Ուլտրաձայնային լիպոսոմային պատրաստում

Ուլտրաձայնային եղանակով արտադրված լիպոսոմները ցույց են տալիս շատ բարձր թակարդման արդյունավետություն, բարձր բեռնման հզորություն և միատեսակ փոքր գնդաձև չափսեր: Այսպիսով, ուլտրաձայնային լիպոսոմներն առաջարկում են գերազանց կենսահասանելիություն: Hielscher Ultrasonics-ն առաջարկում է ուլտրաձայնիչներ դեղագործական կարգի լիպոսոմների հուսալի արտադրության համար խմբաքանակով և շարունակական ռեժիմով:

Ուլտրաձայնային լիպոսոմների արտադրության առավելությունները

Ուլտրաձայնային լիպոսոմային ինկապսուլյացիան մի տեխնիկա է, որն օգտագործվում է լիպոսոմներում դեղեր կամ այլ թերապևտիկ նյութեր պարուրելու համար՝ օգտագործելով ուլտրաձայնային էներգիա: Լիպոսոմների պարուրման այլ մեթոդների համեմատությամբ, ուլտրաձայնային պարկուճն ունի մի քանի առավելություններ, որոնք այն դարձնում են արտադրության գերազանց տեխնիկա:

• Բարձր բեռնվածություն, թակարդման բարձր արդյունավետություն. Հայտնի է, որ ուլտրաձայնային լիպոսոմների արտադրությունը լիպոսոմներ է արտադրում ակտիվ բաղադրիչների բարձր բեռնվածությամբ, օրինակ՝ վիտամին C, դեղամիջոցի մոլեկուլներ և այլն: Սա նշանակում է, որ ակտիվ նյութի բարձր տոկոսը պատված է ուլտրաձայնային եղանակով: Եզրափակելով, սա դարձնում է ուլտրաձայնային արդյունավետ մեթոդ լիպոսոմների արտադրության համար:
• Միատեսակ փոքր լիպոսոմներ. Ուլտրաձայնային լիպոսոմների ինկապսուլյացիայի առավելություններից մեկը նեղ չափի բաշխմամբ խիստ միատեսակ լիպոսոմներ արտադրելու կարողությունն է: Ուլտրաձայնային էներգիան կարող է օգտագործվել ավելի մեծ լիպոսոմները կամ լիպիդային ագրեգատները փոքր, ավելի միատեսակ լիպոսոմների բաժանելու համար: Սա հանգեցնում է լիպոսոմների չափի և ձևի ավելի մեծ հետևողականության, ինչը կարող է կարևոր լինել դեղամիջոցների առաքման համար, որտեղ մասնիկների չափը կարող է ազդել դրանց ֆարմակոկինետիկայի և արդյունավետության վրա:
• Կիրառելի է ցանկացած մոլեկուլների համար. Ուլտրաձայնային լիպոսոմային ինկապսուլյացիայի մեկ այլ առավելություն է դեղամիջոցների և այլ բուժական միջոցների լայն տեսականի պարուրելու նրա կարողությունը: Տեխնիկան կարող է օգտագործվել ինչպես հիդրոֆիլ, այնպես էլ հիդրոֆոբ դեղամիջոցները պարուրելու համար, ինչը դժվար է անել այլ մեթոդների հետ: Բացի այդ, ուլտրաձայնային էներգիան կարող է օգտագործվել մակրոմոլեկուլները և նանոմասնիկներն ամփոփելու համար, որոնք կարող են չափազանց մեծ լինել այլ մեթոդներով պարփակելու համար:
• Արագ և հուսալի. Ուլտրաձայնային լիպոսոմային ինկապսուլյացիան նույնպես համեմատաբար պարզ և արագ գործընթաց է: Այն չի պահանջում կոշտ քիմիական նյութերի կամ բարձր ջերմաստիճանի օգտագործում, որոնք կարող են վնասել թերապևտիկ նյութերին, որոնք պարուրված են:
• Մեծացում. Բացի այդ, տեխնիկան կարող է հեշտությամբ ընդլայնվել լայնածավալ արտադրության համար՝ դարձնելով այն ծախսարդյունավետ տարբերակ դեղերի առաքման համար:

Ամփոփելով, ուլտրաձայնային լիպոսոմային պարկուճը լիպոսոմների պարուրման համար գերազանց տեխնիկա է, որը պայմանավորված է նեղ չափի բաշխվածությամբ միատեսակ լիպոսոմներ արտադրելու, թերապևտիկ նյութերի լայն շրջանակ պարփակելու և դրա պարզությամբ և մասշտաբայնությամբ:

Հետագա ռեհիդրացիայից հետո լիպիդային թաղանթի ձևավորումից հետո, սոնիկացիան օգտագործվում է լիպոսոմում ակտիվ բաղադրիչների թակարդումը խթանելու համար: Բացի այդ, sonication-ը հասնում է լիպոսոմի ցանկալի չափի:

Ուլտրաձայնային լիպոսոմային պատրաստում դեղագործության և կոսմետիկայի համար

Լիպոսոմները (լիպիդների վրա հիմնված վեզիկուլներ), տրանսֆերոսոմները (ուլտրադեֆորմացվող լիպոսոմներ), էթոսոմները (ուլտրադեֆորմացվող վեզիկուլներ՝ բարձր ալկոհոլի պարունակությամբ) և նիոսոմները (սինթետիկ վեզիկուլներ) մանրադիտակային վեզիկուլներ են, որոնք կարող են արհեստականորեն պատրաստվել որպես գնդաձև կրիչներ, որոնց մեջ կարող են ներառվել ակտիվ մոլեկուլները: 25-ից 5000 նմ տրամագծով այս վեզիկուլները հաճախ օգտագործվում են որպես դեղամիջոցների կրիչներ դեղագործական և կոսմետիկ արդյունաբերության մեջ, ինչպիսիք են դեղորայքի բանավոր կամ տեղային առաքումը, գենոթերապիան և իմունիզացիան: Ultrasonication-ը գիտականորեն ապացուցված մեթոդ է բարձր արդյունավետ լիպոսոմների արտադրության համար: Hielscher ուլտրաձայնային սարքերը արտադրում են լիպոսոմներ՝ ակտիվ բաղադրիչների բարձր բեռնվածությամբ և բարձր կենսաանվտանգությամբ:

Լիպոսոմներ և լիպոսոմային ձևավորում

Լիպոսոմները միաշերտ, օլիգոլամերային կամ բազմաշերտ վեզիկուլյար համակարգեր են և կազմված են նույն նյութից, ինչ բջջային թաղանթը (լիպիդային երկշերտ): Իրենց կազմով և չափերով լիպոսոմները տարբերվում են հետևյալ կերպ.

• բազմաշերտ վեզիկուլներ (MLV, 0,1-10 մկմ)
• փոքր միաշերտ վեզիկուլներ (SUV, <100 նմ)
• խոշոր միաշերտ վեզիկուլներ (LUV, 100–500 նմ)
• հսկա միաշերտ վեզիկուլներ (GUV, ≥1 մկմ)

Լիպոսոմների հիմնական կառուցվածքը բաղկացած է ֆոսֆոլիպիդներից։ Ֆոսֆոլիպիդներն ունեն հիդրոֆիլ գլխի խումբ և հիդրոֆոբ պոչի խումբ, որը բաղկացած է երկար ածխաջրածնային շղթայից։
Լիպոսոմային թաղանթն ունի շատ նման բաղադրություն, ինչ մաշկի պատնեշը, այնպես որ դրանք հեշտությամբ կարող են ինտեգրվել մարդու մաշկին: Քանի որ լիպոսոմները միաձուլվում են մաշկի հետ, նրանք կարող են բեռնաթափել թակարդված նյութերը անմիջապես նպատակակետ, որտեղ ակտիվները կարող են կատարել իրենց գործառույթները: Այսպիսով, լիպոսոմները ստեղծում են մաշկի թափանցելիության/թափանցելիության բարձրացում թակարդված դեղագործական և կոսմետիկ նյութերի համար: Նաև լիպոսոմները՝ առանց պարուրված նյութերի, դատարկ վեզիկուլների, ուժեղ ակտիվ են մաշկի համար, քանի որ ֆոսֆատիդիլխոլինը ներառում է երկու էական նյութեր, որոնք մարդու օրգանիզմը չի կարող ինքնուրույն արտադրել՝ լինոլիկ թթու և քոլին:
Լիպոսոմներն օգտագործվում են որպես դեղամիջոցների, պեպտիդների, սպիտակուցների, պլազմային ԴՆԹ-ի, հակասիտային օլիգոնուկլեոտիդների կամ ռիբոզիմների կենսահամատեղելի կրողներ՝ դեղագործական, կոսմետիկ և կենսաքիմիական նպատակներով։ Մասնիկների չափսերի և լիպիդների ֆիզիկական պարամետրերի հսկայական բազմակողմանիությունը գրավիչ ներուժ է տալիս հարմարեցված մեքենաների կառուցման համար՝ կիրառությունների լայն շրջանակի համար: (Ulrich 2002)

Ուլտրաձայնային լիպոսոմների ձևավորում

Լիպոսոմները կարող են ձևավորվել ուլտրաձայնային միջոցների միջոցով: Լիպոսոմների պատրաստման հիմնական նյութը ամֆիլիկ մոլեկուլներն են, որոնք ստացված են կամ հիմնված են կենսաբանական թաղանթային լիպիդների վրա: Փոքր միաշերտ վեզիկուլների (SUV) ձևավորման համար լիպիդային ցրվածությունը մեղմորեն հնչում է – օրինակ՝ UP50H (50W, 30kHz) ձեռքի ուլտրաձայնային սարքով, VialTweeter կամ CupHorn ուլտրաձայնային ռեակտորով – սառցե լոգարանում: Նման ուլտրաձայնային բուժման տեւողությունը տևում է մոտ. 5-15 րոպե: Փոքր միաշերտ վեզիկուլներ արտադրելու մեկ այլ մեթոդ բազմաշերտ վեզիկուլների լիպոսոմների ձայնային ախտահանումն է:
Դինու-Պիրվու և այլք: (2010 թ.) հաղորդում է տրանսֆերոսոմների ստացումը MLV-ների սենյակային ջերմաստիճանում հնչյունավորելու միջոցով:
Hielscher Ultrasonics-ն առաջարկում է տարբեր ուլտրաձայնային սարքեր, սոնոտրոդներ և աքսեսուարներ և դրանով իսկ կարող է ապահովել ամենահարմար ուլտրաձայնային կարգավորումը ցանկացած մասշտաբով բարձր արդյունավետ լիպոսոմային ինկապսուլյացիայի համար:

Ակտիվ նյութերի ուլտրաձայնային պարփակումը լիպոսոմներում

Լիպոսոմները գործում են որպես ակտիվ բաղադրիչների կրիչներ, ինչպիսիք են վիտամինները, բուժական մոլեկուլները, պեպտիդները և այլն: Միաժամանակ, sonication-ը նպաստում է պարկուճման և թակարդման գործընթացին, որպեսզի արտադրվեն ակտիվ բաղադրիչների մեծ բեռնվածությամբ լիպոսոմներ: Նախքան ինկապսուլյացիան, լիպոսոմները հակված են կլաստերներ ձևավորելու ֆոսֆոլիպիդային բևեռային գլխիկների մակերևութային լիցք-լիցք փոխազդեցության պատճառով (տես Míckova et al. 2008), ավելին, դրանք պետք է բացվեն: Որպես օրինակ, Zhu et al. (2003) նկարագրում է բիոտինի փոշու ինկապսուլյացիան լիպոսոմներում ուլտրաձայնային եղանակով: Քանի որ բիոտինի փոշին ավելացվել է վեզիկուլային կասեցման լուծույթի մեջ, լուծույթն անցել է ձայնային լուծույթ: Այս բուժումից հետո բիոտինը փակվեց լիպոսոմների մեջ:
Կարդացեք ավելին լիպոսոմներում GLP-1 պեպտրիդների (օրինակ՝ սեմագլուտիդի) ուլտրաձայնային պարկուճացման մասին։

Լիպոսոմային էմուլսիաներ ուլտրաձայնային ախտորոշմամբ

Խոնավեցնող կամ հակատարիքային քսուքների, լոսյոնների, գելերի և այլ կոսմետիկական ձևակերպումների սնուցող ազդեցությունը բարձրացնելու համար լիպոսոմային դիսպերսիաներին ավելացվում են էմուլգատորներ՝ լիպիդների ավելի մեծ քանակությունը կայունացնելու համար: Սակայն հետազոտությունները ցույց են տվել, որ լիպոսոմների հնարավորությունները հիմնականում սահմանափակ են։ Էմուլգատորների ավելացման դեպքում այս ազդեցությունը կհայտնվի ավելի վաղ, և լրացուցիչ էմուլգատորները թուլացնում են ֆոսֆատիդիլխոլինի պատնեշի մերձեցումը: Նանոմասնիկներ – կազմված ֆոսֆատիդիլքոլինից և լիպիդներից – այս խնդրի պատասխանն է: Այս նանոմասնիկները ձևավորվում են նավթի կաթիլից, որը ծածկված է ֆոսֆատիդիլքոլինի միաշերտով: Նանոմասնիկների օգտագործումը թույլ է տալիս այնպիսի ձևակերպումներ, որոնք ունակ են կլանել ավելի շատ լիպիդներ և մնալ կայուն, այնպես որ լրացուցիչ էմուլգատորների կարիք չկա:
Ultrasonication-ը նանոէմուլսիաների և նանոդիսպերսիաների արտադրության ապացուցված մեթոդ է: Բարձր ինտենսիվ ուլտրաձայնը մատակարարում է էներգիան, որն անհրաժեշտ է հեղուկ փուլը (ցրված փուլ) փոքր կաթիլներով երկրորդ փուլում (շարունակական փուլ) ցրելու համար: Ցրման գոտում պայթող կավիտացիոն փուչիկները առաջացնում են ինտենսիվ հարվածային ալիքներ շրջակա հեղուկում և հանգեցնում հեղուկի բարձր արագության շիթերի ձևավորման: Ցրված փուլի նոր ձևավորված կաթիլները միաձուլման դեմ կայունացնելու համար էմուլսիայի մեջ ավելացվում են էմուլգատորներ (մակերևութային ակտիվ նյութեր, մակերեսային ակտիվ նյութեր) և կայունացուցիչներ: Քանի որ խափանումից հետո կաթիլների միաձուլումը ազդում է կաթիլների վերջնական չափի բաշխման վրա, արդյունավետ կայունացնող էմուլգատորներ են օգտագործվում կաթիլների վերջնական չափի բաշխումը պահպանելու համար այն մակարդակի վրա, որը հավասար է բաշխմանը ուլտրաձայնային ցրման գոտում կաթիլների խզումից անմիջապես հետո:

Լիպոսոմային դիսպերսիաներ՝ օգտագործելով ուլտրաձայնային հետազոտություն

Լիպոսոմային դիսպերսիաները, որոնք հիմնված են չհագեցած ֆոսֆատիդիլքլորի վրա, չունեն կայունություն օքսիդացման դեմ: Դիսպերսիայի կայունացումը կարելի է հասնել հակաօքսիդանտների միջոցով, ինչպիսիք են C և E վիտամինների համալիրը:
 

Լիպոսոմների ձևավորումը հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդի միջոցով՝ օգտագործելով Sonication

 
Օրթան և այլք։ (2002 թ.) հաջողվել է լիպոսոմներում Anethum graveolens եթերայուղի ուլտրաձայնային պատրաստման վերաբերյալ իրենց ուսումնասիրության մեջ լավ արդյունքների հասնել: Sonication-ից հետո լիպոսոմների չափերը եղել են 70-150 նմ, իսկ MLV-ի համար՝ 230-475 նմ; Այս արժեքները մոտավորապես հաստատուն են եղել նաև 2 ամսից հետո, բայց դադարել են 12 ամսից հետո, հատկապես ամենագնացների ցրման դեպքում (տես ստորև ներկայացված հիստոգրամները): Կայունության չափումը, որը վերաբերում է եթերայուղերի կորստին և չափերի բաշխմանը, նաև ցույց է տվել, որ լիպոսոմային դիսպերսիաները պահպանում են ցնդող յուղի պարունակությունը: Սա ենթադրում է, որ եթերայուղի թակարդը լիպոսոմներում մեծացրել է յուղի կայունությունը:

Օրթան և այլք։ (2009). MLV և SUV ցրման կայունություն 1 տարի հետո: Լիպոսոմային ձևակերպումները պահվել են 4±1 ºC ջերմաստիճանում:

Hielscher ուլտրաձայնային պրոցեսորները իդեալական սարքեր են կոսմետիկ և դեղագործական արդյունաբերության մեջ կիրառելու համար: Համակարգերը, որոնք բաղկացած են մինչև 16000 վտ հզորությամբ մի քանի ուլտրաձայնային պրոցեսորներից, ապահովում են այս լաբորատոր կիրառումը արդյունավետ արտադրության մեթոդի վերածելու համար անհրաժեշտ հզորությունը՝ շարունակական հոսքով կամ խմբաքանակով նուրբ ցրված էմուլսիաներ ստանալու համար: – հասնելով այնպիսի արդյունքների, որոնք համեմատելի են այսօրվա լավագույն բարձր ճնշման հոմոգենիզատորների հետ, ինչպիսիք են բաց փականները: Ի հավելումն շարունակական էմուլսացման այս բարձր արդյունավետության, Hielscher ուլտրաձայնային սարքերը պահանջում են շատ ցածր սպասարկում և շատ հեշտ են գործել և մաքրել: Ուլտրաձայնը իրականում աջակցում է մաքրմանը և ողողմանը: Ուլտրաձայնային հզորությունը կարգավորելի է և կարող է հարմարեցվել որոշակի արտադրանքներին և էմուլգացիայի պահանջներին: Հասանելի են նաև հատուկ հոսքային բջջային ռեակտորներ, որոնք համապատասխանում են առաջադեմ CIP (մաքուր տեղում) և SIP (մանրէազերծում տեղում) պահանջներին:

Հաճախակի տրվող հարցեր լիպոսոմների վերաբերյալ

Լիպոսոմների ո՞ր տեսակներն են տարբերվում:

Լիպոսոմները դասակարգվում են տարբեր տեսակների՝ ելնելով դրանց չափից և դրանցում պարունակվող երկշերտների քանակից: Այս կատեգորիաները ներառում են.

• Փոքր միաշերտ վեզիկուլներ (SUV): Սրանք ամենափոքր լիպոսոմներն են՝ մեկ լիպիդային երկշերտով:
• Մեծ միաշերտ վեզիկուլներ (LUV): Ավելի մեծ, քան ամենագնացները, դրանք ունեն նաև մեկ երկշերտ:
• Բազմաշերտ վեզիկուլներ (MLV): Դրանք պարունակում են բազմաթիվ համակենտրոն երկշերտեր:
• Multivesicular Vesicles (MVV): Սրանք կազմված են մի քանի փոքր վեզիկուլներից ավելի մեծ վեզիկուլում:

 
Այլ մասնագիտացված տեսակները ներառում են.

• PEGylated Liposomes: Լիպոսոմներ՝ փոփոխված պոլիէթիլեն գլիկոլով (PEG)՝ կայունությունը և շրջանառության ժամանակը բարձրացնելու համար:
• Նանոլիպոսոմներ. Շատ փոքր լիպոսոմներ, որոնք սովորաբար օգտագործվում են դեղերի նպատակային առաքման համար:

Ինչպիսի՞ վեզիկուլային կառուցվածքներ կարող են դրսևորել լիպոսոմները:

Լիպոսոմները հետագայում դասակարգվում են՝ ելնելով իրենց վեզիկուլային կառուցվածքից, յոթ հիմնական տեսակների.

• Բազմաշերտ խոշոր վեզիկուլներ (MLV): Պարունակում է մի քանի երկշերտ:
• Oligolamellar vesicles (OLV): Ունեն մի քանի երկշերտ:
• Փոքր միաշերտ վեզիկուլներ (SUV): Ամենափոքրը մեկ երկշերտով:
• Միջին չափի միաշերտ վեզիկուլներ (MUV): Միջանկյալ չափս՝ մեկ երկշերտով:
• Մեծ միաշերտ վեզիկուլներ (LUV): Ավելի մեծ՝ մեկ երկշերտով:
• Հսկա միաշերտ վեզիկուլներ (GUV): Շատ մեծ է մեկ երկշերտով:
• Multivesicular Vesicles (MVV): Բազմաթիվ վեզիկուլներ մեկ մեծ վեզիկուլում:

Որո՞նք են տարբերությունները լիպոսոմների և նիոսոմների միջև:

Լիպոսոմները և նիոսոմները հիմնականում տարբերվում են իրենց կազմով.
Լիպոսոմներ: Պատրաստված է երկշղթա ֆոսֆոլիպիդներից, որոնք կարող են լինել կամ չեզոք կամ լիցքավորված:
Նիոսոմներ: Պատրաստված է չլիցքավորված մեկ շղթայական մակերեւութային ակտիվ նյութերից և խոլեստերինից:
Երկու կառույցներն էլ ձևավորվում են սոնիկացիայի միջոցով, ինչը նպաստում է երկշերտ վեզիկուլների հավաքմանը:

Ո՞րն է լիպոսոմի իդեալական չափը:

Թերապևտիկ առաքման համար լիպոսոմի իդեալական չափը տեսականորեն 50-ից 200 նանոմետր է: Այս չափերի շրջանակը օպտիմալացնում է կայունությունը և կենսամատչելիությունը: Sonication-ը սովորաբար օգտագործվում է վեզիկուլը ցանկալի չափի նվազեցնելու համար:

Կարո՞ղ են լիպոսոմները կրել հիդրոֆիլ դեղամիջոցներ:

Այո, լիպոսոմները կարող են կրել հիդրոֆիլ դեղամիջոցներ: Դրանք գնահատվում են կենսաբժշկական կիրառություններում՝ ինչպես հիդրոֆոբ, այնպես էլ հիդրոֆիլ նյութերը պարուրելու ունակությամբ: Բացի այդ, նրանք առաջարկում են բարձր կենսահամատեղելիություն և կենսաքայքայվածություն՝ դրանք դարձնելով առաքման արդյունավետ համակարգեր:

Ինչպե՞ս պատրաստել լիպոսոմներ:

Լիպոսոմների պատրաստման ամենատարածված մեթոդներն են բարակ շերտի մեթոդը և հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդը:
Նիհար թաղանթի խոնավացման մեթոդ.

1. Օրգանական լուծիչում լուծեք լիպիդները:
2. Գոլորշիացրեք լուծիչը՝ բարակ լիպիդային թաղանթ ձևավորելու համար:
3. Խոնավացրեք թաղանթը ջրային լուծույթով, օգտագործելով ձայնային լուծույթ, որպեսզի ձևավորվեն բազմաշերտ վեզիկուլներ:

Հակադարձ փուլային գոլորշիացման մեթոդ.

1. Լիպիդները լուծել ջրի և էթանոլի մեջ:
2. Լուծույթը 60°C ջերմաստիճանում մոտ 10 րոպե քսել՝ լիպիդային մածուկ ստեղծելու համար:
3. Սառեցրեք լիպիդային զանգվածը և խառնելով կաթիլներով ավելացրեք ջուր կամ բուֆեր:
4. Կախոցը խոնավացրեք 1 ժամով՝ բազմաշերտ վեզիկուլներ ձևավորելու համար:
5. Կրճատել լիպոսոմի չափը հետագա sonication-ի միջոցով:

Ի՞նչ են արխեոսոմները:

Արքեոսոմները լիպոսոմներ են, որոնք պատրաստված են արխեային լիպիդներից, որոնք հայտնի են իրենց կայունությամբ և ծայրահեղ պայմաններին դիմադրությամբ: Այս հատկությունները արխեոսոմներին հատկապես օգտակար են դարձնում բարդ միջավայրերում դեղերի առաքման և պատվաստանյութերի մշակման համար:

Ինչպե՞ս են պատրաստվում արխեոսոմները:

Sonication պրոցեդուրա ըստ Pise (2022). Archaeosomes կարող են ստեղծվել բևեռային լիպիդային ֆրակցիայից “PLF” Sulfolobussolfataricus-ը 60°C-ում արտանետման միջոցով առանց լիպիդների արտաքին համալրման անհրաժեշտության: 0°C-ում բևեռային լիպիդները Sulfolobusacidocaldarius-ից արդյունավետորեն հնչյունավորվել են՝ առաջացնելով արխեոսոմներ: BMD-ով բեռնված արխեոսոմները և սովորական լիպոսոմները, ինչպես նաև Archaea H. salinarum-ից մեկուսացված և ֆոսֆատիդիլքոլինով հարստացված արխեալ լիպիդները պատրաստվել են՝ օգտագործելով ձայնային ախտահանման տեխնիկան: Sonicated vesicles ստեղծվել են տեղական առաքման համար՝ MLV դիսպերսիաները 80 տոկոս ամպլիտուդով 4 րոպեի ընթացքում ազդելու միջոցով՝ օգտագործելով Hielscher UP50H զոնդ տիպի sonicator (տես նկարը ձախ կողմում):

Գրականություն/Հղումներ