Ультразвуковое приготовление сыворотки, обогащённой тромбоцитами

• Обогащённая тромбоцитами плазма (PRP) – это плазма крови, обогащённая тромбоцитами, которая используется для медицинских и эстетических процедур.
• Ультразвуковой лизис и кондиционирование – очень эффективный метод приготовления плазмы, обогащённой тромбоцитами.
• Hielscher Ultrasonics предлагает различные ультразвуковые системы, соответствующие требованиям к обработке крови (например, для приготовления внутри и вне чистого помещения).

Сыворотка, обогащённая тромбоцитами

Обработка ультразвуком – надёжный и простой метод лизиса тромбоцитов в аутологичной сыворотке крови для высвобождения факторов роста. Фракции, полученные из тромбоцитов, – также известные как аутологичная кондиционированная сыворотка (ACS) – используются для восстановления тканей или эстетических процедур. Для получения оптимальных результатов PRP обогащают перед инъекцией.
Для приготовления плазмы, обогащённой факторами роста клеток, обработка ультразвуком является очень эффективным и производительным методом лизиса клеточных мембран и высвобождения практически всех факторов роста клеток из тромбоцитов. Благодаря ультразвуковому лизису и кондиционированию можно использовать даже кровь с антикоагулянтами.
Кондиционирование PRP посредством обработки ультразвуком – удобный и экономичный способ получения концентрированных факторов роста.

Ультразвуковой лизис плазмы, обогащённой тромбоцитами (PRP)

Эффекты ультразвукового лизиса

Ультразвуковая обработка сыворотки крови обеспечивает однородный лизис тромбоцитов для высвобождения содержащихся в них факторов роста (фактора роста AB (PDGF-AB), фактора роста AA (PDGF-AA), фактора роста BB (PDGF-BB), фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), трансформирующего фактора роста β (TGF-β), эпидермального фактора роста (EGF), инсулиноподобного фактора роста (IGF), фактора роста эпителиальных клеток ECGF и фактора роста фибробластов (FGF)). Тромбоциты и их альфа-гранулы разрушаются при обработке ультразвуком с использованием явления акустической кавитации. Использование ультразвуковой кавитации для лизиса тромбоцитов уменьшает возможное негативное влияние метода многократного замораживания и оттаивания на активность факторов роста.

Протокол ультразвукового приготовления PRP

Пробирку с приблизительно 16mL свежесобранного образца аутологичной крови осторожно переворачивают 8–10 раз, чтобы хорошо перемешать кровь и антикоагулянты. Затем образец центрифугируют при 1800 g в течение 20 min при комнатной температуре. После центрифугирования тромбоциты и мононуклеарные клетки образуют беловатый слой в нижней части слоя плазмы, известный как плазма, обогащённая тромбоцитами (PRP). Верхний слой известен как плазма, обеднённая тромбоцитами (PPP). Мононуклеарные клетки можно удалить или оставить в образце. Часто мононуклеарные клетки оставляют в образце PRP, чтобы избежать дополнительных этапов, сопряжённых с риском загрязнения.
Примечание: ультразвуковую обработку аутологичной PRP необходимо проводить в стерильных условиях.
PRP и PPP разделяют и собирают. К PPP добавляют 1,5mL 10% раствора хлорида кальция, а к PRP – 0,5mL 5% этанола. Обе суспензии осторожно перемешивают и оставляют на 5 min при комнатной температуре. Наконец, к суспензии PRP добавляют 1mL PPP и оставляют до образования фибринового сгустка.
Ультразвуковая обработка: Поскольку образовавшийся тромбоцитарный гель служит резервуаром для высвобождённых факторов роста, фибриновый гель необходимо разрушить, чтобы высвободить доступные факторы роста. Параметры ультразвукового лизиса и высвобождения факторов роста следующие: обработайте ультразвуком с помощью UP200Ht или UP200St (200W, 26kHz) с сонотродом S26d2 образец в пробирке. Чтобы избежать перегрева образца крови, обработку ультразвуком можно проводить в импульсных циклах (например, 10 sec. работы, 30 sec. паузы). Образец следует поместить на лёд для охлаждения, чтобы оптимальным образом поддерживать температуру в диапазоне 2 – 5°C. После обработки ультразвуком образец центрифугируют при 16 000 g в течение 5 min. при комнатной температуре. Надосадочную жидкость собирают; её можно хранить при -70°C.
При использовании метода с обработкой ультразвуком концентрация тромбоцитов во фракции PRP увеличивалась в 1,7 – 4,5 раза по сравнению с указанным в литературе средним количеством тромбоцитов в цельной крови.

PRP применяли в сочетании с терапией стволовыми клетками, полученными из жировой ткани (аутологичные стволовые клетки, выделенные из жировой ткани с помощью ультразвука, смешанные с PRP и введённые обратно в ткани пациента для их восстановления).

Ультразвуковое оборудование

Hielscher Ultrasonics специализируется на передовых и надёжных ультразвуковых технологиях. Наши ультразвуковые приборы используются во всём мире для лизиса, экстракции и подготовки образцов – прямым и непрямым способами. Автоклавируемые , а также одноразовые принадлежности обеспечивают свободную от загрязнений обработку образцов аутологичной крови. Большинство наших систем можно использовать для ультразвукового лизиса стволовых клеток и PRP, что делает наши ультразвуковые приборы ещё более экономически эффективными.
В приведённой ниже таблице перечислены наши ультразвуковые приборы, подходящие для приготовления плазмы, обогащённой тромбоцитами, и соответствующие рекомендуемые объёмы образцов. Также доступны ультразвуковые приборы большей мощности и системы, изготовленные по индивидуальному заказу.

Свяжитесь с нами сегодня! Мы будем рады помочь вам подобрать оптимальный ультразвуковой прибор!