Ultrazvočni izvornih celic osamitev
- Ultrasonic kavitacija je zelo učinkovit mehanski način, da izoliramo matične celice iz človeškega maščobnega tkiva.
- Ultrazvočno Izoliran stromalni vaskularna frakcijo (SVF) kažejo visoko regenerativno potencial za medicinsko uporabo.
- Hielscher Ultrazvočna ponuja različne možnosti za neposredne in posredne ultrazvoka za spravilo matičnih celic.
Ultrazvočni Izolacija matičnih celic
Iz človeškega telesa ekstrahiramo maščevju (prek liposukcijo) obdelamo z ultrazvokom odstraniti tkivo iz matičnih celic in ostalih rastnih celic. Ta ločen del celic je znan kot stromalnih vaskularne frakcij celic (SVF).
Ultrazvočni izolacija Tehnika izvornih celic iz maščobnega tkiva, ki je temeljila samo na način delovanja ultrazvokom, pridobljene kavitacije, ki je mehansko strižno. Kavitacijske strižnih sil motijo maščobnega tkiva, tako da se matične celice sprosti iz strukture maščobnega tkiva. Izolacijo Ultrazvočni izvornih celic je postopek encim brez, da bi se izognili uporabi kolagenaze, tripsin ali dispaze.
Za ločevanje ekstrahirane matične celice, mezenhimskih matičnih celic, endotelijskih predhodnih sestavin in drugih tipov rast celic, se sonicira maščobno tkivo centrifugirali.
Ločene izvorne celice zbrali in analizirali na njihovo kakovost tudi število celic, preživetja, endotoksina in gram madež, preden se uporablja takoj za avtologno presajanje ali konzervirane v krio-skladiščenju.
Zakaj bi se izognili encime?
Ker encimsko razgradnjo za izolacijo matičnih celic spremlja z visokimi stroški in morebitnih varnostnih tveganj ter primanjkuje učinkovitosti [OBERBAUER et al. 2015], so prednostne Neencimske metode izolacije kot ultrazvočne kavitacije. Ultrazvočni izolacija korak nadomešča encimsko razgradnjo z ločevanjem celic in celičnih agregatov mehansko iz maščobnega tkiva.
GDmini2 pri UP200St-TD pretvornik (200 W)
- hitro
- učinkovite
- ponovljivo
- varna
- Encim-Free
- stroškovno učinkovito
- sterilni Možnosti
-Maščobno zarodne izvorne celice
Stem Cell dobitek
Objavljeno metodo SVF izolacijo s pomočjo ultrazvočne kavitacije donos 1.67-2.24 x 107 celic z rentabilnostjo 97.1 – 98.9% [Victor, S., 2014]. Celične donose približno 2-4 milijone celic/gram maščobnega tkiva so bili pridobljeni z ultrazvočno lizo zrelih adipocitih v disociated maščobnega tkiva [Bright et al., 2014].
Ultrazvočno pripravljene celice imajo enako visoko adipogenic in osteogeni diferenciacijo potencial v primerjavi s standardno encimsko metodo izolacije [OBERBAUER et al. 2015].
Ultrazvočni sistemi za Stem Cell Isolation
Da bi zagotovili najvišjo varnost in najboljšo kakovost, zanesljivo ultrazvočne opreme, ki omogoča natančen nadzor nad obdelavo celice stebla, je ključnega pomena za uspešno zdravljenje bolnikov. Hielscher Ultrazvočna ponuja različne možnosti za avtologno ultrazvočni postopek ločevanja kavitacijskega izolirati in steblo pridelka in endotelijskih prekurzorskih celic.
Neposredno ultrazvoka
Pri postopku za izolacijo matičnih celic prek neposrednega ultrazvoka je Ultrazvočni oddajnik (sonotroda, ultrazvočna konica / sonda) potopimo v tkivo maščobnem maščobe. Prek sonotrode so ultrazvočni valovi sklopljeno neposredno v avtologne maščobe, tako da ultrazvočni kavitacija sprosti izvornih celic in stromalne celice iz preostalega tkiva. Hielscher ultrazvočni predelovalci UP200Ht in UP200St z sonotrode S26d14 se običajno uporabljajo sisteme za zdravljenje avtologno izvornih celic. SVF izolacije z neposrednim ultrazvoka je predvsem primeren za uporabo v Cleanroom objekte.
Posredno ultrazvočnega razbijanja
Ker se matične celice uporabljajo za avtologne zahtevkov, sterilnost postopka je zelo pomembna. Zato je Hielscher razvila več možnosti za posredne ultrazvočno razbijanje, kot so GDmini2, VialTweeter in druge prilagojene sisteme. Z posredne ultrazvočno razbijanje, so ultrazvočni valovi sklopljen z vsebnikom stene v maščobnem tkivu. Frakcija stromalni vaskularne (SVF) je ločena od maščobnega tkiva ultrazvočni kavitacija enaka kot pri neposrednem sonikacijo.
Posredno Postopek ultrazvoka nudi to prednost, da predelujejo celice v zaprti posodi pod Pogoji onesnaženje brez ker tveganje navzkrižne kontaminacije s vstavljanje ultrazvočno rog (sonotrode) se izloči. Izolacija celic izvedemo v zaprtem sistemu, ki zagotavlja sterilnih procesnih pogojev.
digitalni ultrazvočni naprave Hielscher je mogoče natančno nadzoruje preko zaslona na dotik ali nadzorom brskalnika. Postopki ultrazvočno razbijanje mogoče vnaprej določiti prek intuitivnega menija. Ultrazvočne naprave so opremljene s snemanjem za avtomatsko obdelavo podatkov (vsi podatki sonikacijo proces so shranjeni na integriran SD-kartico). vhodna moč ultrazvočni lahko natančno prilagodi protokola celic izolacije.
Literatura / Reference
- Oberbauer, eleni; Steffenhagen, Carolin; Wurzer, Christoph; Kristjan, Christian; Redl, Heinz; Wolbank, Susanne (2015): encimski in neencimski izolacijski sistemi za maščobne celice, pridobljene iz tkiv: trenutno stanje tehnike. Obnavljanje celic (2015) 4:7.
Dejstva je treba vedeti
stebelna celica
Matične celice so nediferencirane celice večceličnega organizma, ki imajo sposobnost, da proizvaja v nedogled več celic iste vrste. Zanje je značilno, izjemnega potenciala za razvoj v različne vrste celic v telesu v zgodnjem stanju življenja in rasti. Najbolj značilnost matičnih celic je njihova sposobnost, da se obnovi z delitvijo celic in njihovo sposobnost, da spremeni v tkivo ali organov za posamezne celice s posebnimi funkcijami. Pluripotentne matične celice imajo lahko razvijejo v kateremkoli izmed treh zarodnih celic: endoderm (notranja želodčne sluznice, prebavila, pljuča), mezoderma (mišice, kosti, kri, urogenitalnega) ali ectoderm (epidermalne tkiva in živčnega sistema).
V nekaterih organov, kot črevesa in kostnega mozga, matične celice redno delimo na popravilo in zamenjavo iztrošene ali poškodovanih tkiv. V drugih organih, kot so trebušne slinavke in srca, matične celice razdeli le pod posebnimi pogoji.
Mezenhimske stromalni / matične celice (MSC), ki nudijo velike možnosti za mnogotere terapevtsko uporabo v regenerativno in estetske medicine, se v glavnem nahajajo v kostnem mozgu, vendar jih lahko izoliramo iz drugih tkivih (npr hrustanca, maščobe, mišične celice), preveč. Mezenhimske matične celice, se štejejo kot proteolitičnih izvornih celic odraslih, ki so značilna po svoji zmogljivosti samoobnovitve.
raziskave in zdravljenje izvornih celic se uporabljajo za gojenje tkiv in organov za presaditev (tkivno inženirstvo). Druge medicinske polja za uporabo izvornih celic je mogoče najti pri zdravljenju možganskih bolezni (npr Parkinsonova in Alzheimerjeva bolezen), terapija pomanjkljivost celic, bolezni krvi (npr levkemija), skupno in uničenja hrustanca (npr osteoartritis), kot tudi kozmetični tretmaji (npr anti-aging zdravljenja). Na splošno velja, matične celice imajo velikost pribl. 15-25 mikronov v premeru.
Mezenhimskih matičnih celic (MSC) so multipotentne stromalni celice, ki imajo sposobnost za razlikovanje v različnih vrstah celic, vključno osteoblastov (kostnih celic), hondrocitov (hrustančnih celic), mišičnih celic (mišičnih celicah) in adipocite (maščobne celice).
Stromalni Vascular frakcija (SVF)
Stromalni Vascular frakcija (SVF) je sestavina lipoaspirate, ki jih lahko ekstrahiramo z liposukcijo iz maščobnega tkiva v človeškem telesu. Lipoaspirate vključuje heterogeno mešanico celic in ima visoko vsebnost izvornih celic, imenovanih-maščobnih pridobljen izvornih celic (ASC ali ADSC), ki kažejo nekatere podobnosti z kostnega mozga matičnih celic, kot njihovo sposobnost, da se diferencirajo v večimi celice.
Heterogena populacija SVF vključuje endotelnih celic eritrocitov, fibroblaste, limfocitov, monocitov / makrofagov ter pericytes med drugim pa tudi pomemben del-maščobnih izvira izvornih celic.
-Maščobno izpeljana stromalni / Matične celice (ASC)
Stromalne / matične celice, pridobljene iz adipoze (ASC / ADSC), sproščajo visoke ravni bioaktivnih dejavnikov rasti, kot so epidermalni rastni faktor (EGF), rastni faktor vaskularnega endotelija (VEGF), osnovni fibroblastni rastni faktor (bFGF), faktor rasti keratinocitov (KGF) (PDGF), hepatocitni rastni faktor (HGF), transformacijski faktor rasti beta (TGF-β), faktor rasti inzulina (IGF) in možganski nevrotrofični faktor (BDNF). ACS ne sprošča samo rastnih faktorjev, temveč tudi izloča citokine, vključno s fos-tirozin-kinaznim 3 (flt-3) ligandom, stimulirajočim faktorjem granulocitne kolonije (G-CSF), granulocitnim makrofagnim kolonijskim stimulirajočim faktorjem (GM-CSF), makrofagom (IL-6), IL-6, IL-7, IL-8, IL-11 in IL-12, inhibitorni faktor levkemije (LIF) in faktor tumorske nekroze-alfa (TNF-α).
Pridobivanje tipov matičnih celic
Avtologno odraslih stemcells od ljudi je mogoče izvleči iz naslednjih virov:
- Kostnega mozga, ki zahteva ekstrakcija z žetvijo, torej vrtanjem v kost.
- Maščevju (lipidov celice), ki zahteva ekstrakcijo z liposukcijo.
- Kri, ki zahteva ekstrakcijo z aferezo, kjer je kri od darovalca prehaja skozi “dializo” Stroj kjer se matične celice ekstrahirali medtem ko so druge komponente krvi se vrne nazaj na darovalca.