Alpha-Synuclein Fragmentation โดยใช้ VialTweeter Sonicator
ไฟบริลและริบบิ้น α-synuclein ถูกแยกส่วนในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์เพื่อสร้างตัวอย่างไฟบริลขนาดเล็กหรือแม้แต่โมเลกุลโปรตีนแต่ละโมเลกุลซึ่งสามารถวิเคราะห์ได้ง่ายขึ้นโดยใช้เทคนิคการทดลองต่างๆ VialTweeter Sonicator เป็นหนึ่งใน ultrasonicators ที่ใช้กันมากที่สุดสําหรับการกระจายตัวของ alpha-synuclein ที่มีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้
α-Synuclein ในการวิจัย
Alpha-synuclein fibrils เป็นโปรตีนรวมที่มีความสัมพันธ์อย่างมากกับความผิดปกติของระบบประสาทเช่นโรคพาร์กินสันและภาวะสมองเสื่อมบางรูปแบบรวมถึงภาวะสมองเสื่อมกับร่างกายของ Lewy การวิจัยที่มุ่งเน้นไปที่ alpha-synuclein fibrils มีจุดมุ่งหมายเพื่อทําความเข้าใจบทบาทของพวกเขาในการลุกลามของโรคและพัฒนาวิธีการรักษาที่มีศักยภาพ โดยการแบ่ง fibrils alpha-synuclein ออกเป็นชิ้นส่วนขนาดเล็กนักวิจัยสามารถตรวจสอบคุณสมบัติโครงสร้างเฉพาะของพวกเขา ตัวอย่างเช่นการแยกส่วน alpha-synuclein fibrils ช่วยให้นักวิจัยสามารถตรวจสอบปฏิสัมพันธ์กับโมเลกุลอื่น ๆ เช่นโปรตีนไขมันหรือโมเลกุลขนาดเล็ก ด้วยการผลิตชิ้นส่วนที่มีขนาดเล็กลงไซต์ที่มีผลผูกพันและความสัมพันธ์ของพันธมิตรที่มีปฏิสัมพันธ์เหล่านี้สามารถตรวจสอบได้อย่างมีประสิทธิภาพมากขึ้น ริบบิ้นและริบบิ้น α-Syn ที่มีขนาดเล็กลงอาจแสดงความเป็นพิษและผลกระทบทางชีวเคมีที่เปลี่ยนแปลงไป ดังนั้นเทคนิคการกระจายตัวที่เชื่อถือได้และมีประสิทธิภาพซึ่งให้ผลลัพธ์ที่ทําซ้ําได้ในการรักษาตัวอย่างที่ง่ายและรวดเร็วจึงเป็นสิ่งสําคัญ
อัลตราโซนิกอัลฟา - Syn การกระจายตัว: VialTweeter sonicator เป็นระบบเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิกที่จัดตั้งขึ้นซึ่ง sonicates มากถึง 10 ขวดพร้อมกันภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน การตั้งค่าที่ตั้งโปรแกรมได้ช่วยให้สามารถทําการทดลองเดียวกันซ้ําได้ง่ายและรวดเร็วซึ่งให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้และทําซ้ําได้ในการกระจายตัวของไฟบริลอัลฟา - synuclein

VialTweeter sonicator สําหรับการกระจายตัวของอัลตราโซนิกพร้อมกันของตัวอย่างอัลฟา - synuclein หลาย
การเตรียมตัวอย่าง α-Synuclein ด้วย Sonicator
วิธีหนึ่งในการศึกษา alpha-synuclein fibrils เกี่ยวข้องกับการสกัดและการกระจายตัวโดยใช้เทคนิคเช่น sonication Sonication เป็นกระบวนการที่ใช้คลื่นอัลตราซาวนด์ความถี่ต่ําที่มีความเข้มสูงเพื่อขัดขวางและสลายมวลรวมโปรตีนซึ่งนําไปสู่การปล่อยไฟบริลขนาดเล็กหรือโมเลกุลโปรตีนแต่ละโมเลกุล sonicator VialTweeter เป็นอุปกรณ์ที่ใช้กันทั่วไปในการศึกษาวิจัยที่เกี่ยวข้องกับ α-synuclein เพื่อจุดประสงค์นี้
การศึกษาวิจัยจํานวนมากอธิบายโปรโตคอลการเตรียมตัวอย่างที่แม่นยําของ alpha-synuclein fibrils sonication ซึ่งใช้ Hielscher VialTweeter เพื่อการกระจายตัวของ α-synuclein fibril ที่มีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้ นักวิจัยสามารถวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ที่ได้และตรวจสอบโครงสร้างความเป็นพิษและการมีปฏิสัมพันธ์กับโมเลกุลอื่น ๆ การวิจัยนี้ให้ข้อมูลเชิงลึกที่สําคัญเกี่ยวกับกลไกพื้นฐานของการเสื่อมสภาพของระบบประสาทและอาจระบุเป้าหมายการรักษาใหม่ โปรโตคอล sonication α-synuclein ที่ได้รับการยอมรับอย่างดีโดยใช้ VialTweeter sonicator ช่วยให้ได้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้และทําซ้ําได้

ภาพบน: ไฟบริล alpha-synuclein ที่ไม่มีการจัดเรียง
ภาพล่าง: ไฟบริล alpha-synuclein ที่กระจัดกระจายด้วย VialTweeter sonicator
(การศึกษาและภาพ: ©Dieriks et al., 2022)
การกระจายตัวของอัลตราโซนิกของ α-Synuclein Fibrils – โปรโตคอล
เนื่องจากนักวิจัยจํานวนมากใช้ VialTweeter sonicator เป็นเทคนิคการกระจายตัวที่ต้องการในการผลิตชิ้นส่วนไฟบริล α-synuclein ที่สม่ําเสมอโปรโตคอลที่จัดตั้งขึ้นจึงพร้อมใช้งาน ด้านล่างนี้คุณจะพบโปรโตคอลการกระจายตัวอย่างบางส่วน
การเตรียมเมล็ด ClearTau: ไฟบริล ClearTau ถูกเจือจางเป็น 10 μM ใน dH2O และ sonicated ที่แอมพลิจูด 70% เป็นเวลา 50 วินาทีโดยมี 1 วินาทีใน 1 วินาที OFF cycle in-tube โดยใช้ sonicator UP200St พร้อม VialTweeter เมล็ดมีลักษณะด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน
การวัดการเรืองแสง ThS: ไฟบริล ClearTau ถูกเจือจางเป็น 2.5 μM ใน dH2O และ sonicated ที่แอมพลิจูด 70% เป็นเวลา 50 วินาทีโดยมี 1 วินาทีใน 1 วินาที OFF cycle in-tube โดยใช้ UP200St พร้อม VialTweeter โมโนเมอร์ Tau 4R2N เต็มความยาว 2.5 μM ถูกใช้เป็นตัวควบคุม สําหรับปฏิกิริยา 100 μl มีการเพิ่ม ThS (10 μM) 100 μl ให้ความเข้มข้นของโปรตีนขั้นสุดท้าย 1.25 μM การเรืองแสง ThS แบบจุดเดียวถูกวัดโดยใช้แผ่นด้านล่างที่ชัดเจน 96 แผ่นที่ติดตั้งในเครื่องอ่านไมโครเพลท FLUOstar Omega พร้อมการกระตุ้นที่ 445 นาโนเมตรและบันทึกการปล่อยที่ 485 นาโนเมตร
(cf. Limorenko et al., 2023)
ความยาว α-synuclein สม่ําเสมอโดยใช้ sonication: ความแตกต่างของความยาวของ α-syn fibrils และริบบิ้นลดลงโดย sonication เป็นเวลา 20 นาทีบนน้ําแข็งในหลอด Eppendorf ขนาด 2 มล. ใน VialTweeter ที่ตั้งค่าแอมพลิจูด 75%, พัลส์ 0.5 วินาที
(cf. Bousset และคณะ, 2013)
การควบคุมคุณภาพของ recombinant monomeric WT หรือ S129A a-Syn ของมนุษย์และโพลีมอร์ฟไฟบริลลาร์ที่พวกเขาสร้างขึ้นเช่นเดียวกับ a-Syn 1–110 ต่อจากนั้น fibrillar polymorphs ถูกแยกส่วนโดย sonication เป็นเวลา 20 นาทีในหลอด Eppendorf ขนาด 2 มล. ในเครื่องอัลตราโซนิก VialTweeter เพื่อสร้างอนุภาคไฟบริลลาร์ที่มีขนาดเฉลี่ย 42-52 นาโนเมตรที่เหมาะสําหรับเอนโดไซโตซิส
(cf. Shrivastava et al., 2020)

ลักษณะของห้า fibrillar α-Syn polymorphs (A) ไมโครกราฟอิเล็กตรอนส่งผ่านของ α-Syn fibrillar polymorphs fibrils, ribbons, fibrils-91, fibrils-65 และ fibrils-110 ที่ย้อมสีเชิงลบก่อน (เลนบน) และหลังการกระจายตัวด้วย VialTweeter (เลนล่าง) จะปรากฏขึ้น (B) แสดงการกระจายความยาวของโพลีมอร์ฟไฟบริลลาร์ที่กระจัดกระจาย จํานวน (n) ของชุดประกอบไฟบริลลาร์ที่ฮิสโตแกรมได้มาจากการระบุ
(การศึกษาและภาพ: Shrivastava et al., 2020)
ไฟบริล α-Syn ถูกแยกส่วนโดย sonication เป็นเวลา 20 นาทีในหลอด Eppendorf ขนาด 2 มล. ใน VialTweeter เพื่อสร้างอนุภาคไฟบริลลาร์ที่มีขนาดเฉลี่ย 42-52 นาโนเมตรตามการประเมินโดยการวิเคราะห์ TEM
(cf. Negrini et al., 2022)
fibrils91 ที่ได้รับการชุบใหม่(ใน PBS) ถูกแยกส่วนก่อนที่จะเพิ่มการเพาะเลี้ยงเซลล์โดย sonication เป็นเวลา 20 นาทีในหลอด Eppendorf ขนาด 2 มล. โดยใช้ Vial Tweeter sonicator, aliquoted, flash แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและเก็บไว้จนกว่าจะใช้ที่ -80 ̊C
(cf. Vajhøj et al., 2021)
VialTweeter และ Lab Sonicators สําหรับการกระจายตัวของ α-Syn
Hielscher Ultrasonics ได้รับการยอมรับทั่วโลกว่าเป็นผู้ผลิตชั้นนําของ ultrasonicators ที่ทันสมัย เชื่อถือได้และเป็นที่ยอมรับในห้องปฏิบัติการวิจัยที่สําคัญทั่วโลกเครื่องอัลตราโซนิกของเรานําเสนอคุณภาพและประสิทธิภาพที่ไม่มีใครเทียบได้สําหรับการทดลองที่สําคัญของคุณ
ด้วย Hielscher VialTweeter และ Hielscher sonicator อื่น ๆ คุณจะได้สัมผัสกับความสะดวกสบายของผู้ใช้ที่ไม่มีใครเทียบได้เนื่องจากได้รับการออกแบบมาอย่างพิถีพิถันเพื่อผลลัพธ์ที่ทําซ้ําได้ใช้งานง่ายและใช้งานได้อย่างราบรื่น ด้วยคุณสมบัติการบันทึกข้อมูลอัตโนมัติคุณสามารถมุ่งเน้นไปที่การวิจัยของคุณในขณะที่เครื่องอัลตราโซนิกของเราบันทึกข้อมูลสําคัญอย่างพิถีพิถันเพื่อความสามารถในการทําซ้ําและความแม่นยํา
บรรลุผลลัพธ์ที่สม่ําเสมอและทําซ้ําได้ด้วยความมั่นใจ!
ultrasonicators ของเราได้รับการออกแบบและผลิตในประเทศเยอรมนี ความแม่นยําของเยอรมันและคุณภาพทางวิศวกรรมสูงสุดเพื่อให้แน่ใจว่าการเตรียมตัวอย่างที่เชื่อถือได้และแม่นยําเช่นการกระจายตัวของเส้นใยอัลฟา - synuclein ทุกครั้ง ไม่ต้องกังวลกับผลลัพธ์ที่ไม่สอดคล้องกันอีกต่อไป – เทคโนโลยีอัลตราซาวนด์ของเราช่วยให้มั่นใจได้ว่าการวิจัยของคุณยังคงอยู่ในระดับแนวหน้าของความก้าวหน้าทางวิทยาศาสตร์
แต่นั่นไม่ใช่ทั้งหมด! ความมุ่งมั่นสู่ความเป็นเลิศของเราขยายไปไกลกว่าผลิตภัณฑ์ของเรา เรามีความภาคภูมิใจในการบริการลูกค้าที่ยอดเยี่ยมของเราโดยให้การสนับสนุนจากผู้เชี่ยวชาญเพื่อตอบคําถามหรือข้อกังวลใด ๆ ที่คุณอาจมี ทีมงานที่ทุ่มเทของเราอยู่ที่นี่เพื่อช่วยเหลือคุณในทุกขั้นตอนของการเดินทางวิจัยของคุณเพื่อให้แน่ใจว่าคุณจะได้รับประโยชน์สูงสุดจากเครื่องอัลตราโซนิกของเรา
เลือกนวัตกรรมความน่าเชื่อถือและประสบการณ์การใช้งานที่ยอดเยี่ยม - เลือกเครื่อง sonicators ในห้องปฏิบัติการของเราเช่น VialTweeter สําหรับการกระจายตัวของไฟบริลอัลฟา - synuclein รับประโยชน์จากโปรโตคอลที่จัดตั้งขึ้นแล้วและเข้าร่วมกลุ่มนักวิจัยชั้นนําที่ไว้วางใจเทคโนโลยีของเราสําหรับการศึกษาที่สําคัญของพวกเขา ยกระดับการวิจัยของคุณและสํารวจพรมแดนใหม่ในการวิจัยภาวะสมองเสื่อมและโรคทางระบบประสาทด้วยเครื่องอัลตราโซนิกที่ทันสมัยของเรา
- ประสิทธิภาพสูง
- เทคโนโลยีล้ําหน้า
- ความเชื่อถือได้ & ความแข็งแรง
- การทำสำเนาได้
- การควบคุมกระบวนการที่ปรับได้และแม่นยํา
- สําหรับวอลุ่มใดๆ
- ซอฟต์แวร์อัจฉริยะ
- คุณสมบัติอัจฉริยะ (เช่นตั้งโปรแกรมได้โปรโตคอลข้อมูลรีโมทคอนโทรล)
- ใช้งานง่ายและปลอดภัยในการใช้งาน
- การบำรุงรักษาต่ำ
- CIP (ทําความสะอาดในสถานที่)
ออกแบบ ผลิต และให้คําปรึกษา – คุณภาพผลิตในประเทศเยอรมนี
เครื่องอัลตราโซนิก Hielscher เป็นที่รู้จักกันดีในด้านคุณภาพและมาตรฐานการออกแบบสูงสุด ความทนทานและใช้งานง่ายช่วยให้การรวมเครื่องอัลตราโซนิกของเราเข้ากับโรงงานอุตสาหกรรมได้อย่างราบรื่น สภาพที่หยาบกร้านและสภาพแวดล้อมที่มีความต้องการได้รับการจัดการอย่างง่ายดายโดยเครื่องอัลตราโซนิก Hielscher
Hielscher Ultrasonics เป็น บริษัท ที่ได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO และให้ความสําคัญกับเครื่องอัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงที่มีเทคโนโลยีล้ําสมัยและใช้งานง่าย แน่นอนว่า Hielscher sonicators เป็นไปตามมาตรฐาน CE และตรงตามข้อกําหนดของ UL, CSA และ RoHs
ตารางด้านล่างแสดงความสามารถในการประมวลผลโดยประมาณของเครื่องอัลตราโซนิกขนาดห้องปฏิบัติการของเรา:
อุปกรณ์ที่แนะนำ | ปริมาณชุด | อัตราการไหล |
---|---|---|
UIP400MTP | แผ่นหลายหลุม / ไมโครไทเตอร์ | N.A. |
อัลตราโซนิก cuphorn | CupHorn สําหรับขวดหรือบีกเกอร์ | N.A. |
GDmini2 | เครื่องปฏิกรณ์ไมโครโฟลว์อัลตราโซนิก | N.A. |
VialTweeter | 00.5 เพื่อ 1.5ml | N.A. |
UP100H | 1 ถึง 500mL | 10 ถึง 200mL / นาที |
Uf200 ःที, UP400St | 10 ถึง 2000ml | 20 ถึง 400ml / นาที |
ติดต่อเรา! / ถามเรา!

ขวดทวีตเตอร์ มักใช้เพื่อแยกส่วน alpha-synuclein fibril เป็นขั้นตอนของการเตรียมตัวอย่างก่อนการวิเคราะห์
วรรณกรรม / อ้างอิง
- Emil Dandanell Agerschou, Marie P. Schützmann, Nikolas Reppert, Michael M. Wördehoff, Hamed Shaykhalishahi, Alexander K. Buell, Wolfgang Hoyer (2021): β-Turn exchanges in the α-synuclein segment 44-TKEG-47 reveal high sequence fidelity requirements of amyloid fibril elongation. Biophysical Chemistry, Volume 269, 2021.
- Bousset, L., Pieri, L., Ruiz-Arlandis, G. et al. (2013): Structural and functional characterization of two alpha-synuclein strains. Nature Communications 4, 2575 (2013).
- Vajhøj, Charlott; Schmid, Benjamin; Alik, Ania; Melki, Ronald; Fog, Karina; Holst, Bjørn; Stummann, Tina (2021): Establishment of a human induced pluripotent stem cell neuronal model for identification of modulators of A53T α-synuclein levels and aggregation. PLOS ONE 16, 2021.
- Dieriks B.V.; Highet B.; Alik A.; Bellande T.; Stevenson T.J.; Low V.; Park T.I.; Correia J.; Schweder P.; Faull R.L.M.; Melki R.; Curtis M.A.; Dragunow M. (2022): Human pericytes degrade diverse α-synuclein aggregates. PLoS One, Nov 18;17(11), 2022.
- Amulya Nidhi Shrivastava, Luc Bousset, Marianne Renner, Virginie Redeker, Jimmy Savistchenko, Antoine Triller, Ronald Melki (2020): Differential Membrane Binding and Seeding of Distinct α-Synuclein Fibrillar Polymorphs. Biophysical Journal, Volume 118, Issue 6, 2020. 1301-1320.
- Negrini M, Tomasello G, Davidsson M, Fenyi A, Adant C, Hauser S, Espa E, Gubinelli F, Manfredsson FP, Melki R, Heuer A. (2022): Sequential or Simultaneous Injection of Preformed Fibrils and AAV Overexpression of Alpha-Synuclein Are Equipotent in Producing Relevant Pathology and Behavioral Deficits. Journal of Parkinsons Disease 12(4), 2022. 1133-1153.
- Limorenko G, Tatli M, Kolla R, Nazarov S, Weil MT, Schöndorf DC, Geist D, Reinhardt P, Ehrnhoefer DE, Stahlberg H, Gasparini L, Lashuel HA (2023): Fully co-factor-free ClearTau platform produces seeding-competent Tau fibrils for reconstructing pathological Tau aggregates. Nature Communications 4;14(1), July 2023.

Hielscher Ultrasonics ผลิต homogenizers อัลตราโซนิกที่มีประสิทธิภาพสูงจาก ห้องปฏิบัติการ ไปยัง ขนาดอุตสาหกรรมของ