Ultrazvočna priprava seruma, bogatega s trombociti

• Plazma, bogata s trombociti (PRP) je krvna plazma, ki je bila obogatena s trombociti, ki se uporablja za medicinsko in estetsko zdravljenje.
• Ultrazvočna liza in kondicioniranje je zelo učinkovita metoda za pripravo plazme, bogate s trombociti.
• Hielscher Ultrasonics ponuja različne ultrazvočne sisteme, ki ustrezajo zahtevam krvnega zdravljenja (npr. za notranjo in zunanjo pripravo čistega prostora).

serum bogat s trombociti

Sonication je zanesljiva in enostavna metoda za lizo trombocitov v avtolognem krvnem serumu, da se sprostijo rastni faktorji. Frakcije, pridobljene iz trombocitov – znan tudi kot avtologni kondicionirani serum (AKS) – se uporabljajo za popravilo tkiv ali estetske tretmaje. Za doseganje optimalnih rezultatov se PRP pred injiciranjem obogati.
Za pripravo obogatene plazme s celičnimi rastnimi faktorji je ultrazvočna razbijanje zelo učinkovita in učinkovita metoda za lizo celičnih membran in sproščanje skoraj celotnih celičnih rastnih faktorjev iz trombocitov. Z ultrazvočno lizo in kondicioniranjem se lahko uporablja tudi antikoagulirana kri.
Kondicioniranje PRP s ultrazvočnim razbijanjem je priročen in stroškovno učinkovit način za pridobivanje koncentriranih rastnih faktorjev.

Ultrazvočna liza plazme, bogate s trombociti (PRP)

Ultrazvočni učinki lize

Ultrazvočna obdelava krvnega seruma povzroči homogeno lizo trombocitov, da se sprostijo ujeti rastni faktorji (rastni faktor AB (PDGF-AB), rastni faktor AA (PDGF-AA), rastni faktor BB (PDGF-BB), vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF), transformacijski rastni faktor β (TGF-β), epidermalni rastni faktor (EGF), insulinu podoben rastni faktor (IGF), rastni faktor epitelnih celic ECGF in fibroblastični rastni faktor (FGF)). Trombociti in njihova alfa-zrnca so motena s ultrazvočnim razbijanjem z uporabo pojava akustična kavitacija. Uporaba ultrazvočne kavitacije za lizo trombocitov zmanjšuje možen negativen vpliv na aktivnost rastnega faktorja ponavljajoče se metode zamrzovanja in odmrzovanja.

Protokol za ultrazvočno pripravo PRP

Približno 16 ml sveže odvzetega avtolognega vzorca krvi se 8-10-krat nežno obrne v epruveti, tako da se kri in antikoagulanti dobro premešajo. Nato se vzorec centrifugira pri 1800 g 20 minut pri sobni temperaturi. Po centrifugiranju trombociti in mononuklearne celice na dnu plazemske plasti zgradijo belkasto plast, ki je znana kot plazma, bogata s trombociti (PRP). Zgornja plast je znana kot plazma s pomanjkanjem trombocitov (PPP). Mononuklearne celice se lahko odstranijo ali ostanejo v vzorcu. Pogosto mononuklearne celice ostanejo v vzorcu PRP, da bi se izognili dodatnim korakom, ki predstavljajo tveganje kontaminacije.
Opomba: Ultrazvočno zdravljenje avtolognega PRP je treba izvajati v sterilnih pogojih.
PRP in FFS se ločijo in zbirajo. V FFS se doda 1,5 ml 10% raztopine kalcijevega klorida, medtem ko se PRP doda 0,5 ml 5% etanola. Obe suspenziji rahlo premešamo in pustimo stati 5 minut pri sobni temperaturi. Nazadnje se suspenziji PRP doda 1 ml FFS in se pusti stati, dokler se ne oblikuje fibrinski strdek.
Ultrazvočno zdravljenje: Ker nastali trombocitni gel deluje kot rezervoar za sproščene rastne faktorje, je treba fibrinski gel prekiniti, da se sprostijo razpoložljivi rastni faktorji. Parametri za ultrazvočno lizo in sproščanje rastnega faktorja so naslednji: Sonicate z UP200Ht ali UP200St (200W, 26kHz) s sonotrodom S26d2 vzorec v cevi. Da bi se izognili pregrevanju vzorca krvi, se ultrazvočno razbijanje lahko izvaja v pulzirajočih ciklih (npr. 10 sekund vklopljeno, 30 sekund izklopljeno). Vzorec je treba položiti na led za hlajenje, tako da se temperatura optimalno vzdržuje med 2 – 5 °C. Po ultrazvočni obdelavi se vzorec centrifugira pri 16000 g 5 minut pri sobni temperaturi. Supernatant se zbira in lahko shranjuje pri temperaturi -70 °C.
Koncentracija trombocitov v frakciji PRP je bila obogatena za 1,7 – 4,5-krat v primerjavi s povprečnim številom trombocitov v polni krvi v literaturi.

PRP je bil kombiniran s terapijo z matičnimi celicami, pridobljenimi iz maščobe (ultrazvočno sproščene avtologne matične celice iz maščobnega tkiva, zmešana s PRP in injicirana nazaj v bolnikovo tkivo za popravilo).

Ultrazvočna oprema

Hielscher Ultrasonics je strokovnjak za prefinjeno in zanesljivo ultrazvočno tehnologijo. Naše ultrazvočne naprave se uporabljajo po vsem svetu za lizo, ekstrakcijo in pripravo vzorcev – neposredno in posredno. Možnost avtoklaviranja kot tudi Razpoložljivi Dodatki zagotavljajo brez kontaminacije obdelava avtolognih vzorcev krvi. Večina naših sistemov se lahko uporablja za ultrazvočno lizo Matične celice in PRP, zaradi česar so naše ultrazvočne naprave še bolj učinkovite.
V spodnji tabeli so navedene naše ultrazvočne naprave, ki so primerne za pripravo plazme, bogate s trombociti, in njihov priporočeni volumen vzorca. Na voljo so tudi večji ultrazvočni aparati in prilagojeni sistemi.

Prosimo, kontaktirajte nas še danes! Z veseljem vam bomo pomagali najti optimalno ultrazvočno napravo!