હાથથી કોષો ખોતરીને અલગ કરવાની પદ્ધતિને બદલે ઉચ્ચ નમૂના પ્રક્રિયા ક્ષમતાવાળું UIP400MTP સોનિકેટર અપનાવો

મલ્ટિ-ઓમિક્સ વિશ્લેષણ માટે મલ્ટિ-વેલ પ્લેટોમાંથી સપાટીને ચોંટેલી કોષરેખાઓને અલગ કરવી અને તેમનું નિષ્કર્ષણ કરવું એ પ્રયોગશાળાઓમાં રોજિંદું કાર્ય છે. મલ્ટિ-વેલ પ્લેટ સોનિકેટર UIP400MTP વડે ઉચ્ચ નમૂના પ્રક્રિયા ક્ષમતા સાથે કોષોને અલગ કરવાની પદ્ધતિ હાથથી કોષો ખોતરીને અલગ કરવાની પદ્ધતિનું સ્થાન લે છે, જેના પરિણામે RNA, કુલ લિપિડ અને કુલ ધ્રુવીય ચયાપચયજ પદાર્થોની વધુ ઉપજ મળે છે. નવી પદ્ધતિમાં Hielscher UIP400MTP સોનિકેટરને Beckman Coulter i7 લિક્વિડ હેન્ડલિંગ વર્કસ્ટેશન સાથે સંકલિત કરવામાં આવે છે, જેનાથી RNA, ચયાપચયજ પદાર્થો અને લિપિડના નિષ્કર્ષણ માટે કોષોની ઉચ્ચ નમૂના પ્રક્રિયા ક્ષમતા સાથે, પુનરુત્પાદનીય અને કાર્યક્ષમ પ્રક્રિયા શક્ય બને છે. પ્રસ્તુત પદ્ધતિ વિવિધ કોષપ્રકારો અને પ્રાયોગિક પરિસ્થિતિઓમાં વધુ સારી પુનરુત્પાદનીયતા અને ઉપજ પ્રાપ્ત કરીને હાથથી કોષો ખોતરીને અલગ કરવાની પરંપરાગત પદ્ધતિઓ કરતાં ચડિયાતી સાબિત થાય છે.

માઇક્રોપ્લેટ સોનિકેટર UIP400MTP વડે કોષોને અલગ કરવાની પ્રક્રિયા સુગમ બનાવો

સપાટીને ચોંટેલા કોષોની સંવર્ધન પ્રણાલીઓ વિષવિજ્ઞાન અને જૈવચિકિત્સાકીય સંશોધનમાં નિર્ણાયક ભૂમિકા ભજવે છે. આ સંદર્ભમાં, Cruchley-Fuge અને સહલેખકોએ (2024) રાસાયણિક જોખમના મૂલ્યાંકન માટે ઓમિક્સ તકનીકોનો ઉપયોગ કરવા પર કેન્દ્રિત PrecisionTox પ્રોજેક્ટમાં એક નોંધપાત્ર પડકારનો ઉકેલ લાવ્યો હતો. પ્રોજેક્ટનો હેતુ વિવિધ રસાયણોથી ઉપચારિત હજારો નમૂનાઓનું ઉચ્ચ નમૂના પ્રક્રિયા ક્ષમતા સાથે વિશ્લેષણ કરવાનો હતો. આ જરૂરિયાત પૂરી કરવા માટે સંશોધકોએ લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી–માસ સ્પેક્ટ્રોમેટ્રી (LC-MS) વિશ્લેષણ માટે UIP400MTP સોનિકેટરને સ્થાપિત દ્વિચરણીય નિષ્કર્ષણ પ્રોટોકોલ સાથે જોડતો સ્વચાલિત કાર્યપ્રવાહ વિકસાવ્યો હતો. તેમનો અભ્યાસ હાથથી ખોતરીને કોષોને અલગ કરવાની અને અન્ય પરંપરાગત પદ્ધતિઓની સરખામણીમાં સપાટીને ચોંટેલા કોષોને અલગ કરવામાં UIP400MTP મલ્ટિ-વેલ પ્લેટ સોનિકેટરની અસરકારકતાનું મૂલ્યાંકન કરે છે.

મલ્ટિ-ઓમિક્સને સુગમ બનાવવું: UIP400MTP વડે સપાટીને ચોંટેલા કોષોનું સ્વચાલિત નિષ્કર્ષણ

યુનિવર્સિટી ઑફ બર્મિંગહામની Laura Cruchley-Fugeની સંશોધક ટીમે ત્રણ માનવ કોષરેખાઓનો ઉપયોગ કર્યો હતો: HepG2 (યકૃતના કેન્સરના કોષો), HepaRG (વિભેદિત યકૃતકોષો જેવા કોષો) અને H295R (અધિવૃક્કના કેન્સરના કોષો). આ કોષોને 24-વેલ અને 96-વેલ પ્લેટોમાં સંવર્ધિત કરવામાં આવ્યા હતા અને અફ્લાટોક્સિન B1 તથા ફોર્સ્કોલિન જેવા પરીક્ષણ રસાયણોના સંપર્કમાં લાવવામાં આવ્યા હતા.

પ્રાયોગિક આયોજન:

• તબક્કો 1: UIP400MTP સોનિકેટરની પાવર સેટિંગ્સનું ઇષ્ટતમીકરણ અને હાથથી કોષો ખોતરીને અલગ કરવાની પદ્ધતિ તથા અલ્ટ્રાસોનિક જળસ્નાનો સાથે સરખામણી કરવામાં આવી હતી. RNA, ચયાપચયજ પદાર્થો અને લિપિડની પુનઃપ્રાપ્તિનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે HepG2 કોષોનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો.
• તબક્કો 2: Beckman Coulter i7 સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરીને UIP400MTP ને દ્વિચરણીય નિષ્કર્ષણ કાર્યપ્રવાહમાં સંકલિત કરવામાં આવ્યું હતું. HepaRG અને H295R કોષોનો ઉપયોગ કરીને માન્યતા ચકાસવામાં આવી હતી.

નિષ્કર્ષણ કાર્યપ્રવાહ: કાર્યપ્રવાહમાં મલ્ટિ-વેલ પ્લેટોમાં કોષોને રસાયણોના સંપર્કમાં લાવવા, UIP400MTP વડે કોષોને અલગ કરવા અને Bligh & Dyer (B&D) પદ્ધતિ દ્વારા દ્વિચરણીય નિષ્કર્ષણ કરવાનો સમાવેશ થતો હતો. લિપિડપ્રેમી અને ધ્રુવીય સંયોજનો માટે Thermo Scientific Orbitrap Exploris 120નો ઉપયોગ કરીને LC-MS વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. લિપિડના માત્રાત્મક નિર્ધારણ માટે સુવર્ણ માનક ગણાતી B&D પદ્ધતિમાં મિથેનોલ, ક્લોરોફોર્મ અને પાણી વડે બે પગલાંમાં નિષ્કર્ષણ કરવામાં આવે છે, ત્યારબાદ ક્લોરોફોર્મ ચરણમાં લિપિડનું માત્રાત્મક નિર્ધારણ કરવામાં આવે છે.

UIP400MTP માઇક્રોપ્લેટ સોનિકેટર મલ્ટિ-વેલ પ્લેટો અને પેટ્રી ડિશોમાંથી સપાટીને ચોંટેલી કોષરેખાઓને અલગ કરવાની પ્રક્રિયા સરળ બનાવે છે

પરિણામો:

• તબક્કો 1: 60% પાવર પર સોનિકેશનની શ્રેષ્ઠ પરિસ્થિતિઓ ઓળખવામાં આવી હતી.
  હાથથી ખોતરીને કોષોને અલગ કરવાની પદ્ધતિ અને અલ્ટ્રાસોનિક સ્નાનોની સરખામણીમાં UIP400MTP વડે અસાધારણ પુનરુત્પાદનીયતા સાથે RNAની સૌથી વધુ પુનઃપ્રાપ્તિ થઈ હતી.
  તમામ પદ્ધતિઓમાં ધ્રુવીય ચયાપચયજ પદાર્થોની પુનઃપ્રાપ્તિ સમાન હતી, જ્યારે UIP400MTP વડે લિપિડની પુનઃપ્રાપ્તિ નોંધપાત્ર રીતે વધુ સારી હતી.
• તબક્કો 2: HepaRG અને H295R કોષો પર કરાયેલી માન્યતા ચકાસણીએ લિપિડોમિક્સ અને મેટાબોલોમિક્સ ડેટામાં ઊંચી પુનરુત્પાદનીયતા દર્શાવી હતી, જેનો સંકેત ચુસ્ત સમૂહોમાં ગોઠવાયેલા PCA સ્કોરથી મળ્યો હતો.
  અફ્લાટોક્સિન B1 અને ફોર્સ્કોલિનથી કરાયેલા ઉપચારોને નિયંત્રણ નમૂનાઓથી અસરકારક રીતે અલગ ઓળખી શકાયા હતા, જે આ પદ્ધતિની સંવેદનશીલતા અને વિશ્વસનીયતા દર્શાવે છે.

“Hielscher UIP400MTP સોનિકેશન ઉપકરણ હાથથી કોષો ખોતરીને અલગ કરવાના ‘સુવર્ણ માનક’ માટે ઉચ્ચ ગુણવત્તાવાળો અને પુનરુત્પાદનીય વૈકલ્પિક અભિગમ પૂરો પાડે છે, જેના પરિણામે RNA, કુલ લિપિડ અને કુલ ધ્રુવીય ચયાપચયજ પદાર્થોની વધુ ઉપજ મળે છે.” (Cruchley-Fuge અને સહલેખકો, 2024)

Cruchley-Fuge અને સહલેખકો સપાટીને ચોંટેલા કોષોની પ્રક્રિયા માટે UIP400MTP સોનિકેટરના ફાયદાઓ પર પ્રકાશ પાડે છે. હાથથી ખોતરીને કોષોને અલગ કરવાની પદ્ધતિનું સ્થાન લઈને આ પદ્ધતિ પુનરુત્પાદનીયતા, નમૂના પ્રક્રિયા ક્ષમતા અને ઉપજમાં વધારો કરે છે, જેનાથી તે PrecisionTox જેવા મોટા પાયાના અભ્યાસો માટે અમૂલ્ય સાધન બને છે. સ્વચાલિત કાર્યપ્રવાહોમાં UIP400MTP નું સંકલન પરિવર્તનશીલતા ઘટાડવાની સાથે શ્રમસઘન પ્રક્રિયાઓને પણ સુગમ બનાવે છે, જેનાથી ઉચ્ચ ગુણવત્તાવાળો મલ્ટિ-ઓમિક્સ ડેટા મેળવવો શક્ય બને છે.

Cruchley-Fuge અને સહલેખકોનું (2024) કાર્ય મલ્ટિ-ઓમિક્સ વિશ્લેષણ માટે સપાટીને ચોંટેલા કોષ સંવર્ધનોની પ્રક્રિયાને સરળ અને સુગમ બનાવે છે. સ્વચાલિત કાર્યપ્રવાહો સાથે UIP400MTP સોનિકેટરનું સંકલન સુસંગત અને કાર્યક્ષમ નમૂના તૈયારી સુનિશ્ચિત કરે છે, જેનાથી તે ઉચ્ચ નમૂના પ્રક્રિયા ક્ષમતાની જરૂર ધરાવતા વિષવિજ્ઞાન સંશોધન માટે આદર્શ રીતે અનુકૂળ બને છે.
 

ડિઝાઇન, ઉત્પાદન અને પરામર્શ – જર્મનીમાં નિર્મિત ગુણવત્તા

Hielscher અલ્ટ્રાસોનિકેટરો તેમની સર્વોચ્ચ ગુણવત્તા અને ડિઝાઇનના ધોરણો માટે જાણીતા છે. મજબૂતાઈ અને સરળ સંચાલન અમારા અલ્ટ્રાસોનિકેટરોને ઔદ્યોગિક સુવિધાઓમાં સરળતાથી સંકલિત કરવાનું શક્ય બનાવે છે. Hielscher અલ્ટ્રાસોનિકેટરો કઠોર પરિસ્થિતિઓ અને પડકારજનક વાતાવરણમાં પણ સરળતાથી કાર્ય કરે છે.

Hielscher Ultrasonics એક ISO પ્રમાણિત કંપની છે અને અત્યાધુનિક તકનીક તથા ઉપયોગમાં સરળતા ધરાવતાં ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતાવાળાં સોનિકેટરો પર વિશેષ ભાર મૂકે છે. સ્વાભાવિક રીતે, Hielscher અલ્ટ્રાસોનિકેટરો CE અનુરૂપ છે અને UL, CSA તથા RoHsની જરૂરિયાતો પૂરી કરે છે.