Tlmivé roztoky pripravené ultrazvukom
Lýzne pufre môžu byť efektívne a rýchlo pripravené pomocou ultrazvukových tkanivových homogenizátorov. Vzhľadom k tomu, ultrasonicators sú dream nástroj pre miešanie, rozpúšťanie a dispergovanie, umožňujú spoľahlivú a užívateľsky prívetivú prípravu lýzových pufrov.
Ultrazvuková príprava tlmivých roztokov lýzy
Ultrazvukové tkanivové homogenizátory sú bežným nástrojom pre narušenie buniek, lýza a extrakcia, preto sú k dispozícii vo väčšine laboratórií. Sekundárnou aplikáciou pre ultrasonicators typu sondy je príprava tlmivých roztokov lýzy.
Lýzový tlmivý roztok je roztok, ktorý sa používa na rozbitie otvorených (lyzových) buniek a uvoľnenie ich obsahu na následnú analýzu. Špecifické zloženie tlmivého roztoku na lýzu sa môže líšiť v závislosti od typu lyzovaných buniek a následnej aplikácie. Typický tlmivý roztok na lýzu však obsahuje zložky, ako sú detergenty, soli a inhibítory proteázy. Tlmivé soli (napr. Tris-HCl) a iónové soli (napr. NaCl) sa bežne používajú na reguláciu pH a osmolarity lyzátu.
Na vytvorenie tlmivého roztoku na lýzu sa zložky zmiešajú vo vhodných koncentráciách a pH. Zmes sa zvyčajne mieša alebo pretrepáva, až kým sa zložky nerozpustia a roztok nie je homogénny.
Ultrazvuková homogenizácia je metóda, ktorá môže byť použitá na pomoc pri vytváraní dobrého lýzneho tlmivého roztoku zlepšením miešania a rozpúšťania zložiek. Pri tejto metóde ultrazvukové vlny – normálne v rozsahu 20 až 30 kHz – sa aplikujú na zmes, ktorá vytvára kavitačné bubliny, ktoré sa zrútia a vytvárajú intenzívnu miestnu energiu, čo vedie k mechanickému šmyku a miešaniu zložiek.
Ultrazvukový homogenizačný proces môže pomôcť rozbiť akékoľvek zhluky alebo agregáty zložiek a zabezpečiť, aby bol roztok rovnomerne zmiešaný. V dôsledku toho môže takýto zlepšený tlmivý roztok na lýzu viesť k efektívnejšiemu narušeniu buniek a vyšším výťažkom extrahovaného materiálu. Okrem toho, ultrazvuková homogenizácia môže znížiť čas potrebný na vytvorenie lýzového tlmivého roztoku v porovnaní s tradičnými metódami miešania alebo trepania.
Celkovo je ultrazvuková homogenizácia silným nástrojom na zlepšenie kvality a účinnosti prípravy lýzového pufra.

Ultrazvukový laboratórny homogenizátor UP200Ht je populárny vo výskumných laboratóriách na prípravu vzoriek, lýzu, extrakciu, fragmentáciu DNA a rozpúšťanie.
Protokol pre prípravu ultrazvukového tlmivého roztoku lýzy
Toto je všeobecný protokol na vytvorenie lýzového tlmivého roztoku pomocou ultrazvukom typu sondy:
Materiály:
- Zvolený(é) čistiaci prostriedok (detergenty) (napr. Triton X-100, SDS, CHAPS)
- Soľ(-ti) podľa výberu (napr. NaCl, KCl)
- inhibítory proteáz (napr. PMSF, aprotinín, leupeptín)
- Ultrasonicator
- Miešadlo
- Deionizovaná voda
- pH meter alebo pH prúžky
Pokyny krok za krokom:
- Určite zloženie tlmivého roztoku na základe buniek alebo tkaniva, ktoré budete lyzátovať, a následných aplikácií, pre ktoré budete lyzát používať. Pripravte zásobné roztoky detergentov, solí a inhibítorov proteáz v požadovaných koncentráciách.
- Pridajte zásobné roztoky detergentov, solí a inhibítorov proteáz do kadičky alebo banky.
- Pridajte deionizovanú vodu, aby sa objem zvýšil na požadované množstvo tlmivého roztoku.
- Zložky zmiešajte pomocou miešadla, aby ste získali roztok predmixu.
- Zmerajte pH tlmivého roztoku pomocou pH metra alebo pH prúžkov a podľa potreby upravte pH malým množstvom kyseliny alebo zásady.
- Použite ultrasonicator typu sondy na homogenizáciu roztoku premixu tak, aby sa získal vysoko homogénny roztok. Preto sonikujte roztok na niekoľko sekúnd, kým sa roztok dôkladne nepremieša a všetky zhluky alebo agregáty sa nerozpadnú. Trvanie a sila ultrazvukom môže byť optimalizovaná na základe špecifického lýzneho tlmivého roztoku a ultrasonicator.
- Po ultrazvukom znovu zmerajte pH pufra a upravte podľa potreby.
- Prefiltrujte pufor cez 0,2 mikrónový filter, aby ste odstránili všetky nečistoty alebo agregáty, ktoré sa mohli vytvoriť počas ultrazvukom.
- Lýzový tlmivý roztok je teraz pripravený na použitie.
Poznámka: Presné zloženie a pH tlmivého roztoku na lýzu sa môže líšiť v závislosti od lyzovaných buniek alebo tkaniva a následných aplikácií. Vyššie uvedený protokol je všeobecným usmernením a môže byť potrebné ho optimalizovať pre konkrétne aplikácie.
Ultrazvukové homogenizátory sa bežne používajú na narušenie buniek a extrakciu intracelulárnych molekúl. Preto mnohé aplikácie lýzy používajú sondovú ultrazvukom nielen na prípravu tlmivého roztoku lýzy, ale aj na mechanické narušenie buniek a extrakciu.
To robí ultrazvukové tkanivové homogenizátory všestranným nástrojom pre laboratóriá a vysvetľuje široké použitie ultrasonicators v mikrobiológii, biotechnológii a biologických vedách.
ultrazvukové laboratórium homogenizers
Hielscher Ultrasonics vyrába a dodáva ultrazvukové homogenizátory a sondy (sonotródy) pri rôznych výkonoch a objemoch vzoriek. To nám umožňuje ponúknuť vám najvhodnejší ultrazvukový disruptor pre prípravu vzorky. Zameriavame sa na najvyššiu kvalitu, vynikajúci užívateľský komfort a spoľahlivé výsledky ultrazvukom. Všetky digitálne ultrasonicators obsahujú inteligentný softvér, programovanie a prednastavenie protokolov ultrazvukom, diaľkové ovládanie prehliadača, reguláciu teploty, osvetlenie vzoriek, ako aj automatické zaznamenávanie údajov na vstavanej SD karte.
Dizajn, výroba a poradenstvo – Kvalita vyrobená v Nemecku
Hielscher ultrasonicators sú známe svojimi najvyššími štandardmi kvality a dizajnu. Robustnosť a jednoduchá obsluha umožňujú hladkú integráciu našich ultrazvukových prístrojov do priemyselných zariadení. Drsné podmienky a náročné prostredia ľahko zvládajú ultrazvukové prístroje Hielscher.
Hielscher Ultrasonics je spoločnosť certifikovaná podľa ISO a kladie osobitný dôraz na vysoko výkonné ultrazvukové prístroje s najmodernejšou technológiou a užívateľskou prívetivosťou. Samozrejme, Hielscher ultrasonicators sú v súlade s CE a spĺňajú požiadavky UL, CSA a RoHs.
The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators:
VialTweeter, UP200St | 200W | 26kHz | ultrazvuku malých liekoviek, napr. Eppendorf 1,5 ml |
UP50H | 50W | 30kHz | vreckový alebo stojanový laboratórny homogenizátor |
UP100H | 100W | 30kHz | vreckový alebo stojanový laboratórny homogenizátor |
UP200Ht | 200W | 26kHz | vreckový alebo stojanový laboratórny homogenizátor |
UP200St | 200W | 26kHz | stály laboratórny homogenizátor |
UP400St | 400W | 24kHz | stály laboratórny homogenizátor |
SonoStep | 200W | 26kHz | laboratórne kombinovanie reaktora, ultrazvuku, čerpadlo, miešadlo a nádobu |
GDmini2 | 200W | 26kHz | bunka bez prúdenia bez kontaminácie |
CupHorn | 200W | 26kHz | intenzívny ultrazvukový kúpeľ pre liekovky a kadičky |
UIP400MTP (UIP400MTP) | 400W | 24kHz | Ultrazvukový systém pre viacjamkové dosky / mikrotitračné dosky |

Ultrazvukový CupHorn na intenzívnu sonikáciu uzavretých skúmaviek a injekčných liekoviek na sterilnú homogenizáciu vzoriek.
Kontaktuj nás! / Opýtajte sa nás!

Ultrazvukový laboratórny homogenizátor UP400St sa bežne používa na prípravu tlmivého roztoku na lýzu a následné narušenie buniek.
Literatúra/referencie
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Hielscher Ultrasonics vyrába vysokovýkonné ultrazvukové homogenizers z laboratórium na priemyselnej veľkosti.