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Préparation d'échantillons par ultrasons pour l'analyse du THC

  • L'extraction par ultrasons est une méthode éprouvée pour la production de THC, mais elle peut également être utilisée à des fins analytiques.
  • L'ultrasonication est une méthode courante de préparation des échantillons utilisée pour l'analyse de la teneur totale en THC dans les produits du cannabis.
  • L'extraction par ultrasons est appliquée aux échantillons avant l'analyse TLC, GC et HPLC.

Extraction ultrasonique du THC

Le THC, ou tétrahydrocannabinol (delta-9-tétrahydrocannabinol), est la substance chimique qui provoque la plupart des effets psychologiques de la marijuana. Pour l'espèce cannabis, on connaît plus de 400 souches différentes. Selon la variété de cannabis, le cannabis peut contenir jusqu'à 0,3 % en poids de THC. Dans d'autres souches, la teneur en THC peut atteindre jusqu'à 20 % en poids.
Les différents produits de cannabis varient également de manière significative : Ainsi, la concentration moyenne de THC dans la marijuana se situe entre 1 et 5 % ; dans le haschisch, la teneur en THC se situe entre 5 et 15 %, et dans l'huile de haschisch, elle est en moyenne de 20 %. La teneur en THC des doses récréatives de marijuana est très variable et plus la teneur en THC de la marijuana est faible, plus l'utilisateur doit en consommer pour ressentir les effets désirés.

UP100H (100W) et UP400St (400W) de Hielscher pour l'extraction de matériel végétal.

Homogénéisateurs ultrasoniques puissants UP100H et UP400St pour l'extraction du THC.

L'application d'ultrasons de puissance (également connue sous le nom de sonification) est un outil éprouvé pour l'extraction de principes actifs à partir de matériel végétal. Le THC ainsi que d'autres composants actifs tels que les cannabinoïdes et les terpènes peuvent être extraits avec succès par sonification. Cliquez ici pour en savoir plus sur l'extraction du cannabis par ultrasons !

La préparation de l'échantillon par ultrasons est utilisée pour analyser la teneur en THC.

  • pour le contrôle de la qualité des produits récréatifs à base de THC,
  • pour la détermination de la qualité des produits pharmaceutiques à base de THC,
  • pour la distinction entre le chanvre à drogue et le chanvre à fibres.

Pour l'analyse du THC, les méthodes chromatographiques suivantes sont couramment utilisées : Chromatographie sur couche mince (TLC), Chromatographie en phase gazeuse (GC) et Chromatographie liquide à haute performance (HPLC).

Demande d'information







Protocole de préparation des échantillons par ultrasons pour l'analyse CCM

Préparation des échantillons : Pour la préparation des échantillons, le matériel végétal séché doit être macéré et broyé en une poudre homogène. Pour l'extraction par ultrasons, 500 mg de poudre de cannabis et 5 ml de mélange méthanol-chloroforme (ratio de 9 : 1) sont mélangés dans un flacon. La sonication peut être appliquée à l'aide d'un ultrasonateur avec micro pointe, le VialTweeter ou l'ultrason CupHorn. La sonication dure environ 5 minutes. Laisser ensuite l'échantillon reposer pendant au moins 5 minutes. Diluer le surnageant clair avec le mélange d'extraction (v/v : 1 : 10). THC libre : 1μL sur la plaque TLC
Décarboxylation : 100μL de l'extrait sont évaporés jusqu'à siccité. Le résidu est chauffé à 180℃ pendant 4 min. Ajouter 500μL de méthanol-chloroforme (v/v 9 : 1). Soniquer pendant 5 min. Diluer le surnageant clair avec le mélange d'extraction (v/v : 1 : 10).
Étalonnage : 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC :
TLC gel de silice F-254, Merck 5729
TLC scanner II, logiciel CATS3, Camag Muttenz Eluens :
Ethylacétate : Toluol : Chloroforme = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Dérivation postchromatographique : Fast Blue Salt 0,1% dans 0,1 M NaOH
Densitométrie à 550 nm

Formule de structure du Δ9-THC pour l'analyse et l'extraction

Tétrahydrocannabinol (Δ9-THC) pour analyse et extraction

Protocole de préparation des échantillons par ultrasons pour l'analyse GC

Préparation de l'échantillon : Le matériel végétal séché est macéré et broyé jusqu'à obtention d'une poudre homogène. Pour l'extraction, 500 mg de poudre de plante de cannabis et 10 ml de mélange méthanol-hexane (ratio de 9 : 1) sont mélangés dans un flacon. La sonication peut être appliquée à l'aide d'un dispositif ultrasonique de type sonde avec micro pointe, le VialTweeter ou l'ultrason CupHorn. Soniquer l'échantillon pendant 15 à 20 minutes. Agiter l'échantillon et le laisser reposer pendant au moins 5 minutes. Diluer le surnageant clair avec le mélange d'extraction (v/v 1 : 20).
Décarboxyliation : dans l'encart
Température de l'injecteur 250℃
Étalonnage : 5 ng/μL à 250 ng/μL
GC : HP 6890 avec 5973 MSD et 7683 autosampler injection : 1μL, temps sans fractionnement : 2 min.
Colonne : HP-5 MS, 30m, diamètre 250 μm, épaisseur du film 0,25 μm.
Gaz vecteur : He, 35 psi, débit constant : 4 mL/min.
Étuve : 100℃ pendant 1min ; augmentation de la température de 15℃/min jusqu'à 280℃ ; 280℃ pendant 5 min. MSD : SCAN : m/e 35 – 550

Protocole de préparation des échantillons par ultrasons pour l'analyse HPLC

Préparation de l'échantillon (analogue à la préparation de la CG) : Le matériel végétal séché est macéré et broyé en une poudre homogène. Pour l'extraction, 500 mg de poudre de plante de cannabis et 10 ml de mélange méthanol-hexane (ratio de 9 : 1) sont mélangés dans un flacon. La sonication peut être appliquée à l'aide d'un ultrasonateur à sonde avec micro pointe, le VialTweeter ou l'ultrason CupHorn. Soniquer l'échantillon pendant 15 à 20 minutes. Agiter l'échantillon et le laisser reposer pendant au moins 5 minutes. Diluer le surnageant clair avec le mélange d'extraction (v/v 1 : 20).

La sonification est une étape courante avant l'analyse (par exemple, GC, TLC, HPLC).

VialTweeter pour la préparation d'échantillons par ultrasons

HPLC-DAD : module de séparation Waters 2695 / injection PAD 2996 : 10μL
Précolonne : LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Colonne : LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Éluant : isocratique 36% TEAP 25 mmol/L, 64% acétonitrile quantification à 210nm
Étalonnage : 0,001 – 010 μg/μL
Étalonnage : 0,01 - 0,50 μg/μL
Temps de rétention : pour le CBD : 6,2 min ; pour le CBN : 8,0 min ; pour le THC : 9,4 min ; pour le THC-A : 11,0 min
LOD : CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%.

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Le VialTweeter est un système ultrasonique unique permettant de sonifier simultanément jusqu'à 10 flacons dans les mêmes conditions, sans contamination croisée.

UP200St avec VialTweeter pour la sonication de flacons fermés

Vignette vidéo

La sonication est une étape importante de la préparation des échantillons

UP200St avec micro-pointe pour la sonication de l'échantillon



Littérature/références

Qu'il faut savoir

marijuana se compose des fleurs séchées et des feuilles et tiges de la plante femelle de Cannabis. C'est la forme la plus largement consommée et elle contient environ 3 % à 20 % de THC. Des formes spécifiques de marijuana, hautement sélectionnées, atteignent une teneur en THC de plus de 30 %. La marijuana est la matière première de toutes les autres variétés de produits de cannabis contenant du THC. Pour convertir le cannabinoïde le plus abondant, l'acide tétrahydrocannabinolique (THCA), en THC psychoactif, un processus de décarboylation doit être initié. Le cannabis et ses extraits doivent donc être chauffés ou déshydratés pour provoquer la décarboxylation.

Kief désigne une poudre riche en trichomes, obtenue par tamisage des feuilles et des fleurs de cannabis. Elle est consommée soit sous forme de poudre, soit comprimée et utilisée dans les gâteaux de haschisch.

haschisch ou hasch est un gâteau ou une boule de résine concentrée produite à partir de kief pressé ou de la résine grattée à la surface de la plante et roulée en boules. Il se présente sous différentes couleurs, du noir au brun doré, en fonction de sa pureté et de sa provenance. Il peut être consommé par voie orale ou fumé, par exemple dans une pipe, un narguilé, un bang, un bubbler, un vaporisateur, à l'aide d'un couteau chaud, fumé dans des joints, mélangé à des bourgeons de cannabis ou à du tabac, fumé en bottle tokes ou utilisé comme ingrédient dans la nourriture.

teinture de cannabis désigne l'extrait de cannabinoïdes dans l'alcool. Les cannabinoïdes sont extraits de la plante de cannabis à l'aide d'alcool à haut degré (principalement de l'alcool de grain) pour créer la teinture.

huile de haschisch est une matrice résineuse de cannabinoïdes produite par extraction au solvant, qui se présente sous la forme d'une masse durcie ou visqueuse. Le haschisch est l'un des produits du cannabis les plus puissants en raison de sa teneur élevée en composés psychoactifs. L'utilisation d'huile de haschisch extraite au butane et au dioxyde de carbone supercritique a récemment gagné en popularité.

Infusions font référence à différents types d'infusions de cannabis qui se distinguent les uns des autres par la grande variété de solvants non volatils qui peuvent être utilisés pour produire une infusion de cannabis. Pour préparer une telle infusion, la matière végétale du cannabis est mélangée à un solvant, puis pressée et filtrée pour transférer les huiles de la plante dans le solvant. Le beurre de cacao, le beurre laitier, l'huile de cuisson, la glycérine et les crèmes hydratantes pour la peau sont des solvants couramment utilisés.

marijuana médicale désigne l'utilisation de la plante de cannabis comme thérapie à base de plantes recommandée par les médecins, ainsi que le THC et les cannabinoïdes synthétiques. Cette utilisation nécessite généralement une prescription, et la distribution se fait habituellement dans un cadre défini par les lois locales. Plusieurs recherches ont montré que l'utilisation du cannabis ou de ses dérivés agit, par exemple, sur les nausées et les vomissements induits par la chimiothérapie, les douleurs neuropathiques et la sclérose en plaques.

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