Ультразвуковая подготовка сыворотки, обогащенной тромбоцитами

• Обогащенная тромбоцитами плазма (PRP) — это обогащенная тромбоцитами плазма крови, которая используется для медикаментозного и эстетического лечения.
• Ультразвуковой лизис и кондиционирование является очень эффективным методом получения обогащенной тромбоцитами плазмы.
• Hielscher Ultrasonics предлагает различные ультразвуковые системы, соответствующие требованиям обработки крови (например, для внутренней и наружной подготовки чистого помещения).

Сыворотка, богатая тромбоцитами

Ультразвуковая обработка является надежным и простым методом лизирования тромбоцитов в аутологичной сыворотке крови с целью высвобождения факторов роста. Фракции, полученные из тромбоцитов – также известна как аутологичная кондиционированная сыворотка (ACS) – используются для восстановления тканей или эстетических процедур. Для получения оптимальных результатов PRP обогащается перед инъекцией.
Для получения обогащенной плазмы с факторами роста клеток, ультразвук является очень эффективным и действенным методом лизирования клеточных мембран и высвобождения почти полных факторов роста клеток из тромбоцитов. С помощью ультразвукового лизиса и кондиционирования можно использовать даже антисвертывающуюся кровь.
Кондиционирование PRP с помощью ультразвука является удобным и экономически эффективным способом получения концентрированных факторов роста.

Ультразвуковой лизис обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP)

Эффекты ультразвукового лизиса

Ультразвуковая обработка сыворотки крови приводит к гомогенному лизису тромбоцитов с целью высвобождения захваченных факторов роста (фактор роста AB (PDGF-AB), фактор роста AA (PDGF-AA), фактор роста BB (PDGF-BB), фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), трансформирующий фактор роста β (TGF-β), эпидермальный фактор роста (EGF), инсулиноподобный фактор роста (IGF), фактор роста эпителиальных клеток ECGF и фибробластический фактор роста (FGF)). Тромбоциты и их альфа-гранулы разрушаются с помощью ультразвука, используя явление акустическая кавитация. Использование ультразвуковой кавитации для лизиса тромбоцитов снижает возможное негативное влияние на активность фактора роста метода повторного замораживания-размораживания.

Протокол ультразвуковой подготовки ОТР

Около 16 мл свежесобранного образца аутологичной крови аккуратно переворачивают 8-10 раз в пробирке, чтобы кровь и антикоагулянты хорошо перемешались. После этого образец центрифугируют при 1800 g в течение 20 мин при комнатной температуре. После центрифугирования тромбоциты и мононуклеарные клетки образуют беловатый слой в нижней части плазменного слоя, который известен как обогащенная тромбоцитами плазма (PRP). Верхний слой известен как бедная тромбоцитами плазма (PPP). Мононуклеарные элементы могут быть удалены или остаться в образце. Часто мононуклеарные элементы остаются в образце PRP, чтобы избежать дополнительных этапов, которые несут риск заражения.
Примечание: Ультразвуковое лечение аутологичной PRP должно проводиться в стерильных условиях.
ОТР и ППС разделяются и собираются. К PPP добавляют 1,5 мл 10% раствора хлорида кальция, а к PRP 0,5 мл 5% этанола. Обе суспензии осторожно взбалтываются и выдерживаются в течение 5 минут при комнатной температуре. Наконец, 1 мл PPP добавляют в суспензию PRP и дают постоять до образования фибринового сгустка.
Ультразвуковая обработка: Поскольку образовавшийся тромбоцитарный гель действует как резервуар для высвобождаемых факторов роста, фибриновый гель должен быть разрушен, чтобы высвободить имеющиеся факторы роста. Параметры ультразвукового лизиса и высвобождения фактора роста следующие: Ультразвук с УП200Хт или УП200Ст (200 Вт, 26 кГц) с сонотродом S26d2 образец в трубке. Чтобы избежать перегрева образца крови, ультразвуковую обработку можно проводить в пульсирующих циклах (например, 10 секунд включено, 30 секунд выключено). Образец следует поместить на лед для охлаждения так, чтобы температура оптимально поддерживалась в пределах 2 – 5°С. После ультразвуковой обработки образец центрифугируют при 16000 g в течение 5 мин. при комнатной температуре. Надосадочная жидкость собирается и может храниться при температуре -70°C.
Концентрация тромбоцитов во фракции PRP была обогащена в 1,7 – В 4,5 раза при ультразвуковом методе по сравнению с литературным средним количеством тромбоцитов в цельной крови.

PRP сочетается с терапией стволовыми клетками, полученными из жировой ткани (Ультразвуковое высвобождение аутологичных стволовых клеток из жировой ткани, смешанный с PRP, и вводимый обратно в ткани пациента для восстановления).

Ультразвуковое оборудование

Hielscher Ultrasonics является экспертом в области сложных и надежных ультразвуковых технологий. Наши ультразвуковые аппараты используются во всем мире для лизиса, экстракции и пробоподготовки – на прямое и косвенное. Автоклавируемый а также одноразовый Аксессуары обеспечивают без загрязнений обработка аутологичных образцов крови. Большинство наших систем могут быть использованы для ультразвукового лизиса стволовые клетки и PRP, что делает наши ультразвуковые аппараты еще более экономически эффективными.
В данной таблице ниже перечислены наши ультразвуковые аппараты, которые подходят для получения обогащенной тромбоцитами плазмы, и их рекомендуемый объем образца соответственно. Также доступны более крупные ультразвуковые аппараты и специализированные системы.

Пожалуйста, свяжитесь с нами сегодня! Мы будем рады помочь Вам в поиске оптимального ультразвукового аппарата!