الفا-Synuclein تکه تکه شدن با استفاده از VialTweeter Sonicator
فیبرها و روبان های α-synuclein در تحقیقات علمی برای تولید قطعه های فیبری کوچکتر یا حتی مولکول های پروتئین فردی تقسیم می شوند که می توانند با استفاده از تکنیک های مختلف تجربی تجزیه و تحلیل شوند. ویال گروهی Sonicator یکی از ultrasonicators رایج ترین استفاده می شود برای کارامد و قابل اعتماد الفا synuclein تکه تکه شدن است.
α-Synuclein در تحقیقات
فیبرهای الفا سینوکلین مجموع پروتئینی هستند که به شدت با اختلالات عصبی مانند بیماری پارکینسون و اشکال خاصی از زوال عقل، از جمله زوال عقل با بدن لوی مرتبط هستند. تحقیقات متمرکز بر فیبرهای الفا سینوکلین با هدف درک نقش انها در پیشرفت بیماری و توسعه مداخلات درمانی بالقوه است. با شکستن فیبرهای الفا سینوکلین به قطعات کوچکتر، محققان می توانند ویژگی های ساختاری خاص انها را بررسی کنند. به عنوان مثال، تکه تکه شدن فیبرهای الفا سینوکلین محققان را قادر می سازد تا تعاملات خود را با مولکول های دیگر مانند پروتئین ها، لیپیدها یا مولکول های کوچک بررسی کنند. با تولید قطعات کوچکتر، سایت های اتصال و وابستگی به این شرکای تعامل می تواند به طور موثر مورد بررسی قرار گیرد. فریبریل ها و روبان های کوچکتر α-Syn نیز ممکن است سمیت و اثرات بیوشیمیایی تغییر یافته را نشان دهند. بنابراین، یک تکنیک تکه تکه شدن قابل اعتماد و کارامد، که نتایج تجدید پذیر را در یک درمان نمونه سریع و ساده تولید می کند، بسیار مهم است.
التراسونیک الفا-Syn تکه تکه شدن: Sonicator VialTweeter سیستم امادگی نمونه اولتراسونیک است که sonicates تا 10 ویال به طور همزمان تحت شرایط دقیقا همان است. تنظیمات قابل برنامه ریزی اجازه می دهد تا برای اجرای مجدد ساده و سریع ازمایش های مشابه، که نتایج بسیار قابل اعتماد و تجدید پذیر در تکه تکه شدن فیبر الفا سینوکلین می دهد.
VialTweeter sonicator (ویال گروهی) برای تکه تکه شدن مافوق صوت به طور همزمان از چند نمونه الفا سینوکلین.
α-Synuclein اماده سازی نمونه با Sonicator
یک رویکرد برای مطالعه فیبرهای الفا سینوکلین شامل استخراج و تکه تکه شدن انها با استفاده از تکنیک هایی مانند فراصوت است. روش فراصوت فرایندی است که از امواج اولتراسوند با شدت بالا و فرکانس پایین برای مختل کردن و شکستن تجمع پروتئین استفاده می کند و منجر به انتشار فیبرهای کوچکتر یا مولکول های پروتئین فردی می شود. ویال گروهی sonicator یک دستگاه معمولا مورد استفاده در مطالعات تحقیقاتی مربوط به α-synuclein برای این منظور است.
مطالعات تحقیقاتی متعدد توصیف پروتکل های اماده سازی نمونه دقیق از فراصوت فیبرهای الفا سینوکلین، که با استفاده از Hielscher VialTweeter برای کارامد و قابل اعتماد α-synuclein فیبر تکه تکه شدن. با تکه تکه شدن فیبرها به صورت اولتراسونیک، محققان می توانند محصولات حاصل را تجزیه و تحلیل کنند و ساختار، سمیت و تعامل انها با مولکول های دیگر را بررسی کنند. این تحقیق بینش های مهمی را در مورد مکانیسم های اساسی تخریب عصبی فراهم می کند و به طور بالقوه اهداف درمانی جدید را شناسایی می کند. پروتکل فراصوت α-synuclein به خوبی تاسیس با استفاده از Sonicator VialTweeter اجازه می دهد برای نتایج قابل اعتماد و تجدید پذیر است.
تصاویر بالا: فیبرهای الفا سینوکلین unfragmented
تصاویر پایین تر: فیبرهای الفا سینوکلین التراسونیک تکه تکه با ویال گروهی sonicator
(مطالعه و تصاویر: ©Dieriks و همکاران، 2022)
تکه تکه شدن التراسونیک از فیبرهای α-Synuclein – پروتکل
از انجا که محققان متعدد از Sonicator VialTweeter به عنوان تکنیک تکه تکه شدن ترجیح داده شده برای تولید قطعات فیبر α-synuclein استفاده می کنند، پروتکل های تاسیس شده به راحتی در دسترس هستند. در زیر می توانید چند پروتکل تکه تکه شدن نمونه را پیدا کنید.
اماده سازی دانه ClearTau: فیبرهای ClearTau به 10 میکرومولار در dH2O رقیق شد و در دامنه 70٪ برای 50 s با 1 S ON 1 S OFF چرخه در لوله با استفاده از SONICATOR UP200St با VialTweeter فراصوت داده شد. دانه ها با میکروسکوپ الکترونی مشخص شدند.
اندازه گیری فلورسانس ThS: فیبرهای ClearTau به 2.5 میکرومولار در dH2O رقیق شد و در دامنه 70٪ برای 50 s با 1 s ON 1 s OFF چرخه در لوله با استفاده از UP200St با VialTweeter فراصوت داده شد. مونومر Tau 4R2N با طول 5/2 میکرومولار به عنوان شاهد مورد استفاده قرار گرفت. به واکنش 100 میکرو لیتر، 100 میکرول ThS (10 میکرومتر) اضافه شد و غلظت نهایی پروتئین 25/1 میکرومولار بود. فلورسانس تک زمانی ThS با استفاده از 96 صفحه پایینی به خوبی شفاف در میکروپلیت ریدر FLUOstar Omega با تحریک 445 نانومتر و انتشار در nm 485 ثبت شد.
(cf. Limorenko و همکاران، 2023)
طول یکنواخت α-synuclein با استفاده از فراصوت: ناهمگنی طول فیبرهای α-syn و روبان توسط فراصوت به مدت 20 دقیقه بر روی یخ در لوله های اپندورف 2 میلی لیتر در یک مجموعه VialTweeter در دامنه 75٪، پالس 0.5 s کاهش یافت.
(cf. Bousset et al.، 2013)
کنترل کیفیت WT مونومریک نوترکیب انسان یا S129A a-Syn و پلی مورفی فیبریلاری که انها تولید می کنند و همچنین a-Syn 1−110 انجام شد. پس از ان، polymorphs فیبریلار توسط فراصوت به مدت 20 دقیقه در لوله های اپندورف 2 میلی لیتر در Ultrasonicator VialTweeter برای تولید ذرات فیبریلار با اندازه متوسط 42−52 نانومتر که مناسب برای اندوسیتوز هستند، تکه تکه شدند.
(cf. Shrivastava و همکاران، 2020)
توصیف پنج فیبریلار α-Syn polymorphs. (A) میکروگراف های الکترونی انتقال رنگ امیزی شده منفی α-Syn فیبریل فیبریل فیبریل، روبان، فیبر-91، فیبریل-65 و فیبریل-110 قبل از (خط بالا) و پس از تکه تکه شدن با VialTweeter (خط پایین) نشان داده شده است. (ب) توزیع طول چندمورف فیبریلار تکه تکه شده نشان داده شده است. تعداد (n) مجموعه های فیبریلار که هیستوگرام ها از ان مشتق شده اند نشان داده شده است.
(مطالعه و تصاویر: Shrivastava و همکاران، 2020)
فیبرهای α-Syn توسط فراصوت به مدت 20 دقیقه در لوله های اپندورف 2 میلی لیتر در یک VialTweeter برای تولید ذرات فیبریلار با اندازه متوسط 42−52 نانومتر که توسط تجزیه و تحلیل TEM ارزیابی شده است، تکه تکه شدند.
(cf. نگرینی و همکاران، 2022)
فیبرهای resuspended91 (در PBS) قبل از علاوه بر این به کشت سلولی توسط فراصوت به مدت 20 دقیقه در لوله های 2 میلی لیتر Eppendorf با استفاده از Sonicator Vial Tweeter، aliquoted، فلش یخ زده در نیتروژن مایع و ذخیره شده تا زمانی که استفاده در -80 ̊ C.
(cf. Vajhøj et al.، 2021)
Sonicator UIP400MTP برای تکه تکه شدن فیبر الفا سینوکلین در صفحات چند چاه.
VialTweeter و Sonicators ازمایشگاه برای α-Syn Fragmentation
Hielscher فرا صوت در سراسر جهان به عنوان تولید کننده پیشرو از ultrasonicators برش لبه شناخته شده است. مورد اعتماد و تاسیس در ازمایشگاه های تحقیقاتی بزرگ در سراسر جهان، ultrasonicators ما ارائه کیفیت بی نظیر و عملکرد برای ازمایش های انتقادی خود را.
با Hielscher VialTweeter و هر sonicator Hielscher دیگر، شما راحتی کاربر بی نظیر را تجربه، به عنوان انها متفکرانه برای نتایج تجدید پذیر، سهولت استفاده و عملیات بدون درز مهندسی. با ویژگی های ضبط داده های خودکار، شما می توانید در تحقیقات خود تمرکز در حالی که ultrasonicators ما با دقت ضبط داده های مهم برای تکرارپذیری و دقت.
دستیابی به نتایج سازگار و تجدید پذیر با اعتماد به نفس!
ultrasonicators ما مهندسی و تولید در المان است. دقت المانی و بالاترین کیفیت مهندسی برای اطمینان از اماده سازی نمونه قابل اعتماد و دقیق مانند تکه تکه شدن فیبر الفا سینوکلین در هر زمان. دیگر نگران نتایج متناقض نباشید - تکنولوژی سونوگرافی ما تضمین می کند که تحقیقات شما در خط مقدم پیشرفت علمی باقی می ماند.
اما این همه نیست! تعهد ما به برتری فراتر از محصولات ما است. ما افتخار در خدمات به مشتریان استثنایی ما، ارائه پشتیبانی متخصص برای رسیدگی به هر گونه نمایش داده شد و یا نگرانی های شما ممکن است. تیم اختصاص داده شده ما در اینجا برای کمک به شما در هر مرحله از سفر تحقیقاتی خود را، اطمینان حاصل شود که شما بیشتر از ultrasonicators ما.
نواوری، قابلیت اطمینان و تجربه کاربر استثنایی را انتخاب کنید - sonicators ازمایشگاه ما مانند VialTweeter برای تکه تکه شدن فیبر الفا سینوکلین را انتخاب کنید. از پروتکل های قبلا تاسیس شده بهره مند شوید و به صفوف محققان برجسته ای بپیوندید که به فناوری ما برای مطالعات انتقادی خود اعتماد دارند. بالا بردن تحقیقات خود را و کشف مرزهای جدید در تحقیقات بیماری های زوال عقل و نورودژنراتیو با ما دولت از هنر ultrasonicators.
- بازدهی بالا
- تکنولوژی دولت از هنر
- قابلیت اطمینان & نیرومندی
- قابلیت تکثیر
- قابل تنظیم، کنترل فرایند دقیق
- برای هر حجم
- نرم افزار هوشمند
- ویژگی های هوشمند (به عنوان مثال، قابل برنامه ریزی، پروتکل داده ها، کنترل از راه دور)
- آسان و ایمن برای کارکردن
- تعمیر و نگهداری کم
- CIP (تمیز در محل)
طراحی، ساخت و مشاوره – کیفیت ساخته شده در آلمان
Ultrasonicators Hielscher به خوبی برای بالاترین کیفیت و استانداردهای طراحی خود شناخته شده است. استحکام و عملیات آسان اجازه می دهد ادغام صاف از مافوق صوت ما را به امکانات صنعتی. شرایط خشن و محیط های خواستار به راحتی توسط Ultrasonicators Hielscher رسیدگی می شود.
Hielscher Ultrasonics یک شرکت گواهی ISO است و تاکید ویژه ای بر ultrasonicators با کارایی بالا با تکنولوژی پیشرفته و کاربر پسندی دارد. البته، sonicators Hielscher CE سازگار هستند و مطابق با الزامات UL، CSA و RoHs.
جدول زیر به شما می دهد نشانه ای از ظرفیت پردازش تقریبی ultrasonicators ازمایشگاه اندازه ما:
| دستگاه های توصیه شده | دسته ای دوره | نرخ جریان |
|---|---|---|
| UIP400MTP | چند چاه / صفحات میکروتیتر | خب |
| cuphorn التراسونیک | CupHorn برای ویال یا فنجان | خب |
| GDmini2 | راکتور میکرو جریان اولتراسونیک | خب |
| VialTweeter(ویال گروهی) | 00.5 به 1.5mL | خب |
| UP100H | 1 تا 500ML | 10 تا پوست 200ml / دقیقه |
| UP200Ht، UP400St | 10 به 2000mL | 20 تا 400ML / دقیقه |
تماس با ما! / از ما بپرسید!
The VialTweeter معمولا برای تکه تکه کردن فیبرهای الفا سینوکلین به عنوان مرحله اماده سازی نمونه قبل از تجزیه استفاده می شود
ادبیات/منابع
- Emil Dandanell Agerschou, Marie P. Schützmann, Nikolas Reppert, Michael M. Wördehoff, Hamed Shaykhalishahi, Alexander K. Buell, Wolfgang Hoyer (2021): β-Turn exchanges in the α-synuclein segment 44-TKEG-47 reveal high sequence fidelity requirements of amyloid fibril elongation. Biophysical Chemistry, Volume 269, 2021.
- Bousset, L., Pieri, L., Ruiz-Arlandis, G. et al. (2013): Structural and functional characterization of two alpha-synuclein strains. Nature Communications 4, 2575 (2013).
- Vajhøj, Charlott; Schmid, Benjamin; Alik, Ania; Melki, Ronald; Fog, Karina; Holst, Bjørn; Stummann, Tina (2021): Establishment of a human induced pluripotent stem cell neuronal model for identification of modulators of A53T α-synuclein levels and aggregation. PLOS ONE 16, 2021.
- Dieriks B.V.; Highet B.; Alik A.; Bellande T.; Stevenson T.J.; Low V.; Park T.I.; Correia J.; Schweder P.; Faull R.L.M.; Melki R.; Curtis M.A.; Dragunow M. (2022): Human pericytes degrade diverse α-synuclein aggregates. PLoS One, Nov 18;17(11), 2022.
- Amulya Nidhi Shrivastava, Luc Bousset, Marianne Renner, Virginie Redeker, Jimmy Savistchenko, Antoine Triller, Ronald Melki (2020): Differential Membrane Binding and Seeding of Distinct α-Synuclein Fibrillar Polymorphs. Biophysical Journal, Volume 118, Issue 6, 2020. 1301-1320.
- Negrini M, Tomasello G, Davidsson M, Fenyi A, Adant C, Hauser S, Espa E, Gubinelli F, Manfredsson FP, Melki R, Heuer A. (2022): Sequential or Simultaneous Injection of Preformed Fibrils and AAV Overexpression of Alpha-Synuclein Are Equipotent in Producing Relevant Pathology and Behavioral Deficits. Journal of Parkinsons Disease 12(4), 2022. 1133-1153.
- Limorenko G, Tatli M, Kolla R, Nazarov S, Weil MT, Schöndorf DC, Geist D, Reinhardt P, Ehrnhoefer DE, Stahlberg H, Gasparini L, Lashuel HA (2023): Fully co-factor-free ClearTau platform produces seeding-competent Tau fibrils for reconstructing pathological Tau aggregates. Nature Communications 4;14(1), July 2023.
Hielscher Ultrasonics تولید هموژنیزرهای مافوق صوت با کارایی بالا از ازمایشگاه ها تا اندازه صنعتی.