Puferi za lizu mogu se učinkovito i brzo pripremiti pomoću ultrazvučnih homogenizatora tkiva. Budući da ultrasonicators su san alat za miješanje, otapanje i raspršivanje, oni omogućuju pouzdanu i user-friendly pripremu lize pufera.

Ultrazvučna priprema pufera za lizu

Ultrazvučni homogenizatori tkiva su uobičajeni alat za poremećaj stanica, lizu i ekstrakciju, stoga dostupni u većini laboratorija. Sekundarna primjena za sonde tipa ultrasonicators je priprema lize pufera.

Pufer za lizu je otopina koja se koristi za razbijanje otvorenih (liznih) stanica i oslobađanje njihovog sadržaja za nizvodnu analizu. Specifični sastav pufera za lizu može varirati ovisno o vrsti stanica koje se liziraju i primjeni nizvodno. Međutim, tipičan pufer za lizu sadrži komponente kao što su deterdženti, soli i inhibitori proteaze. Puferske soli (npr. Tris-HCl) i ionske soli (npr. NaCl) obično se koriste za regulaciju pH vrijednosti i osmolarnosti lizata.
Da bi se napravio pufer za lizu, komponente se miješaju u odgovarajućim koncentracijama i pH. Smjesa se obično miješa ili trese dok se komponente ne otope i otopina ne postane homogena.
Ultrazvučna homogenizacija je metoda koja se može koristiti za dobru pufer lize poboljšanjem miješanja i otapanja komponenti. U ovoj metodi, ultrazvučni valovi – obično u rasponu od 20 do 30 kHz – nanose se na smjesu koja stvara kavitacijske mjehuriće koji se urušavaju i stvaraju intenzivnu lokalnu energiju, što dovodi do mehaničkog smicanja i miješanja komponenti.
Ultrazvučni proces homogenizacije može pomoći razbiti sve nakupine ili agregate komponenti, i osigurati da je otopina ravnomjerno mješovita. Prema tome, takav poboljšani pufer za lizu može dovesti do učinkovitijeg poremećaja stanica i većih prinosa ekstrahiranog materijala. Osim toga, ultrazvučna homogenizacija može smanjiti vrijeme potrebno za izradu pufera za lizu u usporedbi s tradicionalnim metodama miješanja ili tresenja.
Sve u svemu, ultrazvučna homogenizacija je moćan alat za poboljšanje kvalitete i učinkovitosti pripreme pufera za lizu.

Protokol za ultrazvučnu pripremu pufera za lizu

Ovo je opći protokol za izradu pufera za lizu pomoću sonde tipa ultrasonicator:
 
Materijala:

• Deterdženti po izboru (npr. Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Soli po izboru (npr. NaCl, KCl)
• Inhibitori proteaze (npr. PMSF, aprotinin, leupeptin)
• ultrasonicator
• miješalica
• Deionizirana voda
• pH metar ili pH trake

 
 
Detaljne upute:

1. Odredite sastav pufera za lizu na temelju stanica ili tkiva za koje ćete lizati i nizvodne aplikacije za koje ćete koristiti lizat. Pripremite radne otopine deterdženata, soli i inhibitora proteaze u željenim koncentracijama.
2. Dodajte radne otopine deterdženata, soli i inhibitora proteaze u čašu ili tikvicu.
3. Dodajte deioniziranu vodu kako biste volumen doveli do željene količine pufera.
4. Pomiješajte komponente pomoću miješalice kako biste dobili otopinu za prethodno miješanje.
5. Izmjerite pH vrijednost pufera pomoću pH metra ili pH traka i po potrebi prilagodite pH vrijednost s malim količinama kiseline ili baze.
6. Koristite sonda tipa ultrasonicator za homogenizaciju pred-mix otopine tako da se dobije visoko homogena otopina. Stoga, sonificirajte otopinu nekoliko sekundi dok se otopina temeljito ne promiješa i dok se sve nakupine ili agregati ne razgrade. Trajanje i snaga ultrazvukom može se optimizirati na temelju specifičnog pufera za lizu i ultrasonicator koji se koristi.
7. Nakon ultrazvuka, ponovno izmjerite pH pufera i prilagodite po potrebi.
8. Filtrirajte međuspremnik kroz filtar od 0,2 mikrona kako biste uklonili ostatke ili agregate koji su se možda stvorili tijekom ultrazvukom.
9. Međuspremnik za lizu sada je spreman za uporabu.

 
Napomena: Točan sastav i pH pufera za lizu mogu varirati ovisno o stanicama ili tkivu koje se lizira i primjenama nizvodno. Gornji protokol je opća smjernica i možda će ga trebati optimizirati za određene aplikacije.
 
Ultrazvučni homogenizatori se obično koriste za poremećaj stanica i ekstrakciju unutarstaničnih molekula. Stoga mnoge aplikacije lize koriste sondu tipa ultrazvukom ne samo za pripremu pufera za lizu, već i za mehanički poremećaj stanica i ekstrakciju.
To čini ultrazvučne tkivne homogenizatore svestranim alatom za laboratorije i objašnjava široku uporabu ultrasonicators u mikrobiologiji, biotehnologiji i znanosti o životu.

ultrazvučni laboratorij za homogeniziranje

Hielscher Ultrasonics proizvodi i isporučuje ultrazvučne homogenizatore i sonde (sonotrode) na različitim ocjenama snage i volumena uzorka. To nam omogućuje da vam ponudimo najprikladniji ultrazvučni disruptor za pripremu uzorka. Usredotočujemo se na najvišu kvalitetu, izvanrednu udobnost korisnika i pouzdane rezultate ultrazvukom. Svi digitalni ultrasonicators imaju pametni softver, programiranje i pred-podešavanje ultrazvukom protokola, daljinski upravljač preglednika, kontrola temperature, uzorak osvjetljenje, kao i automatsko snimanje podataka na ugrađenoj SD kartici.

Dizajn, proizvodnja i savjetovanje – Kvaliteta proizvedena u Njemačkoj

Hielscher ultrasonicators su poznati po svojim najvišim standardima kvalitete i dizajna. Robusnost i jednostavan rad omogućuju glatku integraciju naših ultrasonicators u industrijske objekte. Grubim uvjetima i zahtjevnim okruženjima lako se bave Hielscher ultrasonicators.

Hielscher Ultrasonics je tvrtka s ISO certifikatom i poseban naglasak stavlja na ultrazvučne uređaje visokih performansi s najsuvremenijom tehnologijom i prilagođenošću korisnicima. Naravno, Hielscher ultrasonicators su CE sukladni i zadovoljavaju zahtjeve UL, CSA i RoHs.

The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators: