Ультразвукова підготовка зразків для аналізу ТГК
- Ультразвукова екстракція є перевіреним методом виробництва ТГК, але її також можна використовувати в аналітичних цілях.
- Ультразвукова обробка є поширеним методом підготовки зразків, що використовується для аналізу загального вмісту ТГК у продуктах із канабісу.
- Ультразвукова екстракція застосовується до зразків перед аналізом TLC, GC та HPLC.
Ультразвукова екстракція ТГК
ТГК, або тетрагідроканнабінол (дельта-9-тетрагідроканнабінол), є хімічною речовиною, яка спричиняє більшість психологічних ефектів марихуани. Для виду Cannabis відомо понад 400 різних сортів. Залежно від конкретного сорту канабісу, вміст ТГК може становити всього 0,3 wt%. В інших сортах вміст ТГК може досягати до 20 wt%.
Також різні продукти з канабісу суттєво відрізняються: середня концентрація ТГК у марихуані коливається від 1 до 5%; у гашиші вміст ТГК становить від 5 до 15%, а в гашишній олії в середньому 20%. Вміст ТГК у рекреаційних дозах марихуани є дуже мінливим, і чим нижчий вміст ТГК у марихуані, тим більше споживач повинен вжити, щоб відчувати бажані ефекти.
Ультразвукова підготовка зразків використовується для аналізу вмісту ТГК
- для контролю якості рекреаційних продуктів із ТГК,
- для визначення якості фармацевтичних продуктів із ТГК,
- для розрізнення наркотичного та технічного конопель.
Для аналізу ТГК зазвичай використовуються такі хроматографічні методи: тонкошарова хроматографія (TLC), газова хроматографія (GC) та високоефективна рідкісна хроматографія (HPLC)
Протокол ультразвукової підготовки зразків для аналізу TLC
Підготовка зразків: Для підготовки зразків суху рослинну сировину необхідно мацерувати та подрібнити до однорідного порошку. Для ультразвукової екстракції 500mg порошку рослин канабісу та 5mL суміші метанол-хлороформ (співвідношення 9 : 1) змішують у флаконі. Ультразвукову обробку можна застосовувати за допомогою ультразвукового гомогенізатора з мікронасадкою, VialTweeter або ультразвукового CupHorn. Час ультразвукової обробки становить приблизно 5 хв. Після цього дайте зразку відстоятися принаймні 5 хв. Розведіть прозору надосадову рідину екстракційною сумішшю (v/v: 1 : 10). Вільний ТГК: 1μL на пластині TLC
Декарбоксилювання: 100μL екстракту випаровують до сухості. Залишок нагрівають при 180℃ протягом 4 хв. Додають 500μL метанол-хлороформу (v/v 9 : 1). Обробляють ультразвуком протягом 5 хв. Розведіть прозору надосадову рідину екстракційною сумішшю (v/v: 1 : 10).
Калібрування: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC силікагель F-254, Merck 5729
TLC сканер II, програмне забезпечення CATS3, Camag Muttenz Елюент:
Етилацетат : Толуол : Хлороформ = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Постхроматографічна дериватизація: Fast Blue Salt 0,1% у 0,1 M NaOH
Денситометрія при 550 nm
Тетрагідроканнабінол (Δ9-ТГК) для аналізу та екстракції
Протокол ультразвукової підготовки зразків для аналізу GC
Підготовка зразків: Суху рослинну сировину мацерують та подрібнюють до однорідного порошку. Для екстракції 500mg порошку рослин канабісу та 10mL суміші метанол-гексан (співвідношення 9 : 1) змішують у флаконі. Ультразвукову обробку можна застосовувати за допомогою зондового ультразвукового пристрою з мікронасадкою, VialTweeter або ультразвукового CupHorn. Обробляють зразок ультразвуком протягом 15-20 хв. Струшують зразок і дають йому відстоятися принаймні 5 хв. Розведіть прозору надосадову рідину екстракційною сумішшю (v/v 1: 20).
Декарбоксилювання: у вставці
Температура інжектора 250℃
Калібрування: від 5 ng/μL до 250 ng/μL
GC: HP 6890 з 5973 MSD та 7683 автозразковідбірником інжекція: 1μL, час без розділення: 2 хв.
Колонка: HP-5 MS, 30m, діаметр 250 μm, товщина плівки 0,25 μm
Газ-носій: He, 35 psi, постійний потік: 4 mL/min.
Піч: 100℃ протягом 1хв.; підвищення температури на 15℃ /хв. до 280℃; 280℃ протягом 5 хв. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Протокол ультразвукової підготовки зразків для аналізу HPLC
Підготовка зразків (аналогічно до підготовки для GC): Суху рослинну сировину мацерують та подрібнюють до однорідного порошку. Для екстракції 500mg порошку рослин канабісу та 10mL суміші метанол-гексан (співвідношення 9 : 1) змішують у флаконі. Ультразвукову обробку можна застосовувати за допомогою зондового ультразвукового гомогенізатора з мікронасадкою, VialTweeter або ультразвукового CupHorn. Обробляють зразок ультразвуком протягом 15-20 хв. Струшують зразок і дають йому відстоятися принаймні 5 хв. Розведіть прозору надосадову рідину екстракційною сумішшю (v/v 1: 20).
VialTweeter для ультразвукової підготовки зразків
Попередня колонка: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Колонка: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Елюент: ізократичний 36% TEAP 25 mmol/L, 64% ацетонітрил кількісне визначення при 210nm
Калібрування: 0,001 – 0,10 μg/μL
Калібрування: 0,01 – 0,50 μg/μL
Час утримування: для CBD: 6,2 хв.; для CBN: 8,0 хв.; для ТГК: 9,4 хв.; для ТГК-A: 11,0 хв
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, ТГК 0,15%, ТГК-A 1%
UP200St з мікронасадкою для ультразвукової обробки зразків
Література/Посилання
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Applica 2006.
Факти, які варто знати
Марихуана складається з висушених квіток, приквіткових листків та стебел жіночої рослини Cannabis. Це найпоширеніша форма споживання, і вона містить приблизно 3% до 20% ТГК. Специфічні, високо виведені форми марихуани досягають вмісту ТГК понад 30%. Марихуана є сировиною для всіх інших різновидів продуктів із канабісу, що містять ТГК. Щоб перетворити найбільш поширений каннабіноїд, тетрагідроканнабінолову кислоту (ТГКA), на психоактивний ТГК, необхідно ініціювати процес декарбоксилювання. Тому канабіс та його екстракти необхідно нагрівати або зневоднювати, щоб спричинити декарбоксилювання.
Кіф відноситься до порошку, багатого на трихоми, який просіюють із листків та квіток канабісу. Його споживають або у формі порошку, або спресованим і використовують у гашишних коржах.
Гашиш або хеш є концентрованим смолистим коржем або кулькою, яка виробляється або з пресованого кіфу, або зі смоли, зішкребеної з поверхні рослини та скатаної в кульки. Він зустрічається в різних кольорах від чорного до золотисто-коричневого залежно від чистоти та джерела. Його можна споживати перорально або курити, наприклад, у трубці, кальяні, бонгу, бульбашковому курці, випарнику, використовуючи гарячий ніж, курити у сполученнях, змішувати з бутончиками канабісу або тютюном, курити як пляшкові затяжки або використовувати як інгредієнт у їжі.
Настоянка канабісу відноситься до екстракту каннабіноїдів у спирті. Каннабіноїди екстрагуються з рослини канабісу за допомогою високоградусного спирту (переважно зернового спирту) для створення настоянки.
Гашишна олія є смолистою матрицею каннабіноїдів, отриманою шляхом екстракції розчинником, сформованою в затверділу або в’язку масу. Гашишна олія є одним із найпотужніших продуктів із канабісу через високий рівень психоактивної сполуки. Використання гашишної олії, екстрагованої в бутані та надкритичному діоксиді вуглецю, нещодавно набуло зростаючої популярності.
Інфузії відносяться до різних видів інфузій канабісу, які відрізняються одна від одної широким різноманіттям нелетких розчинників, які можна використовувати для виробництва інфузії канабісу. Для приготування такої інфузії рослинну масу канабісу змішують із розчинником, а потім пресують і фільтрують, щоб перенести олії з рослини в розчинник. Какао-масло, молочне масло, олія для приготування їжі, гліцерин та зволожувачі для шкіри є поширеними розчинниками.
Медична марихуана відноситься до використання рослини Cannabis як фітотерапії, рекомендованої лікарем, а також синтетичного ТГК та каннабіноїдів. Це використання зазвичай вимагає рецепта, і розповсюдження зазвичай здійснюється в рамках, визначених місцевими законами. Кілька досліджень показали, що використання канабісу або його похідних діє проти, наприклад, нудоти та блювання, спричинених хіміотерапією, нейропатичного болю та розсіяного склерозу.