Թրոմբոցիտներով հարուստ շիճուկի ուլտրաձայնային պատրաստում
- Թրոմբոցիտներով հարուստ պլազման (PRP) արյան պլազմա է, որը հարստացվել է թրոմբոցիտներով և օգտագործվում է բժշկական ու էսթետիկ բուժումների համար։
- Ուլտրաձայնային լիզիսն ու կոնդիցիոնավորումը թրոմբոցիտներով հարուստ պլազմա պատրաստելու շատ արդյունավետ մեթոդ են։
- Hielscher Ultrasonics ընկերությունն առաջարկում է տարբեր ուլտրաձայնային համակարգեր, որոնք համապատասխանում են արյան մշակման պահանջներին (օրինակ՝ մաքուր սենյակի ներսում և դրսում պատրաստման համար)։
Թրոմբոցիտներով հարուստ շիճուկ
Ուլտրաձայնային մշակումը հուսալի և հեշտ մեթոդ է աուտոլոգ արյան շիճուկում թրոմբոցիտների լիզիս իրականացնելու և աճի գործոններն ազատելու համար։ Թրոմբոցիտներից ստացված ֆրակցիաները, որոնք հայտնի են նաև որպես աուտոլոգ կոնդիցիոնավորված շիճուկ (ACS), օգտագործվում են հյուսվածքների վերականգնման կամ էսթետիկ բուժումների համար։ Օպտիմալ արդյունքներ ստանալու նպատակով PRP պատրաստուկը հարստացվում է ներարկումից առաջ։
Բջջային աճի գործոններով հարստացված պլազմա պատրաստելու համար ուլտրաձայնային մշակումը շատ արդյունավետ և բարձր օգտակարությամբ մեթոդ է՝ բջջաթաղանթների լիզիս իրականացնելու և թրոմբոցիտներից բջջային աճի գործոնների գրեթե ամբողջ քանակն ազատելու համար։ Ուլտրաձայնային լիզիսի և կոնդիցիոնավորման միջոցով կարելի է օգտագործել նույնիսկ հակամակարդիչով մշակված արյուն։
Ուլտրաձայնով PRP պատրաստուկի կոնդիցիոնավորումը աճի խտացված գործոններ ստանալու հարմար և ծախսարդյունավետ միջոց է։
Թրոմբոցիտներով հարուստ պլազմայի (PRP) ուլտրաձայնային լիզիս
Ուլտրաձայնային լիզիսի ազդեցությունները
Արյան շիճուկի ուլտրաձայնային մշակումը հանգեցնում է թրոմբոցիտների համասեռ լիզիսի՝ դրանցում պարփակված աճի գործոններն ազատելու համար (աճի գործոն AB (PDGF-AB), աճի գործոն AA (PDGF-AA), աճի գործոն BB (PDGF-BB), անոթային էնդոթելի աճի գործոն (VEGF), տրանսֆորմացնող աճի գործոն β (TGF-β), էպիդերմալ աճի գործոն (EGF), ինսուլինանման աճի գործոն (IGF), էպիթելային բջիջների աճի գործոն ECGF և ֆիբրոբլաստային աճի գործոն (FGF))։ Թրոմբոցիտներն ու դրանց ալֆա-գրանուլները քայքայվում են ուլտրաձայնային մշակմամբ՝ օգտագործելով ակուստիկ կավիտացիայի երևույթը։ Թրոմբոցիտների լիզիսի համար ուլտրաձայնային կավիտացիայի օգտագործումը նվազեցնում է կրկնվող սառեցման-հալեցման մեթոդի հնարավոր բացասական ազդեցությունը աճի գործոնների ակտիվության վրա։
PRP պատրաստուկի ուլտրաձայնային պատրաստման արձանագրություն
Թարմ հավաքված աուտոլոգ արյան մոտ 16mL նմուշը փորձանոթում զգուշորեն շրջում են 8–10 անգամ, որպեսզի արյունն ու հակամակարդիչները լավ խառնվեն։ Այնուհետև նմուշը ցենտրիֆուգում են 1800 g արագացմամբ՝ 20 min, սենյակային ջերմաստիճանում։ Ցենտրիֆուգումից հետո թրոմբոցիտներն ու միակորիզ բջիջները պլազմայի շերտի ստորին հատվածում առաջացնում են սպիտակավուն շերտ, որը հայտնի է որպես թրոմբոցիտներով հարուստ պլազմա (PRP)։ Վերին շերտը հայտնի է որպես թրոմբոցիտներով աղքատ պլազմա (PPP)։ Միակորիզ բջիջները կարելի է հեռացնել կամ թողնել նմուշում։ Հաճախ միակորիզ բջիջները թողնում են PRP նմուշում՝ խուսափելու լրացուցիչ քայլերից, որոնք աղտոտման վտանգ են պարունակում։
Նշում. աուտոլոգ PRP պատրաստուկի ուլտրաձայնային մշակումը պետք է իրականացվի ստերիլ պայմաններում։
PRP և PPP պատրաստուկները տարանջատում և հավաքում են։ PPP պատրաստուկին ավելացնում են 1,5mL կալցիումի քլորիդի 10% լուծույթ, իսկ PRP պատրաստուկին՝ 0,5mL 5% էթանոլ։ Երկու կախույթներն էլ զգուշորեն խառնում են և թողնում 5 min՝ սենյակային ջերմաստիճանում։ Վերջում PRP կախույթին ավելացնում են 1mL PPP և թողնում մինչև ֆիբրինային մակարդուկի առաջացումը։
Ուլտրաձայնային մշակում. Քանի որ առաջացած թրոմբոցիտային գելն ազատված աճի գործոնների համար ծառայում է որպես պահեստարան, ֆիբրինային գելը պետք է քայքայել՝ առկա աճի գործոններն ազատելու համար։ Ուլտրաձայնային լիզիսի և աճի գործոնների ազատման պարամետրերը հետևյալն են։ Փորձանոթում գտնվող նմուշը մշակեք ուլտրաձայնով՝ օգտագործելով UP200Ht կամ UP200St (200W, 26kHz) սարք՝ S26d2 սոնոտրոդով։ Արյան նմուշի գերտաքացումից խուսափելու համար ուլտրաձայնային մշակումը կարելի է կատարել իմպուլսային ցիկլերով (օրինակ՝ 10 sec. միացված, 30 sec. անջատված)։ Սառեցման համար նմուշը պետք է տեղադրել սառույցի վրա, որպեսզի ջերմաստիճանն օպտիմալ կերպով պահպանվի 2–5°C միջակայքում։ Ուլտրաձայնային մշակումից հետո նմուշը ցենտրիֆուգում են 16 000 g արագացմամբ՝ 5 min., սենյակային ջերմաստիճանում։ Վերնստվածքային հեղուկը հավաքում են և կարող են պահել -70°C ջերմաստիճանում։
Ուլտրաձայնային մեթոդով PRP ֆրակցիայում թրոմբոցիտների կոնցենտրացիան հարստացվել է 1,7–4,5 անգամ՝ ամբողջական արյան մեջ թրոմբոցիտների գրականության մեջ նշված միջին քանակի համեմատ։
PRP պատրաստուկը համակցվել է ճարպային հյուսվածքից ստացված ցողունային բջիջներով թերապիայի հետ (ճարպային հյուսվածքից ուլտրաձայնով ազատված աուտոլոգ ցողունային բջիջներ, որոնք խառնվել են PRP պատրաստուկի հետ և կրկին ներարկվել պացիենտի հյուսվածքի մեջ՝ վերականգնման նպատակով)։
Ուլտրաձայնային սարքավորումներ
Hielscher Ultrasonics ընկերությունը բարդ և հուսալի ուլտրաձայնային տեխնոլոգիաների փորձագետ է։ Մեր ուլտրաձայնային սարքերն ամբողջ աշխարհում օգտագործվում են լիզիսի, էքստրակցիայի և նմուշների պատրաստման համար՝ ուղղակի և անուղղակի կերպով։ Ավտոկլավացվող , ինչպես նաև միանգամյա օգտագործման պարագաներն ապահովում են աղտոտումից զերծ մշակում աուտոլոգ արյան նմուշների համար։ Մեր համակարգերի մեծ մասը կարող է օգտագործվել ուլտրաձայնային լիզիսի համար՝ մշակելով ցողունային բջիջներ և PRP, ինչի շնորհիվ մեր ուլտրաձայնային սարքերը տնտեսապես դառնում են էլ ավելի արդյունավետ։
Ստորև բերված աղյուսակում թվարկված են թրոմբոցիտներով հարուստ պլազմա պատրաստելու համար հարմար մեր ուլտրաձայնային սարքերը և յուրաքանչյուրի համար առաջարկվող նմուշի ծավալը։ Հասանելի են նաև ավելի մեծ ուլտրաձայնային սարքեր և անհատական պահանջներով պատրաստված համակարգեր։
| Սարք | Հզորություն [W] | Հաճախ. [kHz] | Տեսակ | Ծավալ [mL] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | ինքնուրույն | 0,5 | — | 1,5 |
| UP50H | 50 | 30 | ձեռքի կամ հենակալի վրա ամրացվող | 0,01 | — | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | ձեռքի կամ հենակալի վրա ամրացվող | 0,01 | — | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | ձեռքի կամ հենակալի վրա ամրացվող | 0,1 | — | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | հենակալի վրա ամրացվող | 0,1 | — | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | հենակալի վրա ամրացվող | 5,0 | — | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | ինքնուրույն | 30 | — | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | աղտոտումից զերծ հոսքային բջիջ | |||
Կապվեք մեզ հետ այսօր։ Մենք սիրով կօգնենք ձեզ գտնել օպտիմալ ուլտրաձայնային սարքը։
Կապվեք մեզ հետ։ / Հարցրեք մեզ։
GDmini2՝ UP200St-TD փոխակերպիչի վրա (200 վատտ)
Գրականություն/հղումներ
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; Pula, G. (2016): Թրոմբոցիտային լիզատի գելը և էնդոթելային նախորդ բջիջները խթանում են միկրոանոթային ցանցի ձևավորումը in vitro. նշանակությունը հյուսվածքային ճարտարագիտության համար։ Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, M.S.A.; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Թրոմբոցիտներով հարուստ պլազման (PRP) մկանների սուր վնասվածքի դեպքում. համակարգված վերանայում։ PLOS ONE հատոր 9, համար 2, 2014.
Փաստեր, որոնք արժե իմանալ
Թրոմբոցիտներով հարուստ պլազմա
Թրոմբոցիտներով հարուստ պլազման պարունակում է աճի գործոն AB (PDGF-AB), թրոմբոցիտներից ստացված աճի գործոն AA (PDGF-AA), թրոմբոցիտներից ստացված աճի գործոն BB (PDGF-BB), անոթային էնդոթելի աճի գործոն (VEGF), տրանսֆորմացնող աճի գործոն β (TGF-β), էպիդերմալ աճի գործոն (EGF), ինսուլինանման աճի գործոն (IGF), էպիթելային բջիջների աճի գործոն ECGF և ֆիբրոբլաստային աճի գործոն (FGF), որոնք բջիջների աճի և նորացման կարևոր խթանիչներ են։
Աուտոլոգ կոնդիցիոնավորված շիճուկ (ACS)
Աուտոլոգ կոնդիցիոնավորված պլազման (ACP) թրոմբոցիտներով հարուստ պլազմա է, որը ստացվում է աուտոլոգ արյունից և օգտագործվում է վերականգնմանը նպաստելու համար՝ տարբեր օրթոպեդիկ վիճակների և վիրաբուժական միջամտությունների դեպքում։ Կոնդիցիոնավորված շիճուկը պատրաստում են՝ պլազման տարանջատելով արյան մյուս բաղադրիչներից (օրինակ՝ էրիթրոցիտներից) և խտացնելով այն։ ACP պատրաստուկը թրոմբոցիտներով հարուստ պլազմա է (PRP)։ PRP ընդհանուր եզրույթը վերաբերում է պլազմայի մի տեսակի, որը պարունակում է թրոմբոցիտների զգալիորեն ավելի բարձր կոնցենտրացիա՝ ամբողջական արյան համեմատ։ Այն ստացվում է ամբողջական արյունից։ ACP պատրաստուկի հիմնական բաղադրիչներն են թրոմբոցիտները (արյան թիթեղիկները) և աճի մի շարք գործոններ, որոնք կարևոր դեր են խաղում ապաքինման գործընթացում։ Ի տարբերություն թրոմբոցիտներով հարուստ պլազմայի այլ պատրաստուկների՝ ACP պատրաստուկն առանձնանում է արյան սպիտակ բջիջների, օրինակ՝ նեյտրոֆիլ գրանուլոցիտների ցածր կոնցենտրացիայով. դրանք բարձր կոնցենտրացիաների դեպքում կարող են վնասակար լինել ապաքինման գործընթացի համար։
Թրոմբոցիտներով հարուստ պլազմայի ներարկումներ
Թրոմբոցիտներով հարուստ պլազման օգտագործվում է ներարկումների ձևով՝ վերականգնողական բժշկության մեջ, ինչպես նաև կոսմետիկ միջամտություններում։ PRP պատրաստուկի կիրառումը խոստանում է մկանների ապաքինման և վերականգնման զգալի արագացում։ Բացի այդ, այն հաջողությամբ օգտագործվում է բորբոքման, արթրիտի, ցավի, վերքերի, դանդաղ ապաքինվող բաց վերքերի և մաշկի ծանր այրվածքների բուժման համար։ PRP պատրաստուկը պարունակում է աճի գործոնների բարձր մակարդակ, որոնք խթանում և պաշտպանում են ապաքինող բջիջները, որպեսզի վնասված հյուսվածքը վերականգնվի։
Կոսմետիկ բուժումների դեպքում ապացուցվել է PRP պատրաստուկի արդյունավետությունը մազերի աճը և մաշկի նորացումը խթանելու համար (հայտնի է նաև որպես վամպիրային բուժում)։
Թրոմբոցիտներից ստացված աճի գործոններ (PDGF)
Թրոմբոցիտներից ստացված աճի գործոն (PDGF) եզրույթը վերաբերում է PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C և PDGF-D գործոններին։ Այն ազդանշանային ցանց է՝ չորս լիգանդներով (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C և PDGF-D) և երկու ընկալիչներով՝ PDGFR-alpha և PDGFR-beta։
Աճի գործոնները կամ սպիտակուցները կարգավորում են բջիջների աճն ու բաժանումը։ Որպես կաթնասունների շիճուկում հայտնաբերվող հիմնական միտոգեն, որն ազատվում է թրոմբոցիտներից մակարդուկի ձևավորման ընթացքում, այն զգալի դեր է խաղում արյունատար անոթների ձևավորման (անգիոգենեզի)՝ արդեն գոյություն ունեցող արյունատար անոթների հյուսվածքից նոր անոթների աճի մեջ։