Hielscher Ultrasonics
Mēs ar prieku apspriedīsim jūsu procesu.
Zvaniet mums: +49 3328 437-420
Nosūtiet mums e-pastu: info@hielscher.com

Protokols SARS-CoV-2 koronavīrusa inaktivācijai ar ultraskaņu

Hielscher VialTweeter ir unikāla ultraskaņas vairāku paraugu sagatavošanas vienība, ko izmanto, lai inaktivētu koronavīrusu SARS-COV-2. VialTweeter ļauj vienlaicīgi sagatavot līdz 10 paraugu flakoniem un tādējādi ir ideāla vienība masas paraugu apstrādei.

SARS-CoV-2 koronavīrusa inaktivācija ar VialTweeter

Pēc fiksatora noņemšanas monoslāņi trīs reizes tika mazgāti ar fosfātu buferšķīdumu (PBS) pirms šūnu nokasīšanas 1 ml MEM? 5% FBS un apstrādāti ar ultraskaņu (3 × 10 sekundes ieslēgtas, 10 sekundes izslēgtas ar 100% jaudu un amplitūdu), izmantojot Hielscher ultraskaņas procesoru UP200St ar VialTweeter Pielikumu. Supernatantus dzidrināja, centrifugējot ar 3000 × g 10 min. 

Lasiet pilnu protokolu par SARS-CoV-2 koronavīrusa inaktivāciju, ko veica Welch et al. (2020) zemāk:

Šūnas un vīruss

Vero E6 cells (Vero C1008; ATCC CRL-1586) were cultured in modified Eagle’s minimum essential medium (MEM) supplemented with 10% (v/v) fetal calf serum (FCS). Virus used was SARS-CoV-2 strain hCOV-19/England/2/2020, isolated by PHE from the first patient cluster in the UK on 29/01/2020. This virus was obtained at passage 1 and used for inactivation studies at passage 2 or 3.
Attiecībā uz reaģentiem un ķīmiskajām vielām, ko izmanto SARS-CoV-2 inaktivācijai, kā arī reaģenta citotoksicitātes likvidēšanai, lūdzu, skatīt Welch et al. (2020) zinātnisko ziņojumu.

Ultraskaņas paraugu sagatavošanas vienība VialTweeter tiek izmantota SARS-CoV-2 koronavīrusa inaktivācijai

Vīrusu inaktivācija ar mazgāšanas līdzekļiem – SARS-CoV-2 koronavīrusa inaktivācijas protokols by Welch et al. 2020

SARS-CoV-2 inaktivācija

Komercproduktiem, vīrusu preparātiem (audu kultūru šķidrums, titri no 1 × 106 līdz 1 × 108 PFU/ml) were treated in triplicate with reagents at concentrations and for contact times recommended in the manufacturersinstructions for use, where available, or for concentrations and times specifically requested by testing laboratories. Where a range of concentrations was given by the manufacturer, the lowest ratio of product to sample was tested (i.e. lowest recommended concentration of test product). Specimen transport tube reagents were tested using a ratio of one volume of tissue culture fluid to ten volumes of reagent, unless a volume ratio of sample fluid to reagent was specified by the manufacturer. Detergents, fixatives and solvents were tested at the indicated concentrations for the indicated times. All inactivation steps were performed at ambient room temperature (18 – 25°C). For testing of alternative sample types, virus was spiked into the indicated sample matrix at a ratio of 1:9, then treated with test reagents as above. All experiments included triplicate control mock-treated samples with an equivalent volume of PBS in place of test reagent. Immediately following the required contact time, 1mL of treated sample was processed using the appropriately selected filtration matrix. Reagent removal for inactivation testing was carried out in a larger spin column format using Pierce 4mL Detergent Removal Spin Columns (Thermo Fisher), or by filling empty Pierce 10mL capacity centrifuge columns (Thermo Fisher) with SM2 Bio-Beads, Sephacryl S-400HR or Sephadex LH-20 to give 4mL packed beads/resin. For purification using Amicon filters, 2 × 500μl samples were purified using two centrifugal filters by the method previously described, then pooled together. For formaldehyde and formaldehyde with glutaraldehyde removal, one filter was used with 1× 500μl sample volume, resuspended after processing in 500μl PBS, and added to 400ul MEM/5% FBS. For inactivation of infected VialTweeter pie ultraskaņas procesora UP200STmonoslāņi, 12,5 cm2 Vero E6 šūnu kolbas (2.5. × 106 šūnas/kolba 2,5 ml MEM/5% FBS) tika inficētas ar MOI 0,001 un inkubētas 37 °C/5% CO temperatūrā2 24 stundas. Supernatants tika noņemts, un šūnas tika fiksētas, izmantojot 5 ml formaldehīda vai formaldehīda un glutaraldehīda istabas temperatūrā 15 vai 60 minūtes. Fiksators tika noņemts, un monoslāņi trīs reizes mazgāti ar PBS pirms šūnu nokasīšanas 1 ml MEM? 5% FBS un apstrādāti ar ultraskaņu (3 × 10 sekundes ieslēgtas, 10 sekundes izslēgtas pie 100% jaudas un amplitūdas), izmantojot UP200St ar VialTweeter pielikumu (Hielscher ultraskaņas tehnoloģija). Supernatantus dzidrināja, centrifugējot ar 3000 × g 10 min.

VialTweeter slēgtu flakonu intensīvai apstrādei ar ultraskaņu

VialTweeter slēgtu flakonu intensīvai apstrādei ar ultraskaņu

Informācijas pieprasījums




Ņemiet vērā mūsu Privātuma politika.




Dažādi reaģenti ir pārbaudīti SARS-CoV-2 koronavīrusa inaktivācijai, izmantojot ultraskaņas paraugu sagatavošanas vienību VialTweeter.

Sīkāka informācija par reaģentu, ko izmanto SARS-CoV-2 koronavīrusa inaktivācijai ar ultraskaņas VialTweeter saskaņā ar Welch et al. 2020 protokolu

Pilns protokols, ieskaitot Hielscher VialTweeter izmantošanu, ir atrodams šeit:
Welch, Stephen R.; Davies, Katherine A.; Buczkowski, Hubert; Hettiarachchi, Nipunadi; Green, Nicole; Arnold, Ulrike; Jones, Matthew; Hannah, Matthew J.; Evans, Reah; Burton, Christopher; Burton, Jane E.; Guiver, Malcolm; Cane, Patricia A.; Woodford, Neil; Bruce, Christine B.; Roberts, Allen D. G.; Killip, Marian J. (2020): Inactivation analysis of SARS-CoV-2 by specimen transport media, nucleic acid extraction reagents, detergents and fixatives. Journal of Clinical Microbiology. Accepted Manuscript Posted Online 24 August 2020.

Vairāku paraugu ultrasonikators VialTweeter ļauj vienlaicīgi sagatavot paraugus līdz 10 flakoniem tādos pašos procesa apstākļos. VialTweeter ir izveidota ultraskaņas ierīce, ko izmanto korona vīrusa SARS-CoV-2 inaktivācijai (noklikšķiniet, lai palielinātu!)

VialTweeter ultraskaņas vīrusu inaktivācijai

VialTweeter priekšrocības īsumā

  • Vienlaicīga līdz 10 flakonu apstrāde ar ultraskaņu
  • Nav šķērskontaminācijas
  • Nav parauga zuduma
  • automātiska datu ierakstīšana
  • viegli un droši lietojams
VialTweeter lieto arī:

  • šūnu līze
  • Vīrusu daļiņu traucējumi
  • Nukleīnskābju ekstrakcija: DNS/RNS izolācija
  • DNS/RNS fragmentācija
  • Lizāta šķīdināšana
  • Izsmalcināti ultraskaņas dismembrators un šūnu traucētāji

    Vairāku paraugu ultrasonicator VialTweeter ir tikai viens no daudziem ultraskaņas risinājumiem paraugu sagatavošanai bioloģiskajās, bioķīmiskajās un klīniskajās laboratorijās. Hielscher Ultrasonics piedāvā ideālu ultraskaņas dismembratoru jūsu lietojumam, piemēram, šūnu līze, šūnu ekstrakcija, audu homogenizācija, lizāta šķīdināšana, izšķīdināšana, paraugu degazēšana utt.
    Paziņojiet mums, cik daudz paraugu jums ir jāapstrādā stundā un dienā, ja vēlaties tiešu vai netiešu ultraskaņu un kāds ir ultraskaņas paraugu apstrādes mērķis. Mēs jums ieteiksim vispiemērotāko ultraskaņas ierīci jūsu ikdienas darba rutīnai!
    Hielscher Ultrasonics’ digital ultrasonic processors are equipped with smart software, automatic data recording, easy pre-setting options for temperature control, sonication duration, cycle/pulse mode as well as sample illumination and browser remote control. We strive to make our ultrasonic devices as smart as possible so that your research and work routine becomes as convenient and successful as possible.
    Noklikšķiniet šeit, lai atrastu vairāk lietojumprogrammu, tostarp ultraskaņas paraugu sagatavošanas protokolus ar VialTweeter!

    Sazinieties ar mums!? Jautājiet mums!

    Jautājiet vairāk informācijas

    Lūdzu, izmantojiet zemāk esošo veidlapu, lai pieprasītu papildu informāciju par ultraskaņas procesoriem, lietojumprogrammām un cenu. Mēs ar prieku apspriedīsim jūsu procesu ar jums un piedāvāsim jums ultraskaņas sistēmu, kas atbilst jūsu prasībām!









    Lūdzu, ņemiet vērā mūsu Privātuma politika.




    Ultraskaņas augstas bīdes homogenizatori tiek izmantoti laboratorijā, stendā, izmēģinājuma un rūpnieciskajā apstrādē.

    Hielscher Ultrasonics ražo augstas veiktspējas ultraskaņas homogenizatorus sajaukšanas lietojumiem, dispersijai, emulgācijai un ekstrakcijai laboratorijā, izmēģinājuma un rūpnieciskā mērogā.

    Literatūra? Atsauces



    Fakti, kurus ir vērts zināt

    Kas ir Vero šūnas?

    Vero E6, also known as Vero C1008 (ATCC No. CRL-1586) is clone cell line from Vero 76 and is used in the research of SARS-CoV and SARS-CoV-2 coronaviruses. Vero cells are a lineage of cells used in cell cultures. The ‘Vero’ ciltsraksti tika izolēti no nieru epitēlija šūnām, kas iegūtas no Āfrikas zaļā pērtiķa (Chlorocebus sp.).
    Vero E6 šūnām ir zināma kontaktu inhibīcija, tāpēc tās ir piemērotas vīrusu pavairošanai, kas replicējas lēni. Vero E6 šūnu līnijas parasti izmanto, lai izpētītu koronavīrusu SARS-CoV un SARS-CoV-2 citopatoloģiju, jo Vero šūnām (Āfrikas zaļo pērtiķu nieru šūnām) piemīt bagātīga angiotenzīnu konvertējošā enzīma 2 (ACE2) receptoru ekspresija. ACE2 receptori ir galvenā SARS-CoV-2 koronavīrusa dokstacija.
    Piemēram, Ogando et al. (2020) konstatēja, ka SARS-CoV-2 – salīdzinājumā ar SARS-CoV – radīja augstāku intracelulāro vīrusu RNS līmeni, bet pārsteidzoši no barotnes tika atgūti aptuveni 50 reizes mazāk infekciozu vīrusu pēcnācēju. Turklāt viņi noteica, ka abu vīrusu jutība pret trim izveidotiem koronavīrusa replikācijas inhibitoriem (remdesivīru, alisporivīru un hlorohīnu) ir ļoti līdzīga, bet SARS-CoV-2 infekcija bija ievērojami jutīgāka pret šūnu pirmapstrādi ar pegilētu alfa interferonu. Svarīga atšķirība starp abiem vīrusiem ir fakts, ka – pēc pārejas Vero E6 šūnās – SARS-CoV-2 apparently is under strong selection pressure to acquire adaptive mutations in its spike protein gene. These mutations change or delete a putative ‘furin-like cleavage sitein the region connecting the S1 and S2 domains and result in a very prominent phenotypic change in plaque assays.

    Mēs ar prieku apspriedīsim jūsu procesu.

    Let's get in contact.