Буферни разтвори, приготвени с ултразвук
Лизис буферите могат да бъдат ефективно и бързо приготвени с помощта на ултразвукови хомогенизатори на тъкани. Тъй като ultrasonicators са мечта инструмент за смесване, разтваряне и диспергиране, те позволяват надеждна и лесна за употреба подготовка на лизис буфери.
Ултразвукова подготовка на Lysis буфери
Ултразвуковите хомогенизатори на тъкани са общ инструмент за разрушаване на клетките, лизис и екстракция, поради което се предлагат в повечето лаборатории. Вторично приложение за ултрасоникатори тип сонда е приготвянето на лизисни буфери.
Лизисният буфер е разтвор, използван за разбиване на отворени (лизни) клетки и освобождаване на съдържанието им за анализ надолу по веригата. Специфичният състав на лизисния буфер може да варира в зависимост от вида на клетките, които се лизират и приложението надолу по веригата. Въпреки това, типичният лизис буфер съдържа компоненти като детергенти, соли и протеазни инхибитори. Буферните соли (напр. Tris-HCl) и йонните соли (напр. NaCl) обикновено се използват за регулиране на pH и осмоларността на лизата.
За да се направи лизисен буфер, компонентите се смесват заедно в подходящи концентрации и рН. Сместа обикновено се разбърква или разклаща, докато компонентите се разтворят и разтворът стане хомогенен.
Ултразвукова хомогенизация е метод, който може да се използва, за да помогне да се направи добър лизис буфер чрез подобряване на смесването и разтварянето на компонентите. При този метод ултразвуковите вълни – обикновено в диапазона от 20 до 30 kHz – се прилагат към сместа, която създава кавитационни мехурчета, които се свиват и генерират интензивна локална енергия, което води до механично срязване и смесване на компонентите.
Процесът на ултразвукова хомогенизация може да помогне да се разпаднат всякакви бучки или агрегати на компонентите и да се гарантира, че разтворът е равномерно смесен. Следователно, такъв подобрен лизис буфер може да доведе до по-ефективно разрушаване на клетките и по-високи добиви на извлечения материал. Освен това, ултразвукова хомогенизация може да намали времето, необходимо да се направи лизис буфер в сравнение с традиционните методи за разбъркване или разклащане.
Като цяло, ултразвукова хомогенизация е мощен инструмент за подобряване на качеството и ефективността на лизис буфер подготовка.

Ултразвуковият лабораторен хомогенизатор UP200Ht е популярен в изследователските лаборатории за подготовка на проби, лизис, екстракция, фрагментация на ДНК и разтваряне.
Протокол за подготовка на ултразвуков лизис буфер
Това е общ протокол за вземане на лизис буфер с помощта на сонда тип ultrasonicator:
Материали:
- Детергент(и) по избор (напр. Triton X-100, SDS, CHAPS)
- Сол(и) по избор (напр. NaCl, KCl)
- Протеазни инхибитори (напр. PMSF, апротинин, левпептин)
- ултрасоникатор
- Бъркалка
- Дейонизирана вода
- рН метър или рН ленти
Инструкции стъпка по стъпка:
- Определете състава на лизис буфера въз основа на клетките или тъканта, които ще лизирате, и приложенията надолу по веригата, за които ще използвате лизата. Пригответе изходните разтвори на детергенти, соли и протеазни инхибитори при желаните концентрации.
- Добавят се изходните разтвори на детергенти, соли и протеазни инхибитори в бехерова чаша или колба.
- Добавете дейонизирана вода, за да доведете обема до желаното количество буфер.
- Смесете компонентите с помощта на бъркалка, за да получите предварително смесен разтвор.
- Измерва се рН на буфера с помощта на рН-метър или рН ленти и се регулира рН, ако е необходимо, с малки количества киселина или основа.
- Използвайте ултрасоникатор тип сонда, за да хомогенизирате предварителния разтвор, така че да се получи силно хомогенен разтвор. Ето защо, ултразвук разтвора за няколко секунди, докато разтворът се смесва добре и всички бучки или агрегати са разбити. Продължителността и силата на ултразвук могат да бъдат оптимизирани въз основа на специфичния лизис буфер и ultrasonicator използва.
- След ултразвук, повторно измерване на рН на буфера и коригира, ако е необходимо.
- Филтрирайте буфера през 0,2 микрона филтър, за да премахнете всички отломки или агрегати, които може да са се образували по време на ултразвук.
- Лизисният буфер вече е готов за употреба.
Забележка: Точният състав и рН на лизисния буфер могат да варират в зависимост от клетките или тъканите, които се лизират и приложенията надолу по веригата. Горният протокол е обща насока и може да се наложи да бъде оптимизиран за конкретни приложения.
Ултразвуковите хомогенизатори обикновено се използват за разрушаване на клетките и екстракция на вътреклетъчни молекули. Ето защо много приложения лизис използват сонда тип ултразвук не само за подготовката на лизис буфера, но също така и за механично разрушаване на клетките и екстракция.
Това прави ултразвуковите хомогенизатори на тъкани универсален инструмент за лаборатории и обяснява широкото използване на ултразвукови апарати в микробиологията, биотехнологиите и науката за живота.
ултразвукови лабораторни хомогенизатори
Hielscher Ultrasonics произвежда и доставя ултразвукови хомогенизатори и сонди (sonotrodes) при различни мощности и обеми на пробите. Това ни позволява да ви предложим най-подходящия ултразвуков разрушител за подготовката на вашата проба. Ние се фокусираме върху най-високо качество, изключителен комфорт на потребителя и надеждни резултати от ултразвук. Всички цифрови ultrasonicators разполагат с интелигентен софтуер, програмиране и предварителна настройка на протоколи за ултразвук, дистанционно управление на браузъра, контрол на температурата, осветление на пробата, както и автоматично записване на данни на вградена SD-карта.
Проектиране, производство и консултиране – Качество, произведено в Германия
Hielscher ultrasonicators са добре известни със своите най-високи стандарти за качество и дизайн. Здравината и лесната работа позволяват гладкото интегриране на нашите ultrasonicators в промишлени съоръжения. Груби условия и взискателни среди се обработват лесно от Hielscher ultrasonicators.
Hielscher Ultrasonics е сертифицирана по ISO компания и постави специален акцент върху високопроизводителни ultrasonicators с участието на най-съвременните технологии и удобство за потребителя. Разбира се, Hielscher ultrasonicators са CE съвместими и отговарят на изискванията на UL, CSA и RoHs.
The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators:
VialTweeter в UP200St | 200W | 26kHz | ултразвук на малки флакони, например Епендорф 1,5 ml |
UP50H | 50W | 30kHz | ръчен или standmounted лаборатория хомогенизатор |
UP100H | 100W | 30kHz | ръчен или standmounted лаборатория хомогенизатор |
Uf200 ः т | 200W | 26kHz | ръчен или standmounted лаборатория хомогенизатор |
UP200St | 200W | 26kHz | standmounted лаборатория хомогенизатор |
UP400St | 400W | 24kHz | standmounted лаборатория хомогенизатор |
SonoStep | 200W | 26kHz | лабораторен реактор комбиниране, ултразвук, помпа, бъркалка и съд |
GDmini2 | 200W | 26kHz | замърсяване без клетъчен поток |
Cuphorn | 200W | 26kHz | интензивна ултразвукова вана за флакони и чаши |
1000000000000000000000 | 400W | 24kHz | ултразвукова система за мулти-добре плочи / микротитърни плочи |

Ултразвуков cuphorn за интензивна обработка с ултразвук на затворени епруветки и флакони за стерилна хомогенизация на проби.
Свържете се с нас! / Попитай ни!

Ултразвукова лаборатория хомогенизатор UP400St обикновено се използва за подготовка на лизис буфер и последващо разрушаване на клетките.
Литература / Препратки
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Hielscher Ultrasonics произвежда високопроизводителни ултразвукови хомогенизатори от лаборатория да се промишлени размери.