Ultrazvuková extrakcia rias na výrobu výživových doplnkov
Ultrazvuková extrakcia je najlepšou metódou na účinné a rýchle narušenie buniek rias. Sonikácia môže uvoľniť celé množstvo bioaktívnych zlúčenín, vďaka čomu je ultrazvuková technika vysoko účinná.
Ako extrahovať bielkoviny, lipidy a fenolové zlúčeniny z rias pomocou ultrazvuku
Druhy rias a mikrorias sú bohaté na biologicky aktívne zlúčeniny, ako sú bielkoviny, lipidy, karotenoidy, pigmenty (napr. fykocyaníny, astaxantín atď.), fenolové zlúčeniny a polysacharidy (napr. karagénany). Vďaka tomu sú široko používanou prírodnou surovinou na výrobu extraktov do potravín a výživových doplnkov. Medzi druhy rias bežne používané na výrobu výživových doplnkov patria Arthrospira maxima (známa aj ako spirulina), Chlorella vulgaris, Haematococcus pluvialis a Ulva spp. Riasy sú známe ako dobrý zdroj vysokokvalitných bielkovín, lipidov, polynenasýtených mastných kyselín s dlhým reťazcom (PUFA, t. j. omega-3), polysacharidov (napr. alginátu, karagénanu, β-glukánov), vitamínov a antioxidantov.
Spirulina je bežne používaný typ riasy, ktorý je bohatý na vysoko hodnotné bioaktívne zlúčeniny, ako sú bielkoviny (s obsahom 50–70% v sušine). Keďže FDA (Úrad pre potraviny a liečivá Spojených štátov amerických) schválil spirulinu ako GRAS (všeobecne uznávanú za bezpečnú), spirulina a extrakty zo spiruliny sa môžu používať v komerčne predávaných potravinách alebo ako výživové doplnky.
Výhody ultrazvukovej extrakcie rias
Ultrazvuková extrakcia prekonáva alternatívne extrakčné metódy v mnohých ohľadoch, ako sú vysoká výťažnosť, spoľahlivosť, bezpečnosť, jednoduchosť a šetrnosť k životnému prostrediu.
Úplná extrakčná výťažnosť
Vysokovýkonné ultrazvukové prístroje rozrušujú a narúšajú bunky rias tak, že sa uvoľní vnútrobunkový materiál. Ultrazvuková extrakcia tým uvoľňuje celé spektrum bioaktívnych zlúčenín, ako sú fykobiliproteíny, karotenoidy, lipidy a fenolové zlúčeniny.
Fykobiliproteíny možno rozdeliť do troch hlavných skupín, a to na chlórofykocyaníny, alofykocyaníny a fykoerytríny. C-fykocyanín je prírodný modrý pigment, ktorý sa široko používa v potravinách a farmaceutických výrobkoch. Ultrazvuková extrakcia uvoľňuje celé spektrum bielkovín.
SonoStation – ultrazvukový systém s 2x 2kW ultrazvukovými prístrojmi, miešanou nádržou a čerpadlom – je používateľsky prívetivý systém na extrakciu.
Vysoká účinnosť extrakcie
Duangsee a kol. (2009) testovali dve rôzne metódy extrakcie bioaktívnych zlúčenín z biomasy Arthospira (ultrazvukom podporovanú extrakciu rozpúšťadlom a extrakciu opakovaným zmrazovaním a rozmrazovaním) a zistili, že ultrazvuková extrakcia rozpúšťadlom dosiahla vyššiu účinnosť extrakcie (22,1%) než zmrazovanie a rozmrazovanie (15,6%). Porovnanie rozrušenia buniek pri sonikácii a opakovanom zmrazovaní a rozmrazovaní ukazuje, že sonikácia je účinnejšia. Ultrazvuková kavitácia narúša bunky rias rýchlo a účinne, čo vedie k vyššej miere narušenia buniek v porovnaní s bunkami spiruliny ošetrenými opakovaným zmrazovaním a rozmrazovaním.
Sonikácia bola pri rozrušovaní bunkového obalu účinnejšia než opakované zmrazovanie a rozmrazovanie. Extrakčná výťažnosť fykocyanínu ukázala, že teplota spracovania ovplyvňovala účinnosť extrakcie.
Rýchly extrakčný proces
Vysokovýkonné ultrazvukové systémy môžu prostredníctvom vysokých amplitúd vnášať do suspenzie rias vysoký ultrazvukový výkon. Vďaka tomu je ultrazvuková extrakcia veľmi rýchlou metódou spracovania.
Regulácia teploty
Ultrazvukové spracovanie je netepelná, čisto mechanická extrakčná technika. Teplotu extrakcie možno presne regulovať pomocou pripojiteľného snímača teploty, ktorý je káblom pripojený k digitálnemu ultrazvukovému prístroju Hielscher. Softvér digitálnych ultrazvukových prístrojov Hielscher umožňuje nastaviť teplotné limity, takže ultrazvukový homogenizátor po dosiahnutí teplotného limitu pozastaví činnosť. Presná regulácia teploty umožňuje predchádzať tepelnej degradácii materiálov citlivých na teplo, ako sú fykobiliproteíny, vitamíny, polyfenoly, polysacharidy, lipidy a ďalšie bioaktívne zlúčeniny.
Kompatibilita s rôznymi rozpúšťadlami
Ultrazvukové spracovanie je kompatibilné s takmer akýmkoľvek rozpúšťadlom. Ultrazvuková extrakcia v kombinácii s ekologickými rozpúšťadlami, ako sú voda alebo etanol, poskytuje čisté extrakty. Tieto ultrazvukové extrakty možno bezpečne pridávať do potravín, pretože extrakčné rozpúšťadlá etanol a voda majú status GRAS (všeobecne považované za bezpečné).
Reprodukovateľnosť a štandardizácia procesu
Digitálne sonikátory Hielscher sú vybavené inteligentným softvérom a prepracovanou škálou nastavení na dosiahnutie ideálnych extrakčných parametrov. Softvér zaznamenáva všetky parametre ultrazvukového procesu (napr. amplitúdu, čistý výkon, celkový výkon, teplotu, tlak, čas, dátum) a zapisuje údaje o sonikácii do súboru CSV na zabudovanej karte SD. To vám umožňuje štandardizovať proces extrakcie a dôsledne monitorovať sonikáciu aj kvalitu výstupu. Tieto funkcie vám pomáhajú spĺňať požiadavky na štandardizáciu procesu aj správnu výrobnú prax (GMP), pričom oboje je veľmi dôležité pri výrobe extraktov pre výživové doplnky, potraviny alebo farmaceutické výrobky.
Protokol ultrazvukovej extrakcie fykocyanínu
Mazumder et al. (2017) skúmali optimálne parametre spracovania na ultrazvukovú extrakciu fykocyanínu a fenolových zlúčenín z Arthospira platensis. Maximálny výťažok fykocyanínu (29,9 mg/g) a celkových fenolových zlúčenín (2,4 mg/g) sa dosiahol pri koncentrácii etanolu 40%, extrakčnej teplote 34,9°C, s použitím sonikátora UP50H (50 wattov, 30kHz) pri amplitúde 95% a čase extrakcie 104,7 sekundy.
Vernès et al. (2019) použili sonikátor UIP1000hdT (1000W, 20kHz) na extrakciu bielkovín zo spiruliny. Sonikátor bol vybavený sonotródou BS2d34 a ultrazvukovým prietokovým reaktorom (presná zostava na ultrazvukovú extrakciu s prietokovou celou a čerpadlom Seepex je zobrazená na obrázku nižšie).
UIP1000hdT – zostava na manotermosonikáciu (MTS) a naša extrakcia bielkovín zo spiruliny v laboratórnom meradle
zdroj: Vernes et al. 2019
Výsledky výskumu ukazujú, že podmienky ultrazvukovej extrakcie optimalizované na výťažok bielkovín zahŕňajú mierne zvýšenú teplotu a tlak (takzvaná manotermosonikácia MTS). MTS podporuje prenos hmoty a umožňuje získať o 229% viac bielkovín (28,42 ± 1,15 g/100 g sušiny) než konvenčný proces bez ultrazvuku (8,63 ± 1,15 g/100 g sušiny).
Pri získaní 28,42 g bielkovín v extrakte na 100 g suchej biomasy spiruliny sa v kontinuálnom procese sonikácie dosiahla miera získania bielkovín 50% už za 6 minút. Mikroskopické zobrazovanie odhaľuje, že akustická kavitácia pôsobí na vlákna spiruliny rôznymi mechanizmami, ako sú fragmentácia, sonoporácia a narušenie textúry. Tieto rôzne účinky uľahčujú a zefektívňujú extrakciu, uvoľňovanie a solubilizáciu bioaktívnych zlúčenín spiruliny, čo vedie k vysokému výťažku vysokokvalitných bielkovín.
Pokiaľ ide o kvalitu ultrazvukovo extrahovaných bielkovín, aminokyseliny sa pri ultrazvukovom spracovaní nedegradovali a pri sonikácii sú prítomné vo väčšom množstve než pri konvenčnej extrakcii.
Pri porovnaní manotermosonikácie a ultrazvukovej extrakcie bez zvýšeného tlaku a teploty je rozdiel vo výťažku a účinnosti extrakcie len minimálny. Preto sa samotný ultrazvuk považuje za najhospodárnejšiu a najjednoduchšiu techniku na výrobu vysokokvalitného extraktu bohatého na bielkoviny spiruliny. Ultrazvuková extrakcia je ekologická extrakčná technika šetrná k životnému prostrediu, vhodná na extrakciu bielkovín zo spiruliny v laboratórnom meradle, ktorú možno ľahko preniesť do poloprevádzkového a priemyselného meradla. (porov. Vernès et al. 2019)
UP400St na ultrazvukovú extrakciu rias v dávke s objemom 8L
Vysokovýkonné ultrazvukové extraktory
Všetky výsledky extrakcie dosiahnuté v malom meradle možno lineárne preniesť na väčšie výrobné kapacity. Rozsiahle produktové portfólio spoločnosti Hielscher Ultrasonics, od laboratórnych až po priemyselné extrakčné systémy, ponúka najvhodnejší ultrazvukový prístroj pre plánovanú kapacitu vášho procesu. Naši pracovníci s dlhoročnými skúsenosťami vám pomôžu od skúšok uskutočniteľnosti a optimalizácie procesu až po inštaláciu vášho ultrazvukového systému v konečnej výrobnej prevádzke.
Hielscher Ultrasonics – Sofistikované extrakčné zariadenia
Produktové portfólio spoločnosti Hielscher Ultrasonics pokrýva celý rozsah vysokovýkonných ultrazvukových extraktorov od malého až po veľké meradlo. Doplnkové príslušenstvo umožňuje jednoducho zostaviť najvhodnejšiu konfiguráciu ultrazvukového zariadenia pre váš proces. Optimálna ultrazvuková zostava závisí od plánovanej kapacity, objemu, suroviny, vsádzkového alebo prietokového procesu a časového harmonogramu. Robustnosť ultrazvukových zariadení Hielscher umožňuje prevádzku 24/7 pri vysokom zaťažení a v náročných prostrediach. Lineárna škálovateľnosť ultrazvukových extrakčných procesov umožňuje jednoduché a spoľahlivé zvýšenie výroby. Prečítajte si viac o lineárnom zväčšovaní meradla ultrazvukových extrakčných procesov!
Vyberte si z rozmanitého príslušenstva, ako sú:
- sonotródy rôznych veľkostí, priemerov a tvarov
- sonotródy pre vysoké amplitúdy 200µm a vyššie
- reaktory s prietokovými celami rôznych objemov a geometrií
- početné zosilňovacie nadstavce na zvýšenie alebo zníženie zosilnenia amplitúdy
- kompletné sonikačné zostavy, ako je SonoStation, ktoré zahŕňajú ultrazvukový extraktor, nádrž, miešadlo a čerpadlo
- pripojiteľné snímače teploty
- pripojiteľné snímače tlaku
Naši dôkladne vyškolení pracovníci s dlhoročnými skúsenosťami vám poradia a odporučia najvhodnejší ultrazvukový systém podľa požiadaviek vášho extrakčného procesu!
Nasledujúca tabuľka poskytuje prehľad o približnej spracovateľskej kapacite našich ultrazvukových prístrojov:
| Objem vsádzky | Prietok | Odporúčané zariadenia |
|---|---|---|
| 1 až 500mL | 10 až 200mL/min | UP100H |
| 10 až 2000mL | 20 až 400mL/min | UP200Ht, UP400St |
| 0,1 až 20L | 0,2 až 4L/min | UIP2000hdT |
| 10 až 100L | 2 až 10L/min | UIP4000hdT |
| n.a. | 10 až 100L/min | UIP16000 |
| n.a. | vyšší | zoskupenie zariadení UIP16000 |
Kontaktujte nás! / Opýtajte sa nás!
Vysokovýkonné ultrazvukové homogenizátory v laboratórnom až poloprevádzkovom a priemyselnom meradle.
Literatúra / Referencie
- Anupriya Mazumder; P. Prabuthas; Hari Niwas Mishra (2017): Optimization of ultrasound-assisted solvent extraction of phycocyanin and phenolics from Arthospira platensis var. ‚lonor‘ biomass. Nutrafoods (2017) 16:231-239.
- Vernès L., Abert-Vian M., El Maâtaoui M., Tao Y., Bornard I., Chemat F. (2019): Application of ultrasound for green extraction of proteins from spirulina. Mechanism, optimization, modeling, and industrial prospects. Ultrasonics Sonochemistry 54, 2019. 48-60.
- Merlyn Sujatha Rajakumar and Karuppan Muthukumar (2018): Influence of pre-soaking conditions on ultrasonic extraction of Spirulina platensis proteins and its recovery using aqueous biphasic system. Separation Science and Technology 2018.
- Smriti Kana Pyne, Paramita Bhattacharjee, Prem Prakash Srivastav (2020): Process optimization of ultrasonication-assisted extraction to obtain antioxidant-rich extract from Spirulina platensis. Sustainability, Agri, Food and Environmental Research 8(4), 2020.
- Zhou, Jianjun; Min Wang, Francisco J. Barba, Zhenzhou Zhu, Nabil Grimi (2023):
A combined ultrasound + membrane ultrafiltration (USN-UF) process for enhancing saccharides separation from Spirulina (Arthrospira platensis). Innovative Food Science & Emerging Technologies, Volume 85, 2023. - Rachen Duangsee, Natapas Phoopat, Suwayd Ningsanond (2009): Phycocyanin extraction from Spirulina platensis and extract stability under various pH and temperature. Asian Journal of Food and Agro-Industry 2009, 2(04), 819-826.
Užitočné fakty
Čo je spirulina?
Spirulina, ktorá je prokaryotickou baktériou, je bohatá na pigmenty, ako sú karotenoidy, chlorofyl a fykocyanín. Karotenoidy (napr. β-karotén, oranžovožltý pigment), chlorofyl a fykocyanín sa v sušine nachádzajú v množstvách 0,4, 1,0 a 14% v uvedenom poradí. Fykocyanín je modrozelený proteín, takzvaný biliproteín, ktorý sa nachádza vo fotosyntetických lamelách v cytoplazmatickej membráne siníc.
Používa sa ako prídavná látka do potravín a potravinárske farbivo, výživový doplnok a na imunodiagnostické aplikácie.
Ako sa sonikácia využíva pri spracovaní rias?
Ultrazvukové spracovanie uľahčuje zber rias podporou sedimentácie. Pri sonikácii biomasy rias sa plynové vakuoly vnútri buniek rias, ktoré podporujú flotáciu rias, narušia a vyprázdnia. Po odstránení plynu z vakuol bunky rias sedimentujú na dne, čo uľahčuje zahusťovanie a oddeľovanie biomasy rias. Prečítajte si viac o ultrazvukovom zbere rias!
V nasledujúcom kroku procesu je sonikácia zavedenou a vysoko účinnou technikou na extrakciu živín a bioaktívnych zlúčenín z rias. Prečítajte si viac o ultrazvukovej extrakcii rias!