Trombocītiem bagāta seruma ultraskaņas sagatavošana
- Trombocītiem bagāta plazma (PRP) ir asins plazma, kas bagātināta ar trombocītiem, ko izmanto medicīniskai un estētiskai ārstēšanai.
- Ultraskaņas līze un kondicionēšana ir ļoti efektīva metode, lai sagatavotu trombocītiem bagātu plazmu.
- Hielscher Ultrasonics piedāvā dažādas ultraskaņas sistēmas, kas atbilst asins apstrādes prasībām (piemēram, tīras telpas sagatavošanai iekšpusē un ārpusē).
Ar trombocītiem bagāts serums
Ultraskaņas apstrāde ir uzticama un vienkārša metode trombocītu lizēšanai autologajā asins serumā, lai atbrīvotu augšanas faktorus. No trombocītiem iegūtās frakcijas – pazīstams arī kā autologs kondicionēts serums (ACS) – tiek izmantoti audu remontam vai estētiskai ārstēšanai. Lai iegūtu optimālus rezultātus, PRP pirms injekcijas tiek bagātināts.
Lai sagatavotu bagātinātu plazmu ar šūnu augšanas faktoriem, ultraskaņas apstrāde ir ļoti efektīva un efektīva metode šūnu membrānu lizēšanai un gandrīz pilnīgu šūnu augšanas faktoru atbrīvošanai no trombocītiem. Ar ultraskaņas līzi un kondicionēšanu var izmantot pat antikoagulētas asinis.
PRP kondicionēšana, izmantojot ultraskaņu, ir ērts un rentabls veids, kā iegūt koncentrētus augšanas faktorus.
Trombocītiem bagātas plazmas ultraskaņas līze (PRP)
Ultraskaņas līzes efekti
Asins seruma ultraskaņas apstrāde izraisa trombocītu viendabīgu līzi, lai atbrīvotu ievilktos augšanas faktorus (augšanas faktors AB (PDGF-AB), augšanas faktors AA (PDGF-AA), augšanas faktors BB (PDGF-BB), asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF), transformējošais augšanas faktors β (TGF-β), epidermas augšanas faktors (EGF), insulīnam līdzīgais augšanas faktors (IGF), epitēlija šūnu augšanas faktors EKGF un fibroblastiskais augšanas faktors (FGF)). Trombocītus un to alfa granulas izjauc ultraskaņas apstrāde, izmantojot akustiskā kavitācija. Ultraskaņas kavitācijas izmantošana trombocītu līzei samazina atkārtotās sasaldēšanas-atkausēšanas metodes iespējamo negatīvo ietekmi uz augšanas faktora aktivitāti.
Protokols ultraskaņas PRP sagatavošanai
Aptuveni 16 ml svaigi savākta autologa asins parauga mēģenē maigi apgriež 8-10 reizes, lai asinis un antikoagulanti būtu labi sajaukti. Pēc tam paraugu centrifugē 1800 g 20 minūtes istabas temperatūrā. Pēc centrifugēšanas trombocīti un mononukleārās šūnas plazmas slāņa apakšā veido bālganu slāni, kas pazīstams kā trombocītiem bagāta plazma (PRP). Augšējais slānis ir pazīstams kā plazma, kurā trūkst trombocītu (AAL). Mononukleārās šūnas var noņemt vai palikt paraugā. Bieži vien mononukleārās šūnas paliek PRP paraugā, lai izvairītos no papildu darbībām, kas rada piesārņojuma risku.
Piezīme: Autologa PRP ultraskaņas apstrāde jāveic sterilos apstākļos.
PRP un AAL tiek atdalīti un savākti. AAL pievieno 1,5 ml 10% kalcija hlorīda šķīduma, bet PRP pievieno 0,5 ml 5% etanola. Abas suspensijas viegli sakrata un ļauj nostāvēties 5 minūtes istabas temperatūrā. Visbeidzot, PRP suspensijai pievieno 1 ml AAL, un tai ļauj nostāvēties, līdz veidojas fibrīna receklis.
Ultraskaņas apstrāde: Tā kā veidotais trombocītu gēls darbojas kā atbrīvoto augšanas faktoru rezervuārs, fibrīna gēls ir jāizjauc, lai atbrīvotu pieejamos augšanas faktorus. Ultraskaņas līzes un augšanas faktora atbrīvošanas parametri ir šādi: Sonicate ar UP200Ht vai UP200St (200W, 26kHz) ar sonotrode S26d2 paraugu mēģenē. Lai izvairītos no asins parauga pārkaršanas, ultraskaņu var veikt pulsējošos ciklos (piemēram, 10 sek. ieslēgts, 30 sek. izslēgts). Paraugs jānovieto uz ledus dzesēšanai tā, lai temperatūra būtu optimāli uzturēta starp 2 – 5°C. Pēc ultraskaņas apstrādes paraugu centrifugē 16000 g 5 minūtes istabas temperatūrā. Centrifugātu savāc, un to var uzglabāt -70°C temperatūrā.
Trombocītu koncentrācija PRP frakcijā tika bagātināta par 1,7 – 4,5 reizes ultraskaņas metodē, salīdzinot ar literatūru vidējais trombocītu skaits asinīs.
PRP ir kombinēta ar no taukaudiem iegūtu cilmes šūnu terapiju (Ultrasoniski atbrīvotas autologās cilmes šūnas no taukaudiem, sajaucot ar PRP un injicējot atpakaļ pacienta audos remontam).
Ultraskaņas iekārtas
Hielscher Ultrasonics ir eksperts sarežģītai un uzticamai ultraskaņas tehnoloģijai. Mūsu ultraskaņas ierīces tiek izmantotas visā pasaulē līzei, ekstrakcijai un paraugu sagatavošanai – tiešā un netiešā veidā. Autoklāvējams kā arī Vienreizlietojams Piederumi nodrošina nesatur piesārņojumu autologo asins paraugu apstrāde. Lielāko daļu mūsu sistēmu var izmantot ultraskaņas līzei Cilmes šūnas un PRP, kas padara mūsu ultraskaņas ierīces ekonomiski vēl efektīvākas.
Šajā tabulā zemāk ir uzskaitītas mūsu ultraskaņas ierīces, kas ir piemērotas trombocītiem bagātas plazmas sagatavošanai, un to ieteicamais parauga tilpums. Ir pieejami arī lielāki ultrasonatori un pielāgotas sistēmas.
| Ierīce | Jauda [W] | Freq. [kHz] | Tips | Tilpums [ml] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | savrups | 0.5 | – | 1.5 |
| UP50H | 50 | 30 | rokas vai stāvus | 0.01 | – | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | rokas vai stāvus | 0.01 | – | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | rokas vai stāvus | 0.1 | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | stāvus | 0.1 | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | stāvus | 5.0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | savrups | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | no piesārņojuma brīvas plūsmas šūna | |||
Lūdzu, sazinieties ar mums jau šodien! Mēs ar prieku palīdzēsim jums atrast optimālo ultraskaņas ierīci!
Sazinieties ar mums! / Jautājiet mums!
GDmini2 pie UP200St-TD devēja (200 vati)
Literatūra/Atsauces
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; Pula, G. (2016): Trombocītu lizāta gēls un endotēlija priekšteči stimulē mikrovaskulārā tīkla veidošanos in vitro: audu inženierijas sekas. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamids, M.S.A.; Jusofs, Ašrils; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Trombocītiem bagāta plazma (PRP) akūtu muskuļu bojājumu gadījumā: sistemātisks pārskats. PLOS ONE 9. sējums, 2. izdevums, 2014. gads.
Fakti, kurus ir vērts zināt
Trombocītiem bagāta plazma
Ar trombocītiem bagāta plazma satur augšanas faktoru AB (PDGF-AB), no trombocītiem atvasinātu augšanas faktoru AA (PDGF-AA), no trombocītiem atvasinātu augšanas faktoru BB (PDGF-BB), asinsvadu endotēlija augšanas faktoru (VEGF), transformējošo augšanas faktoru β (TGF-β), epidermas augšanas faktoru (EGF), insulīnam līdzīgo augšanas faktoru (IGF), epitēlija šūnu augšanas faktoru EKGF un fibroblastisko augšanas faktoru (FGF), kas ir svarīgi šūnu augšanas un atjaunošanās stimulatori.
Autologs kondicionēts serums (ACS)
Autologa kondicionēta plazma (ACP) ir trombocītiem bagāta plazma, ko iegūst no autologām asinīm un ko izmanto, lai atbalstītu reģenerāciju dažādos ortopēdiskos apstākļos un ķirurģiskās procedūrās. Kondicionētu serumu sagatavo, atdalot plazmu no citiem asins komponentiem (piemēram, eritrocītiem) un koncentrējot to. ACP ir trombocītiem bagāta plazma (PRP). PRP ir vispārīgs termins plazmas tipam, kas satur ievērojami augstāku trombocītu koncentrāciju, salīdzinot ar nesadalītām asinīm. To iegūst no asinīm. ĀKK galvenās sastāvdaļas ir trombocīti (trombocīti) un vairāki augšanas faktori, kuriem ir svarīga loma dzīšanas procesā. Atšķirībā no citiem trombocītiem bagātiem plazmas preparātiem, ACP izceļas ar zemu balto asins šūnu, piemēram, neitrofilo granulocītu, koncentrāciju, kas var kaitēt dzīšanas procesam, ja tā ir augstā koncentrācijā.
Ar trombocītiem bagātas plazmas injekcijas
Trombocītiem bagātu plazmu izmanto kā injekcijas reģeneratīvajā medicīnā, kā arī kosmētiskajās procedūrās. PRP pielietošana sola ievērojamu muskuļu dziedināšanas un muskuļu atjaunošanās paātrinājumu. Turklāt to veiksmīgi izmanto, lai ārstētu iekaisumu, artrītu, sāpes, brūces, lēnas dzīšanas atvērtas brūces un nopietnus ādas apdegumus. PRP satur augstu augšanas faktoru līmeni, kas stimulē un aizsargā dziedinošās šūnas ao, ka bojātie audi tiek laboti.
Kosmētisko nodevu gadījumā ir pierādīts, ka PRP ir efektīvs, lai stimulētu matu augšanu, ādas atjaunošanos (pazīstama arī kā vampīru ārstēšana).
No trombocītiem atvasināti augšanas faktori (PDGF)
Termins no trombocītiem atvasināts augšanas faktors (PDGF) attiecas uz faktoriem PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C un PDGF-D. Tas ir četru ligandu (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C un PDGF-D) un divu receptoru, PDGFR-alfa un PDGFR-beta, signalizācijas tīkls.
Augšanas faktori jeb olbaltumvielas regulē šūnu augšanu un dalīšanos. Kā galvenais mitogēns, kas atrodams zīdītāju serumā, kas trombu veidošanās laikā izdalās no trombocītiem, tam ir nozīmīga loma asinsvadu veidošanā (angioģenēzē), asinsvadu augšanā no jau esošajiem asinsvadu audiem.