α-sinukleinskih fibrila i traka fragmentirani su u naučnim istraživanjima kako bi se generisali manji fibrilni isečci ili čak pojedinačni molekuli proteina, koji se mogu preciznije analizirati korišćenjem različitih eksperimentalnih tehnika. VialTweeter Sonicator je jedan od najčešće korišćenih ultrazvučnika za efikasnu i pouzdanu fragmentaciju alfa-sinukleina.

α-Sinuklein u istraživanju

Alfa-sinuklein fibrils su proteinski agregati koji su snažno povezani sa neurodegenerativnim poremećajima kao što su Parkinsonova bolest i određeni oblici demencije, uključujući demenciju sa Lewy telima. Istraživanja fokusirana na alfa-sinukleinove fibrile imaju za cilj da shvate svoju ulogu u progresiji bolesti i razviju potencijalne terapijske intervencije. Razbijanjem alfa-sinukleinnih vlakna na manje fragmente, istraživači mogu da istraže njihove specifične strukturne karakteristike. Na primer, fragmentiranje alfa-sinukleinskih vlakna omogućava istraživačima da istraže njihovu interakciju sa drugim molekulima, kao što su proteini, lipidi ili mali molekuli. Proizvodnjom manjih fragmenata, obavezujuće lokacije i afiniteti za ove partnere u interakciji mogu efikasnije da se ispitaju. Manji α-Sin fribrila i traka takođe mogu pokazati izmenjenu toksičnost i biohemijske efekte. Stoga je pouzdana i efikasna tehnika fragmentacije, koja daje reproduktivne rezultate u brzom i jednostavnom uzorku tretmana, od presudnog značaja.
Ultrazvučna alfa-sin fragmentacija: VialTweeter sonicator je uspostavljen ultrazvučni sistem za pripremu uzoraka koji istovremeno sonicira do 10 bočica pod potpuno istim uslovima. Programirana podešavanja omogućavaju jednostavno i brzo ponovno pokretanje istih eksperimenata, što daje veoma pouzdane i reproduktivne rezultate u fragmentaciji alfa-sinuklein fibrila.

α-Synuclein Uzorak sa Sonicatorom

Jedan pristup proučavanju alfa-sinukleinnih fibrila podrazumeva njihovo vađenje i fragmentaciju korišćenjem tehnika kao što je sonication. Sonication je proces koji koristi ultrazvučne talase visokog intenziteta, niske frekvencije za ometanje i razbijanje proteinskih agregata, što dovodi do oslobađanja manjih fibrila ili pojedinačnih molekula proteina. Sonicator VialTweeter je često korišćen uređaj u α istraživanja vezanih za sinuklein u ove svrhe.

Brojne istraživačke studije opisuju precizne protokole pripreme uzoraka alfa-sinuklein fibrils sonication, koji koriste Hielscher VialTweeter za efikasnu i pouzdanu α-sinuklein fibrilnu fragmentaciju. Fragmentiranjem fibrila ultrasonično, istraživači mogu da analiziraju dobijene proizvode i ispitaju njihovu strukturu, toksičnost i interakciju sa drugim molekulima. Ovo istraživanje pruža važne uvide u mehanizme neurodegeneracije i potencijalno identifikuje nove terapijske ciljeve. Dobro utvrđeni protokoli α sindikacije pomoću VialTweeter sononikatora omogućavaju pouzdane i reproduktivne rezultate.

Gornje slike: nesloženi alfa-sinuklein fibrils
Niže slike: Ultrasonično fragmentirani alfa-sinuklein fibrils sa VialTweeter sononikatorom
(study and images: ©Dieriks et al., 2022)

Ultrazvučna fragmentacija α-Sinuklein Fibrils – Protokole

S obzirom da brojni istraživači koriste VialTweeter sonicator kao poželjnu tehniku fragmentacije za proizvodnju ujednačenih α-sinukleinskih fibrila, uspostavljeni protokoli su lako dostupni. U nastavku možete pronaći nekoliko primernih protokola fragmentacije.
 

 
ClearTau priprema semena: ClearTau fibrils su razblaženi na 10 μM u dH2O i sonicizovani na 70 % amplitude za 50 s sa 1 s ON 1 s OFF ciklusom u cevi koristeći sononikator UP200St sa VialTweeter. Seme je karakterisala elektronska mikroskopija.
ThS merenje fluorescencije: ClearTau fibrils su razblaženi na 2,5 μM u DH2O i sonicirani na 70 % amplitude za 50 s sa 1 s ON 1 s OFF ciklusom u cevi koristeći UP200St sa VialTweeter. 2.5 μM full-length Tau 4R2N monomer je korišćen kao kontrola. Na reakciju od 100 μl, dodato je 100 μl ThS-a (10 μM) što je donelo konačnu koncentraciju proteina od 1,25 μM. Jednokratna tačka ThS fluorescencije izmerena je korišćenjem 96 dobro jasnih donjih ploča postavljenih u FLUOstar Omega čitaču mikroplate sa ekscitacijom na 445 nm i zabeležena je emisija na 485 nm.
(cf. Limorenko et al., 2023)
 
Uniforma α-sinuklein dužine koristeći sonication: Dužina heterogenosti α-syn fibrilsa i traka smanjena je sonikacijom za 20 min na ledu u 2-ml Eppendorf cevi u VialTweeter setu na 75% amplitude, 0,5 s pulsevima.
(cf. Bousset et al., 2013)
 
Izvršena je kontrola kvaliteta ljudskog rekombinantnog monomernog WT ili S129A a-Syn i fibrilarnih polimorfa koje oni generišu kao i onih a-Syn 1–110. Nakon toga, fibrilarni polimorfi su fragmentirani sonikacijom za 20 min u 2-mL Eppendorf cevi u Ultrazvučnom ultrazvuku VialTweeter za generisanje fibrilarnih čestica prosečne veličine 42–52 nm koje su pogodne za endocitozu.
(cf. Shrivastava et al., 2020)
 

Karakterizacija pet fibrillar α-Syn polimorfa. (A) Prenos elektronskih mikrografa negativno umrljanih α-Syn fibrillar polimorfs fibrils, traka, fibrils-91, fibrils-65, i fibrils-110 pre (gornja traka) i nakon fragmentacije sa VialTweeterom (donja traka). (B) Prikazuje se dužina raspodele fragmentiranih fibrilarnih polimorfa. Naznačen je broj (n) fibrilarnih sklopova iz kojih su histogrami izvedeni.
(study and images: Shrivastava et al., 2020)

 
Fibrils α-Syn su fragmentirani sonikacijom za 20 min u 2 ml Eppendorf cevi u VialTweeteru za generisanje fibrilarnih čestica prosečne veličine 42–52 nm kako je procenjeno analizom TEM-a.
(cf. Negrini et al., 2022)
 
Resuspended fibrils91 (in PBS) were fragmented prior to addition to cell cultures by sonication for 20 min in 2 mL Eppendorf tubes using the Vial Tweeter sonicator, aliquoted, flash frozen in liquid azot and stored until use at -80 ̊ C.
(cf. Vajhøj et al., 2021)
 

VialTweeter i Lab Sonicators za α-Syn Fragmentation

Hielscher Ultrasonics je širom sveta prepoznat kao vodeći proizvođač najsavremenijih ultrazvučnika. Pouzdani i uspostavljeni u velikim istraživačkim laboratorijama širom sveta, naši ultrazvučnici nude nenadmašan kvalitet i performanse za vaše kritičke eksperimente.
Uz Hielscher VialTweeter i bilo koji drugi Hielscher sonicator, iskusićete nenadmašnu korisničku udobnost, jer su promišljeno projektovani za reproduktivne rezultate, lakoću upotrebe i besprekoran rad. Pomoću funkcija automatskog snimanja podataka možete da se fokusirate na istraživanje dok naši ultrazvučni uređaji pedantno beleže ključne podatke za reproduktivnost i preciznost.
Postignite dosledne i reproduktivne rezultate sa samopouzdanjem!
Naši ultrazvučnici su projektovani i proizvedeni u Nemačkoj. Nemačka preciznost i najviši inženjerski kvalitet kako bi se obezbedila pouzdana i tačna priprema uzoraka takve alfa-sinukleirske fibrila fragmentacije svaki put. Nema više brige o nedoslednim ishodima – naša ultrazvučna tehnologija osigurava da vaše istraživanje ostane na čelu naučnog napretka.
Ali to nije sve! Naša posvećenost izvrsnosti se proteže i izvan naših proizvoda. Ponosimo se našim izuzetnim korisničkim servisom, pružajući stručnu podršku za rešavanje bilo kakvih upita ili nedoumica koje možda imate. Naš posvećeni tim je tu da vam pomogne na svakom koraku vašeg istraživačkog putovanja, osiguravajući vam da izvučete najviše iz naših ultrazvučnika.
Odaberite inovacije, pouzdanost i izuzetno korisničko iskustvo – odaberite naše laboratorijske soniatore kao što je VialTweeter za fragmentaciju alfa-sinuklein fibrila. Imate koristi od već utvrđenih protokola i pridružite se redovima vodećih istraživača koji veruju našoj tehnologiji za svoje kritičke studije. Podignite svoja istraživanja i istražite nove granice u istraživanju demencije i neurodegenerativnih bolesti sa našim najmodernim ultrazvučnicima.

Dizajn, proizvodnja i konsalting – Kvalitet napravljen u Nemačkoj

Hielscher ultrazvučni su dobro poznati po najvišim standardima kvaliteta i dizajna. Robustnost i lak rad omogućavaju nesmetanu integraciju naših ultrazvučnika u industrijske objekte. Grubim uslovima i zahtevnim okruženjima lako rukohvate Hielscher ultrazvučnici.

Hielscher Ultrasonics je ISO sertifikovana kompanija i poseban akcenat stavlja na ultrazvučnike visokih performansi koji sadrže vrhunsku tehnologiju i user-friendliness. Naravno, Hielscher sonicatori su usaglašeni sa CE i ispunjavaju zahteve UL, CSA i RoHs.
 
Sledeća tabela vam daje pokazatelj približnog kapaciteta obrade naših ultrazvučnika veličine laboratorije: