Vynikající extrakty katechinů pomocí ultrazvuku
Ultrazvuková extrakce katechinů
Ultrazvuková extrakce je netepelná technika, která je založena na působení čistě mechanických sil. Nízkofrekvenční ultrazvukové vlny o vysoké intenzitě jsou přenášeny pomocí ultrazvukové sondy (sonotrody) do kapalného média. Intenzivní smykové síly akustické kavitace perforují a narušují buněčné membrány, zlepšují přenos hmoty mezi vnitřkem buňky a rozpouštědlem a uvolňují intracelulární sloučeniny do rozpouštědla.
Ve svém rozsáhlém přehledu metod extrakce ze zeleného čaje (Camellia sinensis) Banerjee a Chatterjee (2015) zjistili, že ultrazvukové přístroje sondového typu jsou výrazně účinnější než ultrazvukové lázně. Autoři dále uvádějí, že ultrazvuková extrakce je upřednostňovaným způsobem extrakce čajových katechinů díky zvýšené účinnosti extrakčního procesu při nižší teplotě, což zabraňuje tepelné degradaci tepelně citlivých sloučenin a zachovává jejich léčivou hodnotu. Extrakce za vysoké teploty často vede k degradaci polyfenolů a zvyšuje uvolňování bílkovin a pektinu, které narušují organoleptickou kvalitu čaje tvorbou čajového zákalu (tzv. tea cream). Výhoda sonikace spočívá v jejím netepelném mechanismu. Ve své studii výzkumníci prokázali, že ultrazvuková extrakce může zvýšit výtěžek čajových polyfenolů při 65°C ve srovnání s tradiční extrakcí při 85°C. Ultrazvuková extrakce však funguje i při pokojové teplotě. Jako netepelná extrakční technika využívají sonikátory mechanické síly k otevření buněk a k uvolnění bioaktivních sloučenin, jako jsou polyfenoly a katechiny, do rozpouštědla s vynikající účinností.
Ultrazvuková extrakce poskytuje vysoký výtěžek vysoce kvalitních živin. Jako netepelný proces zabraňuje ultrazvuková extrakce ztrátě tepelně citlivých živin.
Ultrazvukovou extrakci lze provádět také při pokojové teplotě nebo v chlazených kapalinách. Klikněte zde a přečtěte si více o čaji připravovaném ultrazvukem za studena (cold brew)!
- Bez rozpouštědel / na vodní bázi
- Vysoký výtěžek extrakce
- Vysoce kvalitní extrakty
- Extrakty s plným spektrem
- Rychlý proces
- Zelený, šetrný k životnímu prostředí
- Jednoduchý a bezpečný provoz
- Nízké nároky na údržbu
- Rychlá návratnost investice (RoI)
Ultrazvukový extraktor UIP2000hdT (2kW) s kontinuálně míchaným vsádkovým reaktorem
Případová studie ultrazvukové extrakce katechinů
Ultrazvukovou extrakci lze provádět s použitím různých rozpouštědel, včetně vody, ethanolu, směsi voda : ethanol, isopropanolu, rostlinného oleje, glycerinu atd.
Ve studii z roku 2018 porovnali Ayyildiz et al. ultrazvukovou extrakci s vodou a ethanolem jako rozpouštědly s konvenční metodou extrakce horkou vodou. Pro tuto studii v pilotním měřítku použili ultrazvukový přístroj Hielscher UIP2000hd (2kW, 20kHz) ve vsádkovém i v kontinuálním průtokovém uspořádání.
Výsledky ukázaly, že ultrazvuková extrakce ethanolem byla významně (p < 0,05) účinnější při získávání vyšších výtěžků EGCG, EGC, ECG a EC než konvenční extrakce horkou vodou a ultrazvuková extrakce na vodní bázi. Za optimalizovaných procesních podmínek bylo ultrazvukovou extrakcí ethanolem získáno téměř o 100 % a o 50 % vyšší obsah EGCG než konvenční extrakcí horkou vodou, resp. ultrazvukovou extrakcí vodou. Optimální podmínky pro ultrazvukovou extrakci EGCG ethanolem byly 66,53ºC, 43,75 min a 67,81% ethanol.
Ultrazvuková extrakce je upřednostňovaným způsobem extrakce čajových katechinů díky zvýšené účinnosti extrakčního procesu při nižší teplotě, přičemž je zachována jejich antioxidační aktivita.
Vysoce výkonné ultrazvukové extraktory
Extrakční systémy Hielscher Ultrasonics se celosvětově používají v potravinářství a farmacii pro komerční výrobu vysoce kvalitních rostlinných extraktů, které slouží jako doplňky stravy a léčiva. Ať už chcete vyrábět menší šarže čaje připravovaného za studena (cold brew), nebo zpracovávat velká množství vysoce kvalitních extraktů polyfenolů / katechinů, Hielscher Ultrasonics pro vás má vhodný ultrazvukový extraktor. Ultrazvukové přístroje se snadno a bezpečně obsluhují. Intuitivní software a digitální ovládání pomocí dotykového displeje umožňují přesné řízení procesu. Robustnost ultrazvukových zařízení Hielscher umožňuje provoz 24/7 při vysokém zatížení a v náročných prostředích.
Sonikátor sondového typu UP100H pro extrakci katechinů z čajových listů
Standardizace procesu s Hielscher Ultrasonics
Extrakty v potravinářské a farmaceutické kvalitě by měly být vyráběny v souladu se správnou výrobní praxí (GMP) a podle standardizovaných specifikací zpracování. Digitální extrakční systémy Hielscher Ultrasonics jsou vybaveny inteligentním softwarem, který usnadňuje přesné nastavení a řízení procesu sonikace. Automatický záznam dat zapisuje všechny parametry ultrazvukového procesu, jako je ultrazvuková energie (celková a čistá energie), amplituda, teplota a tlak (jsou-li namontovány teplotní a tlakové senzory), s datem a časovým razítkem na vestavěnou SD kartu. To vám umožňuje revidovat každou ultrazvukem zpracovanou šarži. Zároveň je zajištěna reprodukovatelnost a trvale vysoká kvalita produktu.
Níže uvedená tabulka vám poskytuje orientační přehled o přibližné zpracovatelské kapacitě našich ultrazvukových přístrojů:
| Objem vsádky | Průtok | Doporučená zařízení |
|---|---|---|
| 1 až 500mL | 10 až 200mL/min | UP100H |
| 10 až 2000mL | 20 až 400mL/min | UP200Ht, UP400St |
| 0,1 až 20L | 0,2 až 4L/min | UIP2000hdT |
| 10 až 100L | 2 až 10L/min | UIP4000hdT |
| n.a. | 10 až 100L/min | UIP16000 |
| n.a. | větší | klastr UIP16000 |
Kontaktujte nás! / Zeptejte se nás!
Vysoce výkonné ultrazvukové homogenizátory od laboratorního přes pilotní až po průmyslové měřítko.
Literatura/odkazy
- Ayyildiz, Sena Saklar; Karadeniz, Bulent; Sagcanb, Nihan; Bahara, Banu; Us, Ahmet Abdullah; Alasalvar, Cesarettin (2018): Optimizing the extraction parameters of epigallocatechin gallate using conventional hot water and ultrasound assisted methods from green tea. Food and Bioproducts Processing 111 (2018). 37–44.
- Banerjee, S., Chatterjee, J. (2015): Efficient extraction strategies of tea (Camellia sinensis) biomolecules. J. Food Sci. Technol. 52, 2015. 3158–3168.
- Martín-García Beatriz; Pasini, Federica; Verardo, Vito; Díaz-de-Cerio, Elixabet; Tylewicz, Urszula; Gómez-Caravaca, Ana María; Caboni Maria Fiorenza (2019): Optimization of Sonotrode Ultrasonic-Assisted Extraction of Proanthocyanidins from Brewers’ Spent Grains. Antioxidants 2019, 8, 282.
- Petigny L., Périno-Issartier S., Wajsman J., Chemat F. (2013): Batch and Continuous Ultrasound Assisted Extraction of Boldo Leaves (Peumus boldus Mol.). International journal of Molecular Science 14, 2013. 5750-5764.
- K.S. Suslick, K. Othmer, „Encyclopaedia of Chemical Technology“; 4. vyd. J. Wiley & Sons: New York, 1998, sv. 26, s. 517-541.
Fakta, která stojí za to znát
Ultrazvuková extrakce – princip fungování
Ultrazvuková extrakce je mechanická metoda k uvolnění a izolaci intracelulárních sloučenin z buněčných matric, jako jsou rostlinné buňky. Když jsou vysoce výkonné ultrazvukové vlny přenášeny do suspenze (např. tvořené macerovanými rostlinnými částicemi ve vodě nebo rozpouštědle), vysoce energetické ultrazvukové vlny vytvářejí kavitaci. Jev kavitace vede lokálně k extrémním teplotám, tlakům, rychlostem ohřevu/ochlazování, tlakovým rozdílům a vysokým smykovým silám v médiu. Když kavitační bubliny implodují na povrchu pevných látek (jako jsou částice, rostlinné buňky, tkáně atd.), mikroproudy a srážky mezi částicemi vyvolávají efekty, jako je odlupování povrchu, eroze a rozpad částic. Imploze kavitačních bublin v kapalných médiích navíc vytváří makroturbulence a mikromísení.
Ultrazvukové ozařování představuje účinný způsob, jak zlepšit procesy přenosu hmoty, protože sonikace vede ke kavitaci a s ní souvisejícím mechanismům, jako je mikropohyb způsobený kapalinovými proudy, komprese a dekomprese v materiálu s následným narušením buněčných stěn, a také k vysokým rychlostem ohřevu a ochlazování.
Ultrazvuková extrakce z rostlinných buněk: mikroskopický příčný řez (TS) ukazuje mechanismus působení během ultrazvukové extrakce z buněk (zvětšení 2000x) [zdroj: Vilkhu et al. 2011]
Sonikace rostlinného materiálu fragmentuje matrici rostlinných buněk a zlepšuje její hydrataci. Chemat et al. (2015) dospěli k závěru, že ultrazvuková extrakce bioaktivních sloučenin z rostlinných materiálů je výsledkem různých nezávislých nebo kombinovaných mechanismů včetně fragmentace, eroze, kapilarity, detexturace a sonoporace. Tyto účinky narušují buněčnou stěnu, zlepšují přenos hmoty tím, že vtlačují rozpouštědlo do buňky a odsávají rozpouštědlo nasycené fytosloučeninami ven, a zajišťují pohyb kapaliny mikromísením.
Jaké jsou hlavní výhody ultrazvukové extrakce?
- Rychlý proces a vysoký výstup
- Nízká spotřeba energie
- Snížené náklady na zpracování
- Netepelná technologie
- Vyšší čistota
- Zelená technologie
Akustická kavitace a její účinky
V kapalině vytvářejí ultrazvukové vlny intenzivní střídající se cykly vysokého / nízkého tlaku, které vedou ke vzniku kavitačních bublin. V průběhu několika tlakových cyklů kavitační bubliny rostou, dokud nedosáhnou meze, kdy bublina již nemůže absorbovat více energie. V tomto okamžiku bublina prudce imploduje. Během imploze bubliny vznikají extrémní podmínky, jako jsou vysoké teploty až 5000K, tlaky až 2000atm, velmi vysoké rychlosti ohřevu/ochlazování a tlakové rozdíly. Protože dynamika kolapsu bubliny je rychlejší než přenos hmoty a tepla, energie v kolabující dutině je soustředěna do velmi malé zóny, nazývané také „hot spot“. Imploze kavitační bubliny má za následek také mikroturbulence, kapalinové proudy o rychlosti až 280m/s a z nich vyplývající smykové síly. Tento jev je známý jako ultrazvuková neboli akustická kavitace.
Katechiny
Zelený čaj je známý tím, že je bohatý na polyfenoly, jako jsou kyselina kávová, kyselina gallová, katechin, epikatechin, galokatechin, katechin-galát, galokatechin-galát, epikatechin-galát, epigalokatechin a epigalokatechin-galát (EGCG), díky čemuž je zelený čaj oblíbenou zdravou potravinou konzumovanou jako nápoj i jako extrakt. EGCG je známý katechin, který je ve vysokém množství přítomen v sušených listech zeleného čaje (7380 mg na 100 g), bílého čaje (4245 mg na 100 g) a v menším množství v černém čaji (936 mg na 100 g). Při výrobě černého čaje se katechiny působením polyfenoloxidáz převážně přeměňují na theaflaviny a thearubiginy.
Zdravotní přínosy epigalokatechin-galátu (EGCG)
Ze skupiny katechinů je epigalokatechin-galát (EGCG) nejvíce zkoumaný a nejslibnější. Od protirakovinných, antioxidačních, protizánětlivých, antifibrotických a antikolagenázových účinků až po posílení imunitního systému a účinky proti stárnutí vykazuje EGCG mnoho přínosů, a proto se konzumuje ve formě nápoje ze zeleného čaje i ve formě doplňků stravy, jako jsou kapsle, prášky, tablety atd.
Výzkumné studie naznačují, že katechiny jako epigalokatechin-galát (EGCG) by mohly snižovat zánět a mohou předcházet určitým chronickým onemocněním, jako jsou srdeční choroby, diabetes a některé formy rakoviny.
EGCG a jeho protirakovinné účinky
Protože rakovina je často život ohrožující onemocnění, protirakovinné vlastnosti EGCG jsou předmětem intenzivního výzkumu. Studie naznačují, že EGCG může inhibovat tumorigenezi snížením nebo eliminací účinků karcinogenů. Existují zjištění naznačující, že EGCG předchází diethylnitrosaminem indukované tumorigenezi jater související s obezitou, a to inhibicí osy IGF/IGF-1R, zlepšením hyperinzulinemie a zmírněním chronického zánětu. Dalším mechanismem protirakovinného účinku EGCG je inhibice angiogeneze, a tím omezení proliferace nádoru.
EGCG a jeho antioxidační účinky
V lidském těle probíhá nespočet antioxidačních procesů, které přispívají ke zdraví, síle a pohodě. EGCG je antioxidant. Antioxidanty mohou chránit před poškozením buněk tím, že vychytávají volné radikály a neutralizují je. Fenolová jádra ve struktuře EGCG působí jako elektronové pasti a lapače volných radikálů, inhibují tvorbu reaktivních forem kyslíku, a tím snižují poškození způsobená oxidačním stresem.
EGCG a jeho protizánětlivé účinky
Zánět může být způsoben nemocí, chronickým stresem a znečištěním životního prostředí. Tělo reaguje na takové stresové faktory zánětem, který je charakterizován agregací velkého počtu imunitních buněk v místech zánětu, uvolňováním prozánětlivých cytokinů a reaktivních forem kyslíku/dusíku (ROS/RNS). ROS/RNS souvisejí s aktivací transkripčního faktoru NF-B a aktivátorového proteinu-(AP-)1. Po aktivaci se NF-jB a AP-1 přesouvají z cytoplazmy do jádra a zvyšují expresi různých zánětlivých genů, což následně způsobuje zesílenou zánětlivou odpověď a poškození tkání.
EGCG inhibuje přenos NF-B a AP-1, takže exprese iNOS a COX-2 je snížena, a to hlavně vychytáváním oxidu dusnatého, peroxynitritu a dalších ROS/RNS, a produkce zánětlivých faktorů je snížena.
EGCG a jeho účinky na podporu osteogeneze
Osteoporóza je závažné onemocnění charakterizované degenerací kostní matrix a úbytkem kostní hustoty. EGCG vykazuje regulační účinky na kostní metabolismus. EGCG může indukovat apoptózu osteoklastů a inhibovat tvorbu osteoklastů blokováním tvorby NF-B a IL-1b. Kromě toho může podporovat tvorbu mineralizovaných kostních uzlíků.
[srov. Chenyu Chu; Jia Deng; Yi Man; Yili Qu (2017): Green Tea Extracts Epigallocatechin-3-gallate for Different Treatments. BioMed Research International Vol. 2017]
