הכנה אולטרסונית של סרום עשיר בטסיות
- פלזמה עשירה בטסיות (PRP) היא פלזמת דם שהועשרה בטסיות, המשמשת לטיפולים רפואיים ואסתטיים.
- ליזיס והתניה אולטרסוניים הם שיטה יעילה מאוד להכנת פלזמה עשירה בטסיות.
- Hielscher Ultrasonics מציעה מגוון מערכות אולטרסוניות המותאמות לדרישות הטיפול בדם (למשל להכנה בתוך חדר נקי ומחוצה לו).
סרום עשיר בטסיות
סוניקציה היא שיטה אמינה ופשוטה לביצוע ליזיס של הטסיות בסרום דם אוטולוגי כדי לשחרר את גורמי הגדילה. המקטעים שמקורם בטסיות – הידועים גם כסרום אוטולוגי מותנה (ACS) – משמשים לשיקום רקמות או לטיפולים אסתטיים. להשגת תוצאות מיטביות, מעשירים את ה־PRP לפני ההזרקה.
לצורך הכנת פלזמה מועשרת בגורמי גדילה תאיים, סוניקציה היא שיטה יעילה מאוד וחסכונית במשאבים לפירוק קרומי התאים ולשחרור כמעט כל גורמי הגדילה התאיים מתוך הטסיות. באמצעות ליזיס והתניה אולטרסוניים ניתן להשתמש אפילו בדם שטופל בנוגדי קרישה.
התניית PRP באמצעות סוניקציה היא דרך נוחה וחסכונית להפקת גורמי גדילה מרוכזים.
ליזיס אולטרסוני של פלזמה עשירה בטסיות (PRP)
השפעות הליזיס האולטרסוני
טיפול אולטרסוני בסרום דם גורם לליזיס אחיד של הטסיות כדי לשחרר את גורמי הגדילה הכלואים בהן (גורם גדילה AB (PDGF-AB), גורם גדילה AA (PDGF-AA), גורם גדילה BB (PDGF-BB), גורם גדילה של אנדותל כלי הדם (VEGF), גורם גדילה מתמיר β (TGF-β), גורם גדילה אפידרמלי (EGF), גורם גדילה דמוי אינסולין (IGF), גורם גדילה של תאי אפיתל ECGF וגורם גדילה פיברובלסטי (FGF)). הטסיות וגרנולות האלפא שלהן מתפרקות באמצעות סוניקציה, תוך שימוש בתופעת הקוויטציה האקוסטית. שימוש בקוויטציה אולטרסונית לליזיס של טסיות מפחית את ההשפעה השלילית האפשרית של שיטת ההקפאה וההפשרה החוזרות על פעילות גורמי הגדילה.
פרוטוקול להכנה אולטרסונית של PRP
הופכים בעדינות מבחנה ובה כ־16mL של דגימת דם אוטולוגי שנאספה זה עתה 8–10 פעמים, כדי לערבב היטב את הדם ואת נוגדי הקרישה. לאחר מכן מצנטריפגים את הדגימה ב־1800 g למשך 20 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר הצנטריפוגה, הטסיות והתאים החד־גרעיניים יוצרים שכבה לבנבנה בתחתית שכבת הפלזמה, המכונה פלזמה עשירה בטסיות (PRP). השכבה העליונה מכונה פלזמה דלה בטסיות (PPP). ניתן להסיר את התאים החד־גרעיניים או להשאירם בדגימה. לעיתים קרובות משאירים את התאים החד־גרעיניים בדגימת ה־PRP כדי להימנע משלבים נוספים הכרוכים בסיכון לזיהום.
הערה: יש לבצע את הטיפול האולטרסוני ב־PRP אוטולוגי בתנאים סטריליים.
מפרידים ואוספים את ה־PRP ואת ה־PPP. ל־PPP מוסיפים 1.5mL של תמיסת סידן כלורי בריכוז 10%, ואילו ל־PRP מוסיפים 0.5mL של אתנול בריכוז 5%. מניעים בעדינות את שני התרחיפים ומניחים להם לעמוד במשך 5 דקות בטמפרטורת החדר. לבסוף מוסיפים 1mL של PPP לתרחיף ה־PRP ומניחים לו לעמוד עד שנוצר קריש פיברין.
טיפול אולטרסוני: מכיוון שג'ל הטסיות שנוצר משמש מאגר לגורמי הגדילה שהשתחררו, יש לפרק את ג'ל הפיברין כדי לשחרר את גורמי הגדילה הזמינים. הפרמטרים לליזיס האולטרסוני ולשחרור גורמי הגדילה הם כדלקמן: העבירו את הדגימה שבמבחנה סוניקציה באמצעות UP200Ht או UP200St (200W, 26kHz) עם סונוטרודה S26d2. כדי למנוע התחממות יתר של דגימת הדם, ניתן לבצע סוניקציה במחזורי פעימות (למשל 10 שניות פעולה, 30 שניות הפסקה). יש להניח את הדגימה על קרח לקירור, כך שהטמפרטורה תישמר באופן מיטבי בטווח 2–5°C. לאחר הסוניקציה מצנטריפגים את הדגימה ב־16,000 g למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר. אוספים את הנוזל העליון, וניתן לאחסנו ב־-70°C.
ריכוז הטסיות במקטע ה־PRP הועשר פי 1.7–4.5 בשיטה המשתמשת בסוניקציה, בהשוואה למספר הטסיות הממוצע בדם מלא המדווח בספרות.
PRP שולב בטיפול בתאי גזע שמקורם ברקמת שומן (תאי גזע אוטולוגיים ששוחררו מרקמת שומן באמצעות אולטרסאונד, עורבבו עם PRP והוזרקו בחזרה לרקמת המטופל לצורך שיקום).
ציוד אולטרסוני
Hielscher Ultrasonics מתמחה בטכנולוגיה אולטרסונית מתקדמת ואמינה. המכשירים האולטרסוניים שלנו משמשים ברחבי העולם לליזיס, למיצוי ולהכנת דגימות – באופן ישיר ועקיף. אביזרים הניתנים לעיקור באוטוקלב וכן אביזרים לשימוש חד־פעמי מבטיחים טיפול ללא זיהום בדגימות דם אוטולוגיות. ניתן להשתמש ברוב המערכות שלנו לליזיס אולטרסוני של תאי גזע ושל PRP, דבר שהופך את המכשירים האולטרסוניים שלנו ליעילים אף יותר מבחינה כלכלית.
הטבלה שלהלן מציגה את המכשירים האולטרסוניים שלנו המתאימים להכנת פלזמה עשירה בטסיות ואת נפח הדגימה המומלץ לכל אחד מהם. ניתן להשיג גם מכשירי סוניקציה גדולים יותר ומערכות מותאמות אישית.
| מכשיר | הספק [W] | תדר [kHz] | סוג | נפח [mL] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | עצמאי | 0.5 | – | 1.5 |
| UP50H | 50 | 30 | מוחזק ביד או מותקן על מעמד | 0.01 | – | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | מוחזק ביד או מותקן על מעמד | 0.01 | – | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | מוחזק ביד או מותקן על מעמד | 0.1 | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | מותקן על מעמד | 0.1 | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | מותקן על מעמד | 5.0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | עצמאי | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | תא זרימה ללא זיהום | |||
צרו איתנו קשר עוד היום! נשמח לעזור לכם למצוא את המכשיר האולטרסוני המיטבי!
צרו איתנו קשר! / שאלו אותנו!
GDmini2 על מתמר UP200St-TD (200 ואט)
ספרות ומקורות
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; Pula, G. (2016): ג'ל ליזט טסיות ותאי אב אנדותליאליים מעודדים יצירת רשת מיקרו־וסקולרית במבחנה: השלכות להנדסת רקמות. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, M.S.A.; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): פלזמה עשירה בטסיות (PRP) לפגיעה חריפה בשריר: סקירה שיטתית. PLOS ONE כרך 9, גיליון 2, 2014.
עובדות שכדאי לדעת
פלזמה עשירה בטסיות
פלזמה עשירה בטסיות מכילה גורם גדילה AB (PDGF-AB), גורם גדילה שמקורו בטסיות AA (PDGF-AA), גורם גדילה שמקורו בטסיות BB (PDGF-BB), גורם גדילה של אנדותל כלי הדם (VEGF), גורם גדילה מתמיר β (TGF-β), גורם גדילה אפידרמלי (EGF), גורם גדילה דמוי אינסולין (IGF), גורם גדילה של תאי אפיתל ECGF וגורם גדילה פיברובלסטי (FGF), שהם גורמים חשובים המעודדים גדילה והתחדשות של תאים.
סרום אוטולוגי מותנה (ACS)
פלזמה אוטולוגית מותנית (ACP) היא פלזמה עשירה בטסיות המופקת מדם אוטולוגי, המשמשת לתמיכה בהתחדשות במגוון מצבים אורתופדיים והליכים כירורגיים. סרום מותנה מוכן באמצעות הפרדת הפלזמה ממרכיבי הדם האחרים (כגון אריתרוציטים) וריכוזה. ACP היא פלזמה עשירה בטסיות (PRP). PRP הוא מונח כללי לסוג של פלזמה המכילה ריכוז גבוה משמעותית של תרומבוציטים בהשוואה לדם מלא. היא מופקת מדם מלא. המרכיבים העיקריים של ACP כוללים תרומבוציטים (טסיות) וכמה גורמי גדילה שהם מרכזיים בתהליכי ריפוי. בניגוד לתכשירים אחרים של פלזמה עשירה בטסיות, ACP מתאפיינת בריכוז נמוך של תאי דם לבנים כגון גרנולוציטים נויטרופיליים, העלולים לפגוע בתהליך הריפוי כאשר הם מצויים בריכוזים גבוהים.
הזרקות פלזמה עשירה בטסיות
פלזמה עשירה בטסיות משמשת להזרקה ברפואה רגנרטיבית וכן בהליכים קוסמטיים. השימוש ב־PRP מבטיח האצה משמעותית של ריפוי השריר והתאוששותו. נוסף על כך, היא משמשת בהצלחה לטיפול בדלקת, בדלקת מפרקים, בכאב, בפצעים, בפצעים פתוחים המחלימים באיטיות ובכוויות עור חמורות. ה־PRP מכילה רמה גבוהה של גורמי גדילה, המעודדים את פעילות התאים המעורבים בריפוי ומגינים עליהם, כך שהרקמה הפגועה משתקמת.
בטיפולים קוסמטיים הוכחה יעילותה של PRP בעידוד צמיחת שיער והתחדשות העור (המוכרת גם כטיפול ערפד).
גורמי גדילה שמקורם בטסיות (PDGF)
המונח גורם גדילה שמקורו בטסיות (PDGF) מתייחס לגורמים PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C ו־PDGF-D. זוהי רשת איתות המורכבת מארבעה ליגנדים (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C ו־PDGF-D) ומשני קולטנים, PDGFR-alpha ו־PDGFR-beta.
גורמי גדילה, או חלבונים, מווסתים את גדילת התאים ואת חלוקתם. כמיטוגן העיקרי המצוי בסרום של יונקים, המשתחרר מטסיות במהלך היווצרות קריש, הוא ממלא תפקיד משמעותי ביצירת כלי דם (אנגיוגנזה), כלומר בצמיחת כלי דם מתוך רקמת כלי דם קיימת.