Буферы для лизиса могут быть эффективно и быстро приготовлены с использованием ультразвуковых гомогенизаторов тканей. Поскольку ультразвуковые аппараты являются инструментом мечты для смешивания, растворения и диспергирования, они позволяют надежно и удобно готовить буферы для лизиса.

Ультразвуковая подготовка лизисных буферов

Ультразвуковые тканевые гомогенизаторы являются распространенным инструментом для разрушения, лизиса и экстракции клеток, поэтому доступны в большинстве лабораторий. Вторичным применением ультразвуковых аппаратов зондового типа является приготовление буферов лизиса.

Буфер лизиса - это раствор, используемый для разрушения (лизиса) клеток и высвобождения их содержимого для последующего анализа. Конкретный состав лизисного буфера может варьироваться в зависимости от типа лизируемых клеток и последующего применения. Однако типичный буфер для лизиса содержит такие компоненты, как моющие средства, соли и ингибиторы протеазы. Буферные соли (например, Tris-HCl) и ионные соли (например, NaCl) обычно используются для регулирования рН и осмолярности лизата.
Чтобы сделать буфер для лизиса, компоненты смешивают вместе в соответствующих концентрациях и рН. Смесь обычно перемешивают или взбалтывают до тех пор, пока компоненты не растворятся и раствор не станет однородным.
Ультразвуковая гомогенизация - это метод, который можно использовать для создания хорошего буфера для лизиса за счет улучшения смешивания и растворения компонентов. В этом методе ультразвуковые волны – обычно в диапазоне от 20 до 30 кГц – наносятся на смесь, которая создает кавитационные пузырьки, которые разрушаются и генерируют интенсивную локальную энергию, что приводит к механическому сдвигу и смешиванию компонентов.
Процесс ультразвуковой гомогенизации может помочь разбить любые комки или агрегаты компонентов и обеспечить равномерное перемешивание раствора. Следовательно, такой улучшенный буфер лизиса может привести к более эффективному разрушению клеток и более высокому выходу экстрагированного материала. Кроме того, ультразвуковая гомогенизация может сократить время, необходимое для создания лизисного буфера по сравнению с традиционными методами перемешивания или встряхивания.
В целом, ультразвуковая гомогенизация является мощным инструментом для повышения качества и эффективности приготовления лизисного буфера.

Протокол приготовления буфера ультразвукового лизиса

Это общий протокол для создания буфера лизиса с использованием ультразвукового аппарата зондового типа:
 
Материалы:

• Моющие средства по выбору (например, Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Соль (соли) по выбору (например, NaCl, KCl)
• Ингибиторы протеазы (например, ПМСФ, апротинин, лейпептин)
• ультразвуковой дезинтегратор
• мешалка
• Деионизированная вода
• рН-метр или рН-полоски

 
 
Пошаговая инструкция:

1. Определите состав буфера лизиса на основе клеток или ткани, для которых вы будете лизировать, и последующих применений, для которых вы будете использовать лизат. Приготовьте исходные растворы моющих средств, солей и ингибиторов протеазы в желаемых концентрациях.
2. Добавьте исходные растворы моющих средств, солей и ингибиторов протеазы в стакан или колбу.
3. Добавьте деионизированную воду, чтобы довести объем до желаемого количества буфера.
4. Смешайте компоненты с помощью мешалки для того, чтобы получить предварительно смешанный раствор.
5. Измерьте рН буфера с помощью рН-метра или рН-полосок и при необходимости отрегулируйте рН с помощью небольшого количества кислоты или основания.
6. Используйте ультразвуковой аппарат зондового типа для гомогенизации предварительно смешанного раствора, чтобы получить высокооднородный раствор. Поэтому обрабатывайте раствор ультразвуком в течение нескольких секунд, пока раствор не будет тщательно перемешан и любые комки или агрегаты не будут разрушены. Продолжительность и мощность обработки ультразвуком могут быть оптимизированы на основе конкретного буфера лизиса и используемого ультразвукового аппарата.
7. После ультразвуковой обработки повторно измерьте рН буфера и отрегулируйте по мере необходимости.
8. Отфильтруйте буфер через 0,2-микронный фильтр, чтобы удалить любой мусор или агрегаты, которые могли образоваться во время обработки ультразвуком.
9. Теперь буфер лизиса готов к использованию.

 
Примечание: Точный состав и рН лизирующего буфера могут варьироваться в зависимости от лизируемых клеток или тканей и последующих применений. Приведенный выше протокол является общим руководством и, возможно, нуждается в оптимизации для конкретных приложений.
 
Ультразвуковые гомогенизаторы обычно используются для разрушения клеток и экстракции внутриклеточных молекул. Поэтому во многих приложениях лизиса используется обработка ультразвуком зондового типа не только для подготовки буфера лизиса, но и для механического разрушения и экстракции клеток.
Это делает ультразвуковые тканевые гомогенизаторы универсальным инструментом для лабораторий и объясняет широкое использование ультразвуковых аппаратов в микробиологии, биотехнологии и науках о жизни.

ультразвуковые лабораторные гомогенизаторы

Hielscher Ultrasonics производит и поставляет ультразвуковые гомогенизаторы и зонды (сонотроды) с различной мощностью и объемами образцов. Это позволяет нам предложить вам наиболее подходящий ультразвуковой разрушитель для вашей пробоподготовки. Мы ориентируемся на высочайшее качество, выдающийся комфорт пользователя и надежные результаты обработки ультразвуком. Все цифровые ультразвуковые аппараты оснащены интеллектуальным программным обеспечением, программированием и предварительной настройкой протоколов обработки ультразвуком, дистанционным управлением браузером, контролем температуры, освещением образца, а также автоматической записью данных на встроенную SD-карту.

Проектирование, производство и консалтинг – Качество Сделано в Германии

Ультразвуковые аппараты Hielscher хорошо известны своим высочайшим качеством и стандартами дизайна. Надежность и простота в эксплуатации обеспечивают плавную интеграцию наших ультразвуковых аппаратов в промышленные объекты. Жесткие условия и требовательные условия легко обрабатываются ультразвуковыми аппаратами Hielscher.

Hielscher Ultrasonics является компанией, сертифицированной ISO, и уделяет особое внимание высокопроизводительным ультразвуковым аппаратам, оснащенным самыми современными технологиями и удобством для пользователя. Конечно, ультразвуковые аппараты Hielscher соответствуют требованиям CE и соответствуют требованиям UL, CSA и RoHs.

The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators: