Ултразвукова екстракция на колаген
- Колагенът е богат на протеини и се използва широко в разнообразни промишлени приложения, например в хранителната и фармацевтичната промишленост, за добавки и др.
- Ултразвуковата обработка може лесно да се комбинира с ензимна или киселинна екстракция на колаген.
- Внедряването на ултразвук в процеса на екстракция на колаген води до по-високи добиви и по-бърза екстракция.
Влияние на ултразвука върху екстракцията на колаген
Ултразвукът с висок интензитет се използва широко за подобряване на масообмена в процеси в течна среда, например екстракция, сонохимия и др. Екстракцията на колаген (известна също като изолиране на колаген) може да бъде значително подобрена чрез ултразвукова обработка. Ултразвуковата обработка подпомага разцепването на колагеновия субстрат и разхлабва структурата на колагеновите фибрили, като по този начин улеснява ензимната хидролиза или киселинната обработка.
Ензимна екстракция, подпомагана от ултразвук
Ултразвуковата обработка е известна със способността си да повишава ензимната активност. Този ефект се основава на ултразвуковото диспергиране и деагломерацията на пепсиновите агрегати. Хомогенно диспергираните ензими осигуряват по-голяма повърхност за масообмен, което е свързано с по-висока ензимна активност. Освен това мощните ултразвукови вълни разхлабват структурата на колагеновите фибрили, така че колагенът се освобождава.
Ултразвукова екстракция с пепсин: Пепсинът, комбиниран с ултразвукова обработка, увеличава добива на колаген до приблизително 124% и значително съкращава времето за екстракция в сравнение с конвенционалната пепсинова хидролиза. Анализът чрез кръгов дихроизъм, атомно-силовата микроскопия и FTIR доказаха, че тройноспиралната структура на извлечения колаген не е повлияна от ултразвуковата обработка и е останала непокътната. (Li et al. 2009) Това прави подпомаганата от ултразвук екстракция с пепсин изключително практична за хранителната промишленост, като осигурява по-висока степен на извличане на протеини за значително по-кратко време на обработка.
В сравнително изследване на екстракцията на колаген от говеждо сухожилие със и без ултразвук ултразвуковата обработка (20kHz, импулсен режим 20/20 sec.) показа убедително по-висок добив и ефективност. Конвенционалната екстракция е извършена с пепсин в оцетна киселина в продължение на 48 часа. Ултразвуковата екстракция е извършена при същите условия, но продължителността на ултразвуковата обработка (от 3 до 24 h) и на обработката с пепсин (от 24 до 45 часа) е варирана, при обща продължителност на обработката от 48 часа. Екстракцията с ултразвук и пепсин показа по-висока ефективност на извличане на колаген, като достигна добив от 6,2%, докато добивът при конвенционалната екстракция беше 2,4%. Най-добрите резултати са постигнати при продължителност на ултразвуковата екстракция от 18 h. Извлеченият колаген показа неповредена непрекъсната спирална структура, добра разтворимост и сравнително висока термична стабилност. Това означава, че екстракцията с ултразвук и пепсин е подобрила ефективността на извличане на естествен колаген, без да влошава качеството на получения колаген. (Ran and Wang 2014)
Киселинна екстракция, подпомагана от ултразвук
В изследване на Kim et al. (2012) екстракцията на киселинноразтворим колаген от кожата на японски лаврак (Lateolabrax japonicus) показа повишен добив и съкратено време за екстракция след ултразвукова обработка при честота 20 kHz в 0,5 M оцетна киселина. Екстракцията с ултразвук не промени основните компоненти на колагена, по-конкретно веригите α1, α2 и β.
Ултразвукова екстракция на протеини от яйчени черупки
Предварително обработените с ултразвук ензимни хидролизати имаха по-добри функционални свойства. При ултразвуковата екстракция на функционални протеинови хидролизати от черупки на кокоши яйца се подобряват разтворимостта, емулгиращите, пенообразуващите и водозадържащите свойства.
Мембраната на яйчената черупка е изобилен природен ресурс и се състои от около 64 протеина, включително колаген тип I, V и X, лизозим, остеопонтин и сиалопротеин. Това прави яйчените черупки интересна суровина за екстракция на протеини. Чрез ултразвукова екстракция освобождаването и функционалността на протеините могат да бъдат значително подобрени, което води до бърз, ефективен и икономичен процес.
Ултразвукови процеси: от лабораторен до промишлен мащаб
Алкална екстракция, подпомагана от ултразвук
за извличане и солюбилизиране на тези протеини
При екстракцията на протеини от мембраната на яйчената черупка ултразвуковата алкална обработка доведе до добив на солюбилизирани протеини, близък до 100% от общото протеиново съдържание на мембраната на яйчената черупка. Ултразвуковата кавитация отдели по-големи протеинови струпвания от мембраната на яйчената черупка и улесни солюбилизирането на нейните съставки. Структурата и свойствата на протеините не бяха увредени от ултразвуковата обработка и останаха непокътнати. Антиоксидантните свойства на протеините бяха еднакви при подпомаганата от ултразвук алкална обработка и при конвенционалната екстракция.
Ултразвукова екстракция на желатин
Замразени и изсушени на въздух кожи от минтай бяха обработени със студени солеви, алкални и киселинни разтвори за отделяне на колагеновата тъкан и извличане на желатин чрез денатурация на колагена при 45°C в продължение на четири часа, като обработката с мощен ултразвук беше използвана като помощно средство в процеса. Бяха оценени добивът на желатин, pH, прозрачността, здравината на гела и вискоеластичните свойства, както и разпределението на молекулната маса, определено чрез метода PAGE-SDS. Като контрола беше използван желатин, извлечен във водна баня при 45°C в продължение на четири часа. Обработката с мощен ултразвук увеличи добива при екстракцията с 11,1% в сравнение с контролата, докато здравината на гела намаля със 7%. Температурата на желиране също беше по-ниска при извлечения с ултразвук желатин (4,2°C). Това поведение е свързано с разлики в разпределението на молекулната маса на полипептидните кълба в желатините. Екстракцията с мощен ултразвук може да се използва за увеличаване на извличането на желатин от замразени и изсушени на въздух рибни кожи. (Olson et al. 2005)
Промишлени ултразвукови системи
Hielscher Ultrasonics доставя мощни ултразвукови системи за лабораторен, настолен и промишлен мащаб. За осигуряване на оптимални резултати от екстракцията може да се извършва непрекъсната и надеждна ултразвукова обработка при тежки условия. Всички промишлени ултразвукови процесори могат да осигуряват много високи амплитуди. Амплитуди до 200µm могат лесно да се поддържат непрекъснато при работа в режим 24/7. За още по-високи амплитуди се предлагат ултразвукови сонотроди, изработени по поръчка. Здравината на ултразвуковото оборудване на Hielscher позволява работа в режим 24/7 при голямо натоварване и в тежки среди.
Свържете се с нас още днес и ни представете изискванията към Вашия процес! С удоволствие ще Ви препоръчаме подходяща ултразвукова система за него!
Мощните ултразвукови хомогенизатори на Hielscher се предлагат за всеки мащаб на процеса – от лабораторен до производствен.
Литература/Източници
- Álvarez, Carlos; Lélu, Pauline; Lynch, Sarah A.; Tiwari, Brijesh K. (2018): Оптимизирано извличане на протеини от цели риби скумрия чрез последователна киселинна/алкална екстракция с изоелектрично солюбилизиране и утаяване (ISP), подпомагана от ултразвук. LWT – Food Science and Technology, том 88, February 2018. 210–216.
- Jain, Surangna; Kumar Anal, Anil (2016): Оптимизиране на екстракцията на функционални протеинови хидролизати от мембраната на черупки на кокоши яйца (ESM) чрез подпомагана от ултразвук екстракция (UAE) и ензимна хидролиза. LWT – Food Science and Technology, том 69, June 2016. 295–302.
- Kim, H.K.; Kim, Y.H.; Kim, Y.J.; Park, H.J.; Lee, N.H. (2012): Влияние на ултразвуковата обработка върху екстракцията на колаген от кожи на лаврака Lateolabrax japonicus. Fisheries Science, том 78, брой 78; 2013. 485–490.
- Li, Defu; Mu, Changdao; Cai, Sumei; Lin, Wei (2016): Ултразвуково облъчване при ензимната екстракция на колаген. Ultrasonics Sonochemistry, том 16, брой 5; 2009. 605–609.
- Olson, D.A., Avena Bustillos, R.D., Olsen, C.W., Chiou, B., Yee, E., Bower, C.K., Bechtel, P.J., Pan, Z., Mc Hugh, T.H. (2005): Оценка на мощния ултразвук като помощно средство в процеса на екстракция на рибен желатин. Резюме на доклад № 71C-26. Годишна среща на IFT. July 2005. Ню Орлиънс, LA.
- Ran, X.G.; Wang, L.Y. (2014): Съчетано използване на ултразвукова обработка и обработка с пепсин за екстракция на колаген от странични продукти на месната промишленост. Journal of the Science of Food and Agriculture 94(3), 2014. 585–590.
- Schmidt, M.M.; Dornelles, R.C.P.; Mello, R.O.; Kubota, E.H.; Mazutti, M.A.; Kempka, A.P.; Demiate, I.M. (2016): Процес на екстракция на колаген. International Food Research Journal 23(3), 2016. 913–922.
- Siritientong, Tippawan; Bonani, Walter; Motta, Antonella; Migliaresi, Claudio; Aramwit, Pornanong (2016): Влияние на щама на Bombyx mori, от който се получава коприната, и времето за екстракция върху молекулните и биологичните характеристики на серицина. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, том 80, брой 2, 2016. 241–249.
- Zeng, J.N.; Jiang, B.Q.; Xiao, Z.Q., Li, S.H. (2011): Екстракция на колаген от рибни люспи с папаин при предварителна ултразвукова обработка. Advanced Materials Research, том 366, 2011. 421–424.
Полезни факти
Колаген
Колагенът е основният структурен протеин в извънклетъчното пространство на различните съединителни тъкани в животинските организми. Като основен компонент на съединителната тъкан той е най-разпространеният протеин при бозайниците,[1] като съставлява от 25% до 35% от общото протеиново съдържание на организма. Колагенът се състои от аминокиселини, усукани заедно в тройни спирали, които образуват удължени фибрили. Най-големите количества колаген се намират във влакнести тъкани като сухожилия, връзки и кожа. Разграничават се три типа колаген:
Колаген тип I: осигурява 90% от протеините в кожата, косата, ноктите, органите, костите и връзките
Колаген тип II: осигурява 50–60% от протеините в хрущяла и 85–90% от колагена в ставния хрущял
Колаген тип III: осигурява протеини на влакнестия протеин в костите, хрущяла, дентина, сухожилията и други съединителни тъкани
Колагенът в организма
Всеки от трите типа колаген е съставен от различни протеини, които изпълняват различни функции в организма. Колагенът тип I и тип III са основни компоненти на кожата, мускулите, костите, косата и ноктите. Те са необходими за тяхното здраве, растеж и възстановяване. Колагенът тип II се намира предимно в хрущяла и ставите.
Колагенът тип I и тип III съдържат по 19 аминокиселини, които се считат за незаменими аминокиселини. Те се произвеждат от фибробласти (клетки в съединителните тъкани) и остеобласти (клетки, които образуват кости). Най-важните протеини в колагена тип I и тип III включват глицин, пролин, аланин и хидроксипролин. Тип III е влакнест склеропротеин.
Глицинът е аминокиселината с най-голямо количество в колагена. Пролинът е заменима аминокиселина, която може да се синтезира от глицин и допринася за ставите и сухожилията. Хидроксипролинът е аминокиселина, която допринася за стабилността на колагена. Аланинът е аминокиселина, важна за биосинтеза на протеини.
Подобно на тип I и тип III, колагенът тип II образува фибрили. Тази фибриларна мрежа от колаген е важна в хрущяла, тъй като позволява задържането на протеогликани. Освен това тя осигурява якост на опън на тъканта.
Източници и приложения
Колагенът е влакнест протеин, който се среща в изобилие в съединителната тъкан на бозайници, например говеда и свине. По-голямата част от колагена се извлича
от свински кожи и кости и от източници с говежди произход. Алтернативни източници за екстракция на колаген са рибите и домашните птици. Колагенът се използва широко в храни, хранителни добавки, фармацевтични/медицински продукти и козметика, наред с други продукти. Екстракцията на колаген е развиващ се бизнес, тъй като този протеин може да замени синтетични агенти в различни промишлени процеси.