Pelepasan Biofilm menggunakan Sonikator UIP400MTP dengan Kapasitas Pemrosesan Sampel yang Tinggi
Sonikator dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi yang dirancang untuk pelat multisumur dan pelat 96 sumur merupakan alat penting dalam penelitian biofilm, khususnya untuk melepaskan dan menghilangkan biofilm dari sumur, tabung, pin, dan cawan Petri. Sonikator ini memudahkan pemrosesan banyak sampel secara bersamaan, sehingga meningkatkan efisiensi dan konsistensi. Sonikator Hielscher UIP400MTP dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi sangat ideal untuk sonikasi pelat multisumur, pelat 96 sumur, beberapa tabung atau cawan Petri. Getaran ultrasonik dan kavitasi yang seragam menghilangkan biofilm dari dasar pelat secara andal. Hal ini menjadikan sonikator pelat multisumur UIP400MTP alat preparasi sampel yang ideal untuk penghilangan biofilm, uji biofilm, serta penelitian bakteri dan mikroba.
Sonikator Pelat Multisumur UIP400MTP untuk Pelepasan dan Penghilangan Biofilm dalam Preparasi Sampel dengan Kapasitas Pemrosesan Sampel yang Tinggi:
- Biofilm bakteri
- Biofilm eukariotik
- Biofilm jamur
- Biofilm arkea
- Biofilm polimikroba / Biofilm spesies campuran
- Biofilm gigi (plak)
- Biofilm laut
- Biofilm lingkungan
- Biofilm pada perangkat medis
- Suspensi sel hasil kultur
Sonikator UIP400MTP dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi untuk penghilangan biofilm dari pelat multisumur, pelat 96 sumur, tabung dan cawan Petri.
Pelepasan dan Penghilangan Biofilm menggunakan Sonikasi
Sonikator Hielscher UIP400MTP dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi dirancang khusus untuk sonikasi pelat multisumur dan pelat 96 sumur secara andal dan seragam. Sebagai alat penting dalam penelitian biofilm, sonikator pelat multisumur UIP400MTP menawarkan teknologi yang andal untuk melepaskan dan menghilangkan biofilm dari pelat multisumur, tabung dan cawan Petri. Dengan memungkinkan preparasi sampel dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi, UIP400MTP meningkatkan efisiensi dan konsistensi uji biofilm serta penelitian terkait lainnya, sehingga sonikator ini menjadi alat yang sangat diperlukan dalam penelitian mikrobiologi akademis maupun industri.
Penghilangan biofilm menggunakan sonikasi: Untuk melepaskan biofilm, biofilm dibiarkan terbentuk di dalam sumur pelat multisumur dalam kondisi terkendali. Pelat kemudian ditempatkan di dalam sonikator, tempat parameter seperti waktu, amplitudo, dan frekuensi diatur sesuai dengan persyaratan khusus jenis biofilm dan tujuan eksperimen. Gelombang ultrasonik menghasilkan kavitasi di dalam setiap sumur, yang secara efektif mendisrupsi matriks biofilm dan melepaskan sel.
Preparasi sampel ultrasonik untuk biofilm: Dalam uji biofilm, sonikator dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi memiliki beberapa aplikasi. Setelah sonikasi, sel biofilm yang terlepas dapat dikumpulkan dan dikuantifikasi menggunakan berbagai uji seperti pewarnaan kristal violet, penghitungan sel viabel, atau pengukuran biomassa. Selain itu, biofilm dapat diberi perlakuan dengan agen antimikroba yang diikuti dengan sonikasi untuk menilai efektivitas agen tersebut dalam mendisrupsi biofilm. Sel biofilm yang terlepas juga berguna untuk penelitian genomik dan proteomik, karena dapat digunakan untuk ekstraksi DNA, RNA, dan protein untuk analisis molekuler lebih lanjut.
Sonikator dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi menawarkan banyak keunggulan. Sonikator ini memungkinkan pemrosesan beberapa sampel secara bersamaan, menghemat waktu dan tenaga kerja, serta memastikan perlakuan yang seragam pada semua sumur, sehingga mengurangi variabilitas dan meningkatkan reproduksibilitas hasil. Perangkat ini juga cocok untuk penelitian berskala besar, memungkinkan penapisan pembentukan, disrupsi, dan perlakuan biofilm dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi.
(A) Pelat berisi TSB dengan 2% glukosa yang digunakan untuk pembentukan biofilm, perolehan kembali sel, dan penentuan MIC serta MBCB; (B) Tutup dengan pin untuk pembentukan biofilm stafilokokus.
Sel biofilm yang terbentuk pada pin dilepaskan menggunakan sonikator Hielscher UIP250MTP selama 5 min di dalam pelat 96 sumur yang berisi medium kultur segar untuk memperoleh kembali sel.
(Gambar dan penelitian: ©de Oliveira et al., 2016)
Sonikator pelat 96 sumur UIP400MTP untuk sonikasi pelat mikrotiter dan multisumur
Pentingnya Penghilangan Biofilm secara Ultrasonik dalam Penelitian Biofilm
Penghilangan biofilm secara ultrasonik sangat penting dalam penelitian biofilm karena efektivitas, konsistensi, efisiensi, dan keserbagunaannya. Metode ini memastikan disrupsi biofilm yang menyeluruh dan seragam, sehingga memudahkan analisis yang akurat dan dapat direproduksi dalam berbagai uji biofilm. Uji ini, termasuk pewarnaan kristal violet, penghitungan sel viabel, bioluminesensi ATP, reduksi XTT, analisis mikroskopis, dan ekstraksi asam nukleat/protein, memberikan pemahaman yang komprehensif tentang pembentukan, viabilitas, struktur, dan respons biofilm terhadap perlakuan.
Sonikasi melepaskan dan menghilangkan biofilm secara lembut dari substrat padat seperti dasar pelat, pin, pasak, atau kaca penutup.
- Disrupsi Biofilm yang Efektif:
Kavitasi: Gelombang ultrasonik menciptakan gelembung kavitasi yang menghasilkan gaya geser kuat saat runtuh, sehingga secara efektif mendisrupsi struktur kompleks biofilm.
Pelepasan Menyeluruh: Memastikan sel biofilm terlepas secara menyeluruh dari permukaan, yang sangat penting untuk kuantifikasi dan analisis yang akurat. - Konsistensi dan Reproduksibilitas:
Perlakuan Seragam: Sonikator dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi memberikan distribusi energi ultrasonik yang seragam pada semua sampel, sehingga mengurangi variabilitas dan meningkatkan reproduksibilitas.
Standardisasi: Memungkinkan standardisasi protokol disrupsi biofilm, sehingga menghasilkan hasil yang lebih andal dan dapat dibandingkan. - Efisiensi:
Kemampuan Pemrosesan Sampel Berkapasitas Tinggi: Memungkinkan pemrosesan beberapa sampel secara bersamaan, sehingga menghemat waktu dan meningkatkan kapasitas pemrosesan sampel dalam penelitian biofilm.
Otomatisasi: Dapat dengan mudah diintegrasikan ke dalam alur kerja otomatis, sehingga semakin meningkatkan efisiensi dan mengurangi pekerjaan manual. - Pemeliharaan Viabilitas dan Integritas:
Kondisi Terkendali: Parameter seperti waktu dan intensitas dapat diatur secara presisi untuk mendisrupsi biofilm tanpa mengganggu viabilitas atau integritas sel, yang penting untuk uji selanjutnya.
- Keserbagunaan:
Penerapan yang Luas: Cocok untuk berbagai jenis biofilm (bakteri, jamur, spesies campuran) dan kompatibel dengan berbagai permukaan dan bahan yang digunakan dalam penelitian biofilm.
Sonikator pelat multisumur UIP400MTP menawarkan banyak manfaat, sehingga menjadikannya alat yang sangat diperlukan dalam preparasi sampel dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi.
Hielscher Ultrasonics menawarkan berbagai model sonikator, termasuk sonikator tipe probe, sonikator nonkontak dan sonikator dengan kapasitas pemrosesan sampel yang tinggi. Hubungi kami sekarang! Para ahli teknis kami akan dengan senang hati mendiskusikan kebutuhan pemrosesan Anda bersama Anda dan merekomendasikan sonikator yang paling sesuai untuk aplikasi biofilm Anda.
Sonikator pelat mikrotiter UIP400MTP digunakan untuk melepaskan biofilm bagi keperluan penelitian
Literatur / Referensi
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Pertanyaan yang Sering Diajukan seputar Penelitian Biofilm
Apa Penyangga yang Paling Umum untuk Biofilm?
Penyangga yang paling umum untuk biofilm dalam penelitian laboratorium adalah pelat mikrotiter. Pelat mikrotiter, khususnya format 96 sumur, digunakan secara luas karena keserbagunaan, kemudahan penggunaan, dan kompatibilitasnya dengan berbagai teknik analisis.
Apa Pelat 96 Sumur Terbaik untuk Biofilm?
Pelat 96 sumur terbaik untuk penelitian biofilm bergantung pada beberapa faktor, termasuk jenis biofilm yang diteliti, konfigurasi eksperimen, dan persyaratan khusus penelitian. Namun, beberapa pelat 96 sumur yang umum direkomendasikan untuk penelitian biofilm adalah:
- Corning® Costar® 3596 96-well Clear Flat Bottom Plate: Pelat ini sering digunakan karena kejernihan optiknya yang tinggi, yang bermanfaat untuk pencitraan dan uji spektrofotometrik.
- Nunc™ MicroWell™ 96-Well Plates: Pelat ini dikenal karena dimensi sumurnya yang seragam dan kejernihan optiknya yang tinggi. Pelat ini tersedia dengan berbagai perlakuan permukaan untuk mendukung berbagai jenis kultur sel.
- Greiner Bio-One CELLSTAR® 96-Well Microplate: Pelat ini sering digunakan untuk penelitian biofilm karena kualitasnya yang konsisten antarsumur dan ketersediaannya dengan berbagai lapisan permukaan, seperti permukaan yang diberi perlakuan untuk kultur jaringan atau permukaan dengan daya ikat rendah.
- Pelat 96 Sumur Hitam dengan Dasar Bening: Untuk penelitian yang memerlukan pengukuran fluoresensi atau luminesensi, pelat hitam dengan dasar bening (misalnya, Corning® 3603) sangat ideal karena meminimalkan interferensi sinyal antarsumur dan meningkatkan deteksi sinyal.
- Pelat Berlapis Hidrofobik atau Hidrofilik: Bergantung pada sifat biofilm dan mikroorganismenya, pelat dengan lapisan khusus yang mendorong atau menghambat adhesi dapat bermanfaat. Misalnya, pelat hidrofobik mungkin cocok untuk biofilm yang dibentuk oleh bakteri tertentu.
- Pelat Khusus Biofilm: Beberapa produsen menawarkan pelat yang dirancang khusus untuk penelitian biofilm. Pelat ini sering memiliki sifat permukaan yang ditingkatkan untuk mendorong pembentukan biofilm dan dioptimalkan untuk uji biofilm.
Saat memilih pelat 96 sumur untuk penelitian biofilm, pertimbangkan kriteria berikut:
- Bahan dan Perlakuan Permukaan: Pilih bahan pelat dan perlakuan permukaan yang mendukung adhesi dan pertumbuhan mikroorganisme pembentuk biofilm yang Anda teliti.
Kejernihan Optik: Untuk uji yang melibatkan pengukuran optik, pastikan pelat memiliki kejernihan optik yang tinggi.
- Desain Sumur: Pertimbangkan bentuk dan kedalaman sumur, yang dapat memengaruhi pertumbuhan biofilm serta efektivitas perlakuan atau pengukuran selanjutnya.
- Kompatibilitas dengan Peralatan: Pastikan pelat kompatibel dengan sonikator, inkubator, dan peralatan lain yang digunakan dalam penelitian Anda. Sonikator pelat multisumur Hielscher kompatibel dengan semua pelat mikrotiter dan multisumur standar.
Pada akhirnya, pilihan terbaik akan bergantung pada persyaratan khusus penelitian biofilm Anda dan karakteristik mikroorganisme yang terlibat.
Apa Saja Uji Biofilm yang Lazim Digunakan dalam Penelitian?
Dalam penelitian dan diagnostik, berbagai jenis uji digunakan untuk menyelidiki dan mengklasifikasikan biofilm. Sonikasi merupakan langkah preparasi sampel yang umum untuk menghilangkan biofilm dari substrat padatnya, sehingga biofilm tersedia untuk pengujian dan analisis.
- Pewarnaan Kristal Violet:
Tujuan: Mengkuantifikasi biomassa total biofilm.
Metode: Biofilm diwarnai dengan pewarna kristal violet, kemudian pewarna tersebut dilarutkan dan diukur secara spektrofotometrik.
Aplikasi: Digunakan untuk menilai pembentukan biofilm dan efek agen antimikroba. - Penghitungan Sel Viabel (Uji CFU):
Tujuan: Menentukan jumlah sel biofilm yang viabel.
Metode: Sel biofilm yang terlepas diencerkan secara serial dan ditanam pada agar untuk menghitung unit pembentuk koloni (CFU).
Aplikasi: Mengevaluasi viabilitas sel biofilm dan efektivitas antimikroba. - Bioluminesensi ATP:
Tujuan: Mengukur aktivitas metabolik sel biofilm.
Metode: Kadar ATP dikuantifikasi menggunakan uji bioluminesensi.
Aplikasi: Menunjukkan viabilitas dan keadaan metabolik biofilm. - Uji Reduksi XTT:
Tujuan: Menilai aktivitas metabolik sel.
Metode: Reagen XTT direduksi oleh sel yang aktif secara metabolik untuk membentuk produk formazan berwarna, yang dikuantifikasi secara spektrofotometrik.
Aplikasi: Digunakan untuk mengevaluasi viabilitas sel biofilm dan efek perlakuan. - Analisis Mikroskopis:
Tujuan: Memvisualisasikan struktur dan komposisi biofilm.
Metode: Teknik yang digunakan meliputi mikroskopi cahaya, mikroskopi pemindaian laser konfokal (CLSM), dan mikroskopi elektron pemindaian (SEM).
Aplikasi: Memberikan pemahaman terperinci tentang arsitektur, distribusi, dan efek perlakuan pada biofilm. - Ekstraksi DNA, RNA, dan Protein:
Tujuan: Menganalisis profil genetik dan proteomik sel biofilm.
Metode: Sel biofilm dilisis untuk mengekstraksi asam nukleat dan protein bagi analisis lanjutan (misalnya, PCR, qPCR, sekuensing, proteomik).
Aplikasi: Mempelajari ekspresi gen, keragaman genetik, dan ekspresi protein dalam biofilm. - Uji Penghambatan dan Eradikasi Biofilm:
Tujuan: Menapis senyawa berdasarkan kemampuannya untuk mencegah pembentukan biofilm atau mengeradikasi biofilm yang telah terbentuk.
Metode: Biofilm diberi perlakuan dengan agen antibiofilm potensial, dan disrupsi dinilai menggunakan uji yang disebutkan di atas.
Aplikasi: Penemuan obat dan pengembangan terapi antibiofilm.
Hielscher Ultrasonics memproduksi homogenizer ultrasonik berkinerja tinggi mulai dari ukuran laboratorium hingga industri.