Ультразвукова екстракція колагену
- Колаген багатий на білки та широко використовується в різноманітних промислових застосуваннях, наприклад, у харчовій промисловості, фармацевтиці, добавках тощо.
- Ультразвукову обробку можна легко поєднати з ферментативною або кислотна екстракцією колагену.
- Впровадження ультразвуку в процес екстракції колагену призводить до вищих виходів та швидшої екстракції.
Вплив ультразвуку на екстракцію колагену
Ультразвук високої інтенсивності широко використовується для покращення масопереносу у вологих процесах, наприклад, екстракції, сонохімії тощо. Екстракція (також відома як ізоляція колагену) колагену може бути суттєво покращена за допомогою ультразвукової обробки. Ультразвукова обробка сприяє розщепленню субстрату колагену, розкриває фібрили колагену, таким чином полегшуючи ферментативний гідроліз або кислотну обробку.
Ферментативна екстракція за ультразвукової допомоги
Ультразвукова обробка відома своєю здатністю підвищувати активність ферментів. Цей ефект базується на ультразвуковій дисперсії та деагломерації агрегатів пепсину. Гомогенно дисперговані ферменти пропонують збільшену поверхню для масопереносу, що корелює з вищою активністю ферментів. Крім того, потужні ультразвукові хвилі розкривають фібрили колагену, так що колаген вивільняється.
Ультразвукова екстракція пепсином: Пепсин, поєднаний з ультразвуковою обробкою, збільшує вихід колагену приблизно до 124% і суттєво скорочує час екстракції в порівнянні з традиційним пепсиновим гідролізом. Аналіз кругового дихроїзму, атомно-силова мікроскопія та ФТІР довели, що потрійна спіральна структура екстрагованого колагену не постраждала від ультразвукової обробки і залишилася цілісною. (Li et al. 2009) Це робить ультразвукову екстракцію пепсином, за ультразвукової допомоги, надзвичайно практичною для харчової промисловості, пропонуючи підвищені рівні відновлення білків за значно коротшого часу обробки.
У порівняльному дослідженні ультразвукової та не-ультразвукової екстракції колагену з сухожилля великої рогатої худоби, ультразвукова обробка (20kHz, імпульсний режим 20/20 сек.) переконувала вищим виходом та ефективністю. Традиційну екстракцію проводили з пепсином в оцтовій кислоті протягом 48 годин. Ультразвукову екстракцію проводили за тих самих умов, але часи експозиції до ультразвукової обробки (3 до 24 h) та пепсину (24 до 45 годин) варіювалися, що призводило до загального часу обробки 48 годин. Ультразвуково-пепсинова екстракція показала вищу ефективність екстракції колагену, досягаючи виходу 6,2%, коли вихід традиційної екстракції становив 2,4%. Найкращі результати були досягнуті при часі ультразвукової екстракції, використовуючи 18 h. Екстрагований колаген показав непошкоджену безперервну спіральну структуру, добру розчинність та досить високу термічну стабільність. це означає, що ультразвуково-пепсинова екстракція покращила ефективність екстракції природного колагену без пошкодження якості отриманого колагену. (Ran and Wang 2014)
Кислотна екстракція за ультразвукової допомоги
У дослідженні Kim et al. (2012), екстракція кислоторозчинного колагену зі шкіри японського морського окуня (Lateolabrax japonicus) показала підвищений вихід та зменшений час екстракції після ультразвукової обробки на частоті 20 kHz в 0,5 M оцтовій кислоті. Екстракція за допомогою ультразвуку не змінила основних компонентів колагену, більш конкретно ланцюгів α1, α2 та β.
Ультразвукова екстракція білків з яєчної шкаралупи
Ультразвуково попередньо оброблені ферментативні гідролізати мали кращі функціональні властивості. Для ультразвукового вилучення функціональних білкових гідролізатів з яєчної шкаралупи покращуються розчинність, емульгуючі, піноутворювальні та водоутримуючі властивості.
Яєчна оболонка є багатим природним ресурсом і складається приблизно з 64 білків, включаючи колаген типів I, V та X, лізоцим, остеопонтин і сиалопротеїн. Це робить яєчну шкаралупу цікавою сировиною для вилучення білків. За допомогою ультразвукового вилучення вивільнення білків та їх функціональність можуть бути значно покращені, що призводить до швидкого, ефективного та економічного процесу.
Ультразвукові процеси: від лабораторного до промислового масштабу
Ультразвуково-асистоване лужне вилучення
для вилучення та розчинення цих білків
Для вилучення білків з яєчної оболонки ультразвуково-лужна обробка призвела до виходу розчиненого білка, близького до 100% від загального білка яєчної оболонки. Ультразвукова кавітація відокремлювала більші скупчення білків від яєчної оболонки та сприяла розчиненню її компонентів. Структура та властивості білків не були пошкоджені ультразвуковою обробкою і залишилися незмінними. Антиоксидантні властивості білків були однаковими для ультразвуково-асистованої лужної обробки та конвенційного вилучення.
Ультразвукове вилучення желатину
Заморожені та повітряно-сушені шкіри минтая обробляли холодними сольовими, лужними та кислотними розчинами для відділення колагенової тканини та вилучення желатину шляхом денатурації колагену при 45°C протягом чотирьох годин з обробкою потужним ультразвуком як допоміжним засобом обробки. Оцінювали вихід желатину, pH, прозорість, гелеміцність та в’язкопружні властивості, а також розподіл молекулярної маси, визначений методом PAGE-SDS. Желатин, вилучений у водяній бані при 45°C протягом чотирьох годин, використовувався як контроль. Обробка потужним ультразвуком збільшила вихід вилучення на 11,1% порівняно з контролем, тоді як гелеміцність знизилася на 7%. Температура гелеутворення також була нижчою для желатину, вилученого за допомогою ультразвуку (4,2°C). Така поведінка пов’язана з відмінностями у розподілі молекулярної маси поліпептидних клубків у желатинах. Екстракція потужним ультразвуком може використовуватися для збільшення вилучення желатину з заморожених та повітряно-сушених рибних шкір. (Olson et al. 2005)
Промислові ультразвукові системи
Hielscher Ultrasonics постачає потужні ультразвукові системи від лабораторного до настільного та промислового масштабу. Для забезпечення оптимальної продуктивності вилучення можна виконувати надійну ультразвукову обробку в складних умовах безперервно. Всі промислові ультразвукові процесори можуть забезпечувати дуже високі амплітуди. Амплітуди до 200µm можна легко підтримувати безперервно в режимі роботи 24/7. Для ще вищих амплітуд доступні індивідуальні ультразвукові сонотроди. Надійність ультразвукового обладнання Hielscher дозволяє працювати 24/7 у важких умовах та в складних середовищах.
Зв’яжіться з нами сьогодні щодо ваших вимог до процесу! Ми будемо раді порекомендувати вам відповідну ультразвукову систему для вашого процесу!
Потужні ультразвукові гомогенізатори Hielscher доступні для будь-якого масштабу процесу – від лабораторного до виробничого.
Література / Посилання
- Álvarez, Carlos; Lélu, Pauline; Lynch, Sarah A.; Tiwari, Brijesh K. (2018): Оптимізоване вилучення білка з цілої скумбрії шляхом послідовної кислотної та лужної екстракції методом ізоелектричного розчинення й осадження (ISP) за сприяння ультразвуку. LWT – Food Science and Technology Vol. 88, February 2018. 210-216.
- Jain, Surangna; Kumar Anal, Anil (2016): Оптимізація вилучення функціональних білкових гідролізатів із підшкаралупної оболонки курячих яєць (ESM) за допомогою екстракції за сприяння ультразвуку (UAE) та ферментативного гідролізу. LWT – Food Science and Technology Vol. 69, June 2016. 295-302.
- Кім, Х.К.; Кім, Ю.Г.; Кім, Ю. Дж.; Парк, Х. Дж.; Лі, Н.Х. (2012): Вплив ультразвукового лікування на екстракцію колагену зі шкіри морського окуня Lateolabrax japonicus. Рибогосподарська наука Том 78, випуск 78; 2013. 485-490.
- Лі, Дефу; Му, Чандао; Цай, Сумей; Лін, Вей (2016): Ультразвукове опромінення в ферментативній екстракції колагену. Ультразвукова сонохімія том 16, випуск 5; 2009. 605-609.
- Olson, D.A., Avena Bustillos, R.D., Olsen, C.W., Chiou, B., Yee, E., Bower, C.K., Bechtel, P.J., Pan, Z., Mc Hugh, T.H. (2005): Оцінювання застосування потужного ультразвуку як допоміжного технологічного засобу для екстракції рибного желатину. Meeting Abstract No. 71C-26. IFT Annual Meeting. July 2005. New Orleans, LA.
- Ран, X. Г.; Ван, Л.Ю. (2014): Використання ультразвукової та пепсинової обробки в тандемі для екстракції колагену з побічних продуктів м’ясної промисловості. Журнал науки про продовольство та сільське господарство 94(3), 2014. 585-590.
- Schmidt, M.M.; Dornelles, R.C.P.; Mello, R.O.; Kubota, E.H.; Mazutti, M.A.; Kempka, A.P.; Demiate, I.M. (2016): Collagen extraction process. International Food Research Journal 23(3), 2016. 913-922.
- Сірітієнтонг, Тіппаван; Бонані, Вальтер; Мотта, Антонелла; Мільярезі, Клаудіо; Aramwit, Pornanong (2016): Вплив штаму шовку Bombyx mori та часу екстракції на молекулярні та біологічні характеристики серицину. Наука, біотехнологія і біохімія Т. 80, вип. 2, 2016. 241-249.
- Цзен, Дж. Цзян, Б. К.; Xiao, Z.Q., Li, S.H. (2011): Екстракція колагену з риб’ячої луски за допомогою папаїну за допомогою ультразвукової попередньої обробки. Дослідження передових матеріалів, Том 366, 2011. 421-424.
Факти, які варто знати
Колаген
Колаген є основним структурним білком у позаклітинному просторі різних сполучних тканин тваринних організмів. Як головний компонент сполучної тканини, він є найбільш поширеним білком у ссавців,[1] становлячи від 25% до 35% загального вмісту білка в тілі. Колаген складається з амінокислот, скручених разом для утворення потрійних спіралей, які формують видовжені фібрили. Найвища кількість колагену присутня у волокнистих тканинах, таких як сухожилля, зв’язки та шкіра. Розрізняють три типи колагену:
Колаген типу I: забезпечує 90% білка в шкірі, волоссі, нігтях, органах, кістках, зв’язках
Колаген типу II: забезпечує 50-60% білка в хрящах, 85-90% колагену в суглобових хрящах
Колаген типу III: забезпечує білками волокнистий білок у кістках, хрящах, дентині, сухожиллях та інших сполучних тканинах
Колаген в організмі
Кожен із трьох типів колагену складається з різних білків, які виконують різні функції в організмі. Колаген типів I та III є основними компонентами шкіри, м’язів, кісток, волосся та нігтів. Вони необхідні для їхнього здоров’я, росту та відновлення. Колаген типу II переважно міститься в хрящах і суглобах.
Колаген типів I та III містить 19 амінокислот, які вважаються незамінними амінокислотами. Вони виробляються фібробластами (клітинами сполучної тканини) та остеобластами (клітинами, що утворюють кістки). Найважливіші білки в колагені типів I та III включають гліцин, пролін, аланін та гідроксипролін. Тип III є волокнистим склеропротеїном.
Гліцин – це амінокислота з найбільшою кількістю в колагені. Пролін – це незамінна амінокислота, яка може синтезуватися з гліцину та сприяє здоров’ю суглобів і сухожиль. Гідроксипролін – це амінокислота, яка сприяє стабільності колагену. Аланін – це амінокислота, важлива для біосинтезу білків.
Як і типи I та III, колаген типу II також утворює фібрили. Ця фібрилярна мережа колагену важлива в хрящах, оскільки вона забезпечує захоплення протеогліканів. Крім того, вона надає тканині міцність на розтяг.
Джерела та застосування
Колаген – це волокнистий білок, який у великій кількості присутній у сполучній тканині ссавців, наприклад, великої рогатої худоби, свиней. Більшість колагену екстрагується
зі свинячої шкіри та кісток і з джерел великої рогатої худоби. Альтернативним джерелом екстракції колагену є риба та птиця. Колаген широко використовується в харчовій промисловості, дієтичних добавках, фармацевтиці/медичних препаратах та косметиці, серед інших продуктів. Екстракція колагену є зростаючим бізнесом, оскільки цей білок може замінити синтетичні агенти в різних промислових процесах.