THC विश्लेषण के लिए अल्ट्रासोनिक नमूना तैयारी
- अल्ट्रासोनिक निष्कर्षण THC के उत्पादन की एक प्रमाणित विधि है, लेकिन इसका उपयोग विश्लेषणात्मक उद्देश्यों के लिए भी किया जा सकता है।
- अल्ट्रासोनिकेशन कैनबिस उत्पादों में THC की कुल मात्रा के विश्लेषण के लिए उपयोग की जाने वाली एक सामान्य नमूना तैयारी विधि है।
- TLC, GC और HPLC विश्लेषण से पहले नमूनों पर अल्ट्रासोनिक निष्कर्षण किया जाता है।
अल्ट्रासोनिक THC निष्कर्षण
THC, या टेट्राहाइड्रोकैनाबिनॉल (delta-9-tetrahydrocannabinol), वह रसायन है जो मारिजुआना के अधिकांश मनोवैज्ञानिक प्रभाव उत्पन्न करता है। कैनबिस प्रजाति की 400 से अधिक अलग-अलग किस्में ज्ञात हैं। विशिष्ट कैनबिस किस्म के आधार पर, कैनबिस में THC की मात्रा केवल 0.3 wt% तक कम हो सकती है। अन्य किस्मों में THC की मात्रा 20 wt% तक पहुँच सकती है।
विभिन्न कैनबिस उत्पादों में भी काफी अंतर होता है: मारिजुआना में THC की औसत सांद्रता 1 से 5% के बीच होती है; हशीश में THC की मात्रा 5 से 15% के बीच होती है, और हशीश तेल में यह औसतन 20% होती है। मनोरंजन के लिए ली जाने वाली मारिजुआना की खुराकों में THC की मात्रा बहुत भिन्न होती है और मारिजुआना में THC की मात्रा जितनी कम होती है, वांछित प्रभावों का अनुभव करने के लिए उपयोगकर्ता को उतनी ही अधिक मात्रा का सेवन करना पड़ता है।
THC की मात्रा का विश्लेषण करने के लिए अल्ट्रासोनिक नमूना तैयारी का उपयोग किया जाता है
- मनोरंजन के लिए उपयोग किए जाने वाले THC उत्पादों के गुणवत्ता नियंत्रण के लिए,
- औषधीय THC उत्पादों की गुणवत्ता निर्धारित करने के लिए,
- नशीले पदार्थ के लिए उगाए जाने वाले हेम्प और रेशे के लिए उगाए जाने वाले हेम्प के बीच अंतर करने के लिए।
THC विश्लेषण के लिए सामान्यतः निम्नलिखित क्रोमैटोग्राफिक विधियों का उपयोग किया जाता है: पतली परत क्रोमैटोग्राफी (TLC), गैस क्रोमैटोग्राफी (GC), और उच्च-प्रदर्शन द्रव क्रोमैटोग्राफी (HPLC)
TLC विश्लेषण के लिए अल्ट्रासोनिक नमूना तैयारी प्रोटोकॉल
नमूना तैयारी: नमूने तैयार करने के लिए, सूखी पादप सामग्री का मैसरेशन करके उसे पीसकर समांगी पाउडर बनाना आवश्यक है। अल्ट्रासोनिक निष्कर्षण के लिए, कैनबिस पौधे के 500mg पाउडर और 5mL मेथनॉल-क्लोरोफॉर्म मिश्रण (9 : 1 के अनुपात में) को एक वायल में मिलाया जाता है। सोनिकेशन के लिए माइक्रो टिप वाले अल्ट्रासोनिकेटर , VialTweeter या अल्ट्रासोनिक CupHorn का उपयोग किया जा सकता है। सोनिकेशन में लगभग 5 min. लगते हैं। इसके बाद नमूने को कम से कम 5 min. स्थिर रहने दें। साफ अधिप्लावी द्रव को निष्कर्षण मिश्रण से तनु करें (v/v: 1 : 10)। मुक्त THC: TLC प्लेट पर 1μL
डीकार्बोक्सिलेशन: अर्क के 100μL को वाष्पित करके पूरी तरह सुखाया जाता है। अवशेष को 180℃ पर 4 min. तक गर्म किया जाता है। 500μL मेथनॉल-क्लोरोफॉर्म (v/v 9 : 1) मिलाएँ। 5 min. तक सोनिकेशन करें। साफ अधिप्लावी द्रव को निष्कर्षण मिश्रण से तनु करें (v/v: 1 : 10)।
अंशांकन: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC सिलिका जेल F-254, Merck 5729
TLC स्कैनर II, सॉफ़्टवेयर CATS3, Camag Muttenz; एल्यूएंट:
एथिल एसीटेट : टॉलूईन : क्लोरोफॉर्म = 3 : 17 : 0.25 (v/v/v)
क्रोमैटोग्राफी के बाद व्युत्पन्नीकरण: 0.1 M NaOH में 0.1% फास्ट ब्लू साल्ट
550 nm पर डेंसिटोमेट्री
विश्लेषण और निष्कर्षण के लिए टेट्राहाइड्रोकैनाबिनॉल (Δ9-THC)
GC विश्लेषण के लिए अल्ट्रासोनिक नमूना तैयारी प्रोटोकॉल
नमूना तैयारी: सूखी पादप सामग्री का मैसरेशन करके उसे पीसकर समांगी पाउडर बनाया जाता है। निष्कर्षण के लिए, कैनबिस पौधे के 500mg पाउडर और 10mL मेथनॉल-हेक्सेन मिश्रण (9 : 1 के अनुपात में) को एक वायल में मिलाया जाता है। सोनिकेशन के लिए माइक्रो टिप वाले प्रोब-प्रकार के अल्ट्रासोनिक उपकरण , VialTweeter या अल्ट्रासोनिक CupHorn का उपयोग किया जा सकता है। नमूने का 15–20 min. तक सोनिकेशन करें। नमूने को हिलाएँ और उसे कम से कम 5 min. स्थिर रहने दें। साफ अधिप्लावी द्रव को निष्कर्षण मिश्रण से तनु करें (v/v 1: 20)।
डीकार्बोक्सिलेशन: इंसर्ट में
इंजेक्टर का तापमान 250℃
अंशांकन: 5 ng/μL से 250 ng/μL
GC: HP 6890 के साथ 5973 MSD और 7683 ऑटोसैंपलर; इंजेक्शन: 1μL, स्प्लिटलेस समय: 2 min.
कॉलम: HP-5 MS, 30m, व्यास 250 μm, फिल्म की मोटाई 0.25 μm
वाहक गैस: He, 35 psi, स्थिर प्रवाह: 4 mL/min.
ओवन: 100℃ पर 1min.; 15℃ /min. की दर से तापमान बढ़ाकर 280℃ तक; 280℃ पर 5 min. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
HPLC विश्लेषण के लिए अल्ट्रासोनिक नमूना तैयारी प्रोटोकॉल
नमूना तैयारी (GC की तैयारी के समान): सूखी पादप सामग्री का मैसरेशन करके उसे पीसकर समांगी पाउडर बनाया जाता है। निष्कर्षण के लिए, कैनबिस पौधे के 500mg पाउडर और 10mL मेथनॉल-हेक्सेन मिश्रण (9 : 1 के अनुपात में) को एक वायल में मिलाया जाता है। सोनिकेशन के लिए माइक्रो टिप वाले प्रोब-प्रकार के अल्ट्रासोनिकेटर , VialTweeter या अल्ट्रासोनिक CupHorn का उपयोग किया जा सकता है। नमूने का 15–20 min. तक सोनिकेशन करें। नमूने को हिलाएँ और उसे कम से कम 5 min. स्थिर रहने दें। साफ अधिप्लावी द्रव को निष्कर्षण मिश्रण से तनु करें (v/v 1: 20)।
VialTweeter अल्ट्रासोनिक नमूना तैयारी के लिए
प्रीकॉलम: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
कॉलम: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
एल्यूएंट: आइसोक्रैटिक 36% TEAP 25 mmol/L, 64% एसीटोनाइट्राइल; 210nm पर मात्रात्मक निर्धारण
अंशांकन: 0.001 – 0.10 μg/μL
अंशांकन: 0.01 – 0.50 μg/μL
प्रतिधारण समय: CBD के लिए: 6.2 min.; CBN के लिए: 8.0 min.; THC के लिए: 9.4 min.; THC-A के लिए: 11.0 min
LOD: CBD 0.5%, CBN 0.5%, THC 0.15%, THC-A 1%
UP200St नमूने के सोनिकेशन के लिए माइक्रो टिप के साथ
साहित्य/संदर्भ
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Applica 2006.
जानने योग्य तथ्य
मारिजुआना में मादा कैनबिस पौधे के सूखे फूल तथा उनके नीचे स्थित पत्तियाँ और तने होते हैं। यह सबसे अधिक सेवन किया जाने वाला रूप है और इसमें लगभग 3% से 20% THC होता है। मारिजुआना के कुछ विशिष्ट, गहन प्रजनन द्वारा विकसित रूपों में THC की मात्रा 30% से अधिक पहुँच जाती है। THC युक्त कैनबिस उत्पादों की अन्य सभी किस्मों की मूल सामग्री मारिजुआना है। सबसे प्रचुर मात्रा में पाए जाने वाले कैनाबिनॉइड, टेट्राहाइड्रोकैनाबिनोलिक अम्ल (THCA), को मनःप्रभावी THC में बदलने के लिए डीकार्बोक्सिलेशन प्रक्रिया शुरू करना आवश्यक है। इसलिए, डीकार्बोक्सिलेशन कराने के लिए कैनबिस और उसके अर्कों को गर्म करना या निर्जलित करना आवश्यक है।
कीफ ट्राइकोम से भरपूर उस पाउडर को कहते हैं जिसे कैनबिस की पत्तियों और फूलों से छानकर अलग किया जाता है। इसका सेवन पाउडर के रूप में किया जाता है या इसे दबाकर हशीश की टिकियों में उपयोग किया जाता है।
हशीश या हैश सांद्र राल की टिकिया या गोला होता है, जिसे या तो दबाए गए कीफ से बनाया जाता है या पौधे की सतह से खुरची गई राल को लुढ़काकर गोलों का आकार देकर बनाया जाता है। शुद्धता और स्रोत के आधार पर इसका रंग काले से सुनहरे भूरे तक हो सकता है। इसका सेवन मुँह से या धूम्रपान द्वारा किया जा सकता है, उदाहरण के लिए पाइप, हुक्का, बॉन्ग, बबलर, वेपोराइज़र में, गर्म चाकू का उपयोग करके, जॉइंट में धूम्रपान करके, कैनबिस की कलियों या तंबाकू के साथ मिलाकर, बोतल के माध्यम से धुआँ खींचकर, या भोजन में एक सामग्री के रूप में उपयोग करके।
कैनबिस टिंचर अल्कोहल में कैनाबिनॉइड के अर्क को कहते हैं। टिंचर बनाने के लिए उच्च अल्कोहल सांद्रता वाली स्पिरिट (अधिकतर अनाज से बनी अल्कोहल) का उपयोग करके कैनबिस पौधे से कैनाबिनॉइड निकाले जाते हैं।
हैश तेल विलायक निष्कर्षण द्वारा उत्पादित कैनाबिनॉइड का एक रालमय मैट्रिक्स है, जो कठोर या श्यान पिंड के रूप में बनता है। मनःप्रभावी यौगिक की उच्च मात्रा के कारण हैश तेल सबसे अधिक प्रभावशाली कैनबिस उत्पादों में से एक है। ब्यूटेन और अतिक्रांतिक कार्बन डाइऑक्साइड में निष्कर्षित हैश तेल के उपयोग की लोकप्रियता हाल में बढ़ी है।
इन्फ्यूज़न कैनबिस इन्फ्यूज़न के विभिन्न प्रकारों को कहते हैं, जो इन्हें बनाने के लिए उपयोग किए जा सकने वाले अनेक प्रकार के अवाष्पशील विलायकों के कारण एक-दूसरे से भिन्न होते हैं। ऐसा इन्फ्यूज़न तैयार करने के लिए, कैनबिस की पादप सामग्री को एक विलायक के साथ मिलाया जाता है और फिर दबाया तथा छाना जाता है, ताकि पौधे के तेल विलायक में स्थानांतरित हो जाएँ। कोकोआ बटर, दूध से बना मक्खन, खाना पकाने का तेल, ग्लिसरीन और त्वचा के मॉइस्चराइज़र सामान्यतः उपयोग किए जाने वाले विलायक हैं।
चिकित्सीय मारिजुआना का अर्थ चिकित्सक द्वारा सुझाई गई वनस्पति चिकित्सा के रूप में कैनबिस पौधे के उपयोग के साथ-साथ संश्लेषित THC और कैनाबिनॉइड के उपयोग से है। इस उपयोग के लिए सामान्यतः चिकित्सकीय पर्चे की आवश्यकता होती है और वितरण आम तौर पर स्थानीय कानूनों द्वारा निर्धारित ढाँचे के अंतर्गत किया जाता है। कई शोध अध्ययनों ने दिखाया है कि कैनबिस या उसके व्युत्पन्नों का उपयोग, उदाहरण के लिए, कीमोथेरेपी से उत्पन्न मतली और उल्टी, तंत्रिकाजन्य दर्द तथा मल्टीपल स्क्लेरोसिस के विरुद्ध प्रभाव डालता है।