Odstranjevanje biofilma z visoko zmogljivim sonikatorjem UIP400MTP
Visoko zmogljivi sonikatorji, zasnovani za plošče z več vdolbicami in plošče z 96 vdolbinicami, so bistvena orodja pri raziskavah biofilma, zlasti za odstranjevanje in odstranjevanje biofilmov iz vdolbinic, cevi, zatičev in petrijevk. Ti sonikatorji olajšajo obdelavo številnih vzorcev hkrati, kar izboljšuje učinkovitost in doslednost. Hielscher visokozmogljiv sonikatorski UIP400MTP je idealen za ultrazvočne plošče z več vdolbicami, 96-jamičke, več cevi ali petrijevke. Enakomerne ultrazvočne vibracije in kavitacija zanesljivo odstranijo biofilme z dna plošče. Zaradi tega UIP400MTP sonikator z več vdolbinicami idealno orodje za pripravo vzorcev za odstranjevanje biofilma, teste biofilma in raziskave bakterij in mikrobov.
Zvočni UIP400MTP z več ploščami za odstranjevanje in odstranjevanje biofilma pri pripravi vzorcev z visoko zmogljivostjo:
- Bakterijski biofilmi
- Evkariontski biofilmi
- Glivični biofilmi
- Arhejalni biofilmi
- Polimikrobni biofilmi / biofilmi mešanih vrst
- Zobni biofilmi (plak)
- Morski biofilmi
- Okoljski biofilmi
- Biofilmi medicinskih pripomočkov
- Suspenzije gojenih celic
UIP400MTP visoko zmogljiv zvočnik za odstranjevanje biofilma iz plošč z več vdolbinicami, plošč s 96 jamicami, cevi in petrijevk.
Ta Hielscher sonicator je certificiran ISO, skladen z UL, RoHs in CE. Ima zmogljivost delovanja 24/7 za visoko zmogljive delovne tokove.
Odstranjevanje in odstranjevanje biofilma z ultrazvočnim razbijanjem
Hielscher visokozmogljiv sonikatorski UIP400MTP je prilagojen zanesljivemu in enakomernemu ultrazvočnemu razbijanju plošč z več in 96 vdolbinicami. Enodušni zvočni UIP400MTP z več vdolbicami, ki ponuja zanesljivo tehnologijo za odstranjevanje in odstranjevanje biofilmov z večjamičkovih plošč, cevi in petrijevk. Omogočanje visoko zmogljive priprave vzorcev UIP400MTP povečuje učinkovitost in doslednost testov biofilma in drugih sorodnih študij, zaradi česar je ta zvočnik nepogrešljiv v akademskih in industrijskih mikrobioloških raziskavah.
Odstranjevanje biofilma z ultrazvočnim razbijanjem: Za odstranjevanje biofilma se lahko biofilmi tvorijo v vdolbinah plošče z več vdolbicami pod nadzorovanimi pogoji. Plošča se nato postavi v sonikator, kjer se parametri, kot so čas, amplituda in frekvenca, nastavijo v skladu s posebnimi zahtevami vrste biofilma in eksperimentalnimi cilji. Ultrazvočni valovi ustvarjajo kavitacijo v vsaki vdolbini, učinkovito motijo matrico biofilma in premikajo celice.
Ultrazvočna priprava vzorcev za biofilme: V testih biofilma imajo visokozmogljivi sonikatorji več aplikacij. Po ultrazvočnem razbijanju se lahko izločene biofilmske celice zberejo in količinsko opredelijo z različnimi testi, kot so obarvanje kristalno vijolične, štetje živih celic ali merjenje biomase. Poleg tega se lahko biofilmi zdravijo s protimikrobnimi sredstvi, ki jim sledi ultrazvočna obdelava, da se oceni učinkovitost teh sredstev pri motenju biofilmov. Izločene biofilmske celice so uporabne tudi za genomske in proteomske študije, saj se lahko uporabljajo za ekstrakcijo DNA, RNA in beljakovin za nadaljnjo molekularno analizo.
Visoko zmogljivi sonikatorji ponujajo številne prednosti. Omogočajo hkratno obdelavo več vzorcev, prihranijo čas in delo ter zagotavljajo enakomerno obdelavo vseh vdolbinic, zmanjšujejo variabilnost in izboljšujejo ponovljivost rezultatov. Te naprave so primerne tudi za obsežne študije, ki omogočajo visoko zmogljivo presejanje nastajanja, motenj in zdravljenja biofilma.
(A) plošča, ki vsebuje TSB z 2 % glukoze, ki se uporablja za tvorbo biofilma, obnovo celic in določanje MIC in MBCB; (B) Pokrov z zatiči za tvorbo stafilokoknih biofilmov.
Biofilmske celice, ki so nastale na zatičih, so bile odstranjene s pomočjo Hielscherjevega sonikatorja UIP250MTP za 5 minut na ploščah z 96 jamicami, ki so vsebovale sveže gojišče za obnovitev celic.
(Slika in študija: ©de Oliveira et al., 2016)
96-jamični sonikator UIP400MTP za ultrazvočno razbijanje mikrotitra in plošč z več jamicami
Pomen ultrazvočnega odstranjevanja biofilma v raziskavah biofilma
Ultrazvočno odstranjevanje biofilma je ključnega pomena pri raziskavah biofilma zaradi svoje učinkovitosti, doslednosti, učinkovitosti in vsestranskosti. Zagotavlja temeljito in enakomerno prekinitev biofilmov, kar omogoča natančno in ponovljivo analizo v različnih testih biofilma. Ti testi, vključno s kristalno vijoličnim barvanjem, štetjem živih celic, bioluminiscenco ATP, redukcijo XTT, mikroskopsko analizo in ekstrakcijo nukleinske kisline / beljakovin, zagotavljajo celovit vpogled v tvorbo biofilma, sposobnost preživetja, strukturo in odziv na zdravljenje.
Sonication nežno odstrani in odstrani biofilm s trdnih podlag, kot so dna plošč, zatiči, kljukice ali pokrovi.
- Učinkovito razbijanje biofilmov:
Kavitacija: Ultrazvočni valovi ustvarjajo kavitacijske mehurčke, ki ob zrušitvi ustvarjajo močne strižne sile, kar učinkovito moti kompleksno strukturo biofilmov.
Temeljito odstranjevanje: Zagotavlja, da se biofilmske celice temeljito odstranijo s površin, kar je ključnega pomena za natančno kvantifikacijo in analizo. - Doslednost in ponovljivost:
Enotna obdelava: Visoko zmogljivi sonikatorji zagotavljajo enakomerno ultrazvočno porazdelitev energije po vseh vzorcih, zmanjšujejo variabilnost in izboljšujejo obnovljivost.
Standardizacija: Omogoča standardizacijo protokolov za motnje biofilma, kar vodi do zanesljivejših in primerljivejših rezultatov. - Učinkovitost:
Zmogljivost visoke zmogljivosti: Omogoča hkratno obdelavo več vzorcev, prihranek časa in povečanje prepustnosti v študijah biofilma.
Avtomatizacija: Lahko se enostavno integrira v avtomatizirane delovne tokove, kar še dodatno poveča učinkovitost in zmanjša ročno delo. - Ohranjanje sposobnosti preživetja in integritete:
Nadzorovani pogoji: Parametre, kot sta čas in intenzivnost, je mogoče natančno nastaviti, da motijo biofilme, ne da bi pri tem ogrozili sposobnost preživetja ali celovitost celic, kar je pomembno za nadaljnje teste. - Vsestranskost:
Široka uporabnost: Primeren za različne vrste biofilmov (bakterijski, glivični, mešane vrste) in združljiv z različnimi površinami in materiali, ki se uporabljajo pri raziskavah biofilma.
Sonic UIP400MTP ator z več vdolbicami ponuja številne prednosti, zaradi česar so nepogrešljivo orodje pri pripravi vzorcev z visoko zmogljivostjo.
Hielscher Ultrasonics ponuja različne modele sonikatorjev, vključno s sondnimi zvočniki, brezkontaktnimi sonicatorji in visoko zmogljivimi zvočnimi aparati. Stopite v stik z nami zdaj! Naši tehnični strokovnjaki se bodo z vami z veseljem pogovorili o vaših zahtevah glede obdelave in vam priporočili najprimernejši sonikator za vašo uporabo biofilma.
Mikrotitarska plošča sonikatorska UIP400MTP se uporablja za odstranjevanje biofilmov za raziskave
Literatura / Reference
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Pogosto zastavljena vprašanja o raziskavah biofilma
Kateri je najpogostejši oder za biofilme?
Najpogostejši oder za biofilme v laboratorijskih raziskavah je mikrotitrska plošča. Mikrotitrijske plošče, zlasti format 96 vdolb, se pogosto uporabljajo zaradi svoje vsestranskosti, enostavnosti uporabe in združljivosti z različnimi analitskimi tehnikami.
Katera je najboljša 96-jamična plošča za biofilme?
Najboljša plošča s 96 vdolbicami za študije biofilma je odvisna od več dejavnikov, vključno z vrsto biofilma, ki ga preučujemo, eksperimentalno postavitvijo in posebnimi zahtevami raziskave. Vendar pa so nekatere pogosto priporočene plošče z 96 jamicami za študije biofilma:
- Corning® Costar® 3596 96-vdolbina prozorna plošča z ravnim dnom: Ta plošča se pogosto uporablja zaradi visoke optične jasnosti, kar je koristno za slikanje in spektrofotometrične teste.
- Nunc™ MicroWell™ 96-jamične plošče: Te plošče so znane po svojih enakomernih dimenzijah vdolbinice in visoki optični jasnosti. Na voljo so v različnih površinskih obdelavah za podporo različnim vrstam celičnih kultur.
- Mikroplošča Greiner Bio-One CELLSTAR® 96-jamic: Ta plošča se pogosto uporablja za študije biofilma zaradi svoje dosledne kakovosti in razpoložljivosti v različnih površinskih premazih, kot so površine, obdelane s tkivnimi kulturami ali površine z nizko vezavo.
- Črne / prozorne spodnje plošče s 96 vdolbinicami: Za študije, ki zahtevajo meritve fluorescence ali luminiscence, so idealne črne plošče s prozornim dnom (npr. Corning® 3603), saj zmanjšujejo preslušavanje med vdolbinami in izboljšujejo zaznavanje signala.
- Hidrofobne ali hidrofilno prevlečene plošče: Odvisno od narave biofilma in mikroorganizma so lahko koristne plošče s posebnimi premazi, ki spodbujajo ali zavirajo adhezijo. Na primer, hidrofobne plošče so lahko primerne za biofilme, ki jih tvorijo nekatere bakterije.
- Plošče, specifične za biofilm: Nekateri proizvajalci ponujajo plošče, posebej zasnovane za raziskave biofilma. Te plošče imajo pogosto izboljšane površinske lastnosti, ki spodbujajo tvorbo biofilma in so optimizirane za teste biofilma.
Pri izbiri 96-jamične plošče za študije biofilma upoštevajte naslednja merila:
- Obdelava materialov in površin: Izberite material plošče in površinsko obdelavo, ki podpira oprijem in rast mikroorganizmov, ki tvorijo biofilm, ki jih preučujete.
Optična jasnost: Pri testih, ki vključujejo optične meritve, zagotovite, da ima plošča visoko optično jasnost. - Oblikovanje vodnjaka: Upoštevajte obliko in globino vdolbinic, ki lahko vplivajo na rast biofilma in učinkovitost nadaljnjih zdravljenj ali meritev.
- Združljivost z opremo: Prepričajte se, da je plošča združljiva z vašim sonikatorjem, inkubatorjem in katero koli drugo opremo, ki se uporablja v vaši študiji. Hielscher sonicator z več vdolbicami je združljiv z vsemi standardnimi mikrotitrskimi in večjamičnimi ploščami.
Konec koncev bo najboljša izbira odvisna od posebnih zahtev vaših raziskav biofilma in značilnosti vključenih mikroorganizmov.
Kateri so tipični testi biofilma, ki se uporabljajo v raziskavah?
V raziskavah in diagnostiki se za raziskovanje in razvrščanje biofilmov uporabljajo različne vrste testov. Sonication je pogost korak priprave vzorca za odstranitev biofilma iz trdnega substrata, zaradi česar je biofilm na voljo za teste in analizo.
- Kristalno vijolično obarvanje:
Namen: Količinsko opredeljuje celotno biomaso biofilma.
Metoda: Biofilmi se obarvajo s kristalno vijoličnim barvilom, barvilo pa se nato raztopi in izmeri spektrofotometrično.
Uporaba: Uporablja se za oceno nastajanja biofilma in učinkov protimikrobnih sredstev. - Štetje uspešnih celic (test CFU):
Namen: Določa število živih biofilmskih celic.
Metoda: Izločene biofilmske celice se serijsko razredčijo in prenesejo na agar, da se preštejejo enote, ki tvorijo kolonije (CFU).
Uporaba: Ocenjuje sposobnost preživetja celic biofilma in protimikrobno učinkovitost. - ATP bioluminiscenca:
Namen: Meri presnovno aktivnost celic biofilma.
Metoda: Ravni ATP se kvantificirajo z uporabo bioluminiscenčnega testa.
Uporaba: Označuje sposobnost preživetja biofilma in presnovno stanje. - Redukcijski test XTT:
Namen: Oceni celično presnovno aktivnost.
Metoda: XTT reagent se reducira s metabolično aktivnimi celicami, da tvori barvni formazanski produkt, ki je kvantificiran spektrofotometrično.
Uporaba: Uporablja se za ocenjevanje sposobnosti preživetja celic biofilma in učinka zdravljenja. - Mikroskopska analiza:
Namen: Vizualizira strukturo in sestavo biofilma.
Metoda: Tehnike vključujejo svetlobno mikroskopijo, konfokalno lasersko vrstično mikroskopijo (CLSM) in vrstično elektronsko mikroskopijo (SEM).
Uporaba: Zagotavlja podroben vpogled v arhitekturo biofilma, distribucijo in učinke zdravljenja. - Ekstrakcija DNA, RNA in beljakovin:
Namen: Analizira genetske in proteomske profile biofilmskih celic.
Metoda: Celice biofilma se lizirajo za ekstrakcijo nukleinskih kislin in beljakovin za analizo v nadaljnjem toku (npr. PCR, qPCR, sekvenciranje, proteomika).
Uporaba: Preučuje izražanje genov, gensko raznolikost in izražanje beljakovin v biofilmih. - Preskusi zaviranja in izkoreninjenja biofilma:
Namen: Preverja spojine glede njihove sposobnosti preprečevanja nastajanja biofilma ali izkoreninjenja uveljavljenih biofilmov.
Metoda: Biofilmi se obdelajo s potencialnimi sredstvi proti biofilmu, motnje pa se ocenijo z zgoraj navedenimi testi.
Uporaba: Odkrivanje zdravil in razvoj anti-biofilmskih terapij.
Hielscher Ultrasonics proizvaja visoko zmogljive ultrazvočne homogenizatorje iz laboratorij k industrijska velikost.