• Particionamento trifásico (TPF) é uma técnica para extrair, separar e purificar componentes, por exemplo, lipídios, enzimas, polissacarídeos e outras biomoléculas, a partir de material biológico.
• O particionamento trifásico auxiliado por ultrassom excede o TPP convencional por maior rendimento, pureza aprimorada e velocidade excepcional.
• O TPP ultrassônico é aplicável para pequenos e grandes volumes e pode ser facilmente dimensionado para a produção industrial.

Partição trifásica ultra-sônica

Particionamento Trifásico

Particionamento trifásico (TPF) é um processo simples e eficiente de uma etapa para a separação, purificação e concentração de biomoléculas, como enzimas, lipídios, polissacarídeos, etc. a partir de misturas complexas.
A TPP é realizada pela adição sequencial de uma quantidade suficiente de sal (tipicamente sulfato de amónio) e um solvente orgânico (principalmente T-butanol /terc-butanol). Sais como o sulfato de amônio são usados ​​em uma certa saturação para precipitar a proteína. Um solvente orgânico como T-butanol é adicionado para formar camadas de três fases e para remover compostos de baixo peso molecular, tais como lípidos, fenólicos e alguns detergentes. Desde a T-butanol tem alto ponto de ebulição, mas é menos inflamável que etanol e metanol, T-butanol é o solvente preferido para TPP.
Após o tratamento do extrato bruto e da decantação, a mistura separa-se em três fases distintas: o solvente superior (T-butanol) contém compostos não polares, que são separados da fase aquosa inferior (contendo compostos polares) por um precipitado proteico interfacial. As proteínas desejadas são seletivamente divididas em uma fase e outras proteínas contaminantes na outra fase. Isso causa purificação parcial e concentração da proteína. O processo de extração é uma fusão de precipitação cosmotrópica, salivar, co-solvente isotônico e osmolítica de proteínas.

Ultra-som avançado TPP

A sonicação intensifica significativamente o processo tpp. O TPP ultrassonicamente assistido é aplicado com sucesso para a separação e purificação de biomoléculas. Uma ampla gama de biomoéculas foram isoladas de forma mais eficiente em menos tempo. Por exemplo, enzimas de plantas (por exemplo, bromelain, papaína, invertase, polifenóis oxidase e inibidores de tripsina), animais (por exemplo. tripsina, α-quimometria, quimosina, pepsina e luciferase) e micróbios (por exemplo, lipase, α-amilase, α-galactosidase, serratiopeptidase, ciclodextrina glicosyltransferase e enzimas fibrinolíticas) foram purificados via TPP ultrassônico. Um benefício adicional do TPP ultrassônico é a atividade aprimorada de várias enzimas, resultando em rendimentos aparentes mais elevados (>100%) uma vez que a enzima ou proteína alvo precipita-se na camada média entre as fases orgânica e aquosa.
O TPP ultra-sônico pode ser usado efetivamente com amostras brutas e pode ser facilmente ampliado.

Exemplos para o US-TPP

TPP ultra-sônico para a extração de astaxantina

Para a extração de astaxantina (AX), o tratamento combinado de TPP e sonicação com Hielscher UP400S Não é apenas simples e facilmente aplicável, mas também uma técnica muito eficiente para isolar o AX da biomassa bacteriana do Paracoccus NBRC 101723. As variáveis ​​operacionais da sonicação podem ser otimizadas para obter resultados ótimos de extração. Os parâmetros de processamento ultrassônico, como amplitude, tempo, temperatura e vaso de extração (tamanho, forma), bem como o tamanho de partícula da biomassa, afetam significativamente a liberação ultra-sônica de AX da biomassa. Ultrasonication da biomassa úmida dá melhores resultados do que a ultra-sônica TPP de biomassa seca para a extração rápida e eficiente de AX. O TPP ultrassônico resulta em uma recuperação de AX 37% maior do que a extração convencional com solvente. (cf. Chougle et al. 2013)

TPP ultra-sônico para a separação de andrographolide de Andrographis paniculata

Andrographolide é um diterpeno labdano, que é valorizado por seus altos efeitos antiinflamatórios, antioxidantes, hepatoprotetores, anticancerígenos e antidiabéticos. Estudos comparativos mostram que a TPP ultrassônica não apenas aumentou o rendimento da andrographolida, mas também melhorou a atividade antioxidante em comparação com a TPP convencional.

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