Zamenjajte strganje celic z visoko zmogljivim zvočnikom UIP400MTP

Ločitev in ekstrakcija adherentnih celičnih linij iz plošč z več vdolbicami za multi-omično analizo je vsakodnevna naloga v laboratorijih. Visoko zmogljivo odvajanje celic z uporabo zvočnega zvočnika z več vdolbinicami UIP400MTP nadomešča ročno strganje celic, kar vodi do višjih donosov RNA, skupnih lipidov in skupnih polarnih metabolitov. Nova metoda združuje Hielscher UIP400MTP sonicator z delovno postajo za ravnanje s tekočinami Beckman Coulter i7, kar omogoča visoko zmogljivi, ponovljivo in učinkovito obdelavo celic za ekstrakcijo RNA, metabolitov in lipidov. Predstavljena metoda je odlična s tradicionalnimi metodami ročnega strganja celic z doseganjem vrhunske obnovljivosti in donosa v različnih vrstah celic in eksperimentalnih pogojih.

Racionalizirajte ločitev celic z mikroploščo Sonicator UIP400MTP

Adherentni sistemi celičnih kultur igrajo ključno vlogo v toksikoloških in biomedicinskih raziskavah. (2024) so obravnavali pomemben izziv v projektu PrecisionTox, ki se je osredotočil na izkoriščanje omičnih tehnologij za oceno kemičnih nevarnosti. Cilj projekta je bil visoko zmogljiva analiza tisočih vzorcev, obdelanih z različnimi kemikalijami. Da bi zadovoljili to povpraševanje, so raziskovalci razvili avtomatiziran potek dela, ki združuje UIP400MTP sonikator z uveljavljenimi dvofaznimi protokoli ekstrakcije za analizo tekočinske kromatografije in masne spektrometrije (LC-MS). Njihova študija ocenjuje učinkovitost UIP400MTP Multi-Well Plate Sonicatorja pri ločevanju adherentnih celic v primerjavi z ročnim strganjem in drugimi tradicionalnimi metodami.

Racionalizacija multi-omike: avtomatizirana ekstrakcija adherentnih celic z UIP400MTP

Raziskovalna skupina Laure Cruchley-Fuge z Univerze v Birminghamu je uporabila tri človeške celične linije: HepG2 (celice raka jeter), HepaRG (diferencirane celice, podobne hepatocitom) in H295R (celice raka nadledvične žleze). Te celice so bile kultivirane na ploščah s 24 in 96 jamicami in izpostavljene preskusnim kemikalijam, kot sta aflatoksin B1 in forskolin.

Eksperimentalna zasnova:

• 1. faza: Optimizacija nastavitev moči sonikatorja UIP400MTP in primerjava z ročnim strganjem celic in zvočnimi vodnimi kopelmi. Celice HepG2 so bile uporabljene za oceno izterjave RNA, presnovka in lipidov.
• 2. faza: Integracija UIP400MTP v dvofazni potek dela ekstrakcije z uporabo sistema Beckman Coulter i7. Validacija je bila izvedena z uporabo celic HepaRG in H295R.

Potek dela ekstrakcije: Potek dela je zajemal izpostavljenost kemikalijam v ploščah z več vdolbicami, odmik celic z uporabo UIP400MTP in dvofazno ekstrakcijo prek Bligha & Barva (B)&D) metoda. LC-MS analiza je bila izvedena z uporabo Thermo Scientific Orbitrap Exploris 120 za lipofilne in polarne spojine. Članek B&Metoda D, zlati standard za kvantifikacijo lipidov, vključuje dvostopenjsko ekstrakcijo z metanolom, kloroformom in vodo, ki ji sledi kvantifikacija lipidov v fazi kloroforma.

UIP400MTP ultraploščni sonikator olajša ločitev adherentnih celičnih linij z več ploščami in petrijevkami

Rezultati:

• 1. faza: Optimalni pogoji za ultrazvočno razbijanje so bili ugotovljeni pri 60% moči.
  UIP400MTP je prinesel najvišjo rekuperacijo RNA z izjemno ponovljivostjo v primerjavi z ročnim strganjem in zvočnimi kopelmi.
  Obnovitev polarnega presnovka je bila dosledna pri vseh metodah, medtem ko je bila obnovitev lipidov opazno boljša pri UIP400MTP.
• 2. faza: Validacija na celicah HepaRG in H295R je pokazala visoko ponovljivost v podatkih o lipidomiki in metabolomiki, kar kažejo tesno združeni rezultati PCA.
  Zdravljenje z aflatoksinom B1 in forskolinom je bilo učinkovito ločeno od kontrol, kar poudarja občutljivost in zanesljivost metode.

“Hielscher UIP400MTP ultrazvočna naprava zagotavlja visokokakovosten in ponovljiv alternativni pristop k "zlatemu standardu" ročnega strganja celic, kar vodi do višjih donosov RNA, skupnih lipidov in skupnih polarnih metabolitov.” (Cruchley-Fuge et al., 2024)

Cruchley-Fuge et al. poudarjajo prednosti UIP400MTP sonikatorja za obdelavo adherentnih celic. Z zamenjavo ročnega strganja ta metoda poveča obnovljivost, prepustnost in donos, zaradi česar je neprecenljivo orodje za obsežne študije, kot je PrecisionTox. Integracija UIP400MTP v avtomatizirane delovne tokove ne le zmanjšuje variabilnost, temveč tudi racionalizira delovno intenzivne procese, kar omogoča visokokakovostno pridobivanje podatkov z več omikami.

(2024) olajša in racionalizira obdelavo adherentnih celičnih kultur za multi-omično analizo. Integracija UIP400MTP sonicatorja z avtomatiziranimi delovnimi tokovi zagotavlja dosledno in učinkovito pripravo vzorcev, zaradi česar je idealen za visoko zmogljive toksikološke raziskave.
 

Projektiranje, izdelava in svetovanje – Kakovost izdelana v Nemčiji

Hielscher ultrazvočni aparati so znani po svojih najvišjih standardih kakovosti in oblikovanja. Robustnost in enostavno upravljanje omogočata nemoteno integracijo naših ultrazvočnih aparatov v industrijske objekte. Težke pogoje in zahtevna okolja zlahka obvladajo Hielscher ultrasonicatorji.

Hielscher Ultrasonics je podjetje s certifikatom ISO in daje poseben poudarek visoko zmogljivim zvočnikom z najsodobnejšo tehnologijo in prijaznostjo do uporabnika. Seveda so Hielscher ultrazvočni aparati skladni s CE in izpolnjujejo zahteve UL, CSA in RoHs.