Ultrazvočni odmik celic

Ultrazvočni odmik celic je zelo učinkovita in zanesljiva tehnika priprave vzorcev, ki se uporablja na različnih področjih celične biologije in biotehnologije. Z uporabo ultrazvočnih valov zvočni UIP400MTP plošče z več vdolbinicami loči pritrjene celice s površin kulture in pripravi celične suspenzije za nadaljnjo uporabo. Sonication ponuja več prednosti pred tradicionalnimi encimskimi, kemičnimi in mehanskimi tehnikami ločevanja, zaradi česar je dragoceno orodje za raziskovalce.

Načelo ultrazvočnega odmika celic

Ultrazvočni odmik celic temelji na uporabi močnega ultrazvoka, da bi prekinil interakcije med celicami in substratom, na katerega so pritrjeni. Ultrazvočni valovi ustvarjajo mikromehurčke, akustično kavitacijo in vibracije v gojišču, kar povzroča mehanske sile, ki nežno, a učinkovito odstranijo celice. Ta postopek se običajno izvaja z uporabo brezkontaktnega sonikatorskega UIP400MTP za plošče z več vdolbinicami.

Spodaj najdete zgledno navodilo za odmik celic z uporabo sonikatorja z več vdolbinicami UIP400MTP.
 

Oprema in materiali za ultrazvočno odvajanje celic

• Brezkontaktni zvočnik za plošče z več vdolbinicami UIP400MTP: Ta visoko zmogljiv zvočnik je ključno orodje. Plošča sonikatorja UIP400MTP je primerna za vse standardne plošče z več jamicami in mikrotitri ter za petrijevke. Ultrazvočni valovi zagotavljajo potrebno mehansko energijo za odmik celic.
• Plošče za celične kulture ali petrijevka: Standardne posode, ki se uporabljajo za gojenje adherentnih celičnih kultur.
• Gojišče: Tekoči medij, v katerem se celice gojijo in vzdržujejo.
• Sterilna PBS (fiziološka raztopina s fosfatnim puferjem): Uporablja se za pranje celic pred odstranitvijo.
• Zbirne epruvete: Za zbiranje ločene celične suspenzije.

Protokol za ultrazvočni odmik z uporabo Plate Sonicator UIP400MTP

1. Pripravka
   – Prepričajte se, da je vsa oprema čista in sterilna, da preprečite kontaminacijo.
   – Gojišče in PBS predhodno segrejemo na ustrezno temperaturo (običajno 37 °C).
2. Pranje celic
   – Gojišče se aspirira iz bučke ali plošče celične kulture.
   – Celice nežno sperite s sterilnim PBS, da odstranite vse ostanke medija in ločene celice.
3. ultrazvočno razbijanje
   – V bučko ali ploščo dodamo majhen volumen PBS ali svežega gojišča, da pokrijemo enoplast celice.
   – Petrijevo posodo ali krožnik postavite v UIP400MTP sonikator.
   – Sonikirajte za določeno obdobje, običajno od nekaj sekund do nekaj minut, odvisno od vrste celice in moči pritrditve.
4. Zbiranje celične suspenzije
   – Po ultrazvočnem razglaševanju opazujte celice pod mikroskopom, da zagotovite odmik.
   – Nežno pipetirajte celično suspenzijo, da zberete ločene celice.
   – Suspenzijo prenesemo v zbirno cev.
5. Obdelava po odcepitvi
   – Po potrebi centrifugiramo celično suspenzijo, da se celice koncentrirajo.
   – Celice resuspendiramo v svežem gojišču ali pufru za nadaljnjo uporabo.

Opombe: Parametre (kot sta čas in intenzivnost ultrazvočne obdelave) je treba optimizirati za različne vrste celic, da se prepreči poškodba celic. Nekatere občutljive vrste celic so lahko bolj občutljive na ultrazvočno zdravljenje, kar zahteva skrbno optimizacijo.

Praktična uporaba ultrazvočnega odmika celic

Ultrazvočni odmik celic se uporablja v različnih raziskovalnih in kliničnih okoljih:

1. Pretočna citometrija: Priprava enoceličnih suspenzij za analizo.
2. Preskusi štetja celic in sposobnosti preživetja: Ločevanje celic za natančno štetje in oceno sposobnosti preživetja.
3. Subkulturiranje: Prenos celic iz ene kulturne posode v drugo.
4. Poskusi molekularne biologije: Izolacija celic za ekstrakcijo DNA, RNA in beljakovin.

Tukaj preberite, kako se sonikator UIP400MTP 96-vdolbice uporablja za odstranjevanje biofilma v testih biofilma, kot je protokol ASTM E2799!

Zakaj bi moral zamenjati strganje celic z odmikom celic z sonciatorjem UIP400MTP mikroplošče?

Zamenjava strganja celic z odmikom celic z uporabo sonikatorja UIP400MTP mikroplošče ponuja raziskovalcem več prednosti. Za razliko od ročnega strganja natančno nadzorovana ultrazvočna obdelava z UIP400MTP zagotavlja dosledno in nežno odvajanje celic, kar zmanjšuje mehanske poškodbe in ohranja sposobnost preživetja celic. UIP400MTP zagotavlja natančen nadzor nad parametri ultrazvočne obdelave, kar omogoča enakomerno obdelavo vseh vrtin in odpravlja variabilnost med vzorci. Ta metoda je hitrejša, učinkovitejša in razširljiva, zaradi česar je idealna za visoko zmogljive aplikacije, hkrati pa ohranja obnovljivost in celovitost občutljivih celičnih kultur. Primerjalno študijo najdete tukaj!