Ganti Pengikisan Sel dengan Sonicator Throughput Tinggi UIP400MTP

Detasemen dan ekstraksi garis sel yang melekat dari pelat multi-sumur untuk analisis multi-omik adalah tugas sehari-hari di laboratorium. Detasemen sel throughput tinggi menggunakan sonicator pelat multi-sumur UIP400MTP menggantikan pengikisan sel manual yang mengarah pada hasil RNA, lipid total, dan metabolit polar total yang lebih tinggi. Metode baru mengintegrasikan sonicator Hielscher UIP400MTP dengan stasiun kerja penanganan cairan Beckman Coulter i7, memungkinkan pemrosesan sel dengan throughput tinggi, dapat direproduksi, dan efisien untuk ekstraksi RNA, metabolit, dan lipid. Metode yang disajikan mengungguli metode pengikisan sel manual tradisional dengan mencapai reproduktifitas dan hasil yang unggul di berbagai jenis sel dan kondisi eksperimental.

Merampingkan Detasemen Sel dengan Microplate Sonicator UIP400MTP

Sistem kultur sel yang melekat memainkan peran penting dalam penelitian toksikologi dan biomedis. Dalam konteks ini, Cruchley-Fuge et al. (2024) membahas tantangan signifikan dalam proyek PrecisionTox yang berfokus pada pemanfaatan teknologi omics untuk evaluasi bahaya kimia. Proyek ini bertujuan untuk analisis throughput tinggi dari ribuan sampel yang diolah dengan beragam bahan kimia. Untuk memenuhi permintaan ini, para peneliti mengembangkan alur kerja otomatis yang menggabungkan sonicator UIP400MTP dengan protokol ekstraksi bifasik yang ditetapkan untuk analisis kromatografi-spektrometri massa cair (LC-MS). Studi mereka mengevaluasi kemanjuran UIP400MTP Multi-Well Plate Sonicator dalam melepaskan sel-sel yang melekat dibandingkan dengan pengikisan manual dan metode tradisional lainnya.

Merampingkan Multi-Omics: Ekstraksi Sel Adheren Otomatis dengan UIP400MTP

Tim peneliti Laura Cruchley-Fuge dari University of Birmingham memanfaatkan tiga garis sel manusia: HepG2 (sel kanker hati), HepaRG (sel mirip hepatosit yang diferensiasikan), dan H295R (sel kanker adrenal). Sel-sel ini dikultur dalam pelat 24 sumur dan 96 sumur dan terpapar bahan kimia uji seperti aflatoksin B1 dan forskolin.

Desain Eksperimental:

• Tahap 1: Optimalisasi pengaturan daya sonicator UIP400MTP dan perbandingan dengan pengikisan sel manual dan penangas air sonik. Sel HepG2 digunakan untuk mengevaluasi pemulihan RNA, metabolit, dan lipid.
• Tahap 2: Integrasi UIP400MTP ke dalam alur kerja ekstraksi bifasik menggunakan sistem Beckman Coulter i7. Validasi dilakukan dengan menggunakan sel HepaRG dan H295R.

Alur Kerja Ekstraksi: Alur kerja mencakup paparan bahan kimia dalam pelat multi-sumur, detasemen sel menggunakan UIP400MTP, dan ekstraksi bifasik melalui Bligh & Pewarna (B&D) metode. Analisis LC-MS dilakukan menggunakan Thermo Scientific Orbitrap Exploris 120 untuk senyawa lipofilik dan polar. The B&Metode D, standar emas untuk kuantifikasi lipid, melibatkan ekstraksi dua langkah dengan metanol, kloroform, dan air, diikuti dengan kuantifikasi lipid pada fase kloroform.

UIP400MTP microplate sonicator memfasilitasi pelepasan garis sel yang melekat dari pelat multi-sumur dan cawan Petri

Hasil:

• Tahap 1: Kondisi sonikasi optimal diidentifikasi pada daya 60%.
  UIP400MTP menghasilkan pemulihan RNA tertinggi dengan reproduktifitas yang luar biasa dibandingkan dengan pengikisan manual dan mandi sonik.
  Pemulihan metabolit polar konsisten di seluruh metode, sementara pemulihan lipid sangat unggul dengan UIP400MTP.
• Tahap 2: Validasi pada sel HepaRG dan H295R menunjukkan reproduktifitas tinggi dalam data lipidomik dan metabolomik, seperti yang ditunjukkan oleh skor PCA yang berkelompok rapat.
  Perlakuan aflatoksin B1 dan forskolin secara efektif dibedakan dari kontrol, menggarisbawahi sensitivitas dan keandalan metode ini.

“Perangkat sonikasi Hielscher UIP400MTP memberikan pendekatan alternatif berkualitas tinggi dan dapat direproduksi untuk "standar emas" pengikisan sel manual, yang mengarah pada hasil RNA yang lebih tinggi, lipid total dan metabolit polar total.” (Cruchley-Fuge dkk., 2024)

Cruchley-Fuge dkk. menyoroti keunggulan sonicator UIP400MTP untuk pemrosesan sel yang melekat. Dengan menggantikan pengikisan manual, metode ini meningkatkan reproduktifitas, throughput, dan hasil, menjadikannya alat yang sangat berharga untuk studi skala besar seperti PrecisionTox. Integrasi UIP400MTP ke dalam alur kerja otomatis tidak hanya mengurangi variabilitas tetapi juga merampingkan proses padat karya, memungkinkan akuisisi data multi-omics berkualitas tinggi.

Karya Cruchley-Fuge et al. (2024) memfasilitasi dan merampingkan pemrosesan kultur sel yang melekat untuk analisis multi-omik. Integrasi sonicator UIP400MTP dengan alur kerja otomatis memastikan persiapan sampel yang konsisten dan efisien, sehingga sangat cocok untuk penelitian toksikologi throughput tinggi.
 

Desain, Manufaktur, dan Konsultasi – Kualitas Buatan Jerman

Ultrasonicators Hielscher terkenal dengan kualitas dan standar desainnya yang tertinggi. Ketahanan dan pengoperasian yang mudah memungkinkan integrasi ultrasonicator kami ke dalam fasilitas industri. Kondisi kasar dan lingkungan yang menuntut mudah ditangani oleh ultrasonicator Hielscher.

Hielscher Ultrasonics adalah perusahaan bersertifikat ISO dan memberikan penekanan khusus pada sonicator berkinerja tinggi yang menampilkan teknologi canggih dan keramahan pengguna. Tentu saja, ultrasonicators Hielscher sesuai dengan CE dan memenuhi persyaratan UL, CSA dan RoHs.