ASTM E2799-22 արձանագրություն հակամանրէային գնահատման համար
Hielscher UIP400MTP-ը հզոր և արդյունավետ բազմաբնակարան ափսեի ձայնագրիչ է, որը նախատեսված է ASTM E2799-22 արձանագրության մեջ ձայնային ձայնագրման փուլը պարզեցնելու համար: Միատեսակ ուլտրաձայնային էներգիա փոխանցելով ամբողջ միկրոտիտրային ափսեի վրա՝ UIP400MTP-ն ապահովում է բիոֆիլմերի հետևողական և հուսալի անջատումը կցորդիչի կափարիչներից՝ առանց բջիջները վնասելու կամ նմուշի ամբողջականությունը խախտելու: Դրա բարձր թողունակությունը և օգտագործողի համար հարմար գործառնությունը զգալիորեն նվազեցնում են մշակման ժամանակը` միաժամանակ բարձրացնելով վերարտադրելիությունը՝ դարձնելով այն իդեալական լուծում կենսաֆիլմի կենսունակության և հակամանրէային արդյունավետության փորձարկումներ իրականացնող լաբորատորիաների համար:
ASTM E2799
ASTM E2799-ը ստանդարտացված փորձարկման մեթոդ է, որը նախատեսված է բիոֆիլմերի դեմ հակամանրէային նյութերի արդյունավետությունը գնահատելու համար, հատկապես կենտրոնանալով Pseudomonas aeruginosa-ի վրա: Բիոֆիլմերը բարդ մանրէաբանական համայնքներ են, որոնք կպչում են մակերեսներին և բարձր դիմադրություն են ցուցաբերում հակամանրէային բուժմանը, ինչը նրանց լուրջ մարտահրավեր է դարձնում առողջապահական, արդյունաբերական և բնապահպանական համատեքստերում: Այս մեթոդը օգտագործում է բիոֆիլմի վերացման նվազագույն կոնցենտրացիան (MBEC)՝ բիոֆիլմի իրատեսական պայմաններում ախտահանիչ նյութերի փորձարկման հուսալի և վերարտադրելի շրջանակ ապահովելու համար:
96 ջրհորի ափսեի ձայնային սարք UIP400MTP բարձր թողունակության ցուցադրման համար
Ինչպե՞ս է Sonication-ը նպաստում ASTM E2799-ին:
Sonication-ը կարևոր դեր է խաղում ASTM E2799 արձանագրության մեջ՝ հեշտացնելով բիոֆիլմերի անջատումը փորձարկման մակերեսներից՝ ապահովելով մանրէների կենսունակության ճշգրիտ գնահատումը բուժումից հետո: Օգտագործելով վերահսկվող ուլտրաձայնային էներգիա, արձանագրությունը հասնում է արդյունավետ և հետևողական բիոֆիլմի խախտման՝ առանց բջիջները վնասելու՝ հնարավորություն տալով ճշգրիտ և վերարտադրելի արդյունքների: Սա ASTM E2799-ը դարձնում է կարևոր գործիք բիոֆիլմի հետազոտությունների առաջխաղացման և արդյունավետ հակամանրէային ռազմավարությունների մշակման համար:
Ինչպես կատարել MBEC վերլուծությունը ASTM E2799-22-ի համաձայն
ASTM E2799-22 արձանագրությունը նախանշում է բիոֆիլմերի դեմ հակամանրէային նյութերի արդյունավետության գնահատման քայլերը: Hielscher UIP400MTP միկրոտիտրային ափսեի ձայնագրիչն օգտագործելիս արձանագրությունը կարող է հարմարեցվել՝ ներառելու բիոֆիլմի անջատման այս առաջադեմ ձայնային մեթոդը: Ստորև բերված է քայլերի նկարագրությունը, որոնք հարմարեցված են UIP400MTP միկրոպլատների ձայնային սարքի օգտագործմանը.
- Կենսաֆիլմերի պատրաստում
Պատրաստեք ստերիլ 96 հորանի միկրոտիտրային ափսե՝ անջատվող կցորդային կափարիչներով:
Հորերը պատվաստել ստանդարտացված բակտերիալ կախոցով համապատասխան աճի միջավայրում:
Կցիչի կափարիչը դրեք ափսեի վրա՝ համոզվելով, որ կցորդները ամբողջությամբ ընկղմված են բակտերիալ կախոցի մեջ:
Ինկուբացրեք թիթեղը վերահսկվող պայմաններում (օրինակ՝ ջերմաստիճան և ժամանակ), որպեսզի թույլ տա բիոֆիլմի ձևավորումը ցցերի վրա: - Բուժում հակամանրէային միջոցներով
Կենսաթաղանթի ձևավորումից հետո միջավայրը փոխարինեք թարմ միջավայրով, որը պարունակում է փորձարկման հակամանրէային նյութեր տարբեր կոնցենտրացիաներում:
Կրկին ամրացրեք կցորդի կափարիչը և ինկուբացրեք փորձարկման նախագծում նշված պայմաններում: - Նախապատրաստում բիոֆիլմի ջոկատի համար
Բուժումից հետո ողողեք կցորդի կափարիչը՝ ընկղմելով այն ստերիլ ողողման լուծույթի մեջ՝ հեռացնելու մնացորդային հակամանրէային նյութերը և թույլ կպած պլանկտոնային բջիջները: - Կենսաֆիլմի անջատում UIP400MTP Sonicator-ի միջոցով
Պատրաստեք թարմ 96 հորանի միկրոտիտրային ափսե, որը պարունակում է վերականգնման միջավայր (օրինակ՝ չեզոքացնող արգանակ):
Անջատեք բիոֆիլմերը՝ կցորդի կափարիչը դնելով վերականգնման միջավայրի ափսեի հորերի մեջ:
Տեղադրեք ափսեը UIP400MTP ձայնային սարքի մեջ՝ համոզվելով, որ կափարիչը և թիթեղը ճիշտ հավասարեցված են:
Նախադրեք sonicator-ը 70%-80% ամպլիտուդի վրա և 3-4 րոպե ցիկլային ռեժիմում ձայնագրեք՝ ապահովելու բիոֆիլմի հետևողական անջատում առանց բջիջների լուծարման: - Բիոֆիլմի կենսունակության գնահատում
Ձայնավորումից հետո մշակեք տարանջատված բիոֆիլմի բջիջներ պարունակող վերականգնման միջավայրը՝ օգտագործելով ստանդարտ մանրէաբանական կամ անալիտիկ մեթոդներ, ինչպիսիք են.- Գաղութ ձևավորող միավորների (CFU) հաշվարկներ. Կատարեք սերիական նոսրացումներ և թիթեղներ ագարի վրա՝ կենսունակ բջիջների հաշվառման համար:
- Օպտիկական խտության (OD) չափումներ. Բջջի խտությունը գնահատելու համար օգտագործեք սպեկտրոֆոտոմետրիկ անալիզ:
- Ֆլյուորեսցենցիայի վրա հիմնված կենսունակության փորձարկումներ. քանակականացնել կենդանի և մեռած բջիջները՝ օգտագործելով լյումինեսցենտային ներկանյութեր:
- տվյալների վերլուծություն
Համեմատեք մշակված և չմշակված բիոֆիլմերի կենսունակության տվյալները՝ որոշելու հակամանրէային նյութերի արդյունավետությունը:
Հաշվարկեք բիոֆիլմի վերացման նվազագույն կոնցենտրացիան (MBEC)՝ հիմնվելով կենսունակ բիոֆիլմի բջիջները վերացնելու համար պահանջվող կոնցենտրացիայի վրա: - որակի հսկողություն
Ապահովեք հետևողական ձայնային պայմաններ՝ կանոնավոր չափավորելով UIP400MTP-ը և հաստատելով, որ բիոֆիլմի անջատման գործընթացը չի հանգեցնում բջիջների զգալի լիզիզի կամ ոչնչացման:
Արդյունքները հաստատելու համար ներառեք համապատասխան հսկիչ սարքեր, ինչպիսիք են չմշակված բիոֆիլմերը և միայն միջին չափի բլանկները:
Բջիջների վրա ձևավորված բիոֆիլմի բջիջները տեղահանվել են ձայնային ախտահանմամբ (Hielscher Ultrasound Technology, Teltow, Germany, UIP250MTP) 5 րոպեի ընթացքում 96 ջրհորի ափսեներում, որոնք պարունակում են թարմ կուլտուրայի միջավայր՝ բջիջները վերականգնելու համար:
(Նկար և ուսումնասիրություն՝ ©de Oliveira et al., 2016)
UIP400MTP-ն ինտեգրելով ASTM E2799-22 աշխատանքային հոսքին, բիոֆիլմի անջատման գործընթացը օպտիմիզացված է հետևողականության, արդյունավետության և բարձր թողունակության ծրագրերի համար:
Գրականություն / Հղումներ
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- ASTM E2799-22 Standard Test Method for Testing Disinfectant Efficacy against Pseudomonas aeruginosa Biofilm using the MBEC Assay
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Հաճախակի տրվող հարցեր
Ի՞նչ է ASTM E2799-ը:
ASTM E2799-ը ստանդարտ փորձարկման մեթոդ է, որը հաստատվել է ASTM International-ի կողմից Pseudomonas aeruginosa բիոֆիլմի դեմ ախտահանիչ արդյունավետության փորձարկման համար՝ օգտագործելով MBEC Assay: Մեթոդը լայնորեն օգտագործվում է բիոֆիլմի ձևավորումը, հակամանրէային արդյունավետությունը և նյութի մակերեսային փոխազդեցությունները գնահատելու համար՝ հնարավորություն տալով ստանդարտացված համեմատություններ կենսաֆիլմի հետ կապված հետազոտություններում:
Ո՞րն է տարբերությունը ASTM E2799-22-ի և ASTM E2799-11-ի, ASTM E2799-12-ի և ASTM E2799-17-ի միջև:
ASTM E2799-ը ստանդարտացված փորձարկման մեթոդ է, որը գնահատում է ախտահանիչների արդյունավետությունը Pseudomonas aeruginosa բիոֆիլմերի դեմ՝ օգտագործելով MBEC (Կենսաֆիլմի վերացման նվազագույն կոնցենտրացիան): Այս մեթոդը ենթարկվել է մի քանի վերանայումների՝ դրա ճշգրտությունն ու կիրառելիությունը բարձրացնելու համար:
- ASTM E2799-11. Սա ստանդարտի սկզբնական թողարկումն էր՝ սահմանելով P. aeruginosa բիոֆիլմերի դեմ ախտահանիչ միջոցների արդյունավետությունը գնահատելու հիմնական ընթացակարգերը՝ օգտագործելով MBEC վերլուծությունը:
- ASTM E2799-12. Այս վերանայումը ներառում էր փոքր տեխնիկական թարմացումներ՝ հստակությունը բարելավելու և 2011 թվականի տարբերակում հայտնաբերված անորոշությունները վերացնելու համար:
- ASTM E2799-17. Այս թարմացումում արձանագրության մեջ կատարվել են ավելի էական փոփոխություններ, ներառյալ բիոֆիլմի մշակման գործընթացի, բուժման կիրառման և չեզոքացման ընթացակարգերի ճշգրտումներ՝ նպատակ ունենալով բարձրացնել վերարտադրելիությունը և համապատասխանեցնել կենսաֆիլմի հետազոտության առաջընթացին:
- ASTM E2799-22. Ամենավերջին վերանայումն արտացոլում է բիոֆիլմի ուսումնասիրությունների վերջին գիտական ըմբռնումը և տեխնոլոգիական առաջընթացը: Այն ներառում է բիոֆիլմի աճի, բուժման և վերլուծության կատարելագործված մեթոդոլոգիաներ՝ ապահովելով, որ թեստային մեթոդը մնում է համապատասխան և արդյունավետ ախտահանիչ միջոցների արդյունավետության ընթացիկ գնահատումների համար:
ASTM E2799-ի յուրաքանչյուր վերանայում կատարվել է մեթոդի հուսալիությունը, վերարտադրելիությունը և համապատասխանությունը բարելավելու համար՝ ապահովելով այն արդիական մնալ կենսաֆիլմի հետազոտության ոլորտում գիտական և տեխնոլոգիական առաջընթացին:
Ո՞րն է տարբերությունը MBEC-ի և MBIC-ի վերլուծությունների միջև:
MBEC (Բիոֆիլմի վերացման նվազագույն կոնցենտրացիա) և MBIC (Բիոֆիլմի նվազագույն արգելակման կոնցենտրացիա) փորձարկումների հիմնական տարբերությունը նրանց ուշադրության կենտրոնում է.
MBEC վերլուծություններ չափել հակամանրէային նյութի նվազագույն կոնցենտրացիան, որն անհրաժեշտ է նախապես ձևավորված կենսաթաղանթները ամբողջությամբ վերացնելու համար՝ գնահատելով նյութի կարողությունը՝ ոչնչացնելու կենսաֆիլմում ներկառուցված միկրոօրգանիզմները:
MBIC վերլուծություններ որոշել հակամանրէային նյութի ամենացածր կոնցենտրացիան, որը կանխում է բիոֆիլմի սկզբնական ձևավորումը՝ գնահատելով բիոֆիլմի զարգացումը արգելակելու նրա կարողությունը:
Երկու փորձարկումներն էլ կարևոր են բիոֆիլմերի դեմ հակամանրէային դեղամիջոցների արդյունավետությունը հասկանալու համար, բայց ուղղված են կենսաթաղանթի կյանքի ցիկլի տարբեր փուլերին:
Իմացեք, թե ինչպես է UIP400MTP միկրոափսե ձայնային սարքը օգտագործվում MBIC վերլուծություններում բիոֆիլմի տեղահանման համար:
Նոր միկրոպլետային ուլտրաձայնային սարքեր՝ համառ բիոթաղանթները կոտրելու համար
Hielscher Ultrasonics-ը արտադրում է բարձր արդյունավետության ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորներ լաբորատորիա դեպի արդյունաբերական չափս.