Элюирование антител с помощью ультразвука с использованием высокопроизводительного ультразвука

Аффинная хроматография является мощным методом очистки белков, который требует Ультразвуковое неспецифическое элюирование является надежным методом подготовки образцов для получения антител с помощью аффинной хроматографии. Эффективное и воспроизводимое элюирование целевых антител, связанных с аффинными матрицами, значительно улучшается с помощью ультразвуковой обработки. Высокопроизводительный пластинчатый ультразвуковой UIP400MTP оптимально подходит для элюирования большого количества образцов в 96-луночных, микротитровых и многолуночных планшетах и облегчает восстановление антител в аффинной хроматографии.

Как ультразвук способствует элюированию?

Используя неспецифическое элюирование с ультразвуковой интенсацией, сотрудники лабораторий и ученые могут эффективно извлекать очищенные антитела из колонок аффинной хроматографии. Эти очищенные антитела используются в различных областях, таких как иммунология, биотехнология и медицинская диагностика.

Элюирование — это этап подготовки образца, обычно используемый для аффинной хроматографии: Аффинная хроматография использует высокоспецифичные взаимодействия между молекулой-мишенью (например, антителом) и лигандом, иммобилизованным на хроматографической матрице. Это позволяет селективно очищать целевую молекулу от сложной смеси с использованием специфического сродства связывания молекул, например, антител.
Специфическое связывание антител: Антитела часто очищают с помощью аффинной хроматографии, где они селективно связываются с лигандом, иммобилизованным на хроматографической смоле. Это может быть антиген, белок A/G или любая другая молекула, которая специфически взаимодействует с интересующим антителом.
Элюция: После связывания антитела-мишени с матриксом следующим этапом является элюирование (или вымывание) связанного антитела из смолы. Этот этап элюирования обычно включает в себя нарушение специфического связывания между антителом и лигандом. Этот этап может быть выполнен с помощью ультразвуковой обработки.
Ультразвуковой датчик UP50H - это лабораторный гомогенизатор, часто используемый в лабораториях в качестве разрушителя клеток, диспергатора и эмульгатора.Ультразвуковое неспецифическое элюирование: В отличие от специфических методов элюирования, которые нарушают только взаимодействие антитело-лиганд, неспецифические методы элюирования нарушают все взаимодействия на смоле, в том числе и неспецифические. Это может быть полезно при работе с сильно связанными загрязняющими веществами, которые могут помешать процессу очистки. Здесь в игру вступает ультразвук! Ультразвуковые волны используются для генерации кавитационных пузырьков в элюирующем буфере. Когда эти пузырьки схлопываются рядом со смоляной матрицей, они создают интенсивные локализованные силы сдвига и микропотоки. Это механическое нарушение помогает нарушить неспецифические взаимодействия между антителом и лигандом, облегчая элюирование связанного антитела из матрикса.

96-луночные планшеты и другие многолуночные планшеты лучше всего обрабатывать с помощью ультразвукового UIP400MTP. Эта ультразвуковая система идеально подходит для обработки образцов лизиса, фрагментации ДНК и солюбилизации клеток с высокой пропускной способностью.

Высокопроизводительный ультразвуковой UIP400MTP облегчает вымывание антител и белков

Запрос информации




Обратите внимание на наши политика конфиденциальности,


 

В этом учебном пособии объясняется, какой тип ультразвукового аппарата лучше всего подходит для ваших задач пробоподготовки, таких как лизис, разрушение клеток, выделение белка, фрагментация ДНК и РНК в лабораториях, анализ и исследования. Выберите идеальный тип ультразвукового аппарата для вашего применения, объем образца, количество образцов и пропускную способность. У Hielscher Ultrasonics есть идеальный ультразвуковой гомогенизатор для вас!

Как найти идеальный ультразвуковой аппарат для разрушения клеток и экстракции белка в науке и анализе

Миниатюра видео

 

Преимущества ультразвукового элюирования с помощью ультразвуковой обработки

Ультразвуковое элюирование имеет ряд преимуществ, особенно в контексте методов очистки белков, таких как аффинная хроматография.
Например, ультразвуковая обработка превосходит альтернативные методы с точки зрения целостности белка, восстановления, чистоты, универсальности и эффективности. Эти преимущества делают ультразвуковое элюирование предпочтительным выбором для процессов очистки белка, особенно в тех случаях, когда важно поддерживать структуру и активность белка. Кроме того, ультразвуковое элюирование отличается простотой, эффективностью, универсальностью и совместимостью с широким спектром белков и аффинных матриц. Применяя ультразвуковые волны для нарушения взаимодействия белка с матриксом, ультразвуковое элюирование предлагает щадящий и быстрый метод очистки белка, обеспечивая высокую скорость восстановления и сохраняя целостность белка для последующих применений.

Щадящее отношение к структуре белка: Элюирование с низким pH включает в себя использование кислых буферов для нарушения связывания между белком-мишенью (например, антителами) и аффинной матрицей. Однако воздействие низкого рН может денатурировать белки, потенциально ставя под угрозу их структуру и биологическую активность. Напротив, ультразвуковое элюирование в первую очередь полагается на механическое разрушение, а не на химическую денатурацию, что делает его более щадящим для структуры белка. Это особенно полезно при очистке нежных белков или антител, чувствительных к изменениям pH.

  • Снижение риска агрегации: Элюирование с низким pH может увеличить риск агрегации белка из-за развертывания белка и воздействия гидрофобных областей. Агрегация может привести к потере активности белка и трудностям в последующей обработке. Ультразвуковое элюирование, напротив, сводит к минимуму риск агрегации за счет использования механических сил для нарушения взаимодействия между белком и аффинной матрицей без существенного изменения нативной конформации белка.
  • Улучшенное восстановление и чистота: Ультразвуковое элюирование позволяет достичь более высокой скорости восстановления и уровня чистоты по сравнению с альтернативными методами элюирования. Механическое разрушение, обеспечиваемое ультразвуком, эффективно высвобождает связанные белки из аффинного матрикса, сводя к минимуму неспецифические взаимодействия. Это приводит к ускоренному извлечению целевого белка с уменьшением загрязнения неспецифически связанными молекулами, что способствует более высокой чистоте элюированной фракции.
  • Высокопроизводительная обработка: Hielscher Ultrasonics предлагает различные ультразвуковые аппараты для ультразвуковой очистки, элюирования и биопанорамирования белков. Микротитровый планшет-ультразвуковой UIP400MTP позволяет проводить массовую обработку образцов в 96-луночных и других многолуночных планшетах. Твитер VialTweeter идеально подходит для одновременной ультразвуковой обработки до 10 ламп, таких как флаконы Eppendorf, в одинаковых условиях. CupHorn - это универсальный ультразвуковой аппарат, идеально подходящий для нескольких пробирок, небольших стаканов и других сосудов. И, конечно же, классические ультразвуковые аппараты зондового типа с микронаконечниками являются хорошо зарекомендовавшим себя лабораторным инструментом для пробоподготовки. В ассортименте продукции Hielscher Ultrasonics есть идеальный ультразвуковой аппарат для вашей экспериментальной установки и размера образца.
  • Универсальность и совместимость: Ультразвуковое элюирование совместимо с широким спектром белков и аффинных матриц, что обеспечивает универсальность в приложениях очистки. Напротив, элюирование с низким pH может не подходить для определенных белков, чувствительных к кислым условиям, или для аффинных матриц, склонных к деградации или выщелачиванию при низком pH. Ультразвуковое элюирование представляет собой щадящую и универсальную альтернативу, которая может быть адаптирована к конкретным потребностям очистки без ущерба для целостности белка или стабильности матрикса.
  • Время и эффективность: Ультразвуковое элюирование обычно требует более короткого времени элюирования по сравнению с другими методами элюирования. Быстрое и эффективное высвобождение связанных белков с помощью ультразвука сокращает время обработки и повышает общую эффективность очистки, что делает его привлекательным вариантом для высокопроизводительных применений или когда требуются чувствительные ко времени результаты.
96-луночный пластинчатый ультразвуковой UIP400MTP для лизиса клеток, экстракции ДНК, фрагментации ДНК, солюбилизации клеток и очистки белка.

96-луночный сенсорный ультразвуковой аппарат UIP400MTP для ультразвуковой обработки многолуночных планшетов, ПЦР и ИФА планшетов

 

VialTweeter на ультразвуковом процессоре UP200ST

Ультразвуковой аппарат VialTweeter для одновременного ультразвукового анализа 10 образцов, например, для разрушения клеток и извлечения белков

Биопанорамирование с ультразвуковым сопровождением

Биопанирование является критически важным методом в очистке антител, особенно когда необходимо получить высокоспецифичные антитела для исследований или медицинской диагностики. Биопанорамирование – это процесс, при котором антитела выделяются из смеси антител, так называемой библиотеки антител.

Как работает ультразвуковое биопанорамирование?

Все начинается с библиотеки антител, смеси различных антител. Каждое антитело характеризуется своей уникальной формой и специфичностью. Для анализа и лечения необходимо выделить специфические антитела, которые распознают конкретную мишень, например, вирус или раковую клетку. С помощью биопанорамирования эти специфические антитела могут быть выделены. Ультразвук помогает облегчить процесс биопанорамирования, делая очистку антител более эффективной.

Начиная с библиотеки антител, антитела обычно отображаются на поверхности бактериофага, дрожжевой клетки или другой системы отображения. В этой библиотеке представлен разнообразный спектр антител.
На первом этапе эта библиотека подвергается воздействию целевой молекулы. Антитела, которые связываются с мишенью, будут прилипать, в то время как другие будут смываться. Для удаления несвязанных антител образцы несколько раз промывают буферным раствором.

Теперь у нас есть образцы, содержащие только связанные антитела. Однако это означает, что антитела по-прежнему прикреплены к своей системе отображения. Чтобы освободить их, взаимодействие антитело-лиганд должно быть нарушено. Этот шаг называется элюированием. Образцы могут быть элюированы с помощью раствора, который нарушает связывание, например, с помощью специального элюирующего буфера, хаотропного метода, снижения значения pH, применения тепла и т. д. Эти методы элюирования разрушают связывание антитело-лиганд, но также могут ухудшить сами антитела. Вот почему ультразвуковая терапия используется в качестве альтернативного метода для мягкого удаления антител из их мишени.

После завершения этапа элюирования мы получаем очищенные антитела, готовые к использованию в исследованиях, диагностике или терапии.

Биопанирование является мощным методом очистки антител, а ультразвуковое элюирование облегчает и усиливает эффективность – в результате образуются высокоочищенные, неповрежденные антитела. Ультразвуковое биопанорамирование позволяет ученым выделять высокоспецифичные антитела из сложных образцов, открывая двери для широкого спектра применений.

Ультразвуковые аппараты для очистки антител

Ультразвуковые аппараты Hielscher - это хорошо зарекомендовавшие себя инструменты, используемые в лучших исследовательских центрах по всему миру. Высоко ценимые за свой современный дизайн и превосходную производительность, ультразвуковые аппараты Hielscher считаются незаменимыми лабораторными инструментами в области биотехнологии и молекулярной биологии. Hielscher Ultrasonics предлагает ультразвуковые аппараты как для одиночного образца, так и для высокопроизводительной пробоподготовки, которые способствуют эффективной очистке антител и элюированию молекул, связанных с мишенью, а также обеспечивают эффективное биопанорамирование для выделения специфических антител с высокой точностью и скоростью.
В контексте очистки антител ультразвуковые аппараты Hielscher превосходно справляются с этапами промывки и элюирования, эффективно удаляя несвязанные антитела, сохраняя при этом целостность целевых комплексов. Их точное управление и масштабируемость позволяют создавать индивидуальные условия обработки, обеспечивая оптимальные результаты очистки в широком диапазоне объемов и сложности образцов.
Ультразвуковые аппараты Hielscher представляют собой технологическую инновацию в ультразвуковой обработке, предлагая беспрецедентные возможности для очистки, элюирования и биопанорамирования антител. Благодаря своей точности, надежности и простоте эксплуатации различные ультразвуковые системы обеспечивают оптимальную эффективность и универсальность для биофармацевтических исследований, диагностики и терапии.
Свяжитесь с нами прямо сейчас, чтобы узнать больше о ультразвуковых аппаратах Hielscher для очистки, элюирования и биопанорамирования антител! Наш опытный технический персонал будет рад обсудить ваше применение, связанное с антителами!

Почему Хильшер Ультразвук?

  • высокая эффективность
  • Современные технологии
  • надежность & прочность
  • Регулируемое, точное управление процессом
  • партия & в очереди
  • для любого объема
  • интеллектуальное программное обеспечение
  • интеллектуальные функции (например, программируемые, протоколирование данных, дистанционное управление)
  • Легко и безопасно работать
  • Низкие расходы
  • CIP (чистый на месте)

Запрос информации




Обратите внимание на наши политика конфиденциальности,


Проектирование, производство и консалтинг – Качество Сделано в Германии

Ультразвуковые аппараты Hielscher хорошо известны своим высочайшим качеством и стандартами дизайна. Надежность и простота в эксплуатации обеспечивают плавную интеграцию наших ультразвуковых аппаратов в промышленные объекты. Жесткие условия и требовательные условия легко обрабатываются ультразвуковыми аппаратами Hielscher.

Hielscher Ultrasonics является компанией, сертифицированной ISO, и уделяет особое внимание высокопроизводительным ультразвуковым аппаратам, оснащенным самыми современными технологиями и удобством для пользователя. Конечно, ультразвуковые аппараты Hielscher соответствуют требованиям CE и соответствуют требованиям UL, CSA и RoHs.

Свяжитесь с нами! / Спросите нас!

Запросить дополнительную информацию

Пожалуйста, используйте форму ниже, чтобы запросить дополнительную информацию об ультразвуковых процессорах, приложениях и цене. Мы будем рады обсудить с вами ваш процесс и предложить вам ультразвуковую систему, отвечающую вашим требованиям!









Пожалуйста, обратите внимание на наши политика конфиденциальности,


На видео показана ультразвуковая система пробоподготовки UIP400MTP, которая позволяет осуществлять надежную пробоподготовку любых стандартных многоскважинных пластин с использованием высокоинтенсивного ультразвука. Типичные применения UIP400MTP включают лизис клеток, сдвиг ДНК, РНК и хроматина, а также экстракцию белка.

Ультразвуковой UIP400MTP для мульти-хорошо звуковой пластины

Миниатюра видео

Сравнение ультразвукового элюирования с традиционными методами элюирования

  1. Градиентное элюирование: При градиентном элюировании прочность связи между белком-мишенью и аффинной матрицей постепенно снижается за счет изменения состава элюирующего буфера. Это может включать в себя изменение факторов, таких как pH, концентрация соли или концентрация конкурирующих лигандов. Градиентное элюирование позволяет точно настроить условия элюирования для селективного высвобождения целевого белка при минимизации неспецифического связывания.
    Преимущества ультразвукового элюирования: Ультразвуковое элюирование обеспечивает более быстрое и равномерное высвобождение связанных белков по сравнению с градиентным элюированием. В то время как градиентное элюирование требует тщательной оптимизации и мониторинга условий элюирования, ультразвуковое элюирование обеспечивает более простой и эффективный метод извлечения белка.
  2. Соревновательная выносливость: При конкурентном элюировании высокая концентрация конкурирующего лиганда вводится в буфер элюирования, чтобы нарушить связывание между белком-мишенью и аффинной матрицей. Конкурирующий лиганд конкурирует с белком-мишенью за сайты связывания на матриксе, тем самым вытесняя белок и высвобождая его в элюат.
    Преимущества ультразвукового элюирования: Ультразвуковое элюирование является более щадящей и универсальной альтернативой конкурентному элюированию. Конкурентное элюирование может потребовать использования высоких концентраций хаотропных агентов (т.е. сорастворенного вещества, которое нарушает сеть водородных связей между молекулами воды и снижает стабильность нативного состояния белков за счет ослабления гидрофобного эффекта) или агрессивных химических веществ, которые могут повлиять на стабильность и активность белка. Напротив, ультразвуковое элюирование обеспечивает механическое разрушение без необходимости использования дополнительных химических агентов, сохраняя целостность белка и обеспечивая высокую скорость восстановления.
  3. Температурно-индуцированное элюирование: Температурно-индуцированное элюирование включает в себя изменение температуры элюирующего буфера, чтобы нарушить связывание между целевым белком и аффинной матрицей. Это может быть достигнуто либо повышением, либо понижением температуры, в зависимости от конкретного взаимодействия белка с матриксом.
    Преимущества ультразвукового элюирования: Ультразвуковое элюирование является более быстрым и контролируемым методом элюирования белков по сравнению с методами, индуцированными температурой. В то время как температурно-индуцированное элюирование может потребовать точного контроля температурных градиентов и более длительного времени равновесия, ультразвуковое элюирование обеспечивает немедленное механическое разрушение, что приводит к сокращению времени элюирования и повышению эффективности.
  4. Ферментативное элюирование: При ферментативном элюировании используются специфические ферменты, которые расщепляют связи между белком-мишенью и аффинной матрицей, высвобождая белок в элюат. Этот метод особенно полезен для белков, которые тесно связаны с матрицей, или для приложений, требующих точного контроля условий элюирования.
    Преимущества ультразвукового элюирования: Ультразвуковое элюирование является неферментативной и не содержащей химикатов альтернативой ферментативному элюированию. В то время как ферментативное элюирование может потребовать оптимизации концентрации фермента, инкубационного времени и условий pH, ультразвуковое элюирование обеспечивает простой и универсально применимый метод восстановления белка без необходимости использования дополнительных реагентов или специализированного оборудования.
Ультразвуковой прибор для высокопроизводительной пробоподготовки! Ультразвуковой аппарат UIP400MTP планшетов облегчает лизис, экстракцию белка, фрагментацию ДНК и клеточную солюбилизацию биологических образцов в 96-луночных планшетах.

Планшетный ультразвуковой UIP400MTP для любых 96-луночных планшетов, микротитровых планшетов и многолуночных планшетов.



Литература / Ссылки


Высокоэффективный ультразвук! Ассортимент продукции Hielscher охватывает весь спектр от компактного лабораторного ультразвукового аппарата до полностью промышленных ультразвуковых систем.

Hielscher Ultrasonics производит высокую производительность ультразвуковых гомогенизаторов из лаборатория в промышленного размера.


Мы будем рады обсудить ваш процесс.

Давайте свяжемся.