Липозоми методом реверзно-фазног испаравања користећи соникацију

Липозоми су разноврсни наноносачи који се користе за испоруку лекова због своје биокомпатибилности и способности да инкапсулирају и хидрофилне и хидрофобне лекове. Метода реверзне фазе испаравања (такође позната као метода емулзификације или метода испаравања растварача) је истакнута техника за припрему липозома, која нуди високу ефикасност инкапсулације. Овај чланак се фокусира на припрему липозома методом реверзне фазе испаравања побољшаном сонификацијом типа сонде, наглашавајући процедуралне кораке, предности и потенцијалне примене у системима за испоруку лекова.

Липозоми су везикуларне структуре које се састоје од једног или више липидних двослојева, способних да инкапсулирају хидрофилна и хидрофобна једињења. Њихова јединствена структура чини их идеалним за циљану испоруку лекова. Метода реверзне фазе испаравања (позната и као емулзификација или метода испаравања растварача) је добро успостављена техника за припрему липозома. У следећим параграфима упознајемо вас са предностима методе реверзне фазе испаравања коришћењем соникације типа сонде, за коју је познато да побољшава емулзификацију, ефикасност инкапсулације и смањење величине липозома.

Методологија припреме липосома методом реверзно-фазног испаравања

Формирање липосома методом обрнутог испаравања помоћу ултразвучне обраде укључује растварање липида у мешавини органског растварача хлороформа и метанола (2:1 в/в), што фаворизује формирање обрнутих мицела. У ову смешу се затим додаје водени пуфер. Комбиновани раствор се обрађује соникацијом, на пример, коришћењем соникатора типа сонде као што је УП400СТ, да би се створила микроемулзија вода у уљу. Органски растварач се затим испарава помоћу ротационог испаривача, што резултира вискозним гелом који се на крају сруши и формира липозоме. Велико водено језгро мехурића микроемулзије промовише хватање хидрофилних молекула, што доводи до липозомалних гелова који показују контролисано ослобађање и добар профил пермеације. Коначно, липосоми се смањују на уједначену величину помоћу соникатора.

Формирање липозома методом обрнутог испаравања помоћу ултразвука

Протокол / упутства корак по корак:

1. Одмерите и растворите липиде:
   Прецизно измерите укупно 40 мг Л-α-фосфатидилхолина и холестерола у масеном односу 4:1 или 7:3.
   Растворити измерене липиде у 10 мЛ мешавине хлороформ/метанол (4:1 в/в) у тиквици са округлим дном.
2. Облик липидног филма:
   Причврстите боцу са округлим дном на ротациони испаривач.
   Ротирати балон на 8 кг на 40°Ц под вакуумом све док се на зидовима боце не формира танак липидни филм.
3. Уклоните испарења растварача:
   Евакуисати преостале испарења смеше растварача испирањем балоне гасом азота.
4. Поновно растворите липидни филм:
   Поново растворите липидни филм у 10 мЛ диетил етра да бисте формирали везикуле обрнуте фазе.
5. Припремите водену фазу:
   Помешати 5 мЛ ПБС пуфера (0,1 М, пХ 7,4) који садржи активни састојак за инкапсулацију и 20 мг Твеен 80 са органском фазом (диетил етар са раствореним липидима).
6. Соницирајте емулзију:
   Ставите в/о емулзију у ледено купатило.
   Соникирајте емулзију користећи соникатор типа сонде УП200Хт на 26 кХз и 50% пулсног режима (0,5 циклуса = 30 секунди УКЉУЧЕНО / 30 сек ИСКЉУЧЕНО) и 50% амплитуде током 1 минута.
7. Испарити да се формира гел:
   Вратите ултразвучну емулзију у ротациони испаривач.
   Упарити под атмосферским притиском на 40°Ц док се не добије гел.
8. Облик липозома:
   Даље испарите гел, разбивши га у полупровидну течност, што указује на формирање липозома.
9. Коначна суспензија липосома:
   Додати још 5 мЛ ПБС пуфера (0,1 М, пХ 7,4) у суспензију липозома.
   Нежно промешајте смешу.
   Евакуисати преостале паре диетил етра користећи гас азота.
10. Складиште:
    Чувајте коначну суспензију липосома на 4°Ц у фрижидеру док не буде потребно.

Ова упутства описују корак по корак процес за припрему липозома коришћењем методе реверзне фазе испаравања са ултразвучном хомогенизацијом, обезбеђујући високо унутрашње водено оптерећење и ефикасну инкапсулацију активног састојка.
Метода реверзне фазе испаравања, посебно коришћењем сонде типа сонде, је широко прихваћена техника за припрему липозома, посебно када се тежи високом унутрашњем воденом оптерећењу. Ова метода има предност у односу на традиционалну методу хидратације танког филма због своје способности да инкорпорира већу количину водене фазе унутар липозома.

Предности сонификације типа сонде за формирање липозома

• Побољшана хомогеност: Соникација типа сонде обезбеђује конзистентан унос енергије, што доводи до уједначеније расподеле величине липозома.
• Побољшана инкапсулација: Механичке силе током соникације побољшавају инкапсулацију лека, посебно за хидрофилна једињења.
• Прилагодљивост: Методе су лако скалабилне, што их чини погодним за производњу липозома великих размера.

Примена липозома у испоруци лекова

Липозоми припремљени емулгирањем и методама испаравања растварача са сонификацијом типа сонде су погодни за различите апликације за испоруку лекова, укључујући:

1. Циљана испорука лекова: Функционализација липосома са специфичним лигандима омогућава циљану испоруку у одређена ткива или ћелије.
2. Контролисано ослобађање: Двослојна липидна структура омогућава контролисано ослобађање лека, повећавајући терапеутску ефикасност.
3. Свестраност: Ове методе прихватају широк спектар терапеутских агенаса, од малих молекула до већих биомолекула као што су протеини и нуклеинске киселине.

Метода реверзне фазе испаравања је посебно истакнута по већем унутрашњем оптерећењу воде у поређењу са методом хидратације танког филма. Ова карактеристика је корисна за апликације које захтевају значајну инкапсулацију хидрофилних лекова или других терапеутских агенаса.
Метода реверзне фазе испаравања која користи соникацију типа сонде је робусна и ефикасна техника за припрему липозома. Његова способност да постигне веће унутрашње оптерећење воде чини га пожељним методом у фармацеутским апликацијама где је максимизирање инкапсулације хидрофилних супстанци кључно. Пажљива контрола испаравања растварача и употреба соникације су кључни за успех ове методе, што доводи до производње висококвалитетних липозома погодних за различите терапеутске сврхе.

Пронађите прави соникатор за производњу липозома

Хиелсцхер Ултрасоницс нуди широк асортиман соникатора типа сонде за ефикасну производњу липозома, што резултира високом ефикасношћу заробљавања и високим капацитетом пуњења биоактивних молекула.
Можете користити Хиелсцхер соникаторе за различите начине припреме липозома, као што је овде описана техника реверзне фазе испаравања, метода емулгирања и метода танког филма.
Прочитајте више о ултразвучној припреми липосома методом танког филма!
Прочитајте више о ултразвучно припремљеним липозомима инкапсулацијама

• Витамин Ц
• ДХА и ЕПА (рибље уље)
• алицин

Дизајн, производња и консалтинг – Квалитет Маде ин Германи

Хиелсцхер ултрасоникатори су познати по свом највишем квалитету и стандардима дизајна. Робусност и једноставан рад омогућавају несметану интеграцију наших ултразвучних апарата у индустријске објекте. Хиелсцхер ултрасоникатори се лако носе са тешким условима и захтевним окружењима.

Хиелсцхер Ултрасоницс је ИСО сертификована компанија и ставља посебан нагласак на ултрасоникаторе високих перформанси са најсавременијом технологијом и једноставношћу за коришћење. Наравно, Хиелсцхер ултрасоникатори су усаглашени са ЦЕ и испуњавају захтеве УЛ, ЦСА и РоХ.

Табела у наставку даје вам индикацију приближних капацитета обраде наших ултразвучних апарата: