Buffer lisis dapat disiapkan secara efisien dan cepat menggunakan homogenizer jaringan ultrasonik. Karena ultrasonicators adalah alat impian untuk pencampuran, pelarutan dan penyebaran, mereka memungkinkan persiapan buffer lisis yang andal dan ramah pengguna.

Persiapan ultrasonik buffer lisis

Homogenizers jaringan ultrasonik adalah alat umum untuk gangguan sel, lisis dan ekstraksi, oleh karena itu tersedia di sebagian besar laboratorium. Aplikasi sekunder untuk ultrasonikator tipe probe adalah persiapan buffer lisis.

Buffer lisis adalah solusi yang digunakan untuk memecah sel terbuka (lisis) dan melepaskan isinya untuk analisis hilir. Komposisi spesifik buffer lisis dapat bervariasi tergantung pada jenis sel yang dilisis dan aplikasi hilir. Namun, buffer lisis khas mengandung komponen seperti deterjen, garam, dan protease inhibitor. Garam buffering (misalnya Tris-HCl) dan garam ionik (misalnya NaCl) biasanya digunakan untuk mengatur pH dan osmolaritas lisat.
Untuk membuat buffer lisis, komponen dicampur bersama dalam konsentrasi dan pH yang sesuai. Campuran biasanya diaduk atau dikocok sampai komponen larut dan larutannya homogen.
Homogenisasi ultrasonik adalah metode yang dapat digunakan untuk membantu membuat buffer lisis yang baik dengan meningkatkan pencampuran dan pembubaran komponen. Dalam metode ini, gelombang ultrasound – biasanya dalam kisaran 20 hingga 30 kHz – diterapkan pada campuran, yang menciptakan gelembung kavitasi yang runtuh dan menghasilkan energi lokal yang intens, yang mengarah ke geser mekanis dan pencampuran komponen.
Proses homogenisasi ultrasonik dapat membantu memecah gumpalan atau agregat komponen, dan memastikan bahwa solusinya dicampur secara seragam. Akibatnya, buffer lisis yang ditingkatkan tersebut dapat menyebabkan gangguan sel yang lebih efisien dan hasil yang lebih tinggi dari bahan yang diekstraksi. Selain itu, homogenisasi ultrasonik dapat mengurangi waktu yang dibutuhkan untuk membuat buffer lisis dibandingkan dengan metode pengadukan atau pengocokan tradisional.
Secara keseluruhan, homogenisasi ultrasonik adalah alat yang ampuh untuk meningkatkan kualitas dan efisiensi persiapan buffer lisis.

Protokol untuk Persiapan Buffer Lisis Ultrasonik

Ini adalah protokol umum untuk membuat buffer lisis menggunakan ultrasonikator tipe probe:
 
Bahan:

• Deterjen pilihan (misalnya Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Garam pilihan (misalnya NaCl, KCl)
• Protease inhibitor (misalnya PMSF, aprotinin, leupeptin)
• Ultrasonicator
• Stirrer
• Air deionisasi
• pH meter atau pH strip

 
 
Petunjuk langkah demi langkah:

1. Tentukan komposisi buffer lisis berdasarkan sel atau jaringan yang akan Anda lisiskan, dan aplikasi hilir yang akan Anda gunakan untuk lisat. Siapkan larutan stok deterjen, garam, dan protease inhibitor pada konsentrasi yang diinginkan.
2. Tambahkan larutan stok deterjen, garam, dan protease inhibitor ke gelas kimia atau labu.
3. Tambahkan air deionisasi untuk membawa volume ke jumlah buffer yang diinginkan.
4. Campur komponen menggunakan pengaduk untuk mendapatkan larutan pra-campuran.
5. Ukur pH buffer menggunakan pH meter atau strip pH, dan sesuaikan pH seperlunya dengan sedikit asam atau basa.
6. Gunakan ultrasonikator tipe probe untuk menyeragamkan solusi pra-campuran sehingga solusi yang sangat homogen diperoleh. Oleh karena itu, sonikasi larutan selama beberapa detik sampai larutan tercampur rata dan setiap rumpun atau agregat dipecah. Durasi dan kekuatan sonikasi dapat dioptimalkan berdasarkan buffer lisis spesifik dan ultrasonikator yang digunakan.
7. Setelah ultrasonikasi, ukur kembali pH buffer dan sesuaikan seperlunya.
8. Filter buffer melalui filter 0,2 mikron untuk menghilangkan kotoran atau agregat yang mungkin terbentuk selama sonikasi.
9. Buffer lisis sekarang siap digunakan.

 
Catatan: Komposisi dan pH yang tepat dari buffer lisis dapat bervariasi tergantung pada sel atau jaringan yang dilisis dan aplikasi hilir. Protokol di atas adalah pedoman umum dan mungkin perlu dioptimalkan untuk aplikasi tertentu.
 
Homogenizers ultrasonik biasanya digunakan untuk gangguan sel dan ekstraksi molekul intraseluler. Oleh karena itu banyak aplikasi lisis menggunakan sonikasi tipe probe tidak hanya untuk persiapan buffer lisis, tetapi juga untuk gangguan sel mekanis dan ekstraksi.
Hal ini membuat homogenizers jaringan ultrasonik alat serbaguna untuk laboratorium dan menjelaskan penggunaan luas ultrasonicators dalam mikrobiologi, bioteknologi dan ilmu kehidupan.

ultrasonik lab homogenisers

Hielscher Ultrasonics memproduksi dan memasok homogenizers ultrasonik dan probe (sonotrodes) di berbagai peringkat daya dan volume sampel. Hal ini memungkinkan kami untuk menawarkan pengganggu ultrasonik yang paling cocok untuk persiapan sampel Anda. Kami fokus pada kualitas tertinggi, kenyamanan pengguna yang luar biasa dan hasil sonikasi yang andal. Semua ultrasonicators digital memiliki perangkat lunak cerdas, pemrograman dan pra-pengaturan protokol sonikasi, remote control browser, kontrol suhu, pencahayaan sampel serta perekaman data otomatis pada SD-card built-in.

Desain, Manufaktur, dan Konsultasi – Kualitas Buatan Jerman

Ultrasonicators Hielscher terkenal dengan kualitas tertinggi dan standar desainnya. Kekokohan dan pengoperasian yang mudah memungkinkan integrasi yang lancar dari ultrasonicators kami ke dalam fasilitas industri. Kondisi kasar dan lingkungan yang menuntut mudah ditangani oleh ultrasonicators Hielscher.

Hielscher Ultrasonics adalah perusahaan bersertifikat ISO dan menempatkan penekanan khusus pada ultrasonicators berkinerja tinggi yang menampilkan teknologi canggih dan keramahan pengguna. Tentu saja, ultrasonicators Hielscher sesuai dengan CE dan memenuhi persyaratan UL, CSA dan RoHs.

The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators: