α-synukleínové fibrily a pásky sú fragmentované vo vedeckom výskume na generovanie menších fibrilových útržkov alebo dokonca jednotlivých proteínových molekúl, ktoré je možné ľahšie analyzovať pomocou rôznych experimentálnych techník. VialTweeter Sonicator je jedným z najčastejšie používaných ultrasonicators pre efektívnu a spoľahlivú fragmentáciu alfa-synukleínu.

α-synukleín vo výskume

Alfa-synukleínové fibrily sú proteínové agregáty, ktoré sú silne spojené s neurodegeneratívnymi poruchami, ako je Parkinsonova choroba a určité formy demencie, vrátane demencie s Lewyho telieskami. Výskum zameraný na alfa-synukleínové fibrily má za cieľ pochopiť ich úlohu v progresii ochorenia a vyvinúť potenciálne terapeutické intervencie. Rozdelením alfa-synukleínových fibríl na menšie fragmenty môžu výskumníci preskúmať ich špecifické štrukturálne vlastnosti. Napríklad fragmentácia alfa-synukleínových fibríl umožňuje výskumníkom skúmať ich interakcie s inými molekulami, ako sú proteíny, lipidy alebo malé molekuly. Produkciou menších fragmentov je možné efektívnejšie skúmať väzbové miesta a afinitu k týmto interagujúcim partnerom. Menšie α-Syn fribrily a stuhy môžu tiež vykazovať zmenenú toxicitu a biochemické účinky. Preto je rozhodujúca spoľahlivá a účinná technika fragmentácie, ktorá poskytuje reprodukovateľné výsledky pri rýchlom a jednoduchom spracovaní vzoriek.
Ultrazvuková alfa-syn fragmentácia: VialTweeter sonicator je zavedený ultrazvukový systém prípravy vzoriek, ktorý sonikuje až 10 injekčných liekoviek súčasne za presne rovnakých podmienok. Programovateľné nastavenia umožňujú jednoduché a rýchle opakovanie rovnakých experimentov, čo poskytuje vysoko spoľahlivé a reprodukovateľné výsledky pri fragmentácii alfa-synukleínových fibríl.

Príprava vzorky α-Synuclein so ultrazvukom

Jeden prístup k štúdiu alfa-synukleínových fibríl zahŕňa ich extrakciu a fragmentáciu pomocou techník, ako je ultrazvukom. Sonikácia je proces, ktorý využíva vysoko intenzívne, nízkofrekvenčné ultrazvukové vlny na narušenie a rozklad proteínových agregátov, čo vedie k uvoľneniu menších fibríl alebo jednotlivých proteínových molekúl. Sonicator VialTweeter je bežne používané zariadenie vo výskumných štúdiách súvisiacich s α-synuclein na tento účel.

Početné výskumné štúdie popisujú presné protokoly prípravy vzoriek ultrazvukom alfa-synukleínových fibríl, ktoré používajú Hielscher VialTweeter pre efektívnu a spoľahlivú fragmentáciu fibríl α-synukleínu. Fragmentáciou fibríl ultrazvukom, výskumníci môžu analyzovať výsledné produkty a preskúmať ich štruktúru, toxicitu a interakcie s inými molekulami. Tento výskum poskytuje dôležité poznatky o mechanizmoch, ktoré sú základom neurodegenerácie a potenciálne identifikuje nové terapeutické ciele. Dobre zavedené protokoly ultrazvukom α-synuclein pomocou ultrazvukom VialTweeter umožňujú spoľahlivé a reprodukovateľné výsledky.

Horné obrázky: nefragmentované alfa-synukleínové fibrily
Nižšie obrázky: Ultrazvukovo fragmentované alfa-synukleínové fibrily s ultrazvukom VialTweeter
(štúdia a obrázky: ©Dieriks et al., 2022)

Ultrazvuková fragmentácia α-synukleínových fibríl – Protokoly

Vzhľadom k tomu, mnohí výskumníci používajú VialTweeter sonicator ako preferovanú fragmentačnú techniku fragmentácie na výrobu jednotných fragmentov fibríl α-synuclein, zavedené protokoly sú ľahko dostupné. Nižšie nájdete niekoľko príkladných fragmentačných protokolov.
 

 
Prípravok semien ClearTau: Fibrily ClearTau boli zriedené na 10 μM v dH2O a sonikované pri 70% amplitúde po dobu 50 s s 1 s ON 1 s OFF cyklus v tube pomocou sonicator UP200St s VialTweeter. Semená boli charakterizované elektrónovou mikroskopiou.
Meranie fluorescencie ThS: Fibrily ClearTau boli zriedené na 2,5 μM v dH2O a sonikované pri 70% amplitúde po dobu 50 s 1 s ON 1 s OFF cyklom v tube pomocou UP200St s VialTweeter. Ako kontrola bol použitý monomér Tau 4R2N s plnou dĺžkou 2,5 μM. K reakcii 100 μl sa pridalo 100 μl ThS (10 μM), čím sa získali konečné koncentrácie proteínov 1,25 μM. Fluorescencia ThS s jedným časovým bodom bola meraná pomocou 96 dobre čírych spodných dosiek umiestnených v čítačke mikrodoštičiek FLUOstar Omega s excitáciou pri 445 nm a emisiou pri 485 nm.
(porov. Limorenko et al., 2023)
 
Jednotná α-synukleínová dĺžka pomocou ultrazvukom: Dĺžková heterogenita α-syn fibríl a pások bola znížená ultrazvukom po dobu 20 minút na ľade v 2-ml skúmavkách Eppendorf v VialTweeter nastavenom na 75% amplitúdu, 0,5 s impulzy.
(porov. Bousset et al., 2013)
 
Bola vykonaná kontrola kvality ľudského rekombinantného monomérneho WT alebo S129A a-Syn a fibrilárnych polymorfov, ktoré generujú, ako aj kvality a-Syn 1–110. Následne boli fibrilárne polymorfy fragmentované ultrazvukom po dobu 20 minút v 2-ml Eppendorfových trubiciach v ultrazvuku VialTweeter na generovanie fibrilárnych častíc s priemernou veľkosťou 42–52 nm, ktoré sú vhodné na endocytózu.
(porov. Shrivastava et al., 2020)
 

Charakterizácia piatich fibrilárnych α-Syn polymorfov. (A) Sú znázornené transmisné elektrónové mikrosnímky negatívne zafarbených fibrilárnych polymorfov α-Syn fibrilárnych polymorfov, pások, fibríl-91, fibríl-65 a fibríl-110 pred (horný pruh) a po fragmentácii VialTweeterom (dolný pruh). (B) Znázornená je distribúcia dĺžok fragmentovaných fibrilárnych polymorfov. Je uvedený počet (n) fibrilárnych zostáv, z ktorých boli histogramy odvodené.
(štúdia a obrázky: Shrivastava et al., 2020)

 
α-Syn fibrily boli fragmentované ultrazvukom po dobu 20 minút v 2 ml Eppendorfových skúmavkách vo VialTweeteri na generovanie fibrilárnych častíc s priemernou veľkosťou 42–52 nm podľa TEM analýzy.
(porov. Negrini et al., 2022)
 
Resuspendované fibrily91 (v PBS) boli fragmentované pred pridaním do bunkových kultúr ultrazvukom po dobu 20 minút v 2 ml skúmaviek Eppendorf pomocou Sonicator injekčnej fľaštičky Tweeter, alikvotné, bleskovo zmrazené v tekutom dusíku a skladované až do použitia pri teplote -80 ̊C.
(porov. Vajhøj et al., 2021)
 

VialTweeter a laboratórne ultrazvukom pre fragmentáciu α-syn

Hielscher Ultrasonics je celosvetovo uznávaný ako popredný výrobca špičkových ultrasonicators. Dôveryhodné a zavedené vo veľkých výskumných laboratóriách po celom svete, naše ultrasonicators ponúkajú bezkonkurenčnú kvalitu a výkon pre vaše kritické experimenty.
S Hielscher VialTweeter a akýkoľvek iný Hielscher sonicator, zažijete bezkonkurenčný užívateľský komfort, pretože sú premyslene navrhnuté pre reprodukovateľné výsledky, jednoduché použitie a bezproblémovú prevádzku. S funkciami automatického zaznamenávania údajov sa môžete sústrediť na svoj výskum, zatiaľ čo naši ultrasonicators starostlivo zaznamenávajú kľúčové údaje pre reprodukovateľnosť a presnosť.
Dosiahnite konzistentné a reprodukovateľné výsledky s istotou!
Naše ultrasonicators sú navrhnuté a vyrobené v Nemecku. Nemecká presnosť a najvyššia inžinierska kvalita na zabezpečenie spoľahlivej a presnej prípravy vzoriek, ako je fragmentácia alfa-synukleínových fibríl zakaždým. Už sa nemusíte obávať nekonzistentných výsledkov - naša ultrazvuková technológia zabezpečuje, že váš výskum zostane v popredí vedeckého pokroku.
Ale to nie je všetko! Náš záväzok k dokonalosti presahuje rámec našich produktov. Sme hrdí na náš výnimočný zákaznícky servis a poskytujeme odbornú podporu pri riešení akýchkoľvek otázok alebo obáv, ktoré môžete mať. Náš špecializovaný tím je tu, aby vám pomohol na každom kroku vašej výskumnej cesty a zabezpečil, že z našich ultrasonicators vyťažíte maximum.
Vyberte si inováciu, spoľahlivosť a výnimočné užívateľské skúsenosti - vyberte si naše laboratórne ultrazvukom, ako je VialTweeter pre fragmentáciu alfa-synukleínových fibríl. Využite výhody už zavedených protokolov a pridajte sa k radom popredných výskumníkov, ktorí dôverujú našej technológii pri svojich kritických štúdiách. Pozdvihnite svoj výskum a preskúmajte nové hranice vo výskume demencie a neurodegeneratívnych ochorení s našimi najmodernejšími ultrasonicators.

Dizajn, výroba a poradenstvo – Kvalita vyrobená v Nemecku

Hielscher ultrasonicators sú známe svojimi najvyššími štandardmi kvality a dizajnu. Robustnosť a jednoduchá obsluha umožňujú hladkú integráciu našich ultrazvukových prístrojov do priemyselných zariadení. Drsné podmienky a náročné prostredia ľahko zvládajú ultrazvukové prístroje Hielscher.

Hielscher Ultrasonics je ISO certifikovaná spoločnosť a kladie osobitný dôraz na vysoko výkonné ultrasonicators s najmodernejšou technológiou a užívateľskou prívetivosťou. Samozrejme, Hielscher sonicators sú v súlade s CE a spĺňajú požiadavky UL, CSA a RoHs.
 
Nasledujúca tabuľka vám poskytuje informácie o približnej kapacite spracovania našich ultrazvukových prístrojov laboratórnej veľkosti: