Ultrazvukové sladování a klíčení sladu
- Sladování je časově náročný proces: máčení a hydratace obilných zrn trvá dlouho a přináší většinou nerovnoměrné výsledky.
- Sonikací lze výrazně zlepšit rychlost, míru a výtěžek klíčení ječmene.
Výroba sladu
Slad / sladované obilí se široce používá k výrobě piva, whisky, sladových koktejlů, sladového octa a také jako potravinářská přísada. Během sladování se sušené obilí (např. ječmen) máčí ve vodě, aby se zahájilo klíčení. Během klíčení se uvolňují stávající enzymy, vznikají nové enzymy a buněčné stěny endospermu se rozrušují, aby se uvolnil jejich buněčný obsah a aby se část zásobních bílkovin rozložila na aminokyseliny. Po dosažení určitého stupně klíčení se proces klíčení zastaví sušením. Sladováním obilí se vytvářejí enzymy – konkrétně α-amyláza a β-amyláza – potřebné k přeměně škrobů v zrnu na cukry. Mezi různé druhy cukrů patří monosacharid glukóza, disacharid maltóza, trisacharid maltotrióza a vyšší cukry nazývané maltodextriny. Máčení a klíčení zrna je poměrně časově náročné, vezmeme-li v úvahu, že máčení trvá 1–2 dny a klíčení dalších 4–6 dní. Výroba sladu je proto časově náročná a nákladná.
Sladování zlepšené ultrazvukem
Řešení: sonikace
- Sonikace zlepšuje klíčivost a rychlost klíčení ječných zrn.
Účinky ultrazvuku:
- Rychlejší a lepší máčení
- Rychlejší klíčení
- Úplnější klíčení
- Aktivace enzymů
- Vyšší míra extrakce
- Vysoce kvalitní slad
Tyto účinky vyvolané ultrazvukem jsou způsobeny zvýšenou enzymatickou aktivitou a mikrotrhlinami, které vyvolává ultrazvuková kavitace na semeni. Ječné zrno dokáže za kratší dobu absorbovat více vody, což vede k výrazně zlepšené hydrataci semen. Rychlá hydratace a rovnoměrné klíčení jsou důležité pro dobrou kvalitu sladu, protože nevyklíčená semena jsou náchylná k poškození bakteriemi a plísněmi.
Sladování je složitý proces, na němž se podílí mnoho enzymů; mezi důležité patří α-amyláza, β-amyláza, α-glukosidáza a limitní dextrin. Během sladování prochází ječmen neúplným přirozeným procesem klíčení, který zahrnuje řadu enzymatických degradací endospermu ječného zrna. V důsledku této enzymatické degradace se buněčné stěny endospermu rozkládají a škrobová zrna se uvolňují z matrice endospermu, v níž jsou uložena. Ultrazvuk aktivuje enzymy a zvyšuje míru extrakce intracelulárního materiálu, např. škrobu, bílkovin. Molekuly arabinoxylanu mají ve zředěných roztocích polysacharidů tendenci tvořit makromolekulární agregáty. Sonikace pomáhá účinně redukovat agregáty polysacharidů. Degradací polysacharidu škrobu vznikají zkvasitelné sacharidy. Tyto sacharidy se ve fázi kvašení při výrobě piva přeměňují na alkohol.
Všechny tyto účinky ultrazvuku na biochemické procesy během sladování vedou ke kratší době klíčení a k vyšší míře klíčení / výtěžku. Zkrácení doby klíčení přináší významné obchodní výhody pro sladařský a pivovarský průmysl.
Yaldagard et al. (2008) prokázali, že ultrazvuk „má potenciál k využití v procesech sladování jako metoda ošetření semen ke zkrácení doby klíčení a zvýšení procenta celkového klíčení.“
Postup ultrazvukové předosevní stimulace semen ječmene
Semena ječmene Hordeum vulgare (obsah vlhkosti 9 %; skladována při pokojové teplotě 3 měsíce po sklizni)
Ultrazvukové zařízení UP200H (200W, 24kHz) vybavené sonotrodou S3 (radiální tvar, průměr 3mm, max. hloubka ponoru 90mm)
Protokol:
Špička sonotrody byla ponořena přibl. 9 mm do procesního roztoku tvořeného vodou a semeny ječmene. Všechny experimenty byly provedeny na vzorcích (10 g semen ječmene) dispergovaných v 80 mL vodovodní vody přímou sonikací (sondový systém) při příkonu 20, 60 a 100 %, s dodatečným mícháním nebo třepáním. To bylo použito, aby se zabránilo vzniku stojatých vln nebo oblastí bez pevné fáze a dosáhlo se rovnoměrného rozložení ultrazvukových vln. Ultrazvukové zařízení bylo nastaveno do pulzního režimu s řízením pracovního cyklu, aby se omezila tvorba volných radikálů. Cyklus byl pro všechny experimenty nastaven na 50 %. Roztok byl zpracováván při konstantní teplotě 30°C po dobu 5, 10 a 15 min. [Yaldagard et al. 2008]
Výsledky:
Ultrazvuková ošetření vedou k vyšší hydrataci a rychlejšímu klíčení v kratším čase.
Nejvyšší klíčivost semen (přibližně 100 %) byla zaznamenána při nastavení výkonu 100 %. U semen sonikovaných po dobu 5, 10 a 15 min při plném výkonu (nastavení výkonu zařízení 100 %) se míra klíčení zvýšila z ~93,3 % (nesonikovaná semena) na 97,2 %, 98 % a 99,4 %. Tyto výsledky lze přičíst mechanickým účinkům ultrazvukem vyvolané kavitace, která zvyšuje příjem vody buněčnými stěnami. Sonikace zlepšuje přenos hmoty a usnadňuje pronikání vody buněčnou stěnou do nitra buňky. Kolaps kavitačních bublin v blízkosti buněčných stěn narušuje strukturu buněk a díky ultrazvukovým kapalinovým tryskám umožňuje dobrý přenos hmoty.
Metoda výrazně zkrátila dobu potřebnou k zahájení klíčení semen. Kořenové vlásky se u ošetřených vzorků objevily rychleji a rostly hojněji ve srovnání s nesonikovanými semeny. Při použití ječmene ošetřeného výše uvedeným způsobem se doba klíčení zkrátila z obvyklých 7 dní na 4 až 5 dní (v závislosti na ultrazvukovém výkonu a době expozice). Dále se průměrná doba klíčení po 15 min zpracování snížila z 6,66 dne při nastavení výkonu 20 % na 4,04 dne při nastavení ultrazvukového výkonu 100 %. Analýza získaných dat ukazuje, že rozsah klíčení a průměrná doba klíčení byly během testu klíčení významně ovlivněny různými nastaveními ultrazvukového výkonu. Všechny experimenty vedly ke zvýšenému klíčení semen ječmene ve srovnání s nesonikovanou kontrolou (obr. 1). Maximální průměrná doba klíčení byla zaznamenána při nastavení výkonu 20 % a minimální průměrná doba klíčení při nastavení výkonu 100 % (obr. 2).
Je také prokázáno, že sonikace zlepšuje klíčení semen cizrny, pšenice, rajčat, papriky, mrkve, ředkvičky, kukuřice, rýže, vodního melounu, slunečnice a mnoha dalších plodin.
Ultrazvuková zařízení
Hielscher Ultrasonics dodává spolehlivé vysoce výkonné ultrazvukové přístroje pro laboratorní, stolní i průmyslové použití. Pro předseťovou úpravu (priming) semen a sladování v komerčním měřítku vám doporučujeme naše průmyslové ultrazvukové systémy, jako jsou UIP2000hdT (2kW), UIP4000hdT (4kW), UIP10000 (10kW) nebo UIP16000 (16kW). Naši nabídku produktů doplňují rozmanité reaktory s průtokovou celou a příslušenství. Všechny systémy Hielscher jsou mimořádně robustní a konstruované pro provoz 24/7.
Abyste mohli ultrazvukovou předseťovou úpravu semen a klíčení otestovat a optimalizovat, nabízíme vám možnost navštívit naši plně vybavenou ultrazvukovou procesní laboratoř a technické centrum!
Kontaktujte nás ještě dnes! Rádi s vámi probereme váš proces!
Kontaktujte nás! / Zeptejte se nás!
Literatura a reference
- Goussous, S. J.; Samarah, N. H.; Alqudah, A. M.; Othman, M. O. (2010): Zvýšení klíčivosti semen čtyř druhů plodin pomocí ultrazvukové techniky. Experimentální zemědělství, 46/02, 2010. 231-242.
- Nilsson, Frida (2009): Studium proteinového složení ječmene během procesu vaření piva pomocí SE-HPLC. Závěrečná práce na University of Kalmar, School of Pure and Applied Natural Sciences, Švédsko.
- Yaldagard, Maryam; Mortazavi, Seyed Ali; Tabatabaie, Farideh (2008): Aplikace ultrazvukových vln jako základní techniky pro urychlení a zvýšení klíčivosti semen ječmene: optimalizace metody pomocí Taguchiho přístupu. J. Inst. Brew. 114(1), 2008. 14-21.
- Yaldagard, Maryam; Mortazavi, Seyed Ali; Tabatabaie, Farideh (2007): Účinnost ultrazvukového ošetření na stimulaci klíčení semen ječmene a jeho aktivitu alfa-amylázy. Mezinárodní časopis biologického, biomolekulárního, zemědělského, potravinářského a biotechnologického inženýrství 1/10, 2007.
Fakta o ječmeni a sladu
Proces sladování
Při sladování obilné zrno klíčí; sladování zahrnuje tři kroky: máčení, klíčení a hvozdění. Během máčení se k zrnům přidává voda, která aktivuje enzymy. Konvenční máčení trvá 1–2 dny. Po 1–2 dnech dosáhnou ječná zrna obsahu vody 40–45 %. V tomto okamžiku se ječmen vyjme z máčecí vody a začíná klíčení.
Během klíčení se tvoří nebo aktivuje několik enzymů, které jsou později nezbytné v procesu rmutování. β-glukany jsou štěpeny endo-β-1,4-glukanázou a endo-β-1,3-glukanázou. Endo-β-1,4-glukanáza je přítomna již v ječmeni, ale endo-β-1,3-glukanáza je přítomna pouze ve sladu. Protože β-glukany tvoří gel, a mohou tak způsobovat problémy při filtraci, je ve sladu žádoucí vysoký obsah β-glukanázy a nízký obsah β-glukanu. Během klíčení klesá obsah škrobu a roste obsah cukrů, přičemž škrob je štěpen α-amylázou a β-amylázou. V ječmeni není α-amyláza přítomna; vzniká během klíčení, zatímco β-amyláza je přítomna již v ječmeni. Během klíčení se rozkládají také bílkoviny. Peptidázy rozkládají 35 – 40 % bílkovin na rozpustný materiál. Po 5 až 6 dnech je klíčení dokončeno a jeho životní procesy jsou inaktivovány hvozděním. Při hvozdění se voda odstraňuje průchodem horkého vzduchu sladem. Tím se zastaví klíčení a modifikace a místo toho vznikají Maillardovými reakcemi barevné a aromatické látky.
Enzymy v procesu sladování a vaření piva
Nejdůležitějšími enzymy pro hydrolýzu škrobu v ječmeni jsou enzymy α-amyláza a β-amyláza, které katalyzují hydrolýzu škrobu na cukry. Amyláza štěpí polysacharidy, konkrétně škrob, na maltózu. β-amyláza je před klíčením přítomna v neaktivní formě, zatímco α-amyláza a proteázy se objevují, jakmile klíčení začne. Protože α-amyláza může působit kdekoli na substrátu, působí obvykle rychleji než β-amyláza. β-amyláza katalyzuje hydrolýzu druhé α-1,4 glykosidové vazby, čímž odštěpuje najednou dvě glukózové jednotky / maltózu.
Jiné enzymy, například proteázy, štěpí bílkoviny v zrnu na formy, které mohou využít kvasinky. V závislosti na tom, kdy je proces sladování zastaven, se získá preferovaný poměr škrobu / enzymů a škrob částečně přeměněný na zkvasitelné cukry. Slad obsahuje také malá množství dalších cukrů, jako je sacharóza a fruktóza, které nejsou produkty modifikace škrobu, ale byly v zrnu již předtím. Další přeměny na zkvasitelné cukry se dosahuje během rmutování.
Hydrolýza škrobu
Během enzymatické hydrolýzy katalyzují enzymy proces zcukření, což znamená, že sacharidy (škrob) se štěpí na molekuly cukrů, z nichž se skládají. Hydrolýzou se energetický zdroj (škrob) přeměňuje na cukry, které klíček spotřebovává pro svůj růst.
Bílkoviny v ječmeni
Ječmen má obsah bílkovin 8 až 15 %. Bílkoviny ječmene zásadně přispívají ke kvalitě sladu a piva. Rozpustné bílkoviny jsou důležité pro výdrž pěny a stabilitu piva.
Arabinoxylany a β-glukan v ječmeni
Arabinoxylany a β-glukan jsou rozpustnou vlákninou. Sladové extrakty mohou obsahovat vysoké množství arabinoxylanů, které mohou způsobovat potíže při filtraci, protože viskózní extrakty mohou výrazně zhoršit výkonnost pivovarských procesů. Při vaření piva může vysoký obsah β-glukanu v ječmeni vést k nedostatečné degradaci buněčných stěn, což následně brání difuzi enzymů, klíčení a mobilizaci zásob zrna, a tím snižuje extrakt sladu. Zbytkový β-glukan může také vést k vysoce viskózní mladině, což způsobuje problém s filtrací v pivovaru, a může se podílet na zrání piva a způsobovat chladový zákal. Arabinoxylany se nacházejí v buněčných stěnách ječmene, ovsa, pšenice, žita, kukuřice, rýže, čiroku a prosa. Extrahovatelnost arabinoxylanů i β-glukanu se sonikací výrazně zvyšuje.
Antioxidanty v ječmeni
Ječmen obsahuje více než 50 proanthokyanidinů, včetně oligomerního a polymerního flavan-3-olu, katechinu a gallokatechinu. Nejhojněji zastoupené v ječmeni jsou dimerní proanthokyanin B3 a prokyanidin B3.
Antioxidanty jsou známé svou schopností zpomalovat oxidační reakce a reakce kyslíkových volných radikálů nebo jim zabraňovat, což je činí důležitými v procesu sladování a vaření piva. Antioxidanty (např. siřičitany, formaldehyd, askorbát) se v procesu vaření piva používají jako přísady za účelem zlepšení stability chuti piva. Přibližně 80 % fenolických látek v pivu pochází z ječného sladu.



