Ուլտրաձայնային լիզիս. քայլ առ քայլ ուղեցույց՝ բջիջների խանգարումը կատարելագործելու համար
Ցանկանու՞մ եք տիրապետել բջիջների լիզի գիտությանը: Այլևս չնայեք: Այս քայլ առ քայլ ուղեցույցում մենք ձեզ կուղեկցենք ուլտրաձայնային բջիջների խափանման գործընթացով և կապահովենք, որ ձեր բջիջների լիզի տեխնիկան ձեզ օպտիմալ արդյունքներ կտա: Անկախ նրանից, թե դուք փորձառու հետազոտող եք, թե սկսնակ գիտնական, այս ուղեցույցը ձեզ կտա գիտելիքներ և հմտություններ՝ օգտագործելու զոնդային տիպի sonicator՝ բջիջների հաջող խզման և լիզիզի հասնելու համար:
Ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորները հզոր բջիջների խանգարողներ են
Sonication, տեխնիկան, որն օգտագործում է զոնդի տիպի sonicator, լայնորեն օգտագործվող մեթոդ է բաց բջիջները կոտրելու համար, որը շատ կենսաբանական, կենսաքիմիական և անալիտիկ փորձերի և վերլուծությունների ժամանակ նմուշի պատրաստման կարևոր քայլ է: Sonication-ի արդյունավետությունը կախված է տարբեր գործոններից, ներառյալ առատությունը, հզորությունը, sonication-ի տևողությունը և նմուշի պատրաստումը:
Հասկանալով ձայնային արտանետման հիմքում ընկած աշխատանքային սկզբունքները և օգտագործելով ճիշտ տեխնիկան, դուք կարող եք առավելագույնի հասցնել բջիջների խափանումը՝ միաժամանակ նվազագույնի հասցնելով զգայուն մոլեկուլների վնասը:
Այս ուղեցույցի ընթացքում մենք կտրամադրենք մանրամասն հրահանգներ և գործնական խորհուրդներ, որոնք կօգնեն ձեզ հեշտությամբ նավարկելու ձայնագրման գործընթացը: Սա ներառում է համապատասխան ձայնային սարքի և ուլտրաձայնային կարգավորումների ընտրություն՝ հատուկ բջիջների տեսակների համար պայմանները օպտիմալացնելու համար:
Բջջային լիզի նշանակությունը գիտական հետազոտություններում
Բջիջների խզումը կամ լիզը գիտական հետազոտությունների տարբեր ոլորտներում օգտագործվող հիմնական մեթոդներից մեկն է, ներառյալ մոլեկուլային կենսաբանությունը, բջջային կենսաբանությունը, կենսաքիմիան և կենսաբանությունը: Բջիջների կազմալուծման գործընթացը ներառում է բջջային թաղանթի կամ բջջային պատի կոտրումը, որպեսզի ազատվեն դրա ներբջջային մոլեկուլները: Լիզիսի թիրախային մոլեկուլները կարող են լինել սպիտակուցները, նուկլեինաթթուները և բջջային այլ բաղադրիչներ: Սա նշանակում է, որ լիզը գիտնականներին հնարավորություն է տալիս վերլուծության համար բջիջներից հանել ներքին բաղադրիչները և կենսամոլեկուլները:
Ճշգրիտ և վերարտադրելի արդյունքներ ստեղծելու համար անհրաժեշտ է հասկանալ բջիջների լիզի սկզբունքները: Արդյունավետորեն կոտրելով բջիջները՝ հետազոտողները կարող են մուտք գործել ներբջջային մոլեկուլներ, որոնք նրանք պետք է ուսումնասիրեն, ինչպիսիք են ֆերմենտները, ԴՆԹ-ն, ՌՆԹ-ն և սպիտակուցները: Բջիջների տարբեր տեսակներ պահանջում են լիզի տարբեր մեթոդներ, և sonication-ը դարձել է հանրաճանաչ տեխնիկա՝ շնորհիվ իր բազմակողմանիության և արդյունավետության:
Sonication-ը ֆիզիկական մեթոդ է, որն օգտագործում է բարձր հաճախականության ձայնային ալիքներ՝ խաթարելու բջջային թաղանթները: Քանի որ ձայնային արտանետման գործընթացի ինտենսիվությունը կարող է ճշգրտորեն ճշգրտվել, ձայնային սարքերը օգտակար են փափուկ և կոշտ բջջային պատերը կոտրելու և ներբջջային բաղադրիչներ հանելու համար: Օպտիմիզացնելով օպտիմիզացման պայմանները, հետազոտողները կարող են հասնել արդյունավետ բջիջների լիզման՝ միաժամանակ պահպանելով արդյունահանվող մոլեկուլների ամբողջականությունը:
Հասկանալով Sonication-ի սկզբունքները
Նախքան ձայնային արտանետման գործընթացը սկսելը, կարևոր է բջիջների լիզատը ճիշտ պատրաստել: Ահա քայլ առ քայլ ուղեցույց, որն օգնում է ձեզ սկսել.
- Բջջային մշակույթի պատրաստում. Սկսեք աճեցնելով հետաքրքրող բջիջները համապատասխան մշակութային միջավայրերում և պայմաններում: Շարունակելուց առաջ համոզվեք, որ բջիջները առողջ են և գտնվում են աճի ցանկալի փուլում:
- Բջիջների հավաքում. Երբ բջիջները հասնեն ցանկալի միաձուլման կամ աճի փուլին, հավաքեք դրանք՝ օգտագործելով համապատասխան մեթոդ, ինչպիսին է տրիպսինացումը կամ քերելը: Բջիջները տեղափոխեք ստերիլ ցենտրիֆուգային խողովակի մեջ և ցենտրիֆուգման միջոցով գնդիկավորեք դրանք:
- Բջջային լվացում. Հեռացրեք կուլտուրայի միջավայրը և լվացեք բջջի գնդիկը համապատասխան բուֆերային լուծույթով, ինչպիսին է ֆոսֆատով բուֆերացված ֆիզիոլոգիական լուծույթը (PBS): Այս քայլը օգնում է հեռացնել ցանկացած մնացորդային միջավայր և աղտոտիչներ:
- Բջջային վերակասում. Բջջային գնդիկը նորից կասեցրեք ձեր փորձին համապատասխան լիզի բուֆերի մեջ: Լիզի բուֆերը պետք է պարունակի լվացող միջոցներ կամ ֆերմենտներ, որոնք խանգարում են բջջային թաղանթը և ազատում ներբջջային պարունակությունը:
- Բջջային Լիզիս. Բջջային կախոցը համասեռացրեք՝ օգտագործելով զոնդային տիպի sonicator՝ ամբողջական լիզում ապահովելու համար: Կախված բջջի տեսակից և փորձարարական պահանջներից, ձեզ կարող է անհրաժեշտ լինել ինկուբացնել բջիջների լիզատը հատուկ ջերմաստիճանում կամ ավելացնել լրացուցիչ ռեակտիվներ՝ լիզին ուժեղացնելու համար:
- Բջջային բեկորների հեռացում. Ցենտրիֆուգեք բջիջների լիզատը բարձր արագությամբ՝ բջջի մնացորդները, օրգանելները և այլ չլուծվող նյութերը գնդիկավորելու համար: Տեղափոխեք ցանկալի ներբջջային բաղադրիչները պարունակող գերնպատակը նոր խողովակի մեջ:
- Սպիտակուցների քանակականացում. Չափել բջիջների լիզատի սպիտակուցի կոնցենտրացիան՝ օգտագործելով համապատասխան մեթոդ, ինչպիսին է Բրեդֆորդի կամ BCA վերլուծությունը: Այս քայլն օգնում է որոշել համապատասխան նոսրացումները հոսանքով ներքևող ծրագրերի համար:
- Նմուշի բաժանում. Կախված ձեր փորձարարական նախագծումից, բջիջների լիզատը բաժանեք համապատասխան ծավալների և պահեք դրանք համապատասխան ջերմաստիճանում ապագա օգտագործման համար:
Հետևելով այս քայլերին՝ դուք բջիջների լիզատը ճիշտ և պատրաստ եք պատրաստում ձայնային ախտահանման համար՝ օպտիմալ արդյունքների հասնելու համար:
Բջջային լուծույթի պատրաստման քայլ առ քայլ ուղեցույց
Այժմ, երբ դուք կարդացել եք բջիջների լիզատի պատրաստման ամբողջական գործընթացի մասին, մենք ցանկանում ենք կենտրոնանալ ձայնային լուծույթի փուլի վրա: The sonication պայմանները կարեւոր են, որպեսզի հասնել արդյունավետ բջիջների lysis. Հիմնական պարամետրերը, որոնք պետք է հաշվի առնել, երբ օպտիմիզացնում են ձայնային ձայնը, ներառում են տևողությունը, հզորությունը և նմուշի պատրաստումը: Ահա որոշ ուղեցույցներ, որոնք կօգնեն ձեզ օպտիմալացնել այս պարամետրերը.
- Տեւողությունը: Sonication-ի տեւողությունը կախված է բջիջի տեսակից և բջիջների խանգարման ցանկալի մակարդակից: Սկսեք ավելի կարճ տևողություններից և անհրաժեշտության դեպքում աստիճանաբար ավելացրեք: Խուսափեք ավելցուկային արտանետման ժամանակներից, քանի որ դրանք կարող են հանգեցնել չափազանց ջերմության առաջացման և զգայուն մոլեկուլների դենատուրացիայի:
- Ուժ: Ձայնային սարքի հզորության կարգավորումը պետք է օպտիմիզացված լինի՝ ելնելով բջջի տեսակից և բջիջների խանգարման ցանկալի մակարդակից: Էլեկտրաէներգիայի ավելի բարձր կարգավորումները կարող են հանգեցնել ավելի արդյունավետ բջիջների լուծարման, բայց կարող են նաև առաջացնել չափազանց ջերմություն: Կարևոր է հավասարակշռել բջիջների խանգարումը նմուշի ամբողջականության հետ:
- Նմուշի պատրաստում. Նմուշի պատշաճ պատրաստումը չափազանց կարևոր է արդյունավետ ձայնագրման համար: Համոզվեք, որ բջիջների լիզատը զերծ է բեկորներից և չլուծվող նյութերից, որոնք կարող են խանգարել ձայնային արտանետման արդյունավետությանը: Անհրաժեշտության դեպքում ցենտրիֆուգեք լիզատը՝ նախքան ձայնային ախտահանումը:
- Ջերմաստիճանի վերահսկում. Sonication-ը առաջացնում է ջերմություն, որը կարող է վնասակար լինել զգայուն մոլեկուլների համար: Ջերմային վնասը նվազագույնի հասցնելու համար մտածեք ջերմաստիճանի վերահսկման հնարավորություններով օժտող սարք օգտագործելու մասին կամ սառը սենյակում կամ սառույցի վրա ձայնային ախտահանում կատարեք:
- Sonicator զոնդի դիրքավորումը. Sonicator զոնդի ճիշտ դիրքավորումը շատ կարևոր է արդյունավետ ձայնագրման համար: Զոնդը պետք է ընկղմվի բջջի լիզատի մեջ, բայց չդիպչի տարայի պատերին՝ խուսափելու համար ավելորդ թրթռումներից և նմուշի տարայի հնարավոր վնասից:
Զգուշորեն հաշվի առնելով այս պարամետրերը և օպտիմիզացնելով ձայնային արտանետման պայմանները, դուք հասնում եք արդյունավետ բջիջների լիզի՝ պահպանելով արդյունահանվող մոլեկուլների ամբողջականությունը:
Օպտիմալացում Sonication պայմանները արդյունավետ բջջային Lysis
Չնայած առաջարկվող ուղեցույցներին հետևելուն, հետազոտողները կարող են բախվել մարտահրավերների բջիջների լիզման և ձայնագրման գործընթացում: Այս մարտահրավերները հասկանալը և խնդիրների վերացման ռազմավարությունների կիրառումը կարող են օգնել հաղթահարել դրանք: Ահա մի քանի ընդհանուր մարտահրավերներ և դրանց համապատասխան անսարքությունների վերացման խորհուրդներ.
- Անբավարար բջջային լիզի. Եթե բջիջների լիզատը չի տալիս բջիջների խզման ցանկալի մակարդակը, հաշվի առեք ձայնային արտանետման տեւողությունը կամ հզորությունը մեծացնելը: Բացի այդ, համոզվեք, որ բջիջների լիզատը պատշաճ կերպով պատրաստված է և զերծ է բեկորներից կամ չլուծվող նյութերից, որոնք կարող են խանգարել ձայնային արտանետման արդյունավետությանը:
- Ավելորդ փրփուրի առաջացում. Ավելորդ փրփուրը ձայնային արտանետման ժամանակ կարող է խանգարել բջիջների արդյունավետ լիզմանը: Փրփուրի առաջացումը նվազագույնի հասցնելու համար օգտագործեք լիզի բուֆեր՝ լվացող միջոցի համապատասխան կոնցենտրացիայով և խուսափեք ավելորդ խառնումից կամ խառնումից ձայնային ախտահանման գործընթացում:
- Նմուշի ջեռուցում. Ավելորդ ջերմության առաջացումը ձայնային լուծույթի ընթացքում կարող է դեֆորմացիայի ենթարկել զգայուն մոլեկուլները և վտանգել բջիջների լիզատի ամբողջականությունը: Նմուշի ջեռուցումը նվազագույնի հասցնելու համար հաշվի առեք ջերմաստիճանի վերահսկման հնարավորություններով օպերացիոն սարքի օգտագործումը կամ սառը սենյակում կամ սառույցի վրա ձայնային ախտահանում կատարեք:
- Նմուշի աղտոտվածություն. Աղտոտումը կարող է առաջանալ բջիջների լիզի և ձայնային լուծույթի ժամանակ, ինչը հանգեցնում է ոչ ճշգրիտ արդյունքների: Աղտոտվածությունը նվազագույնի հասցնելու համար համոզվեք, որ օգտագործվող բոլոր սարքավորումները և ռեակտիվները ստերիլ են և զերծ աղտոտիչներից: Նմուշի պատրաստման և մշակման ժամանակ օգտագործեք պատշաճ ասեպտիկ տեխնիկա:
Տեղյակ լինելով այս մարտահրավերներին և կիրառելով անսարքությունների վերացման համապատասխան ռազմավարություններ՝ դուք կարող եք հաղթահարել խոչընդոտները և հասնել բջիջների հաջող լուծարման՝ օգտագործելով զոնդի տիպի sonicator:
Բջջային լուծարման ընդհանուր մարտահրավերներ և անսարքությունների վերացման խորհուրդներ
Ձեր բջջային լիզատը հաջողությամբ սոնիկացնելուց հետո անհրաժեշտ է ճիշտ վարվել ձայնային նմուշների հետ՝ արդյունահանվող մոլեկուլների ամբողջականությունը պահպանելու համար: Ահա մի քանի լավագույն պրակտիկա՝ ձայնային նմուշների հետ աշխատելու համար.
- Խուսափեք սառեցման-հալման կրկնվող ցիկլերից. Սառեցման և հալեցման ցիկլերը կարող են հանգեցնել զգայուն մոլեկուլների քայքայմանը: Լավագույնն այն է, որ ձայնագրված նմուշները բաժանվեն համապատասխան ծավալների և պահվեն դրանք համապատասխան ջերմաստիճանում, որպեսզի խուսափեն սառեցման-հալման կրկնվող ցիկլերից:
- Պատշաճ պահեստավորում. Պահպանեք ձայնագրված նմուշները համապատասխան ջերմաստիճանում և անհրաժեշտության դեպքում պաշտպանեք դրանք լույսից: Հետևեք առաջարկվող պահպանման պայմաններին հատուկ մոլեկուլների կամ ներքևում հետաքրքրող կիրառությունների համար:
- Պիտակավորում և փաստաթղթավորում. Պատշաճ կերպով պիտակավորեք ձայնագրված նմուշները համապատասխան տեղեկատվությամբ, ներառյալ ամսաթիվը, նմուշի անվանումը և ձայնային արտանետման պայմանները: Պահպանեք ձայնագրման գործընթացի մանրամասն փաստաթղթերը և ձեռնարկված փոփոխությունները կամ անսարքությունների վերացման քայլերը: Եթե դուք օգտագործում եք Hielscher թվային ձայնային սարք, դուք կարող եք գտնել ձայնագրման տվյալները, ինչպիսիք են ամսաթիվը, ժամը, ամպլիտուդը, հզորությունը և ցիկլերը ինտեգրված SD-քարտում: Որպեսզի ձեր նմուշի հետ ձայնագրման տվյալները համապատասխանեցնեք, համոզվեք, որ ձեր նմուշը նշում եք ամսաթիվը և ժամը:
- Խուսափեք խաչաձև աղտոտումից. Նմուշների միջև խաչաձև աղտոտումը կանխելու համար օգտագործեք առանձին խողովակներ, ծայրեր և այլ լաբորատոր սարքավորումներ՝ ձայնային լուծույթով նմուշների հետ աշխատելիս: Ուլտրաձայնային զոնդը պատշաճ կերպով մաքրեք ալկոհոլով: Անհրաժեշտության դեպքում դուք կարող եք ավտոկլավացնել ուլտրաձայնային զոնդը: Մաքրեք և մանրէազերծեք ցանկացած սարքավորում, որը շփվում է նմուշների հետ՝ նվազագույնի հասցնելու աղտոտման վտանգը:
Եթե դուք հետևում եք այս լավագույն պրակտիկայի խորհուրդներին, դուք ապահովում եք ձեր ձայնային նմուշների ամբողջականությունը և օգտագործելիությունը հոսանքով ներքևող հավելվածների համար:
Ինչպե՞ս է Sonication-ը համեմատվում այլ Lysis տեխնիկայի հետ:
Sonication մեթոդը, որն օգտագործում է բարձր հաճախականության ձայնային ալիքներ բջջային մեմբրանները խաթարելու համար, առաջարկում է մի քանի առավելություններ՝ համեմատած բջիջների լիզի այլ մեթոդների հետ: Այն հատկապես արդյունավետ է բաց կոշտ բջջային պատերը կոտրելու և ներբջջային բաղադրիչները հանելու համար: Օպտիմիզացնելով օպտիմիզացման պայմանները, հետազոտողները հասնում են արդյունավետ բջիջների լիզիզի և ստանում թիրախային մոլեկուլների բարձր ելք: Միևնույն ժամանակ, արդյունահանվող մոլեկուլների ամբողջականությունը պահպանվում է՝ ապահովելով նմուշի գերազանց որակ հետագա վերլուծության համար: Ի հակադրություն, այլ մեթոդներ, ինչպիսիք են մեխանիկական խափանումը կամ քիմիական լուծույթը, կարող են այդքան էլ մեղմ չլինել և կարող են հանգեցնել թիրախային մոլեկուլների քայքայմանը:
Sonication-ը նաև ապահովում է խափանումների ինտենսիվության և տևողության նկատմամբ վերահսկողության բարձր մակարդակ՝ դարձնելով այն բազմակողմանի և արդյունավետ տեխնիկա տարբեր տեսակի բջիջների և մոլեկուլների համար: Հետևաբար, sonication-ն ավելի ու ավելի է գերադասվում գիտական հետազոտություններում իր արդյունավետության և արդյունահանվող բաղադրիչների որակը պահպանելու ունակության համար:
Լիզիսի և բջիջների քայքայման համար բարձր արդյունավետության Sonicators
Hielscher Ultrasonics-ը կանգնած է ինժեներական, արտադրության և ժամանակակից զոնդ-ձայնային սարքերի առաջնագծում, որոնք հարմարեցված են տարբեր կիրառությունների համար, ինչպիսիք են նմուշի պատրաստումը, բջիջների լիզը, ԴՆԹ-ի մասնատումը և բջիջների լուծույթը: Համապարփակ պորտֆոլիոն ներառում է զոնդ-ձայնային սարքեր, բարձր թողունակության ձայնային սարքեր, որոնք նախատեսված են 96 ջրհորի ափսեների և միկրո սալերի համար, ինչպես նաև ուլտրաձայնային գավաթի եղջյուրները: Հատկանշվելով ձայնային արտանետման պարամետրերի ճշգրիտ հսկողությամբ՝ Hielscher sonicators-ն առաջարկում է անզուգական հարմարվողականություն տարբեր բջիջների, հյուսվածքների և մոլեկուլների հստակ պահանջներին: Մշակման հուսալիությունը ապահովում է փորձերի հետևողական վերարտադրելիությունը՝ հեշտացնելով բարձրորակ արդյունքների հասնելը յուրաքանչյուր կրկնությունից:
- բարձր արդյունավետություն
- գերժամանակակից տեխնոլոգիա
- հուսալիություն & ամրություն
- կարգավորելի, ճշգրիտ գործընթացի վերահսկում
- խմբաքանակ & ներդիր
- ցանկացած ծավալի համար
- խելացի ծրագրակազմ
- խելացի գործառույթներ (օրինակ՝ ծրագրավորվող, տվյալների արձանագրություն, հեռակառավարում)
- հեշտ և անվտանգ գործելու համար
- ցածր սպասարկում
- CIP (մաքուր տեղում)
Դիզայն, արտադրություն և խորհրդատվություն – Որակյալ Արտադրված է Գերմանիայում
Hielscher ուլտրաձայնային սարքերը հայտնի են իրենց բարձր որակի և դիզայնի չափանիշներով: Հզորությունը և հեշտ շահագործումը թույլ են տալիս մեր ուլտրաձայնային սարքերի սահուն ինտեգրումը արդյունաբերական օբյեկտներում: Կոպիտ պայմանները և պահանջկոտ միջավայրերը հեշտությամբ կառավարվում են Hielscher ուլտրաձայնային սարքերի կողմից:
Hielscher Ultrasonics-ը ISO սերտիֆիկացված ընկերություն է և հատուկ շեշտադրում է կատարում բարձր արդյունավետության ուլտրաձայնային սարքերի վրա, որոնք բնութագրվում են ժամանակակից տեխնոլոգիաներով և օգտագործողների համար հարմարավետությամբ: Իհարկե, Hielscher ուլտրաձայնային սարքերը համապատասխանում են ԵԽ-ին և համապատասխանում են UL, CSA և RoH-ների պահանջներին:
Ստորև բերված աղյուսակը ցույց է տալիս մեր լաբորատոր չափի ուլտրաձայնային սարքերի մոտավոր մշակման հզորությունը.
Առաջարկվող սարքեր | Խմբաքանակի ծավալը | Հոսքի արագություն |
---|---|---|
UIP400MTP 96- Well Plate Sonicator | բազմաբնակարան հորատանցք / միկրոտիտրային թիթեղներ | ԱԺ |
Ուլտրաձայնային CupHorn | CupHorn սրվակների կամ բաժակի համար | ԱԺ |
GDmini2 | ուլտրաձայնային միկրո հոսքի ռեակտոր | ԱԺ |
VialTweeter | 0.5-ից 1.5մլ | ԱԺ |
UP100H | 1-ից 500 մլ | 10-ից 200 մլ / րոպե |
UP200Ht, UP200 St | 10-ից 1000 մլ | 20-ից 200 մլ / րոպե |
UP400 Փ | 10-ից 2000 մլ | 20-ից 400 մլ / րոպե |
UIP500hdT | 100-ից 5000 մլ | 0.1-ից 4լ/րոպե |
Ուլտրաձայնային մաղով թափահարող | ԱԺ | ԱԺ |
Կապ մեզ հետ: / Հարցրեք մեզ:
Բջիջների լիզի և ձայնագրման կիրառությունները տարբեր ոլորտներում
Բջիջների հաջող լիզիզի հասնելու համար անհրաժեշտ է ունենալ ճիշտ գործիքներ և սարքավորումներ: Ահա մի քանի հիմնական գործիքներ, որոնք սովորաբար օգտագործվում են բջիջների լիզման և ձայնագրման համար.
- Ընտրեք ճիշտ Sonicator. Sonicators կամ ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորներ են հիմնական գործիքները, որոնք օգտագործվում են բջջային lysis միջոցով sonication. Համոզվեք, որ դուք օգտագործում եք ճշգրիտ կառավարվող զոնդի տիպի ձայնային սարք, քանի որ արդյունքները կարող են հուսալիորեն կրկնվել: Խուսափեք ուլտրաձայնային լոգանքներից՝ լիզի, արդյունահանման և ԴՆԹ-ի մասնատման համար: Ուլտրաձայնային լոգանքները հիմնականում մաքրման համար են: Նրանք չեն տալիս վերարտադրելի արդյունքներ: Նկատի ունենալով այս կետերը՝ ընտրեք սարք, որն առաջարկում է էներգիայի համապատասխան կարգավորումներ, փոփոխվող զոնդերի չափսեր և ջերմաստիճանի վերահսկման հնարավորություններ ձեր կոնկրետ փորձի համար: Առանձնահատկություններ, ինչպիսիք են օրինակի լուսավորությունը և տվյալների ավտոմատ արձանագրումը, հեշտացնում են ձեր աշխատանքը:
- Ցենտրիֆուգներ: Ցենտրիֆուգները օգտագործվում են բջիջները գնդիկավորելու, բեկորները հեռացնելու և բջիջների լիզման ժամանակ բջջային բաղադրիչները առանձնացնելու համար: Ընտրեք ցենտրիֆուգներ համապատասխան ռոտորի տեսակներով և արագությամբ՝ ձեր փորձնական պահանջներին համապատասխանելու համար:
- Պիպետների և պիպետների խորհուրդներ. Ճշգրիտ և ճշգրիտ pipetting-ը շատ կարևոր է բջիջների լիզման և նմուշի մշակման ժամանակ: Համոզվեք, որ ունեք մի շարք պիպետներ և խորհուրդներ, որոնք հարմար են ձեր փորձի մեջ օգտագործված ծավալներին:
- Լիզիս բուֆերներ. Ընտրեք lysis բուֆերներ, որոնք օպտիմիզացված են ձեր հատուկ բջիջների տեսակների և փորձարարական ծրագրերի համար: Հաշվի առեք բուֆերները, որոնք պարունակում են լվացող միջոցներ կամ ֆերմենտներ, որոնք արդյունավետ կերպով խաթարում են բջջային մեմբրանները:
- Նմուշի տարաներ. Օգտագործեք համապատասխան նմուշի տարաներ, ինչպիսիք են միկրոցենտրիֆուգային խողովակները կամ սրվակները, որպեսզի պահեն բջջային լիզատը ձայնային ախտահանման ընթացքում: Համոզվեք, որ բեռնարկղերը համատեղելի են sonication-ի հետ և չեն խանգարում ուլտրաձայնային ալիքներին:
- Ջերմաստիճանի վերահսկման սարքավորում. Ջերմաստիճանի նկատմամբ զգայուն նմուշների հետ աշխատելու դեպքում օգտագործեք ներկառուցված ջերմաստիճանի վերահսկման հնարավորություններով ձայնային սարքը կամ ներդնեք ջերմաստիճանով կառավարվող ջրային բաղնիքներում կամ սառնարաններում՝ նմուշի ամբողջականությունը պահպանելու համար:
Ձեր տրամադրության տակ ունենալով ճիշտ գործիքներ և սարքավորումներ՝ դուք կարող եք ապահովել բջիջների հաջող լիզացիա և հասնել օպտիմալ արդյունքների ձեր փորձերում:
Գրականություն / Հղումներ
- Giricz Z., Varga Z.V., Koncsos G., Nagy C.T., Görbe A., Mentzer R.M. Jr, Gottlieb R.A., Ferdinandy P. (2017): Autophagosome formation is required for cardioprotection by chloramphenicol. Life Science Oct 2017. 11-16.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.