ალფა-სინუკლეინის ფრაგმენტაცია VialTweeter სონიკატორის გამოყენებით

ალფა-სინუკლეინის ფიბრილები და ლენტები ფრაგმენტირდება სამეცნიერო კვლევებში, რათა მიღებულ იქნას უფრო მცირე ფიბრილური ნაწილაკები ან ინდივიდუალური ცილის მოლეკულები, რომლებიც უფრო მარტივად ანალიზდება სხვადასხვა ექსპერიმენტული ტექნიკების გამოყენებით. VialTweeter სონიკატორი არის ერთ-ერთი ყველაზე ხშირად გამოყენებადი ულტრაბგერითი აპარატი ეფექტური და საიმედო ალფა-სინუკლეინის ფრაგმენტაციისთვის.

ალფა-სინუკლეინი კვლევებში

ალფა-სინუკლეინის ფიბრილები არის ცილოვანი აგრეგატები, რომლებიც მჭიდროდ არის დაკავშირებული ნეიროდეგენერაციულ დაავადებებთან, როგორიცაა პარკინსონის დაავადება და დემენციის ზოგიერთი ფორმა, მათ შორის ლევის სხეულაკებიანი დემენცია. ალფა-სინუკლეინის ფიბრილებზე ორიენტირებული კვლევები მიზნად ისახავს მათი როლის გაგებას დაავადების პროგრესირებაში და პოტენციური თერაპიული ჩარევების შემუშავებას. ალფა-სინუკლეინის ფიბრილების მცირე ფრაგმენტებად დაშლით, მკვლევრებს შეუძლიათ შეისწავლონ მათი კონკრეტული სტრუქტურული თვისებები. მაგალითად, ალფა-სინუკლეინის ფიბრილების ფრაგმენტაცია მკვლევრებს საშუალებას აძლევს შეისწავლონ მათი ურთიერთქმედება სხვა მოლეკულებთან, როგორიცაა ცილები, ლიპიდები ან მცირე მოლეკულები. მცირე ფრაგმენტების წარმოქმნით, ამ ურთიერთქმედ პარტნიორებთან შეკავშირების ადგილებისა და აფინურობის უფრო ეფექტურად შესწავლა შესაძლებელია. მცირე α-Syn ფიბრილები და ლენტები ასევე შეიძლება აჩვენონ ცვლილებები ტოქსიკურობასა და ბიოქიმიურ ეფექტებში. ამიტომ, საიმედო და ეფექტური ფრაგმენტაციის ტექნიკა, რომელიც იძლევა რეპროდუცირებად შედეგებს სწრაფ და მარტივ ნიმუშების დამუშავებაში, გადამწყვეტია.
ულტრაბგერითი ალფა-სინ ფრაგმენტაცია: VialTweeter სონიკატორი არის დამკვიდრებული ულტრაბგერითი ნიმუშების მომზადების სისტემა, რომელიც ულტრაბგერითად ამუშავებს მაქსიმუმ 10 ვიალს ერთდროულად ზუსტად იგივე პირობებში. პროგრამირებადი პარამეტრები საშუალებას აძლევს მარტივად და სწრაფად განმეორდეს იგივე ექსპერიმენტები, რაც იძლევა ძალიან საიმედო და რეპროდუცირებად შედეგებს ალფა-სინუკლეინის ფიბრილების ფრაგმენტაციაში.

ალფა-სინუკლეინის ნიმუშების მომზადება სონიკატორით

ალფა-სინუკლეინის ფიბრილების შესწავლის ერთ-ერთი მიდგომა გულისხმობს მათ ექსტრაქციას და ფრაგმენტაციას ისეთი ტექნიკების გამოყენებით, როგორიცაა ულტრაბგერითი დამუშავება. ულტრაბგერითი დამუშავება არის პროცესი, რომელიც იყენებს მაღალი ინტენსივობის, დაბალი სიხშირის ულტრაბგერით ტალღებს ცილოვანი აგრეგატების დასარღვევად და დასაშლელად, რაც იწვევს მცირე ფიბრილების ან ინდივიდუალური ცილის მოლეკულების გამოთავისუფლებას. VialTweeter სონიკატორი არის ხშირად გამოყენებადი მოწყობილობა α-სინუკლეინთან დაკავშირებულ სამეცნიერო კვლევებში ამ მიზნით.

მრავალი სამეცნიერო კვლევა აღწერს ალფა-სინუკლეინის ფიბრილების ულტრაბგერითი დამუშავების ზუსტ ნიმუშების მომზადების პროტოკოლებს, რომლებიც იყენებენ Hielscher VialTweeter-ს ეფექტური და საიმედო α-სინუკლეინის ფიბრილების ფრაგმენტაციისთვის. ფიბრილების ულტრაბგერითი ფრაგმენტაციით, მკვლევრებს შეუძლიათ გააანალიზონ მიღებული პროდუქტები და შეისწავლონ მათი სტრუქტურა, ტოქსიკურობა და ურთიერთქმედება სხვა მოლეკულებთან. ეს კვლევა იძლევა მნიშვნელოვან ცოდნას ნეიროდეგენერაციის მექანიზმების შესახებ და პოტენციურად ახალი თერაპიული მიზნების იდენტიფიცირებას. კარგად დამკვიდრებული α-სინუკლეინის ულტრაბგერითი დამუშავების პროტოკოლები VialTweeter სონიკატორის გამოყენებით საშუალებას აძლევს მივიღოთ საიმედო და რეპროდუცირებადი შედეგები.

ზედა სურათები: არაფრაგმენტირებული ალფა-სინუკლეინის ფიბრილები
ქვედა სურათები: ულტრაბგერითად ფრაგმენტირებული ალფა-სინუკლეინის ფიბრილები VialTweeter სონიკატორით
(კვლევა და სურათები: ©Dieriks et al., 2022)

ალფა-სინუკლეინის ფიბრილების ულტრაბგერითი ფრაგმენტაცია – პროტოკოლები

რადგან მრავალი მკვლევარი იყენებს VialTweeter სონიკატორს, როგორც სასურველ ფრაგმენტაციის ტექნიკას, ერთგვაროვანი α-სინუკლეინის ფიბრილური ფრაგმენტების მისაღებად, დამკვიდრებული პროტოკოლები ხელმისაწვდომია. ქვემოთ შეგიძლიათ იპოვოთ რამდენიმე მაგალითური ფრაგმენტაციის პროტოკოლი.

ClearTau თესლის მომზადება: ClearTau ფიბრილები განზავდა 10 μM-მდე dH2O-ში და ულტრაბგერითად დამუშავდა 70 % ამპლიტუდით 50 წმ-ის განმავლობაში, 1 წმ ON 1 წმ OFF ციკლით, მილში, UP200St სონიკატორის გამოყენებით VialTweeter-თან ერთად. თესლები დახასიათდა ელექტრონული მიკროსკოპიით.
ThS ფლუორესცენციის გაზომვა: ClearTau ფიბრილები განზავდა 2,5 μM-მდე dH2O-ში და ულტრაბგერითი დამუშავება განხორციელდა 70 % ამპლიტუდით 50 წმ-ის განმავლობაში, 1 წმ ON 1 წმ OFF ციკლით, მილში, UP200St-ის გამოყენებით VialTweeter-თან ერთად. კონტროლად გამოყენებული იყო 2,5 μM სრული სიგრძის Tau 4R2N მონომერი. 100 μl რეაქციას დაემატა 100 μl ThS (10 μM), რის შედეგადაც ცილის საბოლოო კონცენტრაციებმა შეადგინა 1,25 μM. ThS ფლუორესცენცია ერთ დროით წერტილში გაიზომა 96-ფუძიანი გამჭვირვალე ფსკერის ფირფიტებით, რომლებიც დაყენებული იყო FLUOstar Omega მიკროფირფიტის წამკითხველში, 445 nm ექსციტაციით და 485 nm ემისიით.
(cf. Limorenko et al., 2023)

ერთგვაროვანი α-სინუკლეინის სიგრძე ულტრაბგერითი დამუშავების გამოყენებით: α-სინ ფიბრილებისა და ლენტების სიგრძის ჰეტეროგენულობა შემცირდა ულტრაბგერითი დამუშავებით 20 წთ-ის განმავლობაში ყინულზე, 2-ml Eppendorf მილებში, VialTweeter-ში, დაყენებული 75% ამპლიტუდაზე, 0,5 წმ იმპულსებით.
(cf. Bousset et al., 2013)

ჩატარდა ადამიანის რეკომბინანტური მონომერული WT ან S129A a-Syn-ის და მათ მიერ წარმოქმნილი ფიბრილური პოლიმორფების, ასევე a-Syn 1–110-ის ხარისხის კონტროლი. შემდგომში, ფიბრილური პოლიმორფები დაქუცმაცდა ულტრაბგერითი დამუშავებით 20 წთ-ის განმავლობაში 2-mL Eppendorf მილებში VialTweeter ულტრაბგერითში, რათა მიღებულიყო ფიბრილური ნაწილაკები საშუალო ზომით 42–52 nm, რომლებიც შესაფერისია ენდოციტოზისთვის.
(cf. Shrivastava et al., 2020)

ხუთი ფიბრილური α-Syn პოლიმორფის დახასიათება. (A) ნაჩვენებია უარყოფითად შეღებილი α-Syn ფიბრილური პოლიმორფების – ფიბრილების, ლენტების, ფიბრილები-91-ის, ფიბრილები-65-ის და ფიბრილები-110-ის – transmission ელექტრონული მიკროგრაფიები VialTweeter-ით ფრაგმენტაციამდე (ზედა რიგი) და მის შემდეგ (ქვედა რიგი). (B) ნაჩვენებია ფრაგმენტირებული ფიბრილური პოლიმორფების სიგრძის განაწილება. მითითებულია ფიბრილური აგრეგატების რაოდენობა (n), რომლისგანაც ჰისტოგრამები მიღებულია.
(კვლევა და სურათები: Shrivastava et al., 2020)

α-Syn ფიბრილები დაქუცმაცდა ულტრაბგერითი დამუშავებით 20 წთ-ის განმავლობაში 2 ml Eppendorf მილებში VialTweeter-ში, რათა მიღებულიყო ფიბრილური ნაწილაკები საშუალო ზომით 42–52 nm, როგორც შეფასდა TEM ანალიზით.
(cf. Negrini et al., 2022)

ხელახლა სუსპენზირებული ფიბრილები91 (PBS-ში) დაქუცმაცდა უჯრედულ კულტურებში დამატებამდე ულტრაბგერითი დამუშავებით 20 წთ-ის განმავლობაში 2 mL Eppendorf მილებში Vial Tweeter სონიკატორის გამოყენებით, გადანაწილდა ალიკვოტებად, სწრაფად გაიყინა თხევად აზოტში და გამოყენებამდე ინახებოდა -80 ̊C-ზე.
(cf. Vajhøj et al., 2021)

VialTweeter და ლაბორატორიული ულტრაბგერითი დამუშავების სისტემები α-Syn დასაქუცმაცებლად

Hielscher Ultrasonics მსოფლიოში ცნობილია, როგორც წამყვანი მწარმოებელი თანამედროვე ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორების. ჩვენი ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები, რომლებიც სანდოა და დამკვიდრებულია მსოფლიოს მთავარ სამეცნიერო ლაბორატორიებში, უზრუნველყოფენ შეუდარებელ ხარისხსა და წარმადობას თქვენი მნიშვნელოვანი ექსპერიმენტებისთვის.
Hielscher VialTweeter-ის და ნებისმიერი სხვა Hielscher სონიკატორის გამოყენებით, თქვენ იგრძნობთ შეუდარებელ მოხმარების კომფორტს, რადგან ისინი ფრთხილად არის შექმნილი გამეორებადი შედეგების, მარტივი ექსპლუატაციისა და უწყვეტი მუშაობისთვის. ავტომატური მონაცემთა ჩაწერის ფუნქციების წყალობით, თქვენ შეგიძლიათ ყურადღება მიმართოთ თქვენს კვლევას, ხოლო ჩვენი ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები ზედმიწევნით ჩაწერენ მნიშვნელოვან მონაცემებს გამეორებადობისა და სიზუსტისთვის.
მიიღეთ მუდმივი და გამეორებადი შედეგები დარწმუნებით!
ჩვენი ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები შექმნილია და დამზადებულია გერმანიაში. გერმანული სიზუსტე და უმაღლესი ინჟინრული ხარისხი უზრუნველყოფს სანდო და ზუსტ ნიმუშების მომზადებას, როგორიცაა ალფა-სინუკლეინის ფიბრილების ფრაგმენტაცია, ყოველთვის. აღარ იდარდოთ არამუდმივი შედეგების გამო – ჩვენი ულტრაბგერითი ტექნოლოგია უზრუნველყოფს, რომ თქვენი კვლევა რჩებოდეს სამეცნიერო პროგრესის წინა რიგებში.
მაგრამ ეს არ არის ყველაფერი! ჩვენი სრულყოფილებისკენ სწრაფვა სცდება ჩვენს პროდუქტებს. ჩვენ ვამაყობთ ჩვენი უმაღლესი მომხმარებელთა მომსახურებით, რომელიც უზრუნველყოფს ექსპერტულ მხარდაჭერას ნებისმიერი კითხვების ან შეშფოთებების მოსაგვარებლად, რომლებიც შეიძლება გქონდეთ. ჩვენი მიძღვნილი გუნდი მზადაა დაგეხმაროთ თქვენი სამეცნიერო გზის ყოველ ნაბიჯზე, რათა მაქსიმალურად ისარგებლოთ ჩვენი ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორებით.
აირჩიეთ ინოვაცია, სანდოობა და უმაღლესი მოხმარების გამოცდილება – აირჩიეთ ჩვენი ლაბორატორიული სონიკატორები, როგორიცაა VialTweeter, ალფა-სინუკლეინის ფიბრილების ფრაგმენტაციისთვის. ისარგებლეთ უკვე დამკვიდრებული პროტოკოლებით და შეუერთდით წამყვანი მკვლევრების რიგებს, რომლებიც ენდობიან ჩვენს ტექნოლოგიას მათი მნიშვნელოვანი კვლევებისთვის. ამაღლეთ თქვენი კვლევა და შეისწავლეთ ახალი ჰორიზონტები დემენციისა და ნეიროდეგენერაციული დაავადებების კვლევაში ჩვენი თანამედროვე ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორებით.

დიზაინი, წარმოება და კონსალტინგი – ხარისხი დამზადებულია გერმანიაში

Hielscher ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები ცნობილია თავიანთი უმაღლესი ხარისხითა და დიზაინის სტანდარტებით. გამძლეობა და მარტივი ექსპლუატაცია საშუალებას იძლევა, ჩვენი ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები უპრობლემოდ ინტეგრირდეს სამრეწველო ობიექტებში. მკაცრი პირობები და მოთხოვნადი გარემო Hielscher ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორებისთვის ადვილად დაძლევადია.

Hielscher Ultrasonics არის ISO სერტიფიცირებული კომპანია და განსაკუთრებულ ყურადღებას უთმობს მაღალი წარმადობის ულტრაბგერით ჰომოგენიზატორებს, რომლებიც იყენებენ თანამედროვე ტექნოლოგიას და მოხმარების სიმარტივეს. რა თქმა უნდა, Hielscher სონიკატორები შეესაბამება CE მოთხოვნებს და აკმაყოფილებენ UL, CSA და RoHs სტანდარტებს.

ქვემოთ მოცემული ცხრილი გიჩვენებთ ჩვენი ლაბორატორიული ზომის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორების დაახლოებითი დამუშავების სიმძლავრის მაჩვენებლებს: