Буферные растворы, приготовленные с помощью ультразвука

Буферы для лизиса могут быть эффективно и быстро приготовлены с помощью ультразвуковых гомогенизаторов тканей. Поскольку ультразвуковые аппараты являются инструментом мечты для смешивания, растворения и диспергирования, они позволяют надежно и удобно готовить буферы для лизиса.

Ультразвуковая подготовка лизисных буферов

Ультразвуковые гомогенизаторы тканей являются распространенным инструментом для разрушения клеток, лизиса и экстракции, поэтому доступны в большинстве лабораторий. Вторичным применением ультразвуковых аппаратов зондового типа является получение лизисных буферов.

Буфер для лизиса — это раствор, используемый для вскрытия (лизирования) клеток и высвобождения их содержимого для последующего анализа. Конкретный состав буфера для лизиса может варьироваться в зависимости от типа лизируемых клеток и последующего применения. Тем не менее, типичный буфер для лизиса содержит такие компоненты, как детергенты, соли и ингибиторы протеазы. Буферные соли (например, Tris-HCl) и ионные соли (например, NaCl) обычно используются для регулирования pH и осмолярности лизата.
Чтобы сделать буфер для лизиса, компоненты смешивают вместе в соответствующих концентрациях и pH. Смесь обычно перемешивают или встряхивают до тех пор, пока компоненты не растворятся и раствор не станет однородным.
Ультразвуковая гомогенизация — это метод, который может быть использован для создания хорошего буфера для лизиса за счет улучшения смешивания и растворения компонентов. В этом методе используются ультразвуковые волны – в норме в диапазоне от 20 до 30 кГц – В смесь наносятся кавитационные пузырьки, которые схлопываются и генерируют интенсивную локальную энергию, что приводит к механическому сдвигу и смешиванию компонентов.
Процесс ультразвуковой гомогенизации может помочь разбить любые комки или агрегаты компонентов и обеспечить равномерное перемешивание раствора. Следовательно, такой улучшенный буфер для лизиса может привести к более эффективному разрушению клеток и увеличению выхода экстрагированного материала. Кроме того, ультразвуковая гомогенизация может сократить время, необходимое для создания буфера для лизиса, по сравнению с традиционными методами перемешивания или встряхивания.
В целом, ультразвуковая гомогенизация является мощным инструментом для повышения качества и эффективности приготовления лизисного буфера.

Протокол подготовки буфера для ультразвукового лизиса

Это общий протокол изготовления буфера для лизиса с помощью ультразвукового аппарата зондового типа:
 
Материалы:

• Моющие средства по выбору (например, Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Соль (соли) по выбору (например, NaCl, KCl)
• Ингибиторы протеазы (например, PMSF, апротинин, лейпептин)
• ультразвуковой аппарат
• Мешалка
• Деионизированная вода
• pH-метр или рН-полоски

 
 
Пошаговая инструкция:

1. Определите состав буфера для лизиса в зависимости от клеток или тканей, которые вы будете лизировать, и последующих применений, для которых вы будете использовать лизат. Приготовьте исходные растворы моющих средств, солей и ингибиторов протеазы в нужных концентрациях.
2. Добавьте исходные растворы моющих средств, солей и ингибиторов протеазы в стакан или колбу.
3. Добавьте деионизированную воду, чтобы довести объем до нужного количества буфера.
4. Смешайте компоненты с помощью мешалки для того, чтобы получить раствор для предварительного смешивания.
5. Измерьте pH буфера с помощью pH-метра или полосок для измерения pH и при необходимости отрегулируйте pH с помощью небольшого количества кислоты или основания.
6. Ультразвуковой аппарат зондового типа используется для гомогенизации раствора предварительного смешивания, чтобы получить высокооднородный раствор. Поэтому обрабатывайте раствор ультразвуком в течение нескольких секунд, пока раствор полностью не перемешается и любые комки или агрегаты не будут разрушены. Продолжительность и мощность ультразвуковой обработки могут быть оптимизированы в зависимости от используемого буфера для лизиса и ультразвука.
7. После ультразвукового исследования повторно измерьте pH буфера и при необходимости отрегулируйте.
8. Отфильтруйте буфер через фильтр 0,2 микрона, чтобы удалить любой мусор или агрегаты, которые могли образоваться во время ультразвуковой обработки.
9. Теперь буфер для лизиса готов к использованию.

 
Примечание: Точный состав и pH буфера для лизиса могут варьироваться в зависимости от лизируемых клеток или тканей и последующих применений. Приведенный выше протокол является общим руководством и, возможно, потребуется оптимизировать его для конкретных приложений.
 
Ультразвуковые гомогенизаторы обычно используются для разрушения клеток и экстракции внутриклеточных молекул. Поэтому во многих приложениях для лизиса используется зондовая ультразвук не только для приготовления буфера для лизиса, но и для механического разрушения и экстракции клеток.
Это делает ультразвуковые тканевые гомогенизаторы универсальным инструментом для лабораторий и объясняет широкое использование ультразвуковых аппаратов в микробиологии, биотехнологии и медико-биологических науках.

Ультразвуковые лабораторные гомогенизаторы

Hielscher Ultrasonics производит и поставляет ультразвуковые гомогенизаторы и зонды (сонотроды) с различной мощностью и объемом образца. Это позволяет нам предложить Вам наиболее подходящий ультразвуковой дестабилизатор для Вашей пробоподготовки. Мы ориентируемся на высочайшее качество, высочайший комфорт пользователя и надежные результаты ультразвуковой обработки. Все цифровые ультразвуковые аппараты оснащены интеллектуальным программным обеспечением, программированием и предварительной настройкой протоколов ультразвуковой обработки, дистанционным управлением через браузер, контролем температуры, освещением образцов, а также автоматической записью данных на встроенную SD-карту.

Проектирование, производство и консалтинг – Качество «Сделано в Германии»

Ультразвуковые аппараты Hielscher хорошо известны своими высочайшими стандартами качества и дизайна. Надежность и простота в эксплуатации позволяют без проблем интегрировать наши ультразвуковые аппараты в промышленные объекты. Ультразвуковые аппараты Hielscher легко справляются с суровыми условиями и требовательными условиями окружающей среды.

Hielscher Ultrasonics является компанией, сертифицированной по стандарту ISO, и уделяет особое внимание высокопроизводительным ультразвуковым аппаратам, отличающимся самыми современными технологиями и удобством в использовании. Конечно, ультразвуковые аппараты Hielscher соответствуют требованиям CE и соответствуют требованиям UL, CSA и RoHs.

В таблице ниже представлен обзор наших различных лабораторных ультразвуковых аппаратов: