Biofilm Disloding օգտագործելով High-Throught Sonicator UIP400MTP
Բարձր թողունակության ձայնային սարքերը, որոնք նախատեսված են բազմաբնակարան ափսեների և 96 ջրանցքների համար նախատեսված ափսեների համար, կենսաֆիլմի հետազոտության կարևոր գործիքներ են, մասնավորապես, բիոֆիլմերը հորերից, խողովակներից, քորոցներից և Պետրի ափսեներից հեռացնելու և հեռացնելու համար: Այս sonicators-ը հեշտացնում է բազմաթիվ նմուշների մշակումը միաժամանակ՝ բարելավելով արդյունավետությունն ու հետևողականությունը: Hielscher բարձր թողունակության ձայնային սարքը UIP400MTP-ն իդեալական է բազմաբնույթ ափսեների, 96 հորանի ափսեների, մի քանի խողովակների կամ Պետրի ափսեների ձայնային ազդանշանի համար: Ուլտրաձայնային միասնական թրթռումը և կավիտացիան հուսալիորեն հեռացնում են բիոֆիլմերը ափսեի հատակից: Սա UIP400MTP բազմաբնակարան ափսեի ձայնագրիչն է դարձնում նմուշի պատրաստման իդեալական գործիք կենսաթաղանթի հեռացման, բիոֆիլմի վերլուծության և բակտերիաների և մանրէների հետազոտման համար:
Multiwell-Plate Sonicator UIP400MTP Biofilm Dislodgment and Removal in High-throughput Sample Preparation:
- Բակտերիալ բիոֆիլմեր
- Էուկարիոտիկ բիոֆիլմեր
- Սնկային բիոֆիլմեր
- Archaeal biofilms
- Polymicrobial biofilms / Mixed-species biofilms
- Ատամնաբուժական բիոֆիլմեր (ափսե)
- Ծովային բիոֆիլմեր
- Բնապահպանական բիոֆիլմեր
- Բժշկական սարքերի բիոֆիլմեր
- Կուլտուրացված բջիջների կասեցումներ
UIP400MTP բարձր թողունակությամբ sonicator բազմահոր ափսեներից, 96 հորատանցքից, խողովակներից և Պետրի ամաններից բիոֆիլմի հեռացման համար:
Բիոֆիլմի տեղահանում և հեռացում Sonication-ի միջոցով
Hielscher բարձր թողունակության ձայնային սարքը UIP400MTP-ը հարմարեցված է բազմաբնույթ և 96 հորանի թիթեղների հուսալի և միատեսակ արտահոսքի համար: Կենսաթաղանթի հետազոտության մեջ էական նշանակություն ունեցող UIP400MTP բազմաբնակարան ափսեի ձայնագրիչն առաջարկում է հուսալի տեխնոլոգիա բազմահոր ափսեներից, խողովակներից և Պետրի ափսեներից բիոֆիլմերը տեղահանելու և հեռացնելու համար: Թույլ տալով նմուշների բարձր թողունակության պատրաստում, UIP400MTP-ն բարձրացնում է կենսաֆիլմի անալիզների և այլ հարակից ուսումնասիրությունների արդյունավետությունն ու հետևողականությունը, ինչը այս ձայնային սարքն անփոխարինելի է դարձնում ինչպես ակադեմիական, այնպես էլ արդյունաբերական մանրէաբանական հետազոտություններում:
Բիոֆիլմի հեռացում` օգտագործելով sonication. Կենսաթաղանթի տեղահանման համար թույլատրվում է բիոֆիլմեր ձևավորվել բազմահոր ափսեի հորերում վերահսկվող պայմաններում: Այնուհետև ափսեը տեղադրվում է ձայնային սարքի մեջ, որտեղ այնպիսի պարամետրեր, ինչպիսիք են ժամանակը, ամպլիտուդը և հաճախականությունը, սահմանվում են՝ ըստ կենսաֆիլմի տեսակի և փորձարարական նպատակների հատուկ պահանջների: Ուլտրաձայնային ալիքները յուրաքանչյուր ջրհորի ներսում առաջացնում են կավիտացիա՝ արդյունավետորեն խաթարելով բիոֆիլմի մատրիցը և տեղահանելով բջիջները:
Ուլտրաձայնային նմուշի պատրաստում բիոֆիլմերի համար. Կենսաֆիլմի վերլուծություններում բարձր թողունակության ձայնային սարքերը մի քանի կիրառություն ունեն: Ձայնագրումից հետո տեղահանված բիոֆիլմի բջիջները կարող են հավաքվել և քանակականացվել՝ օգտագործելով տարբեր անալիզներ, ինչպիսիք են բյուրեղյա մանուշակագույն գունավորումը, կենսունակ բջիջների հաշվարկը կամ կենսազանգվածի չափումը: Բացի այդ, բիոֆիլմերը կարող են բուժվել հակամանրէային նյութերով, որին հաջորդում է ձայնային ախտահանումը, որպեսզի գնահատվի այս նյութերի արդյունավետությունը կենսաթաղանթները խաթարելու գործում: Տեղահանված բիոֆիլմի բջիջները նույնպես օգտակար են գենոմային և պրոտեոմիկ հետազոտությունների համար, քանի որ դրանք կարող են օգտագործվել ԴՆԹ-ի, ՌՆԹ-ի և սպիտակուցի արդյունահանման համար՝ հետագա մոլեկուլային վերլուծության համար:
Բարձր թողունակության ձայնային սարքերն առաջարկում են բազմաթիվ առավելություններ: Դրանք թույլ են տալիս միաժամանակ մշակել բազմաթիվ նմուշներ՝ խնայելով ժամանակն ու աշխատուժը, ինչպես նաև ապահովում են բոլոր հորերի միատեսակ բուժումը՝ նվազեցնելով փոփոխականությունը և բարելավելով արդյունքների վերարտադրելիությունը: Այս սարքերը նաև հարմար են լայնածավալ ուսումնասիրությունների համար՝ հնարավորություն տալով բիոֆիլմի ձևավորման, խափանումների և բուժման բարձր արդյունավետության ցուցադրում:
(A) 2% գլյուկոզայով TSB պարունակող ափսե, որն օգտագործվում է բիոֆիլմի ձևավորման, բջիջների վերականգնման և MIC-ի և MBCB-ի որոշման համար. (B) Կափարիչով կափարիչով ստաֆիլոկոկային բիոֆիլմերի ձևավորման համար:
Բջիջների վրա ձևավորված բիոֆիլմի բջիջները տեղահանվել են Hielscher sonicator UIP250MTP-ի միջոցով 5 րոպե 96 ջրհորի ափսեներում, որոնք պարունակում են թարմ կուլտուրայի միջավայր՝ բջիջները վերականգնելու համար:
(Նկար և ուսումնասիրություն՝ ©de Oliveira et al., 2016)
96 ջրհորի ափսեի ձայնային սարք UIP400MTP միկրոտիտրային և բազմաբնակարանային թիթեղների ձայնագրման համար
Ուլտրաձայնային բիոֆիլմի հեռացման կարևորությունը բիոֆիլմի հետազոտության մեջ
Ուլտրաձայնային բիոֆիլմի հեռացումը կարևոր է կենսաֆիլմի հետազոտության մեջ՝ դրա արդյունավետության, հետևողականության, արդյունավետության և բազմակողմանիության պատճառով: Այն ապահովում է բիոֆիլմերի մանրակրկիտ և միատեսակ խաթարում՝ հեշտացնելով ճշգրիտ և վերարտադրելի վերլուծությունը բիոֆիլմի տարբեր անալիզներում: Այս փորձարկումները, ներառյալ բյուրեղյա մանուշակագույն ներկումը, կենսունակ բջիջների հաշվարկը, ATP կենսալյումինեսցենտությունը, XTT կրճատումը, մանրադիտակային անալիզը և նուկլեինաթթվի/սպիտակուցի արդյունահանումը, համապարփակ պատկերացումներ են տալիս բիոֆիլմի ձևավորման, կենսունակության, կառուցվածքի և բուժմանը արձագանքելու վերաբերյալ:
Sonication-ը մեղմորեն հեռացնում և հեռացնում է բիոֆիլմը պինդ ենթաշերտերից, ինչպիսիք են ափսեի հատակը, կապում, ցցերը կամ ծածկոցները:
- Կենսաֆիլմերի արդյունավետ խախտում.
Կավիտացիա. Ուլտրաձայնային ալիքները ստեղծում են կավիտացիոն փուչիկներ, որոնք փլուզման ժամանակ առաջացնում են ուժեղ կտրող ուժեր՝ արդյունավետորեն խաթարելով բիոֆիլմերի բարդ կառուցվածքը:
Մանրակրկիտ տեղահանում. Ապահովում է, որ բիոֆիլմի բջիջները մանրակրկիտ հեռացվում են մակերեսներից, ինչը շատ կարևոր է ճշգրիտ քանակականացման և վերլուծության համար: - Հետևողականություն և վերարտադրելիություն.
Միատեսակ բուժում. Բարձր թողունակության ձայնային սարքերը ապահովում են ուլտրաձայնային էներգիայի միասնական բաշխում բոլոր նմուշներում՝ նվազեցնելով փոփոխականությունը և բարելավելով վերարտադրելիությունը:
Ստանդարտացում. հնարավորություն է տալիս բիոֆիլմի խափանման արձանագրությունների ստանդարտացումը՝ հանգեցնելով ավելի հուսալի և համեմատելի արդյունքների: - Արդյունավետություն:
Բարձր թողունակության հնարավորություն. թույլ է տալիս միաժամանակ մշակել բազմաթիվ նմուշներ՝ խնայելով ժամանակը և մեծացնելով թողունակությունը բիոֆիլմի ուսումնասիրություններում:
Ավտոմատացում. կարող է հեշտությամբ ինտեգրվել ավտոմատացված աշխատանքային հոսքերին՝ հետագայում բարձրացնելով արդյունավետությունը և նվազեցնելով ձեռքի աշխատանքը: - Կենսունակության և ամբողջականության պահպանում.
Վերահսկվող պայմաններ. Պարամետրերը, ինչպիսիք են ժամանակը և ինտենսիվությունը, կարող են մանրակրկիտ կարգավորվել, որպեսզի խաթարեն բիոֆիլմերը՝ չվնասելով բջիջների կենսունակությունը կամ ամբողջականությունը, ինչը կարևոր է հետագա վերլուծությունների համար: - Բազմակողմանիություն:
Լայն Կիրառելիություն. Հարմար է կենսաթաղանթների տարբեր տեսակների համար (բակտերիալ, սնկային, խառը տեսակներ) և համատեղելի է տարբեր մակերևույթների և նյութերի հետ, որոնք օգտագործվում են բիոֆիլմի հետազոտության մեջ:
UIP400MTP բազմաբնակարան ափսեի ձայնագրիչն առաջարկում է բազմաթիվ առավելություններ, որոնք դրանք դարձնում են անփոխարինելի գործիք բարձր արդյունավետությամբ նմուշների պատրաստման համար:
Hielscher Ultrasonics-ն առաջարկում է ձայնային սարքերի տարբեր մոդելներ, ներառյալ զոնդային տիպի sonicators, ոչ կոնտակտային sonicators և բարձր թողունակությամբ sonicators: Կապվեք մեզ հետ հիմա: Մեր տեխնիկական փորձագետները հաճույքով կքննարկեն ձեր մշակման պահանջները ձեզ հետ և կառաջարկեն ձեզ ամենահարմար ձայնային սարքը ձեր կենսաֆիլմի կիրառման համար:
Microtiter ափսե sonicator UIP400MTP օգտագործվում է հետազոտության համար կենսաթաղանթները հեռացնելու համար
Գրականություն / Հղումներ
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Հաճախակի տրվող հարցեր Biofilm Research-ի շուրջ
Ո՞րն է բիոֆիլմերի համար ամենատարածված փայտամածը:
Լաբորատոր հետազոտություններում բիոֆիլմերի համար ամենատարածված փայտամածը միկրոտիտրային թիթեղն է: Միկրոտիտրային թիթեղները, մասնավորապես 96 հորատանցքի ձևաչափը, լայնորեն օգտագործվում են իրենց բազմակողմանիության, օգտագործման հեշտության և տարբեր վերլուծական տեխնիկայի հետ համատեղելիության պատճառով:
Ո՞րն է 96 ջրհորի լավագույն ափսեը բիոֆիլմերի համար:
Կենսաթաղանթի ուսումնասիրությունների համար լավագույն 96 ջրհոր թիթեղը կախված է մի քանի գործոններից, ներառյալ ուսումնասիրվող կենսաթաղանթի տեսակը, փորձարարական կազմաձևը և հետազոտության հատուկ պահանջները: Այնուամենայնիվ, բիոֆիլմի ուսումնասիրությունների համար սովորաբար առաջարկվող 96 ջրհորի ափսեներն են.
- Corning® Costar® 3596 96 հորատանցքի թափանցիկ հարթ ներքևի ափսե. այս ափսեը հաճախ օգտագործվում է իր բարձր օպտիկական պարզության պատճառով, որն օգտակար է պատկերների և սպեկտրոֆոտոմետրիկ վերլուծությունների համար:
- Nunc™ MicroWell™ 96 ջրհորի թիթեղներ. այս թիթեղները հայտնի են հորերի միատեսակ չափսերով և բարձր օպտիկական պարզությամբ: Դրանք հասանելի են տարբեր մակերևութային մշակումների մեջ՝ աջակցելու տարբեր տեսակի բջջային կուլտուրաներին:
- Greiner Bio-One CELLSTAR® 96-Well Microplate. Այս ափսեը հաճախ օգտագործվում է բիոֆիլմի ուսումնասիրության համար, քանի որ դրա լավ-լավ որակի և տարբեր մակերևութային ծածկույթների առկայության պատճառով, ինչպիսիք են հյուսվածքային մշակույթով մշակված կամ ցածր կապող մակերեսները:
- Սև/Մաքուր ներքևի 96 ջրհորի թիթեղներ. Ֆլուորեսցենցիայի կամ լյումինեսցենցիայի չափումներ պահանջող ուսումնասիրությունների համար պարզ հատակով սև թիթեղները (օրինակ՝ Corning® 3603) իդեալական են, քանի որ դրանք նվազագույնի են հասցնում հորերի միջև փոխադարձ խոսակցությունը և բարելավում ազդանշանի հայտնաբերումը:
- Հիդրոֆոբ կամ հիդրոֆիլ ծածկված թիթեղներ. Կախված կենսաֆիլմի և միկրոօրգանիզմի բնույթից, հատուկ ծածկույթներով թիթեղները, որոնք նպաստում կամ արգելակում են կպչունությունը, կարող են օգտակար լինել: Օրինակ, հիդրոֆոբ թիթեղները կարող են հարմար լինել որոշակի բակտերիաների կողմից ձևավորված բիոֆիլմերի համար:
- Բիոֆիլմի հատուկ ափսեներ. որոշ արտադրողներ առաջարկում են թիթեղներ, որոնք հատուկ նախագծված են բիոֆիլմի հետազոտության համար: Այս թիթեղները հաճախ ունեն մակերևույթի ուժեղացված հատկություններ, որոնք նպաստում են բիոֆիլմի ձևավորմանը և օպտիմիզացված են բիոֆիլմի վերլուծությունների համար:
Կենսաթաղանթի ուսումնասիրության համար 96 ջրհորի ափսե ընտրելիս հաշվի առեք հետևյալ չափանիշները.
- Նյութի և մակերեսի բուժում. Ընտրեք ափսեի նյութ և մակերեսային մշակում, որն ապահովում է ձեր ուսումնասիրվող կենսաթաղանթ ձևավորող միկրոօրգանիզմների կպչունությունն ու աճը:
Օպտիկական պարզություն. Օպտիկական չափումներ պարունակող վերլուծությունների համար համոզվեք, որ թիթեղն օպտիկական բարձր հստակություն ունի: - Լավ դիզայն. Հաշվի առեք հորերի ձևն ու խորությունը, որոնք կարող են ազդել բիոֆիլմի աճի և հետագա մշակումների կամ չափումների արդյունավետության վրա:
- Համատեղելիություն սարքավորումների հետ. Համոզվեք, որ ափսեը համատեղելի է ձեր sonicator-ի, ինկուբատորի և ձեր ուսումնասիրության մեջ օգտագործվող ցանկացած այլ սարքավորման հետ: Hielscher բազմաբնակարան ափսեի ձայնագրիչը համատեղելի է բոլոր ստանդարտ միկրոտիտրերի և բազմահորերի ափսեների հետ:
Ի վերջո, լավագույն ընտրությունը կախված կլինի ձեր բիոֆիլմի հետազոտության հատուկ պահանջներից և ներգրավված միկրոօրգանիզմների բնութագրերից:
Որո՞նք են բիոֆիլմի տիպային վերլուծությունները, որոնք օգտագործվում են հետազոտության մեջ:
Հետազոտության և ախտորոշման մեջ օգտագործվում են տարբեր տեսակի անալիզներ՝ բիոֆիլմերը հետազոտելու և դասակարգելու համար: Sonication-ը նմուշի պատրաստման սովորական քայլ է՝ կենսաթաղանթն իր պինդ ենթաշերտից հեռացնելու համար, որպեսզի կենսաթաղանթը հասանելի լինի վերլուծությունների և վերլուծությունների համար:
- Բյուրեղյա մանուշակագույն գունավորում.
Նպատակը. Քանակականացնում է բիոֆիլմի ընդհանուր կենսազանգվածը:
Մեթոդ. Կենսաթաղանթները ներկվում են բյուրեղյա մանուշակագույն ներկով, այնուհետև ներկը լուծվում և չափվում է սպեկտրոֆոտոմետրիկ եղանակով:
Կիրառում. Օգտագործվում է բիոֆիլմի ձևավորումը և հակամանրէային նյութերի ազդեցությունը գնահատելու համար: - Կենսունակ բջիջների հաշվարկ (CFU Assay).
Նպատակը. Որոշում է կենսունակ բիոֆիլմի բջիջների քանակը:
Մեթոդ. Կենսաթաղանթի տեղահանված բջիջները սերիականորեն նոսրացվում են և տեղադրվում ագարի վրա՝ գաղութներ ձևավորող միավորները (CFUs) հաշվելու համար:
Կիրառում. Գնահատում է բիոֆիլմի բջիջների կենսունակությունը և հակամանրէային արդյունավետությունը: - ATP Bioluminescence:
Նպատակը. Չափում է բիոֆիլմային բջիջների նյութափոխանակության ակտիվությունը:
Մեթոդ. ATP մակարդակները չափվում են կենսալյումինեսցենտային վերլուծության միջոցով:
Կիրառում. Ցույց է տալիս բիոֆիլմի կենսունակությունը և նյութափոխանակության վիճակը: - XTT նվազեցման վերլուծություն.
Նպատակը. Գնահատում է բջջային նյութափոխանակության ակտիվությունը:
Մեթոդ. XTT ռեակտիվը կրճատվում է մետաբոլիկ ակտիվ բջիջներով՝ ձևավորելով գունավոր ֆորմազանի արտադրանք, որը չափվում է սպեկտրոֆոտոմետրիկ եղանակով:
Կիրառում. Օգտագործվում է բիոֆիլմի բջիջների կենսունակությունը և բուժման ազդեցությունը գնահատելու համար: - Մանրադիտակային վերլուծություն.
Նպատակը. Պատկերացնում է կենսաֆիլմի կառուցվածքը և կազմը:
Մեթոդ. Տեխնիկաները ներառում են լուսային մանրադիտակ, կոնֆոկալ լազերային սկանավորման մանրադիտակ (CLSM) և սկանավորող էլեկտրոնային մանրադիտակ (SEM):
Կիրառում. Մանրամասն պատկերացումներ է տալիս բիոֆիլմի ճարտարապետության, բաշխման և բուժման էֆեկտների վերաբերյալ: - ԴՆԹ, ՌՆԹ և սպիտակուցի արդյունահանում.
Նպատակը. Վերլուծում է բիոֆիլմային բջիջների գենետիկական և պրոտեոմիկ պրոֆիլները:
Մեթոդ. Կենսաթաղանթի բջիջները լուծվում են նուկլեինաթթուների և սպիտակուցների արդյունահանման համար՝ ներքևի վերլուծության համար (օրինակ՝ PCR, qPCR, հաջորդականություն, պրոտեոմիկա):
Կիրառում. Ուսումնասիրում է գեների էքսպրեսիան, գենետիկական բազմազանությունը և սպիտակուցային արտահայտությունը կենսաթաղանթներում: - Բիոֆիլմի արգելակման և վերացման վերլուծություններ.
Նպատակը. Էկրանավորում է միացությունները բիոֆիլմի ձևավորումը կանխելու կամ ստեղծված կենսաթաղանթները վերացնելու ունակության համար:
Մեթոդ. Կենսաթաղանթները մշակվում են պոտենցիալ հակաբիոֆիլմային նյութերով, և խանգարումը գնահատվում է վերը նշված վերլուծությունների միջոցով:
Կիրառում. Դեղերի հայտնաբերում և հակաբիոֆիլմային թերապիայի մշակում:
Hielscher Ultrasonics-ը արտադրում է բարձր արդյունավետության ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորներ լաբորատորիա դեպի արդյունաբերական չափս.