว้ในการเลือกวิธีการ อุปกรณ์ วัสดุ รีเอเจนต์ และวัสดุสิ้นเปลือง และความรับผิดชอบของนักวิเคราะห์ในการแสดงให้เห็นว่าเทคนิคที่ใช้นั้นเหมาะสมกับสารวิเคราะห์ที่น่าสนใจในเมทริกซ์ที่น่าสนใจ และในระดับที่น่ากังวล
นอกจากนี้นักวิเคราะห์และผู้ใช้ข้อมูลจะได้รับคําแนะนําว่าการใช้วิธีการ SW-846 ไม่จําเป็นเพื่อตอบสนองต่อข้อกําหนดการทดสอบของรัฐบาลกลาง ข้อมูลที่มีอยู่ในวิธีนี้จัดทําโดย EPA เพื่อเป็นแนวทางที่จะใช้โดยนักวิเคราะห์และชุมชนที่ได้รับการควบคุมในการตัดสินที่จําเป็นเพื่อสร้างผลลัพธ์ที่ตรงตามวัตถุประสงค์ด้านคุณภาพของข้อมูลสําหรับการใช้งานที่ต้องการ
1.8 การใช้วิธีนี้ถูกจํากัดให้ใช้โดยหรืออยู่ภายใต้การดูแลของนักวิเคราะห์ที่มีประสบการณ์และผ่านการฝึกอบรมอย่างเหมาะสม นักวิเคราะห์แต่ละคนต้องแสดงให้เห็นถึงความสามารถในการสร้างผลลัพธ์ที่ยอมรับได้ด้วยวิธีนี้ การสาธิตดังกล่าวมีความเฉพาะเจาะจงสําหรับสารวิเคราะห์ที่น่าสนใจและระบบตัวทําละลายที่ใช้ ตลอดจนขั้นตอนสําหรับตัวอย่างที่มีความเข้มข้นต่ําและปานกลาง/สูง
ไวอัลทวีตเตอร์ สําหรับการเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิก
2. สรุปวิธีการ
2.1 ขั้นตอนความเข้มข้นต่ํา — ตัวอย่างผสมกับโซเดียมซัลเฟตปราศจากน้ําเพื่อสร้างผงที่ไหลได้อย่างอิสระ ส่วนผสมจะถูกสกัดด้วยตัวทําละลายสามครั้งโดยใช้การสกัดด้วยอัลตราโซนิก สารสกัดจะถูกแยกออกจากตัวอย่างโดยการกรองสุญญากาศหรือการหมุนเหวี่ยง สารสกัดพร้อมสําหรับความเข้มข้นขั้นสุดท้าย การทําความสะอาด และ/หรือการวิเคราะห์
2.2 ขั้นตอนความเข้มข้นปานกลาง / สูง — ตัวอย่างผสมกับโซเดียมซัลเฟตปราศจากน้ําเพื่อสร้างผงที่ไหลได้อย่างอิสระ สิ่งนี้ถูกสกัดด้วยตัวทําละลายครั้งเดียวโดยใช้การสกัดด้วยอัลตราโซนิก ส่วนหนึ่งของสารสกัดจะถูกรวบรวมเพื่อทําความสะอาดและ/หรือวิเคราะห์
3. คําจํากัดความ
อ้างถึงบทที่หนึ่งและคําแนะนําของผู้ผลิตสําหรับคําจํากัดความที่อาจเกี่ยวข้องกับวิธีนี้
4. การรบกวน
4.1 ตัวทําละลาย รีเอเจนต์ เครื่องแก้ว และฮาร์ดแวร์การประมวลผลตัวอย่างอื่นๆ อาจทําให้เกิดสิ่งประดิษฐ์และ/หรือการรบกวนในการวิเคราะห์ตัวอย่าง วัสดุทั้งหมดเหล่านี้ต้องได้รับการพิสูจน์ให้เห็นว่าปราศจากการรบกวนภายใต้เงื่อนไขของการวิเคราะห์โดยการวิเคราะห์ช่องว่างของวิธีการ
การเลือกรีเอเจนต์และการทําให้บริสุทธิ์ของตัวทําละลายโดยการกลั่นในระบบแก้วทั้งหมดอาจจําเป็น อ้างถึงแต่ละวิธีที่จะใช้สําหรับคําแนะนําเฉพาะเกี่ยวกับขั้นตอนการควบคุมคุณภาพ และบทที่สี่สําหรับคําแนะนําทั่วไปเกี่ยวกับการทําความสะอาดเครื่องแก้ว
4.2 การรบกวนมักจะเฉพาะเจาะจงกับสารวิเคราะห์ที่น่าสนใจ ดังนั้น โปรดดูวิธีที่ 3500 และวิธีการกําหนดที่เหมาะสมสําหรับคําแนะนําเฉพาะเกี่ยวกับการรบกวนการสกัด
5. ความปลอดภัย
วิธีนี้ไม่ได้แก้ไขปัญหาด้านความปลอดภัยทั้งหมดที่เกี่ยวข้องกับการใช้งาน ห้องปฏิบัติการมีหน้าที่รับผิดชอบในการรักษาสภาพแวดล้อมการทํางานที่ปลอดภัยและไฟล์การรับรู้ในปัจจุบันของข้อบังคับของ OSHA เกี่ยวกับการจัดการสารเคมีที่ระบุไว้ในวิธีการนี้อย่างปลอดภัย ไฟล์อ้างอิงของเอกสารข้อมูลความปลอดภัยของวัสดุ (MSDS) ควรมีให้สําหรับบุคลากรทุกคนที่เกี่ยวข้องกับการวิเคราะห์เหล่านี้
6. อุปกรณ์และวัสดุสิ้นเปลือง
การกล่าวถึงชื่อทางการค้าหรือผลิตภัณฑ์เชิงพาณิชย์ในคู่มือนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อเป็นตัวอย่างเท่านั้น และไม่ถือเป็นการรับรองของ EPA หรือคําแนะนําเฉพาะสําหรับการใช้งาน ผลิตภัณฑ์และการตั้งค่าเครื่องมือที่อ้างถึงในวิธีการ SW-846 แสดงถึงผลิตภัณฑ์และการตั้งค่าที่ใช้ในระหว่างการพัฒนาวิธีการหรือประเมินโดยหน่วยงานในภายหลัง เครื่องแก้ว รีเอเจนต์ วัสดุสิ้นเปลือง อุปกรณ์ และการตั้งค่านอกเหนือจากที่ระบุไว้ในคู่มือนี้อาจใช้ได้หากมีการสาธิตและจัดทําเอกสารประสิทธิภาพของวิธีการที่เหมาะสมกับการใช้งานที่ต้องการ
ส่วนนี้ไม่ได้แสดงรายการเครื่องแก้วในห้องปฏิบัติการทั่วไป (เช่น บีกเกอร์และขวด)
6.2 การเตรียมอัลตราโซนิก — ต้องใช้อุปกรณ์ประเภทแตรที่มีปลายไทเทเนียมหรืออุปกรณ์ที่จะให้ประสิทธิภาพที่เหมาะสม (เช่น UP200 ฮิต หรือ UP200 เซนต์)
6.2.1 เครื่องรบกวนอัลตราโซนิก — ตัวก่อกวนต้องมีกําลังไฟขั้นต่ํา tage 300 วัตต์พร้อมความสามารถในการเต้นเป็นจังหวะ แนะนําให้ใช้อุปกรณ์ที่ออกแบบมาเพื่อลดเสียงโพรงอากาศ ปฏิบัติตามคําแนะนําของผู้ผลิตในการเตรียมตัวก่อกวนสําหรับการสกัดตัวอย่างที่มีความเข้มข้นต่ําและปานกลาง/สูง (เช่น ยูพี 400 เอส)
6.2.2 ใช้แตรขนาด 3/4 นิ้วสําหรับขั้นตอนวิธีการที่มีความเข้มข้นต่ํา และไมโครทิปเรียวขนาด 1/8 นิ้วที่ติดอยู่กับแตรขนาด 1/2 นิ้วสําหรับขั้นตอนวิธีการที่มีความเข้มข้นปานกลาง/สูง
6.3 กล่องป้องกันเสียง – เพื่อหลีกเลี่ยงความเสียหายต่อการได้ยิน แนะนําให้ใช้อุปกรณ์ป้องกันเสียง (เช่น กล่องป้องกันเสียง SPB-L) ด้วยเหตุนี้เสียงโพรงอากาศของกระบวนการ sonication จึงสามารถลดลงได้อย่างมาก
อุปกรณ์เพิ่มเติม
6.4.1 เตาอบแห้ง — สามารถรักษาอุณหภูมิได้ 105 องศาเซลเซียส
6.4.2 เครื่องดูดความชื้น
6.4.3 เบ้าหลอม — พอร์ซเลนหรืออลูมิเนียมแบบใช้แล้วทิ้ง
6.5 ปิเปตปาสเตอร์ — 1 มล. แก้ว แบบใช้แล้วทิ้ง
6.7 เครื่องกรองสูญญากาศหรือแรงดัน
6.7.1 ช่องทาง Buchner
6.7.2 กระดาษกรอง
6.8 อุปกรณ์ Kuderna-Danish (KD)
6.8.1 หลอดหัวฉีด — 10 มล. สําเร็จการศึกษา จุกแก้วบดใช้เพื่อป้องกันการระเหยของสารสกัด
6.8.2 ขวดระเหย — 500 มล. ติดขวดเข้ากับท่อหัวฉีดด้วยสปริง clamp หรือเทียบเท่า
6.8.3 คอลัมน์ Snyder — มาโครสามลูก
6.8.4 คอลัมน์สไนเดอร์ — ไมโครสองลูก
6.8.5 สปริง — 1/2 นิ้ว
6.9 ระบบนําไอตัวทําละลายกลับมาใช้ใหม่
หมายเหตุ: แนะนําให้ใช้เครื่องแก้วนี้เพื่อวัตถุประสงค์ในการนําตัวทําละลายกลับมาใช้ใหม่ในระหว่างขั้นตอนความเข้มข้นที่ต้องใช้เครื่องคั้นเหยียดแบบ Kuderna-Danish การรวมอุปกรณ์นี้อาจจําเป็นตามข้อบังคับของรัฐบาลกลาง รัฐ หรือเทศบาลท้องถิ่นที่ควบคุมการปล่อยสารอินทรีย์ระเหยง่ายในอากาศ EPA แนะนําให้รวมระบบการถมทะเลประเภทนี้เป็นวิธีการใช้โปรแกรมลดการปล่อยมลพิษ การกู้คืนตัวทําละลายเป็นวิธีที่สอดคล้องกับการลดของเสียและความคิดริเริ่มในการป้องกันมลพิษ
6.10 ชิปเดือด — สกัดด้วยตัวทําละลายประมาณ 10/40 ตาข่าย (ซิลิกอนคาร์ไบด์หรือเทียบเท่า)
6.11 อ่างน้ํา — อุ่นด้วยฝาครอบวงแหวนศูนย์กลางสามารถควบคุมอุณหภูมิได้ถึง ± 5 องศาเซลเซียส ควรใช้อ่างอาบน้ําในเครื่องดูดควัน
6.12 สมดุล — โหลดด้านบนสามารถชั่งน้ําหนักได้ถึง 0.01 กรัมที่ใกล้ที่สุด
6.13 ขวด — 2 มล. สําหรับเครื่องเก็บตัวอย่างอัตโนมัติ GC พร้อมกับฝาเกลียวหรือท็อปจีบที่บุด้วยโพลีเตตระฟลูออโรเอทิลีน (PTFE)
6.14 ขวดแก้วประกาย — 20 มล. พร้อมฝาเกลียว PTFE
6.15 ไม้พาย — สแตนเลสหรือ PTFE
6.16 คอลัมน์อบแห้ง — คอลัมน์โครมาโตกราฟีแก้วบอโรซิลิเกต ID 20 มม. พร้อมใยแก้วที่ด้านล่าง
หมายเหตุ: คอลัมน์ที่มีแผ่นแก้วฟริตต์นั้นยากต่อการขจัดสิ่งปนเปื้อนหลังจากใช้เพื่อทําให้สารสกัดที่มีการปนเปื้อนสูงแห้ง สามารถซื้อคอลัมน์ที่ไม่มีฟริตได้
ใช้ใยแก้วแผ่นเล็ก ๆ เพื่อเก็บสารดูดซับ ล้างแผ่นใยแก้วด้วยอะซิโตน 50 มล. ตามด้วยตัวทําละลายชะ 50 มล. ก่อนบรรจุคอลัมน์ด้วยสารดูดซับ
6.17 อุปกรณ์ระเหยไนโตรเจน (อุปกรณ์เสริม) — N-Evap 12 หรือ 24 ตําแหน่ง (Organomation Model 112 หรือเทียบเท่า)
7. รีเอเจนต์และมาตรฐาน
7.2 น้ํารีเอเจนต์ที่ปราศจากอินทรีย์ การอ้างอิงถึงน้ําทั้งหมดในวิธีนี้หมายถึงน้ํารีเอเจนต์ที่ปราศจากอินทรีย์ ตามที่กําหนดไว้ในบทที่หนึ่ง
7.3 โซเดียมซัลเฟต (เม็ดปราศจากน้ํา), Na2SO4 ทําให้บริสุทธิ์โดยให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 400 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมงในถาดตื้น หรือทําความสะอาดโซเดียมซัลเฟตด้วยเมทิลีนคลอไรด์ล่วงหน้า หากโซเดียมซัลเฟตได้รับการทําความสะอาดล่วงหน้าด้วยเมทิลีนคลอไรด์ควรวิเคราะห์วิธีการว่างเปล่าซึ่งแสดงให้เห็นว่าไม่มีการรบกวนจากโซเดียมซัลเฟต
7.4 ตัวทําละลายสกัด
ควรสกัดตัวอย่างโดยใช้ระบบตัวทําละลายที่ให้การกู้คืนสารวิเคราะห์ที่น่าสนใจจากเมทริกซ์ตัวอย่างได้อย่างเหมาะสมและทําซ้ําได้ที่ความเข้มข้นที่น่าสนใจ การเลือกตัวทําละลายสกัดจะขึ้นอยู่กับสารวิเคราะห์ที่สนใจ และไม่มีตัวทําละลายตัวเดียวที่ใช้ได้กับกลุ่มสารวิเคราะห์ทั้งหมด ไม่ว่าจะใช้ระบบตัวทําละลายใดก็ตาม รวมถึงระบบที่ระบุไว้ในวิธีนี้โดยเฉพาะ นักวิเคราะห์จะต้องแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพที่เพียงพอสําหรับสารวิเคราะห์ที่น่าสนใจในระดับที่น่าสนใจ อย่างน้อยที่สุด การสาธิตดังกล่าวจะครอบคลุมการสาธิตความเชี่ยวชาญเบื้องต้นที่อธิบายไว้ในวิธี 3500 โดยใช้เมทริกซ์อ้างอิงที่สะอาด วิธีการ 8000 อธิบายขั้นตอนที่อาจใช้เพื่อพัฒนาเกณฑ์ประสิทธิภาพสําหรับการสาธิตดังกล่าว ตลอดจนการแหลมเมทริกซ์และผลตัวอย่างการควบคุมในห้องปฏิบัติการ
ระบบตัวทําละลายหลายระบบที่อธิบายไว้ด้านล่างรวมถึงการรวมกันของตัวทําละลายที่ผสมน้ําได้ เช่น อะซิโตน และตัวทําละลายที่ผสมกันไม่ได้ เช่น เมทิลีนคลอไรด์หรือเฮกเซน จุดประสงค์ของตัวทําละลายที่ผสมน้ําได้คือเพื่ออํานวยความสะดวกในการสกัดของแข็งเปียกโดยปล่อยให้ตัวทําละลายผสมแทรกซึมเข้าไปในชั้นน้ําของพื้นผิวของอนุภาคของแข็ง ตัวทําละลายที่ผสมน้ําไม่ได้จะสกัดสารประกอบอินทรีย์ที่มีขั้วใกล้เคียงกัน ดังนั้นตัวทําละลายที่ไม่มีขั้วเช่นเฮกเซนจึงมักใช้สําหรับสารวิเคราะห์ที่ไม่มีขั้วเช่น PCBs ในขณะที่ตัวทําละลายที่มีขั้วเช่นเมทิลีนคลอไรด์อาจใช้สําหรับสารวิเคราะห์ที่มีขั้ว ขั้วของอะซิโตนอาจช่วยสกัดสารวิเคราะห์ขั้วในระบบตัวทําละลายผสม
ตารางที่ 1 แสดงตัวอย่างข้อมูลการกู้คืนสําหรับสารประกอบอินทรีย์กึ่งระเหยบางที่เลือกซึ่งสกัดจาก NIST SRM โดยใช้ระบบตัวทําละลายการสกัดต่างๆ ส่วนต่อไปนี้ให้คําแนะนําเกี่ยวกับการเลือกตัวทําละลายสําหรับสารวิเคราะห์ประเภทต่างๆ
ตัวทําละลายทั้งหมดควรมีคุณภาพสารกําจัดศัตรูพืชหรือเทียบเท่า ตัวทําละลายอาจถูกขจัดแก๊สก่อนใช้งาน
7.4.1 สารอินทรีย์กึ่งระเหยอาจสกัดด้วยอะซิโตน/เฮกเซน (1:1, v/v CH3COCH3/C6H14) หรืออะซิโตน/เมทิลีนคลอไรด์ (1:1, v/vCH3COCH3/CH2Cl2)
7.4.2 สารกําจัดศัตรูพืชออร์กาโนคลอรีนอาจสกัดด้วยอะซิโตน/เฮกเซน (1:1, v/v CH3COCH3/C6H14) หรืออะซิโตน/เมทิลีนคลอไรด์ (1:1, v/vCH3COCH3/CH2Cl2)
7.4.3 PCB อาจสกัดด้วยอะซิโตน/เฮกเซน (1:1, v/v CH3COCH3/C6H14) หรืออะซิโตน/เมทิลีนคลอไรด์ (1:1, v/vCH3COCH3/CH2Cl2) หรือเฮกเซน (C6H14)
7.4.4 อาจใช้ระบบตัวทําละลายอื่น ๆ โดยมีเงื่อนไขว่านักวิเคราะห์สามารถแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพที่เพียงพอสําหรับสารวิเคราะห์ที่น่าสนใจที่ความเข้มข้นที่น่าสนใจในเมทริกซ์ตัวอย่าง (ดูวิธีที่ 3500)
7.5 แลกเปลี่ยนตัวทําละลาย — ด้วยการใช้วิธีการกําหนดบางอย่างตัวทําละลายการสกัดจะต้องถูกแลกเปลี่ยนเป็นตัวทําละลายที่เข้ากันได้กับเครื่องมือที่ใช้ในวิธีการกําหนดนั้น อ้างถึงวิธีการกําหนดที่จะใช้ในการเลือกตัวทําละลายแลกเปลี่ยนที่เหมาะสม ตัวทําละลายทั้งหมดต้องมีคุณภาพสารกําจัดศัตรูพืชหรือเทียบเท่า ตัวอย่างของตัวทําละลายแลกเปลี่ยนมีดังต่อไปนี้
7.5.1 เฮกเซน C6H14
7.5.2 2-โพรพานอล (CH3)2CHOH
7.5.3 ไซโคลเฮกเซน C6H12
7.5.4 อะซิโตไนไตรล์ CH3CN
7.5.5 เมทานอล CH3OH
กล่องป้องกันเสียง SPB-L ช่วยลดเสียงรบกวนของโพรงอากาศของ sonication ได้อย่างมาก
8. การรวบรวม การเก็บรักษา และการเก็บรักษาตัวอย่าง
8.1 ดูเนื้อหาเบื้องต้นของบทที่สี่ “สารวิเคราะห์ออร์แกนิก” วิธีที่ 3500 และวิธีการกําหนดเฉพาะที่จะใช้
8.2 ตัวอย่างที่เป็นของแข็งที่จะสกัดโดยขั้นตอนนี้ควรรวบรวมและจัดเก็บเช่นเดียวกับตัวอย่างของแข็งอื่น ๆ ที่มีสารอินทรีย์กึ่งระเหย
9. การควบคุมคุณภาพ
9.2 การสาธิตความเชี่ยวชาญเบื้องต้น
ห้องปฏิบัติการแต่ละแห่งต้องแสดงให้เห็นถึงความเชี่ยวชาญเบื้องต้นในการเตรียมตัวอย่างแต่ละครั้งและการผสมผสานวิธีการที่กําหนดโดยใช้โดยการสร้างข้อมูลที่มีความแม่นยําและความแม่นยําที่ยอมรับได้สําหรับสารวิเคราะห์เป้าหมายในเมทริกซ์ที่สะอาด ห้องปฏิบัติการจะต้องแสดงให้เห็นถึงความเชี่ยวชาญซ้ําเมื่อใดก็ตามที่พนักงานใหม่ได้รับการฝึกอบรมหรือมีการเปลี่ยนแปลงเครื่องมือที่สําคัญ ดูวิธีที่ 8000 สําหรับข้อมูลเกี่ยวกับวิธีการสาธิตความเชี่ยวชาญ
9.3 ในขั้นต้น ก่อนประมวลผลตัวอย่างใดๆ นักวิเคราะห์ควรแสดงให้เห็นว่าทุกส่วนของอุปกรณ์ที่สัมผัสกับตัวอย่างและรีเอเจนต์นั้นปราศจากการรบกวน สิ่งนี้ทําได้ผ่านการวิเคราะห์วิธีการที่ว่างเปล่า ในการตรวจสอบอย่างต่อเนื่อง ทุกครั้งที่มีการสกัด ทําความสะอาด และวิเคราะห์ตัวอย่าง และเมื่อมีการเปลี่ยนแปลงรีเอเจนต์ ควรสกัดและวิเคราะห์วิธีการเปล่าเพื่อหาสารประกอบที่น่าสนใจเพื่อป้องกันการปนเปื้อนในห้องปฏิบัติการเรื้อรัง
9.4 ช่องว่างของวิธีการใด ๆ ตัวอย่างแหลมเมทริกซ์หรือตัวอย่างจําลองควรอยู่ภายใต้ขั้นตอนการวิเคราะห์เดียวกัน (มาตรา 11.0) เช่นเดียวกับที่ใช้ในตัวอย่างจริง
9.5 ควรใช้แนวทางปฏิบัติในการประกันคุณภาพมาตรฐานกับวิธีนี้ตามที่รวมอยู่ในเอกสารการวางแผนอย่างเป็นระบบและ SOP ของห้องปฏิบัติการที่เหมาะสม ควรบันทึกสภาพการทํางานของเครื่องมือทั้งหมด
9.6 อ้างถึงวิธีการ 3500 สําหรับขั้นตอนการควบคุมคุณภาพการสกัดและการเตรียมตัวอย่าง และวิธีการกําหนดที่จะใช้สําหรับขั้นตอน QC ที่กําหนด
9.7 เมื่อระบุไว้ในวิธีการกําหนดที่เหมาะสมควรเพิ่มมาตรฐานตัวแทนลงในตัวอย่างทั้งหมดก่อนการสกัด ดูวิธีการ 3500 และ 8000 และวิธีการกําหนดที่เหมาะสมสําหรับข้อมูลเพิ่มเติม
9.8 ดังที่ได้กล่าวไว้ก่อนหน้านี้การใช้เทคนิคการสกัดใด ๆ รวมถึงการสกัดด้วยอัลตราโซนิกควรได้รับการสนับสนุนโดยข้อมูลที่แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพของระบบตัวทําละลายเฉพาะและเงื่อนไขการทํางานสําหรับสารวิเคราะห์ที่น่าสนใจในระดับที่น่าสนใจในเมทริกซ์ตัวอย่าง
10. การสอบเทียบและการกําหนดมาตรฐาน
ไม่มีขั้นตอนการสอบเทียบหรือการกําหนดมาตรฐานที่เกี่ยวข้องโดยตรงกับขั้นตอนการสกัดตัวอย่างนี้
11. ขั้นตอน
ตามที่ระบุไว้ในมาตรา 1.4 การสกัดด้วยอัลตราโซนิกอาจไม่เข้มงวดเท่ากับวิธีการสกัดดิน/ของแข็งอื่นๆ ดังนั้นจึงเป็นสิ่งสําคัญที่จะต้องปฏิบัติตามวิธีนี้อย่างชัดเจน (รวมถึงคําแนะนําของผู้ผลิต) เพื่อให้ได้ประสิทธิภาพการสกัดสูงสุด อย่างน้อยสําหรับการใช้เทคนิคนี้ให้ประสบความสําเร็จ:
11.1 การจัดการตัวอย่าง
11.1.2 ตัวอย่างขยะ — ตัวอย่างที่ประกอบด้วยหลายเฟสจะต้องเตรียมก่อนการสกัดโดยขั้นตอนการแยกเฟสที่อธิบายไว้ในบทที่สอง ขั้นตอนการสกัดนี้ใช้สําหรับของแข็งเท่านั้น
11.1.3 ตัวอย่างขยะแห้งที่เข้ากันได้กับการบด — บดหรือแบ่งย่อยของเสียเพื่อให้ผ่านตะแกรงขนาด 1 มม. หรือสามารถอัดผ่านรูขนาด 1 มม. ได้ แนะนําตัวอย่างที่เพียงพอลงในอุปกรณ์บดเพื่อให้ได้อย่างน้อย 10 กรัมหลังจากการบด
ข้อควรระวัง: ควรทําการอบแห้งและการเจียรในเครื่องดูดควันเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของห้องปฏิบัติการ
11.1.4 วัสดุเหนียว เส้นใย หรือมันไม่เหมาะกับการบด — ตัด ฉีก หรือลดขนาดวัสดุเหล่านี้เพื่อให้สามารถผสมและเปิดรับแสงสูงสุดของพื้นผิวตัวอย่างสําหรับการสกัด
11.2 การกําหนดเปอร์เซ็นต์น้ําหนักแห้ง — เมื่อต้องคํานวณผลตัวอย่างตามน้ําหนักแห้ง ควรชั่งน้ําหนักตัวอย่างแยกต่างหากพร้อมกับส่วนที่ใช้สําหรับการตรวจวัดเชิงวิเคราะห์
ข้อควรระวัง: เตาอบแห้งควรบรรจุไว้ในเครื่องดูดควันหรือมีช่องระบายอากาศ การปนเปื้อนในห้องปฏิบัติการอย่างมีนัยสําคัญอาจเป็นผลมาจากตัวอย่างของเสียอันตรายที่ปนเปื้อนอย่างหนัก
ทันทีหลังจากชั่งน้ําหนักส่วนแบ่งของตัวอย่างที่จะสกัดแล้ว ให้ชั่งน้ําหนักตัวอย่างอีก 5 ถึง 10 กรัมลงในเบ้าหลอมแบบทาร์ด เช็ดให้แห้งค้างคืนที่ 105 องศาเซลเซียส ปล่อยให้เย็นในเครื่องดูดความชื้นก่อนชั่งน้ําหนัก
คํานวณเปอร์เซ็นต์น้ําหนักแห้งดังนี้:
% น้ําหนักแห้ง = (g ของแห้ง sample / g ของ samp) x 100
แผ่นแบ่งที่อบแห้งนี้ไม่ได้ใช้สําหรับการสกัด และควรกําจัดอย่างเหมาะสมเมื่อกําหนดน้ําหนักแห้งแล้ว
11.3 ขั้นตอนการสกัดที่มีความเข้มข้นต่ํา
ขั้นตอนนี้ใช้กับตัวอย่างที่เป็นของแข็งที่คาดว่าจะมีการวิเคราะห์อินทรีย์น้อยกว่าหรือเท่ากับ 20 มก./กก.
ขั้นตอนก่อนการ sonication
11.3.1 ควรทําตามขั้นตอนต่อไปนี้อย่างรวดเร็วเพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียสารสกัดที่ระเหยง่าย
11.3.1.1 ชั่งน้ําหนักตัวอย่างประมาณ 30 กรัมลงในบีกเกอร์ขนาด 400 มล. บันทึกน้ําหนักให้ใกล้ที่สุด 0.1 กรัม
11.3.1.2 สําหรับตัวอย่างในแต่ละชุดที่เลือกสําหรับการเพิ่ม ให้เติมสารละลายเมทริกซ์ 1.0 มล. ศึกษาวิธี 3500 สําหรับคําแนะนําเกี่ยวกับการเลือกสารประกอบและความเข้มข้นของเมทริกซ์ที่เหมาะสมในการเพิ่มขีดฆ่า ดูหมายเหตุในมาตรา 11.3 ด้วย
11.3.1.3 เติมสารละลายมาตรฐานตัวแทน 1.0 มล. ลงในตัวอย่างทั้งหมด ตัวอย่างที่มีหนาม ตัวอย่าง QC และช่องว่าง ปรึกษาวิธี 3500 สําหรับคําแนะนําเกี่ยวกับการเลือกสารประกอบและความเข้มข้นแทนที่เหมาะสม ดูหมายเหตุในมาตรา 11.3 ด้วย
11.3.1.4 หากต้องใช้การทําความสะอาดการซึมผ่านของเจล (ดูวิธีที่ 3640) นักวิเคราะห์ควรเพิ่มปริมาตรของสารละลายสไปค์แทนเป็นสองเท่า (และสารละลายสลักเมทริกซ์ ถ้ามี) หรือเข้มข้นสารสกัดขั้นสุดท้ายให้เหลือครึ่งหนึ่งของปริมาตรปกติ เพื่อชดเชยครึ่งหนึ่งของสารสกัดที่สูญหายไปเนื่องจากการโหลดคอลัมน์ GPC ดูหมายเหตุในมาตรา 11.3 ด้วย
11.3.1.5 ตัวอย่างที่ไม่มีรูพรุนหรือเปียก (ชนิดเหนียวหรือดินเหนียว) ที่ไม่มีเนื้อทรายไหลอย่างอิสระจะต้องผสมกับโซเดียมซัลเฟตปราศจากน้ํา 60 กรัมโดยใช้ไม้พาย หากจําเป็น อาจเติมโซเดียมซัลเฟตเพิ่ม หลังจากเติมโซเดียมซัลเฟตแล้ว ตัวอย่างควรไหลได้อย่างอิสระ ดูหมายเหตุในมาตรา 11.3 ด้วย
11.3.1.6 เติมตัวทําละลายสกัดหรือส่วนผสมของตัวทําละลาย 100 มล. ทันที (ดู Sec. 7.4 และตารางที่ 2 สําหรับข้อมูลเกี่ยวกับการเลือกตัวทําละลาย)
11.3.2 วางพื้นผิวด้านล่างของปลายแตรรบกวนขนาด 3/4 นิ้วใต้พื้นผิวของตัวทําละลายประมาณ 1/2 นิ้ว แต่เหนือชั้นตะกอน
หมายเหตุ: ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้ติดตั้งแตรอัลตราโซนิก / sonotrode อย่างถูกต้องตามคําแนะนําของผู้ผลิต
11.3.3 แยกตัวอย่างอัลตราโซนิกเป็นเวลา 3 นาที โดยตั้งค่าการควบคุมเอาต์พุตไว้ที่ 100% (กําลังเต็ม) หรือที่การตั้งค่าพลังงานที่แนะนําของผู้ผลิต สวิตช์โหมดเปิดพัลส์ (พลังงานที่เต้นเป็นจังหวะมากกว่าพลังงานต่อเนื่อง) และรอบการทํางานเปอร์เซ็นต์ตั้งไว้ที่ 50% (พลังงาน 50% ของเวลาและปิด 50% ของเวลา) อย่าใช้โพรบไมโครทิป
11.3.4 ล้างสารสกัดและกรองผ่านกระดาษกรอง (เช่น Whatman No. 41 หรือเทียบเท่า) ในกรวย Buchner ที่ติดอยู่กับขวดกรองขนาด 500 มล. ที่สะอาด หรือเทสารสกัดลงในขวดหมุนเหวี่ยงและหมุนเหวี่ยงด้วยความเร็วต่ําเพื่อขจัดอนุภาค
11.3.5 การสกัดซ้ําอีกสองครั้งด้วยตัวทําละลายสะอาดขนาด 100 มล. อีกสองส่วน ล้างตัวทําละลายออกหลังจากการสกัดอัลตราโซนิกแต่ละครั้ง หลังจากการสกัดอัลตราโซนิกครั้งสุดท้าย ให้เทตัวอย่างทั้งหมดลงในกรวย Buchner ล้างบีกเกอร์ด้วยตัวทําละลายสกัด และเพิ่มน้ํายาล้างลงในกรวย
ขั้นตอนหลังการ sonication
11.3.6 หากจําเป็น ให้สารสกัดเข้มข้นก่อนวิเคราะห์ตามขั้นตอนในข้อ 11.5 มิฉะนั้น ให้ไปที่ Sec. 11.7
UP200St พร้อมไมโครทิปสําหรับตัวอย่าง sonication
11.4 ขั้นตอนการสกัดความเข้มข้นปานกลาง / สูง
ขั้นตอนนี้ใช้กับตัวอย่างที่เป็นของแข็งที่คาดว่าจะมีสารวิเคราะห์อินทรีย์มากกว่า 20 มก./กก.
ขั้นตอนก่อนการ sonication
11.4.2 สําหรับตัวอย่างในแต่ละชุดที่เลือกสําหรับการเพิ่ม ให้เติมสารละลายเมทริกซ์ 1.0 มล. ศึกษาวิธี 3500 สําหรับคําแนะนําเกี่ยวกับการเลือกสารประกอบและความเข้มข้นของเมทริกซ์ที่เหมาะสมในการเพิ่มขีดฆ่า ดูหมายเหตุในมาตรา 11.3 ด้วย
11.4.3 เติมสารละลายแทน 1.0 มล. ลงในตัวอย่างทั้งหมด ตัวอย่างที่มีหนาม ตัวอย่าง QC และช่องว่าง ศึกษาวิธี 3500 สําหรับคําแนะนําเกี่ยวกับการเลือกสารประกอบและความเข้มข้นของเมทริกซ์ที่เหมาะสมในการเพิ่มขีดฆ่า ดูหมายเหตุในมาตรา 11.3 ด้วย
11.4.4 หากต้องใช้การทําความสะอาดการซึมผ่านของเจล (ดูวิธีที่ 3640) นักวิเคราะห์ควรเพิ่มปริมาตรของสารละลายสไปเกตแทนเป็นสองเท่า (และสารละลายสลักเมทริกซ์ ถ้ามี) หรือเข้มข้นสารสกัดขั้นสุดท้ายให้เหลือครึ่งหนึ่งของปริมาตรปกติ เพื่อชดเชยครึ่งหนึ่งของสารสกัดที่สูญหายไปเนื่องจากการโหลดคอลัมน์ GPC
11.4.5 ตัวอย่างที่ไม่มีรูพรุนหรือเปียก (ชนิดกัมมี่หรือดินเหนียว) ที่ไม่มีเนื้อทรายไหลอย่างอิสระจะต้องผสมกับโซเดียมซัลเฟตปราศจากน้ํา 2 กรัมโดยใช้ไม้พาย หากจําเป็น อาจเติมโซเดียมซัลเฟตเพิ่ม หลังจากเติมโซเดียมซัลเฟตแล้ว ตัวอย่างควรไหลได้อย่างอิสระ (ดูหมายเหตุในข้อ 11.3)
11.4.6 เติมตัวทําละลายในปริมาตรที่จําเป็นทันทีเพื่อให้ปริมาตรสุดท้ายเป็น 10.0 มล. โดยพิจารณาจากปริมาตรที่เพิ่มขึ้นของตัวแทนและเมทริกซ์เดือย (ดู Sec. 7.4 และตารางที่ 2 สําหรับข้อมูลเกี่ยวกับการเลือกตัวทําละลาย)
11.4.7 สกัดตัวอย่างด้วยโพรบอัลตราโซนิกไมโครทิปเรียวขนาด 1/8 นิ้วเป็นเวลา 2 นาทีที่การตั้งค่าการควบคุมเอาต์พุต 5 และด้วยสวิตช์โหมดบนพัลส์และรอบการทํางานเปอร์เซ็นต์ที่ 50%
11.4.8 บรรจุปิเปตปาสเตอร์แบบใช้แล้วทิ้งอย่างหลวมๆ ด้วยใยแก้ว 2 ถึง 3 ซม. กรองสารสกัดตัวอย่างผ่านใยแก้วและรวบรวมสารสกัดในภาชนะที่เหมาะสม ไม่สามารถกู้คืนตัวทําละลายสกัด 10 มล. ทั้งหมดจากตัวอย่างได้ ดังนั้นนักวิเคราะห์ควรรวบรวมปริมาตรที่เหมาะสมกับความไวของวิธีการกําหนดที่จะใช้ ตัวอย่างเช่น สําหรับวิธีการที่ไม่ต้องการให้สารสกัดเข้มข้นเพิ่มเติม (เช่น โดยทั่วไปวิธี 8081 จะใช้ปริมาตรสารสกัดขั้นสุดท้าย 10 มล.) สารสกัดอาจถูกรวบรวมในขวดประกายไฟหรือภาชนะปิดผนึกอื่นๆ สําหรับสารสกัดที่ต้องการความเข้มข้นเพิ่มเติม ขอแนะนําให้รวบรวมปริมาตรมาตรฐานสําหรับตัวอย่างดังกล่าวทั้งหมดเพื่อลดความซับซ้อนในการคํานวณผลตัวอย่างขั้นสุดท้าย ตัวอย่างเช่น เก็บสารสกัด 5.0 มล. ในหลอดหัวฉีดที่สะอาด ปริมาตรนี้คิดถึงครึ่งหนึ่งของปริมาตรทั้งหมดของสารสกัดตัวอย่างดั้งเดิม ตามความจําเป็น ให้บัญชี “การขาดทุน” ครึ่งหนึ่งของสารสกัดในการคํานวณตัวอย่างขั้นสุดท้าย หรือเข้มข้นสารสกัดขั้นสุดท้ายให้เหลือครึ่งหนึ่งของปริมาตรสุดท้ายเล็กน้อย (เช่น 0.5 มล. เทียบกับ 1.0 มล.) เพื่อชดเชยการสูญเสีย
11.4.9 หากจําเป็น ให้สารสกัดเข้มข้นก่อนการวิเคราะห์ตามขั้นตอนในมาตรา 11.5 หรือมาตรา 11.6 มิฉะนั้น ให้ไปที่ Sec. 11.7
เทคนิคการมีสมาธิ
ในกรณีที่จําเป็นเพื่อให้เป็นไปตามเกณฑ์ความไวสารสกัดตัวอย่างจากขั้นตอนการสกัดที่มีความเข้มข้นต่ําหรือความเข้มข้นปานกลาง/สูงอาจมีความเข้มข้นจนถึงปริมาตรสุดท้ายที่จําเป็นสําหรับวิธีการกําหนดและการใช้งานเฉพาะที่จะใช้โดยใช้เทคนิค KD หรือการระเหยของไนโตรเจน
11.5.1 ประกอบหัวฉีด Kuderna-Danish (KD) โดยติดท่อหัวฉีดขนาด 10 มล. เข้ากับขวดระเหยที่มีขนาดเหมาะสม
11.5.2 ทําให้สารสกัดแห้งโดยผ่านคอลัมน์อบแห้งที่มีโซเดียมซัลเฟตปราศจากน้ําประมาณ 10 กรัม รวบรวมสารสกัดแห้งในหัวฉีด KD
11.5.3 ล้างท่อเก็บและคอลัมน์อบแห้งลงในขวด KD ด้วยตัวทําละลายเพิ่มเติม 20 มล. เพื่อให้ได้การถ่ายโอนเชิงปริมาณ
11.5.4 ใส่ชิปเดือดที่สะอาดหนึ่งหรือสองชิ้นลงในขวดและติดคอลัมน์ Snyder สามลูก ติดเครื่องแก้วนําไอตัวทําละลายกลับมาใช้ใหม่ (คอนเดนเซอร์และอุปกรณ์รวบรวม ดู Sec. 6.9) เข้ากับคอลัมน์ Snyder ของอุปกรณ์ KD ตามคําแนะนําของผู้ผลิต ทําให้คอลัมน์ Snyder เปียกก่อนโดยเติมเมทิลีนคลอไรด์ประมาณ 1 มล. (หรือตัวทําละลายอื่นที่เหมาะสม) ที่ด้านบนของคอลัมน์ วางอุปกรณ์ KD บนอ่างน้ําร้อน (15 – 20 EC เหนือจุดเดือดของตัวทําละลาย) เพื่อให้ท่อหัวฉีดจุ่มลงในน้ําร้อนบางส่วน และพื้นผิวโค้งมนด้านล่างทั้งหมดของขวดถูกอาบด้วยไอร้อน ปรับตําแหน่งแนวตั้งของอุปกรณ์และอุณหภูมิของน้ําตามต้องการเพื่อให้ความเข้มข้นสมบูรณ์ใน 10 – 20 นาที ในอัตราการกลั่นที่เหมาะสมลูกบอลของคอลัมน์จะพูดคุยกันอย่างแข็งขัน แต่ห้องจะไม่ท่วม เมื่อปริมาตรของเหลวที่ชัดเจนถึง 1 มล. ให้นําอุปกรณ์ KD ออกจากอ่างน้ําและปล่อยให้ระบายออกและเย็นลงอย่างน้อย 10 นาที
ข้อควรระวัง: อย่าปล่อยให้สารสกัดแห้ง เพราะจะส่งผลให้สารวิเคราะห์บางชนิดสูญเสียอย่างรุนแรง สารกําจัดศัตรูพืชออร์กาโนฟอสฟอรัสมีความอ่อนไหวต่อการสูญเสียดังกล่าวเป็นพิเศษ
11.5.4.1 หากจําเป็นต้องแลกเปลี่ยนตัวทําละลาย (ตามที่ระบุไว้ในตารางที่ 2 หรือวิธีการกําหนดที่เหมาะสม) ให้นําคอลัมน์ Snyder ออกชั่วขณะ เติมตัวทําละลายแลกเปลี่ยน 50 มล. และชิปเดือดใหม่
11.5.4.2 ใส่คอลัมน์ Snyder กลับเข้าไปใหม่ เพิ่มอุณหภูมิของอ่างน้ําหากจําเป็นเพื่อรักษาอัตราการกลั่นที่เหมาะสม
11.5.5 ถอดคอลัมน์ Snyder ออก ล้างขวด KD และข้อต่อด้านล่างของคอลัมน์ Snyder ลงในท่อหัวฉีดด้วย 1 – ตัวทําละลาย 2 มล. สารสกัดอาจเข้มข้นเพิ่มเติมโดยใช้เทคนิคใดเทคนิคหนึ่งที่ระบุไว้ในมาตรา 11.6 หรือปรับเป็นปริมาตรสุดท้ายที่ 5.0 – 10.0 มล. โดยใช้ตัวทําละลายที่เหมาะสม (ดูตารางที่ 2 หรือวิธีการกําหนดที่เหมาะสม) หากมีผลึกกํามะถัน ให้ดําเนินการต่อที่วิธีที่ 3660 เพื่อทําความสะอาด
11.6 หากจําเป็นต้องมีความเข้มข้นเพิ่มเติม ให้ใช้เทคนิคคอลัมน์ไมโครสไนเดอร์ (ดู Sec. 11.6.1) หรือเทคนิคการระเหยไนโตรเจน (ดู Sec. 11.6.2)
11.6.1 เทคนิคคอลัมน์ Micro-Snyder
11.6.1.1 เติมชิปเดือดที่สะอาดใหม่ลงในท่อหัวฉีด และติดคอลัมน์ไมโคร Snyder สองลูกเข้ากับท่อหัวฉีดโดยตรง ติดเครื่องแก้วนําไอตัวทําละลายกลับมาใช้ใหม่ (คอนเดนเซอร์และอุปกรณ์รวบรวม) เข้ากับคอลัมน์ไมโคร Snyder ของอุปกรณ์ KD ตามคําแนะนําของผู้ผลิต ทําให้คอลัมน์ Snyder เปียกก่อนโดยเติมเมทิลีนคลอไรด์ 0.5 มล. หรือตัวทําละลายแลกเปลี่ยนที่ด้านบนของคอลัมน์ วางอุปกรณ์ความเข้มข้นระดับไมโครในอ่างน้ําร้อนเพื่อให้ท่อหัวฉีดจุ่มลงในน้ําร้อนบางส่วน ปรับตําแหน่งแนวตั้งของอุปกรณ์และอุณหภูมิของน้ํา ตามความจําเป็น เพื่อให้ความเข้มข้นใน 5 สมบูรณ์ – 10 นาที ในอัตราการกลั่นที่เหมาะสมลูกบอลของคอลัมน์จะพูดคุยกันอย่างแข็งขัน แต่ห้องจะไม่ท่วม
11.6.1.2 เมื่อปริมาตรของเหลวที่ปรากฏถึง 0.5 มล. ให้ถอดอุปกรณ์ออกจากอ่างน้ําและปล่อยให้ระบายออกและเย็นลงอย่างน้อย 10 นาที ถอดคอลัมน์ Snyder ออกแล้วล้างข้อต่อด้านล่างลงในท่อหัวฉีดด้วยตัวทําละลาย 0.2 มล. ปรับระดับเสียงสกัดสุดท้ายเป็น 1.0 – 2.0 มล.
ข้อควรระวัง: อย่าปล่อยให้สารสกัดแห้ง เพราะจะส่งผลให้สารวิเคราะห์บางชนิดสูญเสียอย่างรุนแรง สารกําจัดศัตรูพืชออร์กาโนฟอสฟอรัสมีความอ่อนไหวต่อการสูญเสียดังกล่าวเป็นพิเศษ
11.6.2 เทคนิคการระเหยของไนโตรเจน
11.6.2.1 วางท่อหัวฉีดในอ่างน้ําอุ่น (30 องศาเซลเซียส) และระเหยปริมาตรตัวทําละลายเป็น 0.5 มล. โดยใช้ไนโตรเจนแห้งที่สะอาดอย่างอ่อนโยน (กรองผ่านคอลัมน์ถ่านกัมมันต์)
ข้อควรระวัง: ห้ามใช้ท่อพลาสติกใหม่ระหว่างกับดักคาร์บอนและ samp เนื่องจากอาจทําให้เกิดการรบกวนของพทาเลต
11.6.2.2 ล้างผนังด้านในของท่อหัวฉีดหลาย ๆ ครั้งด้วยตัวทําละลายในระหว่างความเข้มข้น ในระหว่างการระเหย ให้จัดตําแหน่งท่อหัวฉีดเพื่อหลีกเลี่ยงการควบแน่นของน้ําเข้าไปในสารสกัด ภายใต้ขั้นตอนปกติต้องไม่ปล่อยให้สารสกัดแห้ง
ข้อควรระวัง: อย่าปล่อยให้สารสกัดแห้ง เพราะจะส่งผลให้สารวิเคราะห์บางชนิดสูญเสียอย่างรุนแรง สารกําจัดศัตรูพืชออร์กาโนฟอสฟอรัสมีความอ่อนไหวต่อการสูญเสียดังกล่าวเป็นพิเศษ
11.7 สารสกัดอาจอยู่ภายใต้ขั้นตอนการทําความสะอาดหรือวิเคราะห์สําหรับสารวิเคราะห์เป้าหมายโดยใช้เทคนิคการกําหนดที่เหมาะสม หากจะไม่ดําเนินการจัดการสารสกัดเพิ่มเติมในทันที ให้ปิดท่อหัวฉีดและเก็บไว้ในตู้เย็น หากสารสกัดจะถูกเก็บไว้นานกว่า 2 วัน ควรย้ายไปยังขวดที่มีฝาเกลียวบุด้วย PTFE และติดฉลากอย่างเหมาะสม
12. การวิเคราะห์และการคํานวณข้อมูล
ไม่มีการคํานวณที่เกี่ยวข้องกับขั้นตอนการแยกนี้อย่างชัดเจน ดูวิธีการกําหนดที่เหมาะสมสําหรับการคํานวณผลตัวอย่างขั้นสุดท้าย
13. ประสิทธิภาพของวิธีการ
14. การป้องกันมลพิษ
14.1 การป้องกันมลพิษครอบคลุมเทคนิคใด ๆ ที่ลดหรือกําจัดปริมาณและ/หรือความเป็นพิษของของเสีย ณ จุดที่เกิด มีโอกาสมากมายในการป้องกันมลพิษในการดําเนินงานในห้องปฏิบัติการ EPA ได้กําหนดลําดับชั้นของเทคนิคการจัดการสิ่งแวดล้อมที่ต้องการซึ่งให้การป้องกันมลพิษเป็นตัวเลือกการจัดการทางเลือกแรก เมื่อใดก็ตามที่เป็นไปได้บุคลากรในห้องปฏิบัติการควรใช้เทคนิคการป้องกันมลพิษเพื่อจัดการกับการสร้างของเสีย เมื่อไม่สามารถลดขยะได้ที่แหล่งกําเนิดหน่วยงานแนะนําให้รีไซเคิลเป็นทางเลือกที่ดีที่สุดรองลงมา
14.2 สําหรับข้อมูลเกี่ยวกับการป้องกันมลพิษที่อาจใช้ได้กับห้องปฏิบัติการและสถาบันวิจัย โปรดดู Less is Better: Laboratory Chemical Management for Waste Reduction จาก American Chemical Society's Department of Government Relations and Science Policy, 1155 16th St., NW, Washington, DC 20036, https://www.acs.org
15. การจัดการขยะ
เครื่องดูดควันและการทํางานของม้านั่ง โดยปฏิบัติตามตัวอักษรและจิตวิญญาณของใบอนุญาตและข้อบังคับการปล่อยท่อระบายน้ํา และโดยปฏิบัติตามข้อบังคับของขยะมูลฝอยและของเสียอันตรายทั้งหมด โดยเฉพาะอย่างยิ่งกฎการระบุของเสียอันตรายและข้อจํากัดในการกําจัดที่ดิน สําหรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับการจัดการของเสีย โปรดดูคู่มือการจัดการของเสียสําหรับบุคลากรในห้องปฏิบัติการที่มีให้จาก American Chemical Society ตามที่อยู่ที่ระบุไว้ในบทที่ 14.2
16. อ้างอิง
- EPA ของสหรัฐอเมริกา “การศึกษาเปรียบเทียบระหว่างห้องปฏิบัติการ: วิธีการสําหรับสารประกอบระเหยและกึ่งระเหย” ห้องปฏิบัติการระบบตรวจสอบสิ่งแวดล้อม สํานักงานวิจัยและพัฒนา ลาสเวกัส เนวาดา EPA 600/4-84-027, 1984
- ซีเอสไฮน์, พีเจมาร์สเดน, เอเอสชูทเลฟฟ์, “การประเมินวิธีการ 3540 (Soxhlet) และ 3550 (Sonication) สําหรับการประเมินสารวิเคราะห์ภาคผนวก IX จากตัวอย่างที่เป็นของแข็ง” S-CUBED, รายงานสัญญา EPA 68-03-33-75, งานมอบหมายงาน 03, เอกสารเลขที่ SSS-R- 88-9436 ตุลาคม 1988
ข้อเท็จจริงที่ควรค่าแก่การรู้
Homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกมักเรียกว่าโพรบ sonicator, sonic lyser, ultrasound disruptor, ultrasonic grinder, sono-ruptor, sonifier, sonic dismembrator, cell disrupter, ultrasonic disperser หรือ dissolver เงื่อนไขที่แตกต่างกันเป็นผลมาจากการใช้งานต่างๆที่สามารถเติมเต็มได้โดยการ sonication
ขนาด sonotrode ที่แตกต่างกันสําหรับ UP200Ht