Буферные растворы, приготовленные с помощью обработки ультразвуком

Лизирующие буферы можно эффективно и быстро приготовить с помощью ультразвуковых гомогенизаторов тканей. Поскольку ультразвуковые аппараты идеально подходят для смешивания, растворения и диспергирования, они обеспечивают надежное и удобное приготовление лизирующих буферов.

Приготовление лизирующих буферов с помощью ультразвука

Ультразвуковые гомогенизаторы тканей широко применяются для разрушения клеток, лизиса и экстракции, поэтому они имеются в большинстве лабораторий. Дополнительное применение ультразвуковых аппаратов зондового типа – приготовление лизирующих буферов.

Лизирующий буфер – это раствор, используемый для разрушения (лизиса) клеток и высвобождения их содержимого для последующего анализа. Конкретный состав лизирующего буфера может различаться в зависимости от типа лизируемых клеток и последующего применения. Однако типичный лизирующий буфер содержит такие компоненты, как детергенты, соли и ингибиторы протеаз. Буферные соли (например, Tris-HCl) и ионные соли (например, NaCl) обычно используются для регулирования pH и осмолярности лизата.
Для приготовления лизирующего буфера компоненты смешивают в соответствующих концентрациях и при соответствующем pH. Смесь обычно перемешивают или встряхивают до растворения компонентов и получения однородного раствора.
Ультразвуковая гомогенизация – это метод, который может помочь приготовить качественный лизирующий буфер за счет улучшения смешивания и растворения компонентов. При этом методе на смесь воздействуют ультразвуковыми волнами – обычно в диапазоне от 20 до 30 kHz, – что приводит к образованию кавитационных пузырьков, которые схлопываются и генерируют интенсивную локальную энергию, вызывая механический сдвиг и смешивание компонентов.
Процесс ультразвуковой гомогенизации может способствовать разрушению любых комков или агрегатов компонентов и обеспечивать равномерное смешивание раствора. Следовательно, такой улучшенный лизирующий буфер может обеспечивать более эффективное разрушение клеток и более высокий выход извлекаемого материала. Кроме того, ультразвуковая гомогенизация может сократить время, необходимое для приготовления лизирующего буфера, по сравнению с традиционными методами перемешивания или встряхивания.
В целом ультразвуковая гомогенизация является мощным инструментом для повышения качества и эффективности приготовления лизирующего буфера.

Протокол приготовления лизирующего буфера с помощью ультразвука

Это общий протокол приготовления лизирующего буфера с помощью ультразвукового аппарата зондового типа:
 
Материалы:

• Выбранный детергент или детергенты (например, Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Выбранная соль или соли (например, NaCl, KCl)
• Ингибиторы протеаз (например, PMSF, апротинин, лейпептин)
• Ультразвуковой аппарат
• Мешалка
• Деионизированная вода
• pH-метр или индикаторные полоски для измерения pH

 
 
Пошаговые инструкции:

1. Определите состав лизирующего буфера исходя из клеток или ткани, которые вы будете лизировать, и последующих применений лизата. Приготовьте исходные растворы детергентов, солей и ингибиторов протеаз с требуемыми концентрациями.
2. Добавьте исходные растворы детергентов, солей и ингибиторов протеаз в лабораторный стакан или колбу.
3. Добавьте деионизированную воду, чтобы довести объем буфера до требуемого значения.
4. Смешайте компоненты с помощью мешалки, чтобы получить предварительно смешанный раствор.
5. Измерьте pH буфера с помощью pH-метра или индикаторных полосок для измерения pH и при необходимости скорректируйте pH небольшими количествами кислоты или основания.
6. Используйте ультразвуковой аппарат зондового типа для гомогенизации предварительно смешанного раствора, чтобы получить раствор с высокой степенью однородности. Для этого обрабатывайте раствор ультразвуком в течение нескольких секунд, пока он не будет тщательно перемешан и все комки или агрегаты не будут разрушены. Продолжительность и мощность обработки ультразвуком можно оптимизировать с учетом конкретного лизирующего буфера и используемого ультразвукового аппарата.
7. После обработки ультразвуком повторно измерьте pH буфера и при необходимости скорректируйте его.
8. Пропустите буфер через фильтр с размером пор 0,2 микрона, чтобы удалить любые остатки или агрегаты, которые могли образоваться во время обработки ультразвуком.
9. Теперь лизирующий буфер готов к использованию.

 
Примечание: точный состав и pH лизирующего буфера могут различаться в зависимости от лизируемых клеток или ткани и последующих применений. Приведенный выше протокол представляет собой общее руководство и может потребовать оптимизации для конкретных применений.
 
Ультразвуковые гомогенизаторы широко используются для разрушения клеток и экстракции внутриклеточных молекул. Поэтому во многих процессах лизиса обработка ультразвуком с помощью зонда применяется не только для приготовления лизирующего буфера, но и для механического разрушения клеток и экстракции.
Это делает ультразвуковые гомогенизаторы тканей универсальным инструментом для лабораторий и объясняет широкое применение ультразвуковых аппаратов в микробиологии, биотехнологии и науках о жизни.

Ультразвуковые лабораторные гомогенизаторы

Hielscher Ultrasonics производит и поставляет ультразвуковые гомогенизаторы и зонды (сонотроды) с различными номинальными мощностями и для различных объемов образцов. Это позволяет нам предложить вам наиболее подходящий ультразвуковой аппарат для разрушения клеток при подготовке ваших образцов. Мы уделяем особое внимание высочайшему качеству, исключительному удобству использования и надежным результатам обработки ультразвуком. Все цифровые ультразвуковые аппараты оснащены интеллектуальным программным обеспечением, функциями программирования и предварительной настройки протоколов обработки ультразвуком, дистанционного управления через браузер, контроля температуры, подсветки образцов, а также автоматической записи данных на встроенную SD-карту.

Проектирование, производство и консультирование – качество, произведенное в Германии

Ультразвуковые аппараты Hielscher хорошо известны высочайшими стандартами качества и проектирования. Прочность и простота эксплуатации позволяют без труда интегрировать наши ультразвуковые аппараты в промышленные установки. Ультразвуковые аппараты Hielscher легко справляются с суровыми условиями и сложными эксплуатационными средами.

Hielscher Ultrasonics – компания, сертифицированная по ISO, которая уделяет особое внимание высокопроизводительным ультразвуковым аппаратам, сочетающим передовые технологии и удобство использования. Разумеется, ультразвуковые аппараты Hielscher соответствуют нормам CE и требованиям UL, CSA и RoHs.

В таблице ниже представлен обзор наших различных лабораторных ультразвуковых аппаратов: