Ar ultraskaņu sagatavoti buferšķīdumi

Līzes buferšķīdumus var efektīvi un ātri sagatavot, izmantojot ultraskaņas audu homogenizatorus. Tā kā ultraskaņas apstrādes ierīces ir ideāls instruments sajaukšanai, šķīdināšanai un disperģēšanai, tās ļauj uzticami un lietotājam ērti sagatavot līzes buferšķīdumus.

Līzes buferšķīdumu sagatavošana ar ultraskaņu

Ultraskaņas audu homogenizatori ir plaši izmantots instruments šūnu sagraušanai, līzei un ekstrakcijai, tādēļ tie ir pieejami lielākajā daļā laboratoriju. Vēl viens zondes tipa ultraskaņas apstrādes ierīču lietojums ir līzes buferšķīdumu sagatavošana.

Līzes buferšķīdums ir šķīdums, ko izmanto šūnu sagraušanai (lizēšanai) un to satura atbrīvošanai turpmākai analīzei. Līzes buferšķīduma konkrētais sastāvs var atšķirties atkarībā no lizējamo šūnu veida un turpmākā lietojuma. Tomēr tipisks līzes buferšķīdums satur tādas sastāvdaļas kā detergenti, sāļi un proteāžu inhibitori. Buferējošos sāļus (piemēram, Tris-HCl) un jonu sāļus (piemēram, NaCl) parasti izmanto lizāta pH un osmolaritātes regulēšanai.
Lai pagatavotu līzes buferšķīdumu, sastāvdaļas sajauc atbilstošās koncentrācijās un pie atbilstoša pH. Maisījumu parasti maisa vai krata, līdz sastāvdaļas ir izšķīdušas un šķīdums ir viendabīgs.
Ultraskaņas homogenizācija ir metode, kas var palīdzēt pagatavot labu līzes buferšķīdumu, uzlabojot sastāvdaļu sajaukšanos un izšķīšanu. Šajā metodē maisījumu pakļauj ultraskaņas viļņu iedarbībai – parasti diapazonā no 20 līdz 30 kHz –, kas rada kavitācijas burbuļus, kuri sabrūk un rada intensīvu lokālu enerģiju, izraisot mehānisku bīdi un sastāvdaļu sajaukšanos.
Ultraskaņas homogenizācijas process var palīdzēt sašķelt sastāvdaļu salipumus vai agregātus un nodrošināt vienmērīgu šķīduma sajaukšanos. Tādējādi šādi uzlabots līzes buferšķīdums var nodrošināt efektīvāku šūnu sagraušanu un lielāku ekstrahētā materiāla iznākumu. Turklāt ultraskaņas homogenizācija var samazināt līzes buferšķīduma pagatavošanai nepieciešamo laiku salīdzinājumā ar tradicionālajām maisīšanas vai kratīšanas metodēm.
Kopumā ultraskaņas homogenizācija ir iedarbīgs instruments līzes buferšķīdumu sagatavošanas kvalitātes un efektivitātes uzlabošanai.

Protokols līzes buferšķīduma sagatavošanai ar ultraskaņu

Šis ir vispārīgs protokols līzes buferšķīduma pagatavošanai, izmantojot zondes tipa ultraskaņas apstrādes ierīci:
 
Materiāli:

• Izvēlētais detergents vai detergenti (piemēram, Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Izvēlētais sāls vai sāļi (piemēram, NaCl, KCl)
• Proteāžu inhibitori (piemēram, PMSF, aprotinīns, leipeptīns)
• Ultraskaņas apstrādes ierīce
• Maisītājs
• Dejonizēts ūdens
• pH metrs vai pH teststrēmeles

 
 
Soli pa solim izpildāmi norādījumi:

1. Nosakiet līzes buferšķīduma sastāvu, ņemot vērā šūnas vai audus, kurus lizēsiet, un turpmākos lietojumus, kuriem izmantosiet lizātu. Sagatavojiet detergentu, sāļu un proteāžu inhibitoru izejšķīdumus vēlamajās koncentrācijās.
2. Ielejiet detergentu, sāļu un proteāžu inhibitoru izejšķīdumus vārglāzē vai kolbā.
3. Pievienojiet dejonizētu ūdeni, lai iegūtu vēlamo buferšķīduma tilpumu.
4. Sajauciet sastāvdaļas ar maisītāju, lai iegūtu iepriekš sajauktu šķīdumu.
5. Izmēriet buferšķīduma pH ar pH metru vai pH teststrēmelēm un pēc vajadzības koriģējiet pH ar nelielu daudzumu skābes vai bāzes.
6. Izmantojiet zondes tipa ultraskaņas apstrādes ierīci, lai homogenizētu iepriekš sajaukto šķīdumu un iegūtu ļoti viendabīgu šķīdumu. Šim nolūkam apstrādājiet šķīdumu ar ultraskaņu dažas sekundes, līdz šķīdums ir rūpīgi sajaukts un visi salipumi vai agregāti ir sašķelti. Apstrādes ar ultraskaņu ilgumu un jaudu var optimizēt atkarībā no konkrētā līzes buferšķīduma un izmantotās ultraskaņas apstrādes ierīces.
7. Pēc apstrādes ar ultraskaņu atkārtoti izmēriet buferšķīduma pH un pēc vajadzības to koriģējiet.
8. Filtrējiet buferšķīdumu caur 0,2 mikronu filtru, lai atdalītu visas atliekas vai agregātus, kas varētu būt izveidojušies apstrādes ar ultraskaņu laikā.
9. Līzes buferšķīdums tagad ir gatavs lietošanai.

 
Piezīme: līzes buferšķīduma precīzais sastāvs un pH var atšķirties atkarībā no lizējamām šūnām vai audiem un turpmākajiem lietojumiem. Iepriekš minētais protokols ir vispārīga vadlīnija, un konkrētiem lietojumiem var būt nepieciešama tā optimizācija.
 
Ultraskaņas homogenizatorus plaši izmanto šūnu sagraušanai un intracelulāro molekulu ekstrakcijai. Tādēļ daudzos līzes lietojumos apstrādi ar zondes tipa ultraskaņas ierīci izmanto ne tikai līzes buferšķīduma sagatavošanai, bet arī mehāniskai šūnu sagraušanai un ekstrakcijai.
Tas padara ultraskaņas audu homogenizatorus par daudzpusīgu laboratoriju instrumentu un izskaidro ultraskaņas apstrādes ierīču plašo izmantošanu mikrobioloģijā, biotehnoloģijā un dzīvības zinātnēs.

Laboratorijas ultraskaņas homogenizatori

Hielscher Ultrasonics ražo un piegādā ultraskaņas homogenizatorus un zondes (sonotrodes) ar dažādu nominālo jaudu un dažādiem paraugu tilpumiem. Tas ļauj mums piedāvāt jums vispiemērotāko ultraskaņas šūnu sagraušanas ierīci jūsu paraugu sagatavošanai. Mēs koncentrējamies uz visaugstāko kvalitāti, izcilu lietošanas ērtumu un uzticamiem apstrādes ar ultraskaņu rezultātiem. Visām digitālajām ultraskaņas apstrādes ierīcēm ir vieda programmatūra, apstrādes ar ultraskaņu protokolu programmēšanas un iepriekšējas iestatīšanas iespējas, attālināta vadība pārlūkprogrammā, temperatūras kontrole, paraugu apgaismojums, kā arī automātiska datu ierakstīšana iebūvētā SD kartē.

Projektēšana, ražošana un konsultācijas – Vācijā radīta kvalitāte

Hielscher ultraskaņas apstrādes ierīces ir labi pazīstamas ar visaugstākajiem kvalitātes un projektēšanas standartiem. Izturība un vienkārša lietošana ļauj mūsu ultraskaņas apstrādes ierīces viegli integrēt rūpnieciskajās ražotnēs. Hielscher ultraskaņas apstrādes ierīces viegli tiek galā ar skarbiem apstākļiem un prasīgu vidi.

Hielscher Ultrasonics ir ISO sertificēts uzņēmums un īpašu uzmanību pievērš augstas veiktspējas ultraskaņas apstrādes ierīcēm ar vismodernākajām tehnoloģijām un ērtu lietošanu. Protams, Hielscher ultraskaņas apstrādes ierīces atbilst CE prasībām un izpilda UL, CSA un RoHs prasības.

Tālāk esošajā tabulā sniegts pārskats par mūsu dažādajām laboratorijas ultraskaņas apstrādes ierīcēm: