ASTM E2799-22 արձանագրություն հակամանրէային արդյունավետության գնահատման համար
Hielscher UIP400MTP-ը հզոր և արդյունավետ բազմահորիկ թիթեղների ուլտրաձայնային մշակիչ է, որը նախատեսված է ASTM E2799-22 արձանագրության ուլտրաձայնային մշակման փուլը պարզեցնելու համար։ Ամբողջ միկրոտիտրային թիթեղով հավասարաչափ ուլտրաձայնային էներգիա հաղորդելով՝ UIP400MTP-ն ապահովում է կենսաթաղանթների հետևողական և հուսալի անջատում ցցիկավոր կափարիչներից՝ առանց բջիջները վնասելու կամ նմուշի ամբողջականությունը խախտելու։ Մեծ քանակությամբ նմուշներ մշակելու հնարավորությունը և օգտագործման հարմարավետությունը զգալիորեն կրճատում են մշակման ժամանակը՝ միաժամանակ բարձրացնելով արդյունքների վերարտադրելիությունը, ինչը այն դարձնում է իդեալական լուծում կենսաթաղանթների կենսունակության վերլուծություններ և հակամանրէային արդյունավետության փորձարկումներ կատարող լաբորատորիաների համար։
ASTM E2799
ASTM E2799-ը ստանդարտացված փորձարկման մեթոդ է, որը նախատեսված է կենսաթաղանթների նկատմամբ հակամանրէային նյութերի արդյունավետությունը գնահատելու համար՝ հատուկ ուշադրություն դարձնելով Pseudomonas aeruginosa-ին։ Կենսաթաղանթները բարդ մանրէային համայնքներ են, որոնք կպչում են մակերեսներին և հակամանրէային մշակումների նկատմամբ ցուցաբերում են բարձր դիմադրողականություն՝ լուրջ մարտահրավեր ստեղծելով առողջապահական, արդյունաբերական և շրջակա միջավայրին առնչվող ոլորտներում։ Այս մեթոդում կիրառվում է կենսաթաղանթի վերացման նվազագույն կոնցենտրացիայի (MBEC) վերլուծությունը՝ կենսաթաղանթների իրատեսական պայմաններում ախտահանիչների փորձարկման համար հուսալի և վերարտադրելի հիմք ապահովելու նպատակով։
96-հորիկավոր թիթեղների ուլտրաձայնային մշակիչ UIP400MTP մեծ քանակությամբ նմուշների սկրինինգի համար
Ինչպե՞ս է ուլտրաձայնային մշակումը նպաստում ASTM E2799-ին։
Ուլտրաձայնային մշակումը կարևոր դեր է խաղում ASTM E2799 արձանագրության մեջ՝ հեշտացնելով կենսաթաղանթների անջատումը փորձարկվող մակերեսներից և ապահովելով մանրէների կենսունակության ճշգրիտ գնահատում մշակումից հետո։ Վերահսկվող ուլտրաձայնային էներգիայի կիրառմամբ արձանագրությունն ապահովում է կենսաթաղանթների արդյունավետ և հետևողական քայքայում՝ առանց բջիջները վնասելու, ինչը հնարավորություն է տալիս ստանալ ճշգրիտ և վերարտադրելի արդյունքներ։ Դրա շնորհիվ ASTM E2799-ը կարևոր գործիք է կենսաթաղանթների հետազոտության առաջընթացի և արդյունավետ հակամանրէային ռազմավարությունների մշակման համար։
Ինչպես կատարել MBEC վերլուծությունը՝ ASTM E2799-22-ի համաձայն
ASTM E2799-22 արձանագրությունը նկարագրում է կենսաթաղանթների նկատմամբ հակամանրէային նյութերի արդյունավետության գնահատման փուլերը։ Hielscher UIP400MTP միկրոտիտրային թիթեղների ուլտրաձայնային մշակիչն օգտագործելիս արձանագրությունը կարող է հարմարեցվել՝ կենսաթաղանթների անջատման համար ուլտրաձայնային մշակման այս առաջադեմ մեթոդը ներառելու նպատակով։ Ստորև ներկայացված է UIP400MTP միկրոթիթեղների ուլտրաձայնային մշակիչի կիրառմանը հարմարեցված փուլերի նկարագրությունը։
- Կենսաթաղանթների պատրաստում
Պատրաստեք ստերիլ 96-հորիկավոր միկրոտիտրային թիթեղ՝ անջատվող ցցիկավոր կափարիչներով։
Հորիկները ցանքսավորեք համապատասխան աճեցման միջավայրում պատրաստված ստանդարտացված բակտերիալ կախույթով։
Ցցիկավոր կափարիչը տեղադրեք թիթեղի վրա՝ համոզվելով, որ ցցիկներն ամբողջությամբ ընկղմված են բակտերիալ կախույթի մեջ։
Թիթեղը ինկուբացրեք վերահսկվող պայմաններում (օրինակ՝ ջերմաստիճանի և ժամանակի)՝ ցցիկների վրա կենսաթաղանթի ձևավորումը հնարավոր դարձնելու համար։ - Մշակում հակամանրէային նյութերով
Կենսաթաղանթի ձևավորումից հետո միջավայրը փոխարինեք թարմ միջավայրով, որը պարունակում է փորձարկվող հակամանրէային նյութերը տարբեր կոնցենտրացիաներով։
Կրկին ամրացրեք ցցիկավոր կափարիչը և ինկուբացրեք փորձի նախագծով սահմանված պայմաններում։ - Նախապատրաստում կենսաթաղանթի անջատմանը
Մշակումից հետո ցցիկավոր կափարիչը լվացեք՝ այն ընկղմելով ստերիլ լվացման լուծույթի մեջ՝ հակամանրէային նյութերի մնացորդներն ու թույլ կպած պլանկտոնային բջիջները հեռացնելու համար։ - Կենսաթաղանթի անջատում UIP400MTP ուլտրաձայնային մշակիչի միջոցով
Պատրաստեք նոր 96-հորիկավոր միկրոտիտրային թիթեղ, որը պարունակում է վերականգնման միջավայր (օրինակ՝ չեզոքացնող արգանակ)։
Անջատեք կենսաթաղանթները՝ ցցիկավոր կափարիչը տեղադրելով վերականգնման միջավայր պարունակող թիթեղի հորիկների մեջ։
Թիթեղը տեղադրեք UIP400MTP ուլտրաձայնային մշակիչի մեջ՝ համոզվելով, որ կափարիչն ու թիթեղը ճիշտ են համադրված։
Ուլտրաձայնային մշակիչի ամպլիտուդը սահմանեք 70%–80% և ցիկլային ռեժիմով կատարեք ուլտրաձայնային մշակում 3–4 րոպե՝ կենսաթաղանթի հետևողական անջատումն առանց բջիջների լիզիսի ապահովելու համար։ - Կենսաթաղանթի կենսունակության գնահատում
Ուլտրաձայնային մշակումից հետո անջատված կենսաթաղանթի բջիջներ պարունակող վերականգնման միջավայրը մշակեք ստանդարտ մանրէաբանական կամ վերլուծական մեթոդներով, ինչպիսիք են՝- Գաղութ առաջացնող միավորների (CFU) հաշվարկ. կատարեք հաջորդական նոսրացումներ և ցանքս ագարի վրա՝ կենսունակ բջիջները հաշվելու համար։
- Օպտիկական խտության (OD) չափումներ. բջիջների խտությունը գնահատելու համար կիրառեք սպեկտրալուսաչափական վերլուծություն։
- Ֆլուորեսցենցիայի վրա հիմնված կենսունակության վերլուծություններ. ֆլուորեսցենտ ներկերի միջոցով քանակապես որոշեք կենդանի և մահացած բջիջները։
- Տվյալների վերլուծություն
Համեմատեք մշակված և չմշակված կենսաթաղանթների կենսունակության տվյալները՝ հակամանրէային նյութերի արդյունավետությունը որոշելու համար։
Հաշվարկեք կենսաթաղանթի վերացման նվազագույն կոնցենտրացիան (MBEC)՝ հիմք ընդունելով կենսաթաղանթի կենսունակ բջիջները վերացնելու համար պահանջվող կոնցենտրացիան։ - Որակի վերահսկում
Ապահովեք ուլտրաձայնային մշակման պայմանների կայունությունը՝ պարբերաբար տրամաչափարկելով UIP400MTP-ը և ստուգելով, որ կենսաթաղանթի անջատման գործընթացը չի հանգեցնում բջիջների զգալի լիզիսի կամ քայքայման։
Արդյունքների վավերականությունը ստուգելու համար ներառեք համապատասխան ստուգիչ նմուշներ, օրինակ՝ չմշակված կենսաթաղանթներ և միայն միջավայր պարունակող դատարկ նմուշներ։
Ցցիկների վրա ձևավորված կենսաթաղանթի բջիջներն անջատվել են 5 min տևողությամբ ուլտրաձայնային մշակմամբ (Hielscher Ultrasound Technology, Թելտով, Գերմանիա, UIP250MTP)՝ բջիջների վերականգնման համար թարմ սննդամիջավայր պարունակող 96-հորիկավոր թիթեղներում։
(Լուսանկար և ուսումնասիրություն՝ ©de Oliveira et al., 2016)
ASTM E2799-22 աշխատանքային ընթացքի մեջ UIP400MTP-ը ներառելով՝ կենսաթաղանթի անջատման գործընթացն օպտիմալացվում է հետևողականության, արդյունավետության և մեծ քանակությամբ նմուշների մշակման կիրառությունների համար։
Գրականություն / Հղումներ
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator — Non-Contact Sonicator — Hielscher Ultrasonics
- ASTM E2799-22 Standard Test Method for Testing Disinfectant Efficacy against Pseudomonas aeruginosa Biofilm using the MBEC Assay
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Հաճախ տրվող հարցեր
Ի՞նչ է ASTM E2799-ը։
ASTM E2799-ը ASTM International-ի սահմանած ստանդարտ փորձարկման մեթոդ է՝ MBEC վերլուծության միջոցով Pseudomonas aeruginosa-ի կենսաթաղանթի նկատմամբ ախտահանիչների արդյունավետությունը փորձարկելու համար։ Մեթոդը լայնորեն կիրառվում է կենսաթաղանթների ձևավորումը, հակամանրէային արդյունավետությունը և նյութերի մակերեսների հետ փոխազդեցությունները գնահատելու համար՝ հնարավորություն տալով ստանդարտացված համեմատություններ կատարել կենսաթաղանթներին առնչվող հետազոտություններում։
Ո՞րն է տարբերությունը ASTM E2799-22-ի և ASTM E2799-11-ի, ASTM E2799-12-ի ու ASTM E2799-17-ի միջև։
ASTM E2799-ը ստանդարտացված փորձարկման մեթոդ է, որը գնահատում է ախտահանիչների արդյունավետությունը Pseudomonas aeruginosa-ի կենսաթաղանթների նկատմամբ՝ կիրառելով MBEC (կենսաթաղանթի վերացման նվազագույն կոնցենտրացիայի) վերլուծությունը։ Այս մեթոդը մի քանի անգամ վերանայվել է՝ դրա ճշգրտությունն ու կիրառելիությունը բարձրացնելու համար։
- ASTM E2799-11. սա ստանդարտի սկզբնական հրատարակությունն էր, որով սահմանվեցին MBEC վերլուծության միջոցով P. aeruginosa-ի կենսաթաղանթների նկատմամբ ախտահանիչների արդյունավետության գնահատման հիմնական ընթացակարգերը։
- ASTM E2799-12. այս վերանայումը ներառում էր փոքր տեխնիկական թարմացումներ՝ հստակությունը բարելավելու և 2011 թվականի տարբերակում հայտնաբերված երկիմաստությունները վերացնելու համար։
- ASTM E2799-17. այս թարմացման շրջանակում արձանագրության մեջ կատարվեցին ավելի էական փոփոխություններ, այդ թվում՝ կենսաթաղանթի աճեցման գործընթացի, մշակման կիրառման և չեզոքացման ընթացակարգերի ճշգրտումներ՝ նպատակ ունենալով բարձրացնել վերարտադրելիությունը և համապատասխանությունը կենսաթաղանթների հետազոտության առաջընթացին։
- ASTM E2799-22. ամենավերջին վերանայումն արտացոլում է կենսաթաղանթների ուսումնասիրության ոլորտի արդի գիտական պատկերացումներն ու տեխնոլոգիական առաջընթացը։ Այն ներառում է կենսաթաղանթների աճեցման, մշակման և վերլուծության կատարելագործված մեթոդաբանություններ՝ ապահովելով, որ փորձարկման մեթոդը մնա արդիական և արդյունավետ ախտահանիչների արդյունավետության ներկայիս գնահատումների համար։
ASTM E2799-ի յուրաքանչյուր վերանայում կատարվել է մեթոդի հուսալիությունը, վերարտադրելիությունը և արդիականությունը բարելավելու համար՝ ապահովելով դրա համապատասխանությունը կենսաթաղանթների հետազոտության ոլորտի գիտական ու տեխնոլոգիական առաջընթացին։
Ո՞րն է տարբերությունը MBEC և MBIC վերլուծությունների միջև։
MBEC (կենսաթաղանթի վերացման նվազագույն կոնցենտրացիայի) և MBIC (կենսաթաղանթի արգելակման նվազագույն կոնցենտրացիայի) վերլուծությունների հիմնական տարբերությունը դրանց ուղղվածությունն է։
MBEC վերլուծությունները չափում են հակամանրէային նյութի այն նվազագույն կոնցենտրացիան, որն անհրաժեշտ է նախապես ձևավորված կենսաթաղանթներն ամբողջությամբ վերացնելու համար՝ գնահատելով կենսաթաղանթի մեջ ներկառուցված միկրոօրգանիզմները ոչնչացնելու նյութի ունակությունը։
MBIC վերլուծությունները որոշում են հակամանրէային նյութի այն նվազագույն կոնցենտրացիան, որը կանխում է կենսաթաղանթների սկզբնական ձևավորումը՝ գնահատելով կենսաթաղանթի զարգացումն արգելակելու դրա ունակությունը։
Երկու վերլուծություններն էլ կարևոր են կենսաթաղանթների նկատմամբ հակամանրէային նյութերի արդյունավետությունը հասկանալու համար, սակայն ուղղված են կենսաթաղանթի կենսացիկլի տարբեր փուլերին։
Իմացեք, թե ինչպես է UIP400MTP միկրոթիթեղների ուլտրաձայնային մշակիչն օգտագործվում MBIC վերլուծություններում կենսաթաղանթների անջատման համար։
Նոր միկրոթիթեղների ուլտրաձայնային մշակիչներ՝ դժվար քայքայվող կենսաթաղանթների քայքայման համար
Hielscher Ultrasonics-ն արտադրում է բարձր արդյունավետությամբ ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորներ՝ լաբորատոր չափերից մինչև արդյունաբերական չափեր։