Липозоми чрез метод на обратно фазово изпаряване с помощта на соникация

Липозомите са универсални наноносители, използвани при доставяне на лекарства поради тяхната биосъвместимост и способност да капсулират както хидрофилни, така и хидрофобни лекарства. Методът на обратно фазово изпаряване (известен също като метод на емулгиране или метод на изпаряване с разтворител) е известна техника за приготвяне на липозоми, предлагаща висока ефективност на капсулиране. Тази статия се фокусира върху получаването на липозоми чрез метода на обратно фазово изпарение, подсилен чрез ултразвук тип сонда, подчертавайки процедурните стъпки, ползите и потенциалните приложения в системите за доставяне на лекарства.

Липозоми са везикулозни структури, състоящи се от един или повече липидни двуслоеве, способни да капсулират хидрофилни и хидрофобни съединения. Тяхната уникална структура ги прави идеални за целенасочено доставяне на лекарства. Методът на обратнофазово изпаряване (известен още като емулгиране или метод на изпаряване с разтворител) е утвърдена техника за приготвяне на липозоми. В следващите параграфи ви запознаваме с предимствата на метода на обратнофазно изпаряване с помощта на ултразвук тип сонда, за който е известно, че подобрява емулгирането, ефективността на капсулиране и намаляването на размера на липозома.

Методология на приготвяне на липозоми чрез метод на обратно фазово изпаряване

Образуването на липозоми чрез метода на обратно изпаряване с помощта на ултразвук включва разтваряне на липиди в смес от органичен разтворител от хлороформ и метанол (2:1 v/v), което благоприятства образуването на обърнати мицели. След това към тази смес се добавя воден буфер. Комбинираният разтвор се озвукова, например, с помощта на сондов тип ултразвук като UP400ST, за да се създаде микроемулсия вода в масло. След това органичният разтворител се изпарява с помощта на ротационен изпарител, което води до вискозен гел, който в крайна сметка се срутва, за да образува липозоми. Голямото водно ядро на микроемулсионните мехурчета насърчава улавянето на хидрофилни молекули, което води до липозомени гелове, които показват контролирано освобождаване и добър профил на проникване. И накрая, липозомите се намаляват до еднакъв размер с помощта на ултразвука.

Образуване на липозоми чрез метод на обратно изпаряване с помощта на соникация

Протокол / инструкции стъпка по стъпка:

1. Претеглете и разтворете липидите:
   Точно претеглете общо 40 mg L-α-фосфатидилхолин и холестерол в масово съотношение 4:1 или 7:3.
   Претеглените липиди се разтварят в 10 ml смес от хлороформ/метанол (4:1 v/v) в колба с кръгло дъно.
2. Форма на липиден филм:
   Прикрепете колбата с кръгло дъно към въртящ се изпарител.
   Завъртете колбата при 8 x g при 40°C при вакуумни условия, докато по стените на колбата се образува тънък липиден филм.
3. Отстранете изпаренията на разтворителя:
   Евакуирайте останалите изпарения от разтворителната смес, като промиете колбата с азотен газ.
4. Повторно разтваряне на липиден филм:
   Разтворете отново липидния филм в 10 ml диетилов етер, за да образувате везикули с обратна фаза.
5. Пригответе водна фаза:
   Смесват се 5 ml PBS буфер (0,1 M, рН 7,4), съдържащ активната съставка за капсулиране и 20 mg Tween 80 с органичната фаза (диетил етер с разтворени липиди).
6. Соникирайте емулсията:
   Поставете емулсията в ледена баня.
   Соникирайте емулсията с помощта на сонден ултразвук UP200Ht при 26 kHz и 50% импулсен режим (0,5 цикъла = 30 сек ВКЛ / 30 сек ИЗКЛ.) и 50% амплитуда за 1 минута.
7. Изпарете се, за да образувате гел:
   Върнете ултразвуковата емулсия във въртящия се изпарител.
   Изпарява се при атмосферно налягане при 40°C, докато се получи гел.
8. Образувайте липозоми:
   Допълнително изпарете гела, разбивайки го в полупрозрачна течност, което показва образуването на липозоми.
9. Окончателно спиране на липозома:
   Добавете още 5 ml PBS буфер (0,1 M, pH 7,4) към липозомната суспензия.
   Внимателно завихрете сместа.
   Евакуирайте останалите изпарения на диетилов етер с помощта на азотен газ.
10. Съхранение:
    Съхранявайте крайната липозомна суспензия при 4°C в хладилник до необходимост.

Тези инструкции очертават стъпка по стъпка процеса за приготвяне на липозоми с помощта на метода на обратнофазно изпаряване с ултразвукова хомогенизация, осигурявайки високо вътрешно водно натоварване и ефективно капсулиране на активната съставка.
Методът на обратнофазно изпаряване, особено с помощта на сонда, е широко възприета техника за приготвяне на липозоми, особено когато се стреми към високо вътрешно водно натоварване. Този метод е изгоден пред традиционния метод на тънкослойна хидратация поради способността му да включва по-голямо количество водна фаза в липозомите.

Предимства на сондната соникация за образуване на липозоми

• Подобрена хомогенност: Ултразвукът от тип сонда осигурява постоянен вход на енергия, което води до по-равномерно разпределение на размерите на липозоми.
• Подобрено капсулиране: Механичните сили по време на ултразвука подобряват капсулирането на лекарствата, особено за хидрофилни съединения.
• Мащабируемост: Методите са лесно мащабируеми, което ги прави подходящи за мащабно производство на липозоми.

Приложения на липозоми при доставяне на лекарства

Липозоми, приготвени чрез методи на емулгиране и изпаряване на разтворител със сондовидна ултразвук, са подходящи за различни приложения за доставяне на лекарства, включително:

1. Целенасочена доставка на лекарства: Функционализацията на липозоми със специфични лиганди позволява целенасочено доставяне до определени тъкани или клетки.
2. Контролирано освобождаване: Липидната двуслойна структура позволява контролирано освобождаване на лекарството, повишавайки терапевтичната ефикасност.
3. Гъвкавост: Тези методи обхващат широк спектър от терапевтични агенти, от малки молекули до по-големи биомолекули като протеини и нуклеинови киселини.

Методът на обратно фазово изпаряване е особено известен с по-високото си вътрешно водно натоварване в сравнение с метода на тънкослойна хидратация. Тази характеристика е полезна за приложения, изискващи значително капсулиране на хидрофилни лекарства или други терапевтични агенти.
Методът на обратнофазово изпаряване с помощта на сонда е стабилна и ефективна техника за приготвяне на липозоми. Способността му да постига по-високо вътрешно водно натоварване го прави предпочитан метод във фармацевтични приложения, където максимизирането на капсулирането на хидрофилни вещества е от решаващо значение. Внимателният контрол на изпаряването на разтворителя и използването на ултразвук са от ключово значение за успеха на този метод, което води до производството на висококачествени липозоми, подходящи за различни терапевтични цели.

Намерете правилния соникатор за производството на липозоми

Hielscher Ultrasonics предлага широка продуктова гама от сондови ултразвукораздвижители за ефективно производство на липозоми, което води до висока ефективност на улавяне и висока товароносимост на биоактивните молекули.
Можете да използвате ултразвукозатори на Hielscher за различни начини на приготвяне на липозоми, като описаната тук техника на обратно фазово изпаряване, метод на емулгиране и метод на тънък слой.
Прочетете повече за ултразвуковата липозома чрез тънкослойен метод!
Прочетете повече за капсулирането на ултразвуково подготвени липозоми

• Витамин
• DHA и EPA (рибено масло)
• алицин

Проектиране, производство и консултиране – Качество, произведено в Германия

Ултразвуковите апарати Hielscher са добре известни със своите най-високи стандарти за качество и дизайн. Здравината и лесната работа позволяват безпроблемното интегриране на нашите ултразвукови апарати в промишлени съоръжения. Тежките условия и взискателните условия се справят лесно с ултразвуковите апарати на Hielscher.

Hielscher Ultrasonics е сертифицирана по ISO компания и поставя специален акцент върху високопроизводителните ултразвукови уреди, отличаващи се с най-съвременна технология и удобство за потребителя. Разбира се, ултразвуковите апарати на Hielscher са съвместими с CE и отговарят на изискванията на UL, CSA и RoHs.

Таблицата по-долу ви дава представа за приблизителния капацитет на обработка на нашите ултразвукови апарати: