Tampon rješenja pripremljena s ultrazvukom
Puferi za lizu mogu se učinkovito i brzo pripremiti pomoću ultrazvučnih homogenizatora tkiva. Budući da ultrasonicators su san alat za miješanje, otapanje i raspršivanje, oni omogućuju pouzdanu i user-friendly pripremu lize pufera.
Ultrazvučna priprema pufera za lizu
Ultrazvučni homogenizatori tkiva su uobičajeni alat za poremećaj stanica, lizu i ekstrakciju, stoga dostupni u većini laboratorija. Sekundarna primjena za sonde tipa ultrasonicators je priprema lize pufera.
Pufer za lizu je otopina koja se koristi za razbijanje otvorenih (liznih) stanica i oslobađanje njihovog sadržaja za nizvodnu analizu. Specifični sastav pufera za lizu može varirati ovisno o vrsti stanica koje se liziraju i primjeni nizvodno. Međutim, tipičan pufer za lizu sadrži komponente kao što su deterdženti, soli i inhibitori proteaze. Puferske soli (npr. Tris-HCl) i ionske soli (npr. NaCl) obično se koriste za regulaciju pH vrijednosti i osmolarnosti lizata.
Da bi se napravio pufer za lizu, komponente se miješaju u odgovarajućim koncentracijama i pH. Smjesa se obično miješa ili trese dok se komponente ne otope i otopina ne postane homogena.
Ultrazvučna homogenizacija je metoda koja se može koristiti za dobru pufer lize poboljšanjem miješanja i otapanja komponenti. U ovoj metodi, ultrazvučni valovi – obično u rasponu od 20 do 30 kHz – nanose se na smjesu koja stvara kavitacijske mjehuriće koji se urušavaju i stvaraju intenzivnu lokalnu energiju, što dovodi do mehaničkog smicanja i miješanja komponenti.
Ultrazvučni proces homogenizacije može pomoći razbiti sve nakupine ili agregate komponenti, i osigurati da je otopina ravnomjerno mješovita. Prema tome, takav poboljšani pufer za lizu može dovesti do učinkovitijeg poremećaja stanica i većih prinosa ekstrahiranog materijala. Osim toga, ultrazvučna homogenizacija može smanjiti vrijeme potrebno za izradu pufera za lizu u usporedbi s tradicionalnim metodama miješanja ili tresenja.
Sve u svemu, ultrazvučna homogenizacija je moćan alat za poboljšanje kvalitete i učinkovitosti pripreme pufera za lizu.

Ultrazvučni laboratorijski homogenizator UP200Ht popularan je u istraživačkim laboratorijima za pripremu uzorka, lizu, ekstrakciju, fragmentaciju DNA i otapanje.
Protokol za ultrazvučnu pripremu pufera za lizu
Ovo je opći protokol za izradu pufera za lizu pomoću sonde tipa ultrasonicator:
Materijala:
- Deterdženti po izboru (npr. Triton X-100, SDS, CHAPS)
- Soli po izboru (npr. NaCl, KCl)
- Inhibitori proteaze (npr. PMSF, aprotinin, leupeptin)
- ultrasonicator
- miješalica
- Deionizirana voda
- pH metar ili pH trake
Detaljne upute:
- Odredite sastav pufera za lizu na temelju stanica ili tkiva za koje ćete lizati i nizvodne aplikacije za koje ćete koristiti lizat. Pripremite radne otopine deterdženata, soli i inhibitora proteaze u željenim koncentracijama.
- Dodajte radne otopine deterdženata, soli i inhibitora proteaze u čašu ili tikvicu.
- Dodajte deioniziranu vodu kako biste volumen doveli do željene količine pufera.
- Pomiješajte komponente pomoću miješalice kako biste dobili otopinu za prethodno miješanje.
- Izmjerite pH vrijednost pufera pomoću pH metra ili pH traka i po potrebi prilagodite pH vrijednost s malim količinama kiseline ili baze.
- Koristite sonda tipa ultrasonicator za homogenizaciju pred-mix otopine tako da se dobije visoko homogena otopina. Stoga, sonificirajte otopinu nekoliko sekundi dok se otopina temeljito ne promiješa i dok se sve nakupine ili agregati ne razgrade. Trajanje i snaga ultrazvukom može se optimizirati na temelju specifičnog pufera za lizu i ultrasonicator koji se koristi.
- Nakon ultrazvuka, ponovno izmjerite pH pufera i prilagodite po potrebi.
- Filtrirajte međuspremnik kroz filtar od 0,2 mikrona kako biste uklonili ostatke ili agregate koji su se možda stvorili tijekom ultrazvukom.
- Međuspremnik za lizu sada je spreman za uporabu.
Napomena: Točan sastav i pH pufera za lizu mogu varirati ovisno o stanicama ili tkivu koje se lizira i primjenama nizvodno. Gornji protokol je opća smjernica i možda će ga trebati optimizirati za određene aplikacije.
Ultrazvučni homogenizatori se obično koriste za poremećaj stanica i ekstrakciju unutarstaničnih molekula. Stoga mnoge aplikacije lize koriste sondu tipa ultrazvukom ne samo za pripremu pufera za lizu, već i za mehanički poremećaj stanica i ekstrakciju.
To čini ultrazvučne tkivne homogenizatore svestranim alatom za laboratorije i objašnjava široku uporabu ultrasonicators u mikrobiologiji, biotehnologiji i znanosti o životu.
ultrazvučni laboratorij za homogeniziranje
Hielscher Ultrasonics proizvodi i isporučuje ultrazvučne homogenizatore i sonde (sonotrode) na različitim ocjenama snage i volumena uzorka. To nam omogućuje da vam ponudimo najprikladniji ultrazvučni disruptor za pripremu uzorka. Usredotočujemo se na najvišu kvalitetu, izvanrednu udobnost korisnika i pouzdane rezultate ultrazvukom. Svi digitalni ultrasonicators imaju pametni softver, programiranje i pred-podešavanje ultrazvukom protokola, daljinski upravljač preglednika, kontrola temperature, uzorak osvjetljenje, kao i automatsko snimanje podataka na ugrađenoj SD kartici.
Dizajn, proizvodnja i savjetovanje – Kvaliteta proizvedena u Njemačkoj
Hielscher ultrasonicators su poznati po svojim najvišim standardima kvalitete i dizajna. Robusnost i jednostavan rad omogućuju glatku integraciju naših ultrasonicators u industrijske objekte. Grubim uvjetima i zahtjevnim okruženjima lako se bave Hielscher ultrasonicators.
Hielscher Ultrasonics je tvrtka s ISO certifikatom i poseban naglasak stavlja na ultrazvučne uređaje visokih performansi s najsuvremenijom tehnologijom i prilagođenošću korisnicima. Naravno, Hielscher ultrasonicators su CE sukladni i zadovoljavaju zahtjeve UL, CSA i RoHs.
The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators:
VialTweeter na UP200St | 200W | 26kHz | ultrasonication od malih bočica, npr. Eppendorf 1.5mL |
UP50H | 50W | 30kHz | ručni ili standmounted lab homogenizer |
UP100H | 100W | 30kHz | ručni ili standmounted lab homogenizer |
Uf200 ः t | 200W | 26kHz | ručni ili standmounted lab homogenizer |
UP200St | 200W | 26kHz | homogenizator laboratorija |
UP400St | 400W | 24kHz | homogenizator laboratorija |
SonoStep | 200W | 26kHz | laboratorijski reaktor koji kombinira, ultrasonication, pump, stirrer i posuda |
GDmini2 | 200W | 26kHz | stanice protoka bez onečišćenja |
Cuphorn | 200W | 26kHz | intenzivna ultrazvučna kupka za bočice i čaše |
UIP400MTP | 400W | 24kHz | Ultrazvučni sustav za višeslojne ploče / mikrotitarske ploče |

Ultrazvučno cuphorn za intenzivnu ultrazvukom zatvorenih cijevi i bočica za sterilnu homogenizaciju uzoraka.
Kontaktirajte nas! / Pitajte nas!

Ultrazvučni laboratorijski homogenizator UP400St Obično se koristi za pripremu pufera za lizu i naknadni poremećaj stanica.
Književnost / Reference
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Hielscher Ultrasonics proizvodi ultrazvučne homogenizatore visokih performansi Laboratorija do industrijske veličine.