Ultraskaņas audu homogenizatori
- Ultrasonication ir drošs & efektīva audu homogenizācijas metode.
- Ultraskaņas lietojumi ietver sagatavošanas audus un suspensijas, proteīnu, DNS / RNS un aktīvo savienojumu ekstrakciju, kā arī fermentu un raugu aktivizēšanu / inaktivāciju.
- Zondes tipa ultraskaņas homogenizatoru precīza vadāmība ļauj droši sagatavot audu paraugus.
Audu homogenizācija, izmantojot ultraskaņas zondes
Audu homogenizācija ir paraugu sagatavošanas process, kurā dzīvnieku un augu šūnas vai mikroorganismi tiek sagatavoti pirms intracelulārās vielas, piemēram, olbaltumvielu, DNS vai RNS, ekstrakcijas. Lai atbrīvotu šūnas saturu, šūnai membranam jābūt plīsušam. Pēc šūnu sienas laušanas intracelulārās makromolekulas peld buferšķīdumā, lai kļūtu pieejamas organellas, proteīni un DNS / RNS. Ultraskaņas audu homogenizatori un šūnu traucētāji ir ļoti efektīvi instrumenti šūnu darbības traucējumiem, līzei un ekstrakcijai.
Ultraskaņas audu homogenizatori vs alternatīvas līzes metodes
Jūs varētu sev pajautāt, kāda šūnu darbības traucējumu tehnika un kuras audu homogenizācijas iekārtas ir labākais risinājums jūsu laboratorijai. Zemāk jūs varat atrast dažus argumentus, kas runā par ultraskaņas līzi un audu homogenizāciju, jo ultrasonication ir vairākas priekšrocības salīdzinājumā ar alternatīvām homogenizācijas metodēm:
- Efektivitāte: Ultraskaņas homogenizācija ir ātra un efektīva metode audu un šūnu izjaukšanai. Ultraskaņas audu homogenizatori izmanto akustiskās kavitācijas darba principu. Šī metode ir ļoti efektīva un dažu sekunžu laikā var izjaukt šūnas. Tā kā intensitātes līmeni var pielāgot no vieglas līdz intensīvai, ultraskaņas apstrāde ir īpaši efektīva cietiem vai šķiedru audiem, kurus ir grūti homogenizēt, izmantojot citas metodes.
- Izvairieties no savstarpējas piesārņošanas: Hielscher piedāvā spēcīgus ultraskaņas audu homogenizatorus, kas sagatavo paraugu netiešā ultraskaņas apstrādē. Ar UIP400MTP (ideāli piemērots mikrotitrēšanai un multiwell plāksnēm), kā arī VialTweeter un CupHorn (ideāli piemērots flakoniem, mēģenēm un vārglāzēm) Hielscher piedāvā ultraskaņas šūnu traucējumu aprīkojumu bezkontakta homogenizācijai, kas samazina savstarpējas inficēšanās risku starp paraugiem. Tas arī samazina piesārņotāju ievešanas risku no slīpēšanas virsmām vai citām homogenizācijas iekārtām.
- Elastību: Ultraskaņas homogenizāciju var izmantot ar dažādiem paraugu izmēriem un apjomiem, sākot no maziem apjomiem līdz lieliem audu paraugiem. Turklāt ultraskaņas homogenizācija ir piemērota arī plašam paraugu tipu klāstam, ieskaitot augu audus, dzīvnieku audus un mikrobu kultūras. Ultrasonication intensitāti un ilgumu var pielāgot, lai optimizētu traucējumu līmeni dažāda veida audiem.
- Reproducējamība: Ultraskaņas homogenizācija nodrošina konsekventus rezultātus un ļauj precīzi kontrolēt homogenizācijas parametrus, piemēram, jaudu un ultraskaņas apstrādes laiku. Tas palīdz nodrošināt eksperimentālo datu reproducējamību un precizitāti.
- Biomolekulu saglabāšana: Zondes tipa ultrasonication ir netermiska apstrāde. Tas nozīmē, ka tā ietekme nav balstīta uz siltumu. Tomēr katra mehāniskā apstrāde rada siltumu saskaņā ar otro termodinamikas likumu. Tas nozīmē, ka paraugs kļūst siltāks ilgākā ultraskaņas apstrādes laikā. Hielscher vismodernākie ultrasonikatori ir aprīkoti ar temperatūras sensoriem un viedu temperatūras uzraudzības programmatūru. Izsmalcinātas dzesēšanas iespējas ļauj novērst siltuma noārdīšanos un palīdz saglabāt karstumjutīgu biomolekulu, piemēram, fermentu un olbaltumvielu, aktivitāti.
- Laika taupīšana: Zondes tipa ultrasonication augstā efektivitāte ļauj ātri homogenizēt audus, kas ietaupa laiku salīdzinājumā ar citām metodēm, kurām nepieciešama plašāka fiziska manipulācija ar audiem.
Ultraskaņas audu homogenizācija piedāvā vairākas priekšrocības salīdzinājumā ar alternatīvām homogenizācijas metodēm. Tāpēc ultraskaņas audu homogenizatori ir vēlamā šūnu darbības traucējumu metode dažādos pētījumos un rūpnieciskos lietojumos.
Piemērs audu homogenizācijas protokolam, izmantojot ultraskaņas zondi:
Ultrasonikatori atvieglo audu homogenizāciju ar vienkāršu darbību un ātru homogenizācijas procedūru. Tajā pašā laikā ultraskaņas procesa parametrus var atkārtoti kontrolēt un uzraudzīt, lai rezultāti būtu ticami un reproduicible.
Materiāli:
- Audu paraugs (piemēram, aknas, smadzenes, muskuļi)
- Buferšķīdums (piemēram, PBS, Tris-HCl)
- Proteāzes inhibitoru kokteilis
- Ultraskaņas homogenizators (zondes tipa)
- Ledus
- mikrocentrifūgas mēģenes
- Pipetes
Ultraskaņas audu homogenizācijas protokols:
Piezīme: Ultraskaņas apstrādes ilgums un intensitāte var būt jāoptimizē atkarībā no audu veida, vecuma un veselības stāvokļa, kā arī no konkrētiem pakārtotajiem lietojumiem. Ir svarīgi arī rūpīgi izvēlēties buferšķīdumu, proteāzes inhibitorus un citas piedevas, lai optimizētu homogenāta ražu un kvalitāti.
Hielscher ultraskaņas audu homogenizatoru galvenās priekšrocības
- ātra un efektīva slīpēšana, homogenizācija, līze & šūnu darbības traucējumi vai ekstrakcija ar spēcīgu ultraskaņas kavitāciju
- viegla un intuitīva lietošana un darbība (izvēlieties analogo vai digitālo versiju)
- viegli notīrīt virsmas, kas nonāk saskarē ar produktu, skalojot sonotrode ar ultraskaņu (CIP clean-in-place / SIP sterilizē-in-place)
- skaņas aizsardzības kaste (laboratorijas ierīču skaņas aizsardzības kaste ir pilnībā izgatavota no akrila stikla, lai nodrošinātu pilnīgu redzamību no jebkura leņķa)
- pilnīga procesa parametru kontrole, izmantojot digitālo skārienekrānu ierīcē (digitālie ultrasonatori) vai powermetrs (analogajām ierīcēm)
- integrēta temperatūras kontrole (svarīga karstumjutīgiem, labiliem audu paraugiem)
- Homogenizācijas skrējiena pauzes var atsevišķi definēt un iepriekš iestatīt digitālajā izvēlnē
- visas digitālās ierīces ir aprīkotas ar automātisku datu ierakstīšanu (integrētā SD/USB-ComboCard), pievienojamu temperatūras sensoru un pārlūka tālvadības pulti.
- Vairāku paraugu apstrāde ar VialTweeter, Cuphorn vai izmantojot 4 vai 8 pirkstu sonotrodes (piemēram, integrēšanai laboratorijas robotu procesos)
- maza mēroga un liela mēroga lietojumiem
Zemāk redzamajā tabulā ir sniegta norāde par mūsu ultraskaņas audu homogenizatoru aptuveno apstrādes jaudu šūnu sadalīšanai, līzei un ekstrakcijai:
Partijas apjoms | Plūsmas ātrums | Ieteicamās ierīces |
---|---|---|
Vairāku urbumu plāksnes | Nav | UIP400MTP |
flakoni, maza vārglāze | Nav | Ultraskaņas CupHorn |
līdz 10 flakoniem | Nav | VialTweeter |
1 līdz 500 ml | 10 līdz 200 ml/min | UP100H |
10 līdz 2000 ml | 20 līdz 400 ml/min | UP200Ht, UP400St |
0.1 līdz 20L | 02 līdz 4 l/min | UIP2000hdT |
Sazinieties ar mums! / Jautājiet mums!
Atrodiet optimālo ultraskaņas audu homogenizatoru savam lietojumam
Hielscher ultraskaņas audu homogenizatori ir pieejami ar ultraskaņas izejas diapazonu no 50W līdz 16,000W (16kW).
Laboratorijas darbinieki ir apmierināti ar vienkāršu un intuitīvu Hielscher ultraskaņas laboratorijas homogenizatoru darbību. Atkarībā no īpašajām prasībām Hielscher ierīcēm ir digitālā vai analogā vadība.
- The VialTweeter ir spēcīgs ultraskaņas homogenizators, kas ļauj vienlaicīgi apstrādāt ar ultraskaņu līdz 10 flakoniem vai mēģenēm ar tādu pašu intensitāti. Netiešās ultraskaņas apstrādes dēļ pilnībā tiek novērsta savstarpēja piesārņošana un paraugu zudums. Tīrīšana un dezinficēšana tiek samazināta līdz minimumam, jo tiek izmantoti vienreizējās lietošanas flakoni. Bloks sonotrode ir autoklavējams.
- The UIP400MTP Plate-Sonicator ir ideāli piemērots, ja strādājat ar mikrotitru un vairāku urbumu plāksnēm, piemēram, 96 urbumu plāksnēm. Vienkārši ievietojiet savu daudzslāņu plāksni vai Petri trauku UIP400MTP, un visi paraugi tiek vienmērīgi apstrādāti ar ultraskaņu. Izmantojot UIP400MTP Plate-Sonicator, augstas caurlaidspējas paraugu apstrāde kļūst vienkārša un efektīva!
- Zondes tipa laboratorijas ultrasonikatoru diapazonā homogenizatorus var izvēlēties ar 50 vatiem, 100 vatiem, 200 vatiem un 400 vatiem.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)
Ultraskaņas audu homogenizatoru pielietojums un izmantošana
Ultraskaņas homogenizatori parasti tiek izmantoti audu slīpēšanai, šūnu darbības traucējumiem & bioloģisko paraugu līze un homogenizācija pirms intracelulārās vielas ekstrakcijas molekulārajā diapazonā. Ar kontrolētu paraugu apstrādi ar ultraskaņu visus soļus no līzes līdz ekstrakcijai un homogenizācijai var veikt, izmantojot to pašu ultraskaņas šūnu traucētāju.
Ultraskaņas homogenizatoru lielā priekšrocība ir viegli regulējama jaudas ievade un ultraskaņas intensitāte. Hielscher ultraskaņas šūnu traucētāji (lysers) ļauj kontrolēt ultraskaņas intensitāti, pielāgojot amplitūdu no 20% līdz 100%.
Alternatīvi nepārtrauktai darbībai ultraskaņas homogenizatoru var iestatīt uz cikla režīmu, piemēram, karstumjutīgu audu apstrādei ar ultraskaņu. Ultraskaņas apstrāde impulsa režīmā nozīmē, ka ultrasonikators periodiskos ciklos rada augstas intensitātes ultraskaņas viļņus. Ultraskaņas perioda ilgumu un atpūtas laiku lietotājs var noteikt individuāli.
pie Pulsējoša ultraskaņas apstrāde, atpūtas periodā sonikētais materiāls var atgriezties miera stāvoklī un paraugs var atdzist (izmantojot atpūtas laiku siltuma izkliedei). Tādējādi apstrādes intensitāti var precīzi iestatīt atbilstoši audiem un samazinās nevēlama parauga sildīšana.
Ultraskaņas audu homogenizatori ir izturīgi un lietotājam draudzīgi, vienlaikus radot ticamus rezultātus, nodrošinot reproducējamību, pateicoties pilnīgai kontrolei pār visiem svarīgajiem procesa parametriem.
Parastie ultraskaņas audu slīpēšanas, šūnu darbības traucējumu, līzes, ekstrakcijas un homogenizācijas pielietojumi ir atrodami bioloģiskajās un farmācijas laboratorijās, mikrobioloģijā, proteomikas un genoma pētījumos (piemēram, olbaltumvielu izdalīšanās pirms Western blotēšanas un ar fermentiem saistītā imūnsorbcijas testa ELISA), kā arī botānisko ekstraktu un bioaktīvo savienojumu ražošanā pārtikas, farmācijas un kosmētikas rūpniecībai.
- Noklikšķiniet šeit, lai iegūtu konkrētus procesa ieteikumus attiecībā uz paraugu sagatavošanu, audu homogenizāciju, līzi un ekstrakciju (piemēram, šūnām, baktērijām, sporām, aktīvajiem savienojumiem)!
- Lasiet šeit, kāpēc sonikatori ir neaizstājams proteomikas pētījumu līdzeklis!
- Uzziniet, kā ultraskaņas apstrāde atvieglo genoma izpētes darbu!
Literatūra / Atsauces
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Fakti, kurus ir vērts zināt
Ultraskaņas audu homogenizatori bieži tiek saukti par zondes sonikatoru, skaņas lizeru, ultraskaņas traucētāju, ultraskaņas dzirnaviņu, sono-ruptoru, sonifikatoru, skaņas dismembratoru, šūnu traucētāju, ultraskaņas izkliedētāju vai šķīdinātāju. Dažādie termini izriet no dažādām lietojumprogrammām, kuras var izpildīt ar ultraskaņu.