Līzes buferus var efektīvi un ātri sagatavot, izmantojot ultraskaņas audu homogenizatorus. Tā kā ultrasonikatori ir sapņu līdzeklis sajaukšanai, izšķīdināšanai un izkliedēšanai, tie ļauj droši un lietotājam draudzīgi sagatavot līzes buferus.

Līzes buferu ultraskaņas sagatavošana

Ultraskaņas audu homogenizatori ir kopīgs līdzeklis šūnu darbības traucējumiem, līzei un ekstrakcijai, tāpēc tie ir pieejami lielākajā daļā laboratoriju. Sekundārais pielietojums zondes tipa ultrasonikatoriem ir līzes buferu sagatavošana.

Līzes buferšķīdums ir šķīdums, ko izmanto, lai izjauktu (lizētu) šūnas un atbrīvotu to saturu pakārtotai analīzei. Līzes buferšķīduma specifiskais sastāvs var atšķirties atkarībā no lizējamo šūnu veida un pielietojuma pakārtotajā tirgū. Tomēr tipisks līzes buferis satur tādas sastāvdaļas kā mazgāšanas līdzekļi, sāļi un proteāzes inhibitori. Bufersāļus (piemēram, Tris-HCl) un jonu sāļus (piemēram, NaCl) parasti izmanto, lai regulētu lizāta pH un osmolaritāti.
Lai izveidotu līzes buferšķīdumu, komponentus sajauc kopā atbilstošās koncentrācijās un pH. Maisījumu parasti sajauc vai sakrata, līdz sastāvdaļas ir izšķīdušas un šķīdums ir viendabīgs.
Ultraskaņas homogenizācija ir metode, ko var izmantot, lai palīdzētu izveidot labu līzes buferi, uzlabojot sastāvdaļu sajaukšanu un izšķīdināšanu. Šajā metodē ultraskaņas viļņi – parasti diapazonā no 20 līdz 30 kHz – tiek uzklāti uz maisījuma, kas rada kavitācijas burbuļus, kas sabrūk un rada intensīvu vietējo enerģiju, izraisot mehānisku bīdīšanu un sastāvdaļu sajaukšanos.
Ultraskaņas homogenizācijas process var palīdzēt atdalīt visus sastāvdaļu gabalus vai agregātus un nodrošināt, ka šķīdums ir vienmērīgi sajaukts. Līdz ar to šāds uzlabots līzes buferšķīdums var izraisīt efektīvākus šūnu darbības traucējumus un augstāku ekstrahētā materiāla ražu. Turklāt ultraskaņas homogenizācija var samazināt laiku, kas nepieciešams, lai izveidotu līzes buferi, salīdzinot ar tradicionālajām maisīšanas vai kratīšanas metodēm.
Kopumā ultraskaņas homogenizācija ir spēcīgs līdzeklis, lai uzlabotu līzes bufera sagatavošanas kvalitāti un efektivitāti.

Protokols ultraskaņas līzes bufera sagatavošanai

Šis ir vispārējs protokols līzes bufera izgatavošanai, izmantojot zondes tipa ultrasonikatoru:
 
Materiāli:

• Izvēlēts(-i) mazgāšanas līdzeklis(-i) (piemēram, Triton X-100, DDL, CHAPS)
• Sāls(-i) pēc izvēles (piemēram, NaCl, KCl)
• Proteāzes inhibitori (piemēram, PMSF, aprotinīns, leipeptīns)
• Ultraskaņotājs
• Maisītāju
• Dejonizēts ūdens
• pH metrs vai pH sloksnes

 
 
Soli pa solim instrukcijas:

1. Nosakiet līzes buferšķīduma sastāvu, pamatojoties uz šūnām vai audiem, kurus jūs lizēsit, un pakārtotajiem lietojumiem, kuriem jūs izmantosiet lizātu. Sagatavojiet mazgāšanas līdzekļu, sāļu un proteāzes inhibitoru rezerves šķīdumus vēlamajās koncentrācijās.
2. Pievieno mazgāšanas līdzekļu, sāļu un proteāzes inhibitoru izejas šķīdumus vārglāzē vai kolbā.
3. Pievienojiet dejonizētu ūdeni, lai palielinātu tilpumu līdz vēlamajam bufera daudzumam.
4. Komponentus sajauc, izmantojot maisītāju, lai iegūtu šķīduma iepriekšēju sajaukšanu.
5. Izmēra buferšķīduma pH līmeni, izmantojot pH metru vai pH sloksnes, un pēc vajadzības noregulē pH līmeni ar nelielu skābes vai bāzes daudzumu.
6. Izmantojiet zondes tipa ultrasonikatoru, lai homogenizētu pre-mix šķīdumu tā, lai iegūtu ļoti viendabīgu šķīdumu. Tāpēc dažas sekundes apstrādājiet šķīdumu ar ultraskaņu, līdz šķīdums ir rūpīgi sajaukts un visi gabali vai agregāti ir sadalīti. Ultraskaņas apstrādes ilgumu un jaudu var optimizēt, pamatojoties uz izmantoto specifisko līzes buferi un ultrasonikatoru.
7. Pēc ultrasonikācijas atkārtoti izmēriet bufera pH un pēc vajadzības noregulējiet.
8. Filtrējiet buferi caur 0,2 mikronu filtru, lai noņemtu visus gružus vai agregātus, kas varētu būt izveidojušies ultraskaņas apstrādes laikā.
9. Līzes buferis tagad ir gatavs lietošanai.

 
Piezīme: Precīzs līzes buferšķīduma sastāvs un pH var atšķirties atkarībā no lizējamajām šūnām vai audiem un pakārtotajiem lietojumiem. Iepriekš minētais protokols ir vispārīga vadlīnija, un to var būt nepieciešams optimizēt konkrētām lietojumprogrammām.
 
Ultraskaņas homogenizatori parasti tiek izmantoti šūnu darbības traucējumiem un intracelulāro molekulu ekstrakcijai. Tāpēc daudzi līzes lietojumi izmanto zondes tipa ultraskaņu ne tikai līzes bufera sagatavošanai, bet arī mehānisko šūnu traucējumu un ekstrakcijas gadījumā.
Tas padara ultraskaņas audu homogenizatorus par daudzpusīgu instrumentu laboratorijām un izskaidro plašu ultrasonikatoru izmantošanu mikrobioloģijā, biotehnoloģijā un zinātnē par dzīvību.

ultraskaņas laboratorijas homogenizatori

Hielscher Ultrasonics ražo un piegādā ultraskaņas homogenizatorus un zondes (sonotrodes) pie dažādiem jaudas grādiem un paraugu apjomiem. Tas ļauj mums piedāvāt jums vispiemērotāko ultraskaņas traucētāju jūsu parauga sagatavošanai. Mēs koncentrējamies uz augstāko kvalitāti, izcilu lietotāja komfortu un uzticamiem ultraskaņas apstrādes rezultātiem. Visiem digitālajiem ultrasonatoriem ir gudra programmatūra, programmēšana un ultraskaņas protokolu iepriekšēja iestatīšana, pārlūka tālvadības pults, temperatūras kontrole, paraugu apgaismojums, kā arī automātiska datu ierakstīšana iebūvētā SD kartē.

Projektēšana, ražošana un konsultācijas – Kvalitāte Ražots Vācijā

Hielscher ultrasonikatori ir labi pazīstami ar saviem augstākajiem kvalitātes un dizaina standartiem. Izturība un viegla darbība ļauj vienmērīgi integrēt mūsu ultrasonikatorus rūpnieciskajās iekārtās. Hielscher ultrasonikatori viegli apstrādā neapstrādātus apstākļus un prasīgu vidi.

Hielscher Ultrasonics ir ISO sertificēts uzņēmums un īpašu uzsvaru liek uz augstas veiktspējas ultrasonikatoriem, kas piedāvā vismodernākās tehnoloģijas un lietotājdraudzīgumu. Protams, Hielscher ultrasonikatori ir saderīgi ar CE un atbilst UL, CSA un RoHs prasībām.

The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators: