સેલ સ્ક્રેપિંગને UIP400MTP હાઇ-થ્રુપુટ સોનીકેટર સાથે બદલો
મલ્ટિ-ઓમિક્સ પૃથ્થકરણ માટે મલ્ટિ-વેલ પ્લેટ્સમાંથી એડહેરન્ટ સેલ લાઇન્સનું ડિટેચમેન્ટ અને નિષ્કર્ષણ લેબ્સમાં દૈનિક કાર્ય છે. મલ્ટિ-વેલ પ્લેટ સોનિકેટર UIP400MTP નો ઉપયોગ કરીને હાઇ-થ્રુપુટ સેલ ડિટેચમેન્ટ મેન્યુઅલ સેલ સ્ક્રેપિંગને બદલે છે જે RNA, કુલ લિપિડ્સ અને કુલ ધ્રુવીય ચયાપચયની ઉચ્ચ ઉપજ તરફ દોરી જાય છે. એક નવી પદ્ધતિ Hielscher UIP400MTP સોનિકેટરને બેકમેન કોલ્ટર i7 લિક્વિડ હેન્ડલિંગ વર્કસ્ટેશન સાથે સંકલિત કરે છે, RNA, મેટાબોલાઇટ અને લિપિડ નિષ્કર્ષણ માટે કોષોની ઉચ્ચ-થ્રુપુટ, પુનઃઉત્પાદનક્ષમ અને કાર્યક્ષમ પ્રક્રિયાને સક્ષમ કરે છે. પ્રસ્તુત પદ્ધતિ વિવિધ સેલ પ્રકારો અને પ્રાયોગિક પરિસ્થિતિઓમાં શ્રેષ્ઠ પ્રજનનક્ષમતા અને ઉપજ હાંસલ કરીને પરંપરાગત મેન્યુઅલ સેલ સ્ક્રેપિંગ પદ્ધતિઓને શ્રેષ્ઠ બનાવે છે.
માઇક્રોપ્લેટ સોનિકેટર UIP400MTP સાથે સેલ ડિટેચમેન્ટને સ્ટ્રીમલાઇન કરો
આનુષંગિક કોષ સંસ્કૃતિ પ્રણાલીઓ ઝેરી અને જૈવ ચિકિત્સા સંશોધનમાં નિર્ણાયક ભૂમિકા ભજવે છે. આ સંદર્ભમાં, ક્રુચલી-ફ્યુજ એટ અલ. (2024) રાસાયણિક સંકટ મૂલ્યાંકન માટે ઓમિક્સ ટેક્નોલોજીનો લાભ લેવા પર કેન્દ્રિત પ્રિસિઝનટોક્સ પ્રોજેક્ટમાં નોંધપાત્ર પડકારને સંબોધિત કર્યો. આ પ્રોજેક્ટનો હેતુ વિવિધ રસાયણો સાથે સારવાર કરાયેલા હજારો નમૂનાઓના ઉચ્ચ-થ્રુપુટ વિશ્લેષણનો હતો. આ માંગને પહોંચી વળવા માટે, સંશોધકોએ લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી-માસ સ્પેક્ટ્રોમેટ્રી (LC-MS) વિશ્લેષણ માટે સ્થાપિત બાયફાસિક એક્સટ્રેક્શન પ્રોટોકોલ સાથે UIP400MTP સોનિકેટરને સંયોજિત કરતી સ્વયંસંચાલિત વર્કફ્લો વિકસાવી છે. તેમનો અભ્યાસ મેન્યુઅલ સ્ક્રેપિંગ અને અન્ય પરંપરાગત પદ્ધતિઓની તુલનામાં અનુયાયી કોષોને અલગ કરવામાં UIP400MTP મલ્ટી-વેલ પ્લેટ સોનિકેટરની અસરકારકતાનું મૂલ્યાંકન કરે છે.
સ્ટ્રીમલાઈનિંગ મલ્ટી-ઓમિક્સ: UIP400MTP સાથે ઓટોમેટેડ એડહેરન્ટ સેલ એક્સટ્રેક્શન
બર્મિંગહામ યુનિવર્સિટીની લૌરા ક્રુચલી-ફ્યુજની સંશોધક ટીમે ત્રણ માનવ કોષ રેખાઓનો ઉપયોગ કર્યો: HepG2 (લિવર કેન્સર કોશિકાઓ), HepaRG (વિવિધ હેપેટોસાઇટ જેવા કોષો), અને H295R (એડ્રિનલ કેન્સર કોષો). આ કોષોનું સંવર્ધન 24-વેલ અને 96-વેલ પ્લેટમાં કરવામાં આવ્યું હતું અને અફલાટોક્સિન B1 અને ફોરસ્કોલિન જેવા પરીક્ષણ રસાયણોના સંપર્કમાં આવ્યા હતા.
પ્રાયોગિક ડિઝાઇન:
- તબક્કો 1: UIP400MTP સોનિકેટરની પાવર સેટિંગ્સનું ઑપ્ટિમાઇઝેશન અને મેન્યુઅલ સેલ સ્ક્રેપિંગ અને સોનિક વૉટર બાથ સાથે સરખામણી. આરએનએ, મેટાબોલાઇટ અને લિપિડ પુનઃપ્રાપ્તિનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે HepG2 કોષોનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો.
- તબક્કો 2: બેકમેન કોલ્ટર i7 સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરીને બાયફાસિક નિષ્કર્ષણ વર્કફ્લોમાં UIP400MTPનું એકીકરણ. HepaRG અને H295R કોષોનો ઉપયોગ કરીને માન્યતા હાથ ધરવામાં આવી હતી.
નિષ્કર્ષણ કાર્યપ્રવાહ: વર્કફ્લોમાં મલ્ટિ-વેલ પ્લેટ્સમાં રાસાયણિક એક્સપોઝર, UIP400MTP નો ઉપયોગ કરીને સેલ ડિટેચમેન્ટ અને બ્લાઇગ દ્વારા બાયફાસિક નિષ્કર્ષણનો સમાવેશ થાય છે. & ડાયર (બી&ડી) પદ્ધતિ. લિપોફિલિક અને ધ્રુવીય સંયોજનો માટે થર્મો સાયન્ટિફિક ઓર્બિટ્રેપ એક્સપ્લોરિસ 120 નો ઉપયોગ કરીને એલસી-એમએસ વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. આ બી&ડી પદ્ધતિ, લિપિડ પરિમાણ માટેનું ગોલ્ડ સ્ટાન્ડર્ડ, જેમાં મિથેનોલ, ક્લોરોફોર્મ અને પાણી સાથે બે-પગલાંના નિષ્કર્ષણનો સમાવેશ થાય છે, ત્યારબાદ ક્લોરોફોર્મ તબક્કામાં લિપિડનું પ્રમાણીકરણ થાય છે.
UIP400MTP માઈક્રોપ્લેટ સોનિકેટર મલ્ટી-વેલ પ્લેટ્સ અને પેટ્રી ડીશમાંથી એડહેરન્ટ સેલ લાઈનોને અલગ કરવાની સુવિધા આપે છે
પરિણામો:
- તબક્કો 1: શ્રેષ્ઠ sonication શરતો 60% પાવર પર ઓળખવામાં આવી હતી.
UIP400MTP એ મેન્યુઅલ સ્ક્રેપિંગ અને સોનિક બાથની તુલનામાં અસાધારણ પ્રજનનક્ષમતા સાથે સૌથી વધુ RNA પુનઃપ્રાપ્તિ પ્રાપ્ત કરી છે.
ધ્રુવીય મેટાબોલાઇટ પુનઃપ્રાપ્તિ સમગ્ર પદ્ધતિઓમાં સુસંગત હતી, જ્યારે લિપિડ પુનઃપ્રાપ્તિ UIP400MTP સાથે નોંધપાત્ર રીતે શ્રેષ્ઠ હતી. - તબક્કો 2: HepaRG અને H295R કોશિકાઓ પરની માન્યતાએ લિપિડોમિક્સ અને મેટાબોલોમિક્સ ડેટામાં ઉચ્ચ પ્રજનનક્ષમતા દર્શાવી છે, જેમ કે ચુસ્તપણે ક્લસ્ટર્ડ PCA સ્કોર્સ દ્વારા સૂચવવામાં આવ્યું છે.
Aflatoxin B1 અને forskolin સારવાર અસરકારક રીતે નિયંત્રણોથી અલગ પાડવામાં આવી હતી, જે પદ્ધતિની સંવેદનશીલતા અને વિશ્વસનીયતા પર ભાર મૂકે છે.
Microplate sonicator UIP400MTP ઉચ્ચ થ્રુપુટ સેલ ડિટેચમેન્ટ માટે
“Hielscher UIP400MTP sonication ઉપકરણ મેન્યુઅલ સેલ સ્ક્રેપિંગના "ગોલ્ડ સ્ટાન્ડર્ડ" માટે ઉચ્ચ-ગુણવત્તા અને પુનઃઉત્પાદનક્ષમ વૈકલ્પિક અભિગમ પૂરો પાડે છે, જે RNA, કુલ લિપિડ્સ અને કુલ ધ્રુવીય ચયાપચયની ઉચ્ચ ઉપજ તરફ દોરી જાય છે.” (ક્રુચલી-ફ્યુજ એટ અલ., 2024)
ક્રુચલી-ફ્યુજ એટ અલ. અનુયાયી સેલ પ્રોસેસિંગ માટે UIP400MTP સોનિકેટરના ફાયદાઓને હાઇલાઇટ કરો. મેન્યુઅલ સ્ક્રેપિંગને બદલીને, આ પદ્ધતિ પુનઃઉત્પાદનક્ષમતા, થ્રુપુટ અને ઉપજને વધારે છે, જે તેને પ્રિસિઝનટોક્સ જેવા મોટા પાયે અભ્યાસ માટે અમૂલ્ય સાધન બનાવે છે. UIP400MTP નું સ્વયંસંચાલિત વર્કફ્લોમાં એકીકરણ માત્ર પરિવર્તનક્ષમતા ઘટાડે છે પરંતુ શ્રમ-સઘન પ્રક્રિયાઓને પણ સુવ્યવસ્થિત કરે છે, ઉચ્ચ-ગુણવત્તાવાળા મલ્ટી-ઓમિક્સ ડેટા સંપાદનને સક્ષમ કરે છે.
ક્રુચલી-ફ્યુજ એટ અલનું કાર્ય. (2024) મલ્ટિ-ઓમિક્સ પૃથ્થકરણ માટે અનુયાયી સેલ સંસ્કૃતિઓની પ્રક્રિયાને સરળ અને સુવ્યવસ્થિત કરે છે. સ્વયંસંચાલિત વર્કફ્લો સાથે UIP400MTP સોનીકેટરનું એકીકરણ સુસંગત અને કાર્યક્ષમ નમૂનાની તૈયારીને સુનિશ્ચિત કરે છે, જે તેને ઉચ્ચ-થ્રુપુટ ટોક્સિકોલોજિકલ સંશોધન માટે આદર્શ રીતે અનુકૂળ બનાવે છે.
ડિઝાઇન, ઉત્પાદન અને કન્સલ્ટિંગ – જર્મનીમાં બનાવેલ ગુણવત્તા
Hielscher ultrasonicators તેમના ઉચ્ચતમ ગુણવત્તા અને ડિઝાઇન ધોરણો માટે જાણીતા છે. મજબૂતાઈ અને સરળ કામગીરી ઔદ્યોગિક સુવિધાઓમાં અમારા અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સના સરળ એકીકરણને મંજૂરી આપે છે. ખરબચડી પરિસ્થિતિઓ અને માંગવાળા વાતાવરણને Hielscher અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ દ્વારા સરળતાથી નિયંત્રિત કરવામાં આવે છે.
Hielscher Ultrasonics એ ISO પ્રમાણિત કંપની છે અને અત્યાધુનિક ટેકનોલોજી અને વપરાશકર્તા-મિત્રતા દર્શાવતા ઉચ્ચ-પ્રદર્શન સોનિકેટર્સ પર વિશેષ ભાર મૂકે છે. અલબત્ત, Hielscher અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ CE અનુરૂપ છે અને UL, CSA અને RoHs ની જરૂરિયાતોને પૂર્ણ કરે છે.
સાહિત્ય / સંદર્ભો
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.
- Dreyer J., Ricci G., van den Berg J., Bhardwaj V., Funk J., Armstrong C., van Batenburg V., Sine C., VanInsberghe M.A., Marsman R., Mandemaker I.K., di Sanzo S., Costantini J., Manzo S.G., Biran A., Burny C., Völker-Albert M., Groth A., Spencer S.L., van Oudenaarden A., Mattiroli F. (2024): Acute multi-level response to defective de novo chromatin assembly in S-phase. Molecular Cell 2024.
- Mochizuki, Chika; Taketomi, Yoshitaka; Irie, Atsushi; Kano, Kuniyuki; Nagasaki, Yuki; Miki, Yoshimi; Ono, Takashi; Nishito, Yasumasa; Nakajima, Takahiro; Tomabechi, Yuri; Hanada, Kazuharu; Shirouzu, Mikako; Watanabe, Takashi; Hata, Kousuke; Izumi, Yoshihiro; Bamba, Takeshi; Chun, Jerold; Kudo, Kai; Kotani, Ai; Murakami, Makoto (2024): Secreted phospholipase PLA2G12A-driven lysophospholipid signaling via lipolytic modification of extracellular vesicles facilitates pathogenic Th17 differentiation. BioRxiv 2024.
- Cosenza-Contreras M, Seredynska A, Vogele D, Pinter N, Brombacher E, Cueto RF, Dinh TJ, Bernhard P, Rogg M, Liu J, Willems P, Stael S, Huesgen PF, Kuehn EW, Kreutz C, Schell C, Schilling O. (2024): TermineR: Extracting information on endogenous proteolytic processing from shotgun proteomics data. Proteomics. 2024.
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
વારંવાર પૂછાતા પ્રશ્નો
સેલ ડિટેચમેન્ટ શું છે?
સંશોધનમાં સેલ ડિટેચમેન્ટ એ સંવર્ધન જહાજ અથવા સબસ્ટ્રેટની સપાટીથી અનુયાયી કોષોને અલગ કરવાની પ્રક્રિયાનો સંદર્ભ આપે છે. આ સામાન્ય રીતે ડાઉનસ્ટ્રીમ એપ્લીકેશન જેમ કે વિશ્લેષણ, સબકલ્ચરિંગ અથવા ક્રિઓપ્રીઝર્વેશન માટે કોષોની લણણી માટે કરવામાં આવે છે. કોષના પ્રકાર અને સંશોધનની જરૂરિયાતોને આધારે એન્ઝાઈમેટિક પદ્ધતિઓ (દા.ત., ટ્રિપ્સિન), રાસાયણિક એજન્ટો (દા.ત., EDTA), યાંત્રિક પદ્ધતિઓ (દા.ત., સ્ક્રેપિંગ), અથવા સોનિકેશન જેવી ભૌતિક તકનીકોનો ઉપયોગ કરીને ડિટેચમેન્ટ પ્રાપ્ત કરી શકાય છે.
તમે અનુયાયી કોષોને કેવી રીતે અલગ કરશો?
સોનિકેશનનો ઉપયોગ કરીને અનુયાયી કોષોને અલગ કરવાથી નિયંત્રિત વાતાવરણમાં સેલ-સપાટીના સંલગ્નતાને વિક્ષેપિત કરવા માટે કેન્દ્રિત અલ્ટ્રાસાઉન્ડ તરંગોનો સમાવેશ થાય છે. ખાસ કરીને, UIP400MTP માઇક્રોપ્લેટ સોનિકેટર સ્થાનિક યાંત્રિક સ્પંદનો પેદા કરીને આને પ્રાપ્ત કરે છે જે કોષો અને સંસ્કૃતિની સપાટી વચ્ચેના બોન્ડને તોડે છે. મુખ્ય પગલાઓમાં શામેલ છે:
- તૈયારી: કોષો મલ્ટિ-વેલ પ્લેટ્સમાં ઉગાડવામાં આવે છે અને પ્રાયોગિક ડિઝાઇનના ભાગ રૂપે ચોક્કસ રસાયણોના સંપર્કમાં આવી શકે છે.
- સોનિકેશન: સોનીકેટર UIP400MTP એ કોષોને નુકસાન પહોંચાડ્યા વિના અથવા બાયોમોલેક્યુલ અખંડિતતા સાથે સમાધાન કર્યા વિના અસરકારક ટુકડીની ખાતરી કરવા માટે ઑપ્ટિમાઇઝ સેટિંગ્સ (દા.ત., 60% પાવર) સાથે પ્રોગ્રામ કરેલ છે.
- તાપમાન નિયંત્રણ: પ્રક્રિયા દરમિયાન ગરમી-પ્રેરિત કોષ અથવા મોલેક્યુલર ડિગ્રેડેશનને રોકવા માટે ઉપકરણ તાપમાનની સ્થિરતા જાળવી રાખે છે.
- પોસ્ટ-ડિટેચમેન્ટ: અલગ કોશિકાઓ ડાઉનસ્ટ્રીમ નિષ્કર્ષણ પ્રોટોકોલને આધિન છે, જેમ કે બ્લાઇગ & ડાયર બાયફાસિક પદ્ધતિ, આરએનએ, લિપિડ્સ અને ચયાપચયની પુનઃપ્રાપ્તિ માટે.
આ પદ્ધતિ તેના ઓટોમેશન, પુનઃઉત્પાદનક્ષમતા અને ઉચ્ચ-થ્રુપુટ નમૂનાઓને કાર્યક્ષમ રીતે પ્રક્રિયા કરવાની ક્ષમતાને કારણે મેન્યુઅલ સ્ક્રેપિંગ કરતાં શ્રેષ્ઠ છે.
નોન-ડેમેજિંગ સેલ ડિટેચમેન્ટ શું છે?
બિન-નુકસાનકર્તા સેલ ડિટેચમેન્ટ એ કોષની સદ્ધરતા, અખંડિતતા અથવા કાર્યક્ષમતા સાથે સમાધાન કર્યા વિના અનુયાયી કોષોને તેમના સબસ્ટ્રેટમાંથી અલગ કરવાની પ્રક્રિયાનો સંદર્ભ આપે છે. તે નિયંત્રિત સોનિકેશન અથવા એન્ઝાઇમ-ફ્રી સોલ્યુશન્સ જેવી નમ્ર પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને પ્રાપ્ત થાય છે.
કોષોને બચાવવા માટે કોષોના વિનાશને ટાળવું મહત્વપૂર્ણ છે’ માળખાકીય અને મોલેક્યુલર લાક્ષણિકતાઓ, જે મલ્ટી-ઓમિક્સ વિશ્લેષણ, કાર્યાત્મક પરીક્ષણો અથવા ઉપચારાત્મક ઉપયોગ જેવા ચોક્કસ ડાઉનસ્ટ્રીમ એપ્લિકેશન માટે આવશ્યક છે. ક્ષતિગ્રસ્ત કોષો અંતઃકોશિક સામગ્રીઓ પ્રકાશિત કરી શકે છે, સંભવિત રૂપે પ્રાયોગિક પરિણામોને મૂંઝવણમાં મૂકે છે અથવા નમૂનાની ગુણવત્તા સાથે સમાધાન કરી શકે છે.
એન્ઝાઇમ-ફ્રી સેલ ડિટેચમેન્ટનો ફાયદો શું છે?
એન્ઝાઇમ-ફ્રી સેલ ડિટેચમેન્ટ સેલ સપાટી પ્રોટીન અને રીસેપ્ટર્સને સાચવવા, કોષની સદ્ધરતા જાળવી રાખવા અને બાયોમોલેક્યુલ્સને સંભવિત એન્ઝાઈમેટિક નુકસાનને ટાળવા સહિત ઘણા ફાયદા આપે છે. આ અભિગમ ખાસ કરીને સંવેદનશીલ ડાઉનસ્ટ્રીમ એપ્લીકેશન્સ માટે ફાયદાકારક છે, જેમ કે ફ્લો સાયટોમેટ્રી, પ્રોટીઓમિક્સ અથવા ફંક્શનલ એસેસ, જ્યાં એન્ઝાઈમેટિક ફેરફારો ડેટાની ગુણવત્તા અથવા પ્રાયોગિક પરિણામો સાથે સમાધાન કરી શકે છે. વધુમાં, એન્ઝાઇમ-મુક્ત પદ્ધતિઓ ઘણીવાર વધુ પુનઃઉત્પાદનક્ષમ હોય છે અને ઉચ્ચ-થ્રુપુટ વર્કફ્લો માટે સ્વીકારી શકાય છે.
Hielscher Ultrasonics થી ઉચ્ચ-પ્રદર્શન અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝર્સનું ઉત્પાદન કરે છે પ્રયોગશાળા પ્રતિ ઔદ્યોગિક કદ.


